Introducción al aseguramiento de la

calidad en laboratorios analíticos

QUÍMICA ANALÍTICA Y CALIDAD

Se define a la calidad como la totalidad de las características de una entidad que la

capacitan para satisfacer necesidades especificadas o implícitas por el cliente o la
legislación. La calidad se materializa en los sistemas de calidad que son un conjunto de
actividades planeadas y desarrolladas en el ente para satisfacer los requisitos del cliente.
El laboratorio analítico puede considerarse un ente productivo que recibe materias primas
(muestras, reactivos, patrones, etc.) y genera productos (información analítica,
resultados). Por lo tanto, los sistemas de calidad son de aplicación en este contexto, con
las debidas adaptaciones.
Los sistemas de calidad aplicados al laboratorio analítico deben comprender el
seguimiento de normas y el cumplimiento de la legislación.
Los más frecuentemente empleados son: la norma ISO-17025 y las Buenas Prácticas
de Laboratorio (BPL).
 LAS BUENAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO

BPL o GLP (Good LaboratoryPractice) son una serie de normas internacionales y

procedimientos operativos, escritas por la FDA (Food and Drugs Administration de
EUA) entre otras organizaciones, tendientes a asegurar la fiabilidad y la trazabilidad
o rastreabilidad de los resultados obtenidos.
La certificación de estas normas por una industria es una forma de acceder a nuevos
mercados. Por ejemplo, en el caso de alimentos o medicamentos, la certificación es la
forma de ser competitivos y mejorar su oferta de productos y/o servicios. Para la
comunidad, es una garantía de que todo lo relacionado con la salud y la alimentación
de la población esté correctamente elaborado. En nuestro país, el INAME-ANMAT
(Instituto Nacional del Medicamento – Administración Nacional de Alimentos,
Medicamentos y Tecnología) y el OAA (Organismo Argentino de Acreditación) se
están encargando de la confección y cumplimiento por parte de las empresas
nacionales de este tipo de regulaciones.
 PRINCIPIOS DE LAS BPL
1. Facilidades Adecuadas. Para que el trabajo pueda ser realizado en forma segura y
apropiada. Se debe contar con salas suficientes para que el personal trabaje cómodo.
2. Personal Calificado.
3. Equipamientos Mantenidos y Calibrados. Disponer de los registros de
los mantenimientos.
4. Procedimientos Estándares de Operación. Escritos, para asegurar que todos los que
deban utilicen el mismo procedimiento. Todos los procedimientos e instrucciones
deben estar explícitamente indicados. Por ej:
• Anotar los datos y observaciones en un cuaderno, no en papeles sueltos.
• Asegurar que muestras, estándares y reactivos han sido etiquetados.
• Siempre usar material de vidrio limpio.
• Nunca calentar el material calibrado de vidrio.
• Usar reactivos pureza analítica, a menos que se estipule lo contrario y que todos
los reactivos contengan garantía de sus límites máximos de impurezas.
• Tener cuidado de no contaminar estándares, muestras y reactivos.
• Hacer muestras en duplicado por lo menos.
• Evaluar críticamente todas las mediciones y reacciones si algo resulta sospechoso.
• Usar los métodos estándarizados para evaluar datos cuantificados.
 LA NORMA ISO - 17025 (IRAM 301)
Fue escrita por The International Standarization Organization y se refiere a las
calibraciones y mediciones de equipos de laboratorio.
La norma madre es la ISO 9001, que describe genéricamente los elementos marco
para gestionar la calidad en el mundo empresarial, de esta manera se tiende a
asegurar una calidad estándar para un producto tal que pueda ser intercambiable
entre países y en ambos pueda ser aceptado. Una certificación ISO 9000 establece que
la empresa está capacitada para ofrecer productos o proveer servicios a través de
procesos estandarizados de acuerdo a la calidad que manifiesta.
A nivel nacional esta norma se concreta en la IRAM 301, titulada "Requisitos
generales para la competencia de laboratorios de calibración y ensayo" y es aplicables
tanto en metrología física como química.
CONTROL DE CALIDAD: Actividades planeadas y diseñadas para proporcionar un
producto de calidad.
GARANTIA DE CALIDAD: Actividades planeadas y diseñadas para asegurar que las
actividades de control de calidad se ejecuten correctamente.
BUENAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO: Vinculadas al cuidado de la salud y a la
seguridad pública. Se relacionan con alimentos, medicamentos, cosméticos y
agroquímicos. Sus auditores son empleados del gobierno.
 ESTABLECIMIENTO DE UN PROGRAMA DE CALIDAD
Cada organización deberá realizar consideraciones y tratamientos especiales
acorde a sus necesidades. Todo laboratorio que desee organizarse bajo condiciones
GLP deberá contar mínimamente con:
a. Instalaciones adecuadas y financiamiento asegurado
b. Director que conozca todas las actividades del laboratorio, planifique,
distribuya tareas y designe responsables
c. Procedimientos operativos estandarizados.
d. Personal CAPACITADO para las tareas a realizar.
e. Equipos. Cada uno debe tener sus procedimientos de uso asociadas y
fichas técnicas.
f. Reactivos y soluciones: Deben estar rotulados correctamente indicando Identidad,
Título o concentración, condiciones de almacenamiento, fecha de expiración.
g. Unidad de aseguramiento de calidad: inspecciona las actividades del Laboratorio
y redacta informes escritos.
h. Archivo de datos crudos. Las observaciones realizadas, medidas efectuadas, el
resultado escrito de un cromatograma, un espectro, cuadernos de notas fichas,
etc. Todos estos datos deberán ser archivados.
i. Conservación de Registros. Los registros de calibraciones deben hacerse acorde
a un cronograma preestablecido, utilizando estándares de referencia, se deben registrar.
 MANUAL DE GARANTÍA DE CALIDAD
Es un documento escrito que identifica las políticas y los objetivos de la institución,
las actividades funcionales y las actividades específicas de calidad concebidas para
alcanzar las metas de calidad deseadas para la operación del sistema.
El manual es una herramienta flexible y adaptable que describe de una manera
sistemática, las medidas que el laboratorio empleará para ejecutar el programa
de garantía de calidad.
Un aspecto importante a tener en cuenta es la evaluación de los costos que
genera la implementación de un sistema de garantía de calidad.
Los costos pueden evaluarse facilmente, los beneficios se apreciarán a largo plazo
como mejora en la imagen pública de la organización, mejora de los productos,
cumplimiento de las leyes y regulaciones gubernamentales y la satisfacción a las
exigencias de los clientes.
Se ha estimado que el incremento en costo de un programa de garantía de calidad está
entre el 10 y el 20 % de los costos de operación. La mayor parte de este incremento se
podría destinar al control de análisis de muestra, al uso de especificaciones aprobadas y
materiales estándares y mantenimiento preventivo del equipo.
 OBJETIVOS DEL PROGRAMA

El programa de garantía de calidad requiere un conjunto de objetivos precisos, que

deben ser claramente establecidos y comprendidos por la administración y por todo el
personal. Los objetivos deben relacionarse con los resultados deseados, no con las
actividades o procesos específicos.
Ejemplo:

• Elevar la calidad general del desempeño del laboratorio.

• Mantener una evaluación continua de los datos de calidad generados por los analistas.
• Identificar buenos métodos analíticos y necesidades de investigación.
• Proporcionar registros permanentes del funcionamiento de los instrumentos como
base para validar los datos y proyectar las necesidades de reparaciones y repuestos.
• Asegurar la integridad de las muestras.
• Mejorar el mantenimiento de los registros.
• Producir resultados analíticos que puedan resistir el escrutinio legal.
• Detectar necesidades de capacitación.
 TRAZABILIDAD
Se emplea como atributo para caracterizar diversas facetas analíticas. Es un concepto
abstracto, fruto de la integración de dos significados: rastreo (historia de la producción
o comportamiento) y relación con estándares (referencias).

• Trazabilidad de una alícuota: relación inequívoca de la alícuota de muestra sometida

al proceso de medición química, tanto con el problema económico-social
(representatividad) como con el resultado generado (cadena de custodia de la muestra). De
esta forma se asegura la coherencia entre el problema y el resultado.

• Trazabilidad de un instrumento: historia documentada de su comportamiento instalación,

averías y reparación, revisiones, calibración y corrección, horas de uso, muestras
procesadas, etc.). A través de la calibración se establece la relación con los estándares
utilizados (trazabilidad).

• Trazabilidad de un método: característica que asegura que los resultados del proceso
de medición química tienen trazabilidad a referencias bien establecidas.

• Trazabilidad de un resultado: propiedad de un resultado o del valor de un estándar

según la cual este se relaciona con referencias nacionales o internacionales bien
establecidas a través de una cadena ininterrumpida de comparaciones, todas ellas
caracterizadas por sus respectivas incertidumbres.
 ESTÁNDARES Y REFERENCIAS
Para la puesta a punto, la verificación y calibración de su instrumental y su metodología,
un laboratorio de análisis requiere el uso de estándares y de materiales y sustancias de
referencia.
Los estándares o patrones están relacionados íntimamente con la trazabilidad en
cualquier ámbito metrológico. Constituyen la base para la realización de medidas de
parámetros físicos, químicos, bioquímicos y biológicos.
METROLOGÍA
Ciencia de las mediciones. Incluye todos los aspectos tanto teóricos como prácticos que se
refieren a las mediciones, cualquiera sea la incertidumbre y en cualquier campo de la
ciencia o la tecnología en que ellas se realicen. En nuestro país el INTI(Instituto Nacional
de Tecnología Industrial) tiene atribuciones en el campo de la metrología que le fueron
concedidas por ley y es por lo tanto el custodio de los patrones nacionales para las
mediciones físicas.
ESTÁNDARES QUÍMICOS
En el ámbito de las medidas químicas pueden diferenciarse distintos tipos de
estándares, todos ellos relacionados entre si a través de la trazabilidad.
Los Estándares químicos se consideran como el vínculo de trazabilidad entre los patrones
básicos, que coinciden con las unidades básicas del Sistema Internacional de Unidades,
y los estándares químico-analíticos. Son ejemplos de estándares químico-analíticos el
isótopo 12 del carbono que se relaciona con el mol (que es un estándar básico) y la
plata ultra pura.
 ESTÁNDARES (PATRONES) QUÍMICO ANALÍTICOS
Se emplean en la práctica en los procesos de medición química. Pueden diferenciarse
en dos tipos según sus características:

• Primarios
Son sustancias estables y homogéneas con propiedades bien establecidas que
permiten relacionarse directamente con los estándares químicos a través de la
trazabilidad. Por ejemplo el biftalato de potasio para la valoración de ácidos, buffers
para la estandarización de un peachímetro, etc.
• Secundarios
Sustancias con propiedades no adecuadas para ser usados directamente como estándares
analíticos. Por ejemplo una solución valorada de AgNO3 donde el título o concentración
debe ser establecido por comparación con un patrón primario (valoración).

Dentro de los patrones químico analíticos primarios se encuentran los materiales de

referencia que son materiales o sustancias que tienen una o varias de sus propiedades
suficientemente homogéneas y establecidas que permitan su empleo para calibrar un
instrumento, asignar valores a materiales y sistemas o evaluar métodos analíticos.
 MATERIALES DE REFERENCIA
Materiales de Referencia Certificados (SRM) o patrones primarios: son materiales en los
que los valores de una o más de sus propiedades están certificados, con sus
incertidumbres específicas, obtenidos por procedimientos técnicamente válidos bajo la
responsabilidad de un organismo competente e independiente; la certificación también
implica una documentación detallada de su trazabilidad.

En el mundo existen varios organismos reconocidos como certificadores de materiales

de referencia dentro de ellos se encuentran: NIST (NationaL Institute of Standards and
Technology) de USA, NRC (National Research Council) de Canada, BRC Global Standards
(British Retail Consortium), INTI de Argentina.

Su costo es demasiado elevado para permitir el uso diario y suelen ser reemplazados por
materiales de referencia secundarios con propiedades medidas por el laboratorio usuario
mediante el uso de un material de referencia certificado y por un procedimiento
certificado. La norma internacional y la nacional vinculadas con distintos aspectos acerca de
los materiales de referencia son la ISO 30 y la IRAM 451 respectivamente.
Las soluciones patrón o patrones de calibración son ejemplos de materiales secundarios, son
soluciones preparadas a partir del patrón primario.
 EVALUACIÓN DE PROCESOS ANALÍTICOS
La evaluación global de un proceso de medición química se realiza con una muestra
patrón que debe ser un patrón primario certificado.
El objetivo es contrastar la calidad analítica global de un proceso de medición química
en las siguientes circunstancias:

a. Cuando se pone a punto un método analítico por primera vez en el laboratorio o

cuando se producen modificaciones en un método ya utilizado (VALIDACIÓN DE UN
MÉTODO ANALÍTICO).
b. Cuando se quiere evaluar cuantitativamente la calidad del laboratorio (CONTROL DE
CALIDAD INTERNO Y EXTERNO).

La evaluación consiste en las siguientes etapas

i. Selección del patrón adecuado. Debe ser de naturaleza similar a las muestras reales
que normalmente se medirán con ese método y debe tener certificadas las magnitudes
de interés con sus incertidumbres.
ii. Análisis del patrón. Se someten varias alícuotas del patrón al proceso de medición
química en cuestión, luego los resultados son tratados estadísticamente se obtienen
diversos parámetros como límite de detección, de cuantificación, sensibilidad, etc.
iii. Se comparan los valores certificados con el resultado obtenido y se concluye sobre la
calidad en términos de incertidumbre y precisión del método examinado.
 VALIDACIÓN DE UN MÉTODO ANALÍTICO
Validar implica demostrar experimental y formalmente que un proceso de medición química
o una parte del proceso (muestreo, tratamiento de datos) funciona como se espera de él y
lo hace a lo largo del tiempo. Es una demostración de la capacidad de realizar ese ensayo.
La validación consiste en contar con evidencias documentadas que proveen un alto grado
de aseguramiento de que un determinado método producirá consistentemente datos que
cumplirán sus especificaciones y atributos de calidad predeterminados. Deben existir
protocolos de validación.
Consta de la realización de un conjunto de pruebas, de manera de:
a) Comprobar varios aspectos del comportamiento del método.
b) Establecer que sirve para el fin previsto.

La validación tiene dos objetivos fundamentales:

a. Definir y asegurar la calidad de la información analítica generada. Es una validación
intrínseca que consiste en caracterizar un proceso de medición química a través de
sus propiedades o características de desempeño.
b. Garantizar la coherencia entre la información analítica generada y las necesidades
de información requeridas por el cliente, en un proceso denominado validación
extrínseca del proceso analítico.

No confundir con Verificación: confirmación mediante la aportación de evidencia objetiva

de que se han cumplido los requisitos especificados.
 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO DE UN MÉTODO
ANALÍTICO
Parámetros a determinar:
 
Especificidad
 
Exactitud - Incertidumbre- Sesgo
 
Precisión: Repetitividad, Reproducibilidad
 
Límite de detección
 
Límite de cuantificación
 
Linealidad
 
Rango
 
Robustez

Durante el proceso de validación, los estudios para determinar los parámetros de

desempeño de un método deben realizarse con equipamiento debidamente
calificado, es decir que cumplen con las especificaciones necesarias, que funcionan
correctamente y están correctamente calibrados.
Los analistas deben estar entrenados y conocer adecuadamente la metodología en
estudio. Todo el proceso de validación debe encontrarse documentado en
protocolos de validación e informes de verificación.
 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO DE UN MÉTODO
ANALÍTICO
 Especificidad
Es la capacidad del método analítico para medir inequívocamente al analito en presencia de
otros componentes que pueda esperarse que se encuentren presentes. Los métodos
analíticos no siempre detectan el total del analito presente en una muestra. Esto puede ser
intencional y tratarse de una característica del método o bien reflejar un problema
inherente al mismo. Para estimarla puede recurrirse al análisis de blancos o muestras sin
fortificar y fortificadas con el analito de interés en un intervalo de concentraciones (prueba
de recuperación) o analizar materiales de referencia certificados.

 Incertidumbre - Sesgo – Intervalo de confianza –Justeza

La incertidumbre se define como un parámetro asociado con el resultado de una
medición que caracteriza la dispersión de los valores que puede atribuirse
razonablemente al mensurando. Se debe intentar identificar todos los motivos de
incertidumbre y hacer una estimación razonable de ellos. Se calcula estimando los
errores que se producen en las distintas etapas del análisis.
Pueden hacerse estimaciones de la incertidumbre utilizando la siguiente fórmula:

en la que u1 , u2 etc. son los motivos individuales de incertidumbre.

 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO DE UN MÉTODO
ANALÍTICO
Exactitud - Incertidumbre - Sesgo – Intervalo de confianza –Justeza

En el año 2004 se publicó el Nordtest Report “Handbook for Calculation of Measurement

Uncertainty in Environmental Laboratories -TR537” con el propósito de dar una forma
práctica, comprensible y común de calcular la incertidumbre de medida, basada
principalmente en datos ya existentes de control de calidad y de validación. El cálculo
de incertidumbre utiliza una combinación de la reproducibilidad intermedia del
laboratorio con el sesgo del método y del laboratorio.
El sesgo es el grado de asimetría que tiene la curva de valores del resultado.
La exactitud es el grado de concordancia entre el resultado de un ensayo y el valor
de referencia aceptado.
Un intervalo de confianza es un rango de valores en el cual se encuentra el verdadero
valor del resultado, con una probabilidad determinada (generalmente 95%). Esa
probabilidad se denomina nivel de confianza. La probabilidad de equivocarnos se llama
nivel de significancia o justeza.
 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO DE UN MÉTODO
ANALÍTICO
 Precisión – Reproducibilidad - Repetitividad
Grado de concordancia entre un grupo de resultados obtenidos al aplicar repetitiva e
independientemente el mismo método analítico a alícuotas de la misma muestra o
dispersión de estos resultados entre sí y con su media. Parámetro a analizar: la
desviación estándar.
Para distintas alícuotas, con distintos operarios, en distintos días, etc. =
Reproducibilidad. Todo igual = Repetitividad.
♦ Linealidad
Capacidad del método de producir resultados que son directamente proporcionales a
la concentración del analito en la muestra.
♦ Rango
Intervalo entre las concentraciones máxima y mínima del analito para las que se ha
demostrado que el método tiene niveles aceptables de precisión, exactitud y linealidad
 Robustez
Es una medida de la capacidad del método para no ser afectado por pequeños
cambios deliberados en sus parámetros y provee una indicación de su confiabilidad
durante su uso normal. Prueba t de Student, por ejemplo.
 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO DE UN MÉTODO
ANALÍTICO

♦ Límite de detección: Es la concentración de analito CLD que corresponde a una señal

XLD que pueda distinguirse estadísticamente de una señal blanco (xB) y que se concreta
matemáticamente en la expresión:

XLD = XB + 3B

Siendo xB la media de n > 30 blancos y σB su desviación estándar.

♦ Límite de cuantificación: Se define como la concentración del analito CLC que origina
una señal XLC que puede considerarse el límite inferior del rango lineal de
medición. Su expresión matemática se basa en el estudio estadístico de blancos:

XLC = XB + 10B
 CONTRIBUCIÓN A LA EVALUACIÓN DE LA CALIDAD DE
UN LABORATORIO ANALÍTICO
La evaluación de la calidad debe realizarse de dos formas distintas e independientes a
través del control de calidad interno y control de calidad externo.

a. Evaluación interna
Es el conjunto de procedimientos llevados a cabo por el
personal del laboratorio para controlar en forma
continua la operación y los resultados de las mediciones.
Se somete rutinariamente una muestra control al
análisis completo y se evalúan estadísticamente
regularmente los resultados obtenidos.
Por ejemplo, se construyen diagramas de control que
son trazos gráficos de los resultados de las pruebas
con relación al tiempo o secuencia de las mediciones,
se establecen límites estadísticos que pueden ser
preventivos o de peligro.

b. Evaluación externa
Un grupo de laboratorios participan de una ronda de análisis, luego un organismo externo
realiza las evaluaciones estadísticas de los resultados. De esta manera puede conocerse la
exactitud de los resultados emitidos por un laboratorio respecto de los demás. Ej:
Proficiency Testing.
 ACREDITACIÓN DE LABORATORIOS
Es el reconocimiento formal, por una organización independiente con bases científicas, de
que un laboratorio es competente para realizar ensayos específicos. Por lo general la
acreditación es específica para probar sistemas, productos, componentes o materiales,
para los cuales el laboratorio afirma ser competente.
En Argentina existen instituciones gubernamentales y privadas que
poseen atribuciones legales o licencias internacionales para realizar acreditaciones. El
SENA SA es el organismo oficial de acreditación de laboratorios creado para realizar
determinaciones en alimentos a exportar, el OAA (Organismo Argentino de Acreditación)
para la ISO 17025 y va ampliando su espectro de acción con el tiempo y su prestigio. El
Bureau VERITAS posee la licencia a nivel nacional para acreditación de normas ISO. A su
vez existen organismos internacionales que realizan sus propias acreditaciones como la
FDA (Food and Drug Administration) de USA.
Certificación: Una organización de terceros (o agencia), totalmente independiente e
imparcial, declara que el producto, proceso o servicio concuerda con los
requerimientos especificados (Ejemplo: ISO 17025)
Acreditación: Una organización de terceros (o agencia), totalmente independiente
e imparcial, con autoridad, reconoce formalmente la competencia de esa
institución para desarrollar determinada(s) tarea(s).
 TIPOS DE MÉTODOS
1. Métodos Normalizados: Método analítico desarrollado por un organismo de
normalización u otro organismo reconocido.

2. Métodos No Normalizados: Método analítico desarrollado

Por un tercero o que ha sido adaptado por el
laboratorio a partir de un método normalizado.

3. Métodos Desarrollados por el Laboratorio:

Método analítico que no se encuentra en normas u otras
colecciones de métodos, ni en publicaciones de terceros,
habiendo sido desarrollado por el propio laboratorio.

TODOS LOS MÉTODOS DEBEN VALIDARSE

Muchas personas e instituciones indican una diferencia en cuanto a que
los métodos normalizados sólo deben verificarse. En esta clase, llamamos
validación a ese proceso (verificación de aplicabilidad).
“Los métodos utilizados en un laboratorio de análisis químicos han de ser
evaluados y sometidos a prueba para asegurarse de que producen unos
resultados válidos y coherentes con el objetivo previsto, es decir, han de ser
validados. Los laboratorios que adopten métodos normalizados deben o
bien revalidarlos o bien verificarlos como proceda para garantizar su
funcionamiento adecuado en su entorno habitual”.
 “Este material pertenece a la materia Química Analítica de la Facultad de Ingeniería de la
Universidad de Buenos Aires, 2°Cuatrimestre 2016”.

Bibliografía:

 Norma internacional ISO/IEC 17025 Requisitos Generales para la Competencia de los Laboratorios de Ensayo y de
 Calibración (2ª edición, 15-05-2005).
 OAA, Organismo Argentino de Acreditación. Guía para la Validación de un Método de Ensayo (26-09-2003).
 Official Methods of analysis of AOAC international. Association of Official Analytical Chemists (A.O.A.C.)
 Análisis Químico Cuantitativo, Daniel C. Harris 3ª Edición. Editorial Reverté, 2007.