UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSÉ DE CALDAS

TALLER BIOQUÍMICA

CARBOHIDRATOS

1.1 Monosacáridos:

Los monosacáridos son los azúcares más sencillos, pues no pueden descomponerse por hidrólisis
para dar lugar a otros azúcares más simples. En la naturaleza se encuentran en estado libre,
desempeñando importantes funciones, pero también se encuentran formando parte de otros azúcares
más complejos, los ósidos, de los cuales son sus sillares estructurales. La estructura básica de todos
los monosacáridos es una cadena de átomos de carbono no ramificada en la que todos ellos están
unidos por enlaces simples. Uno de estos átomos de carbono está unido a uno de oxígeno por un
enlace doble formando un grupo carbonilo; todos los demás están unidos a grupos hidroxilo. Si el
grupo carbonilo se encuentra en un extremo de la cadena carbonada el monosacárido es un aldehído
y recibe el nombre de aldosa; si el grupo carbonilo se encuentra en cualquier otra posición el
monosacárido es una cetona y recibe el nombre de cetosa (Figura 1.). Los monosacáridos naturales
tienen entre tres y ocho átomos de carbono, aunque los de siete y ocho son relativamente raros.
[ CITATION biosf \l 9226 ]

FIGURA 1. Aldosas y cetosas. [ CITATION biosf \l 9226 ]

Ejemplos: Triosas (reacciones del glucolisis). Tetrosas (Sintetiza azucares a partir del CO2
atmosférico). Las pentosas (Intermediario metabólico en la etapa oscura de la fotosíntesis)
1.2 Disacáridos:

Los monosacáridos capaces de formar anillos de piranosa o furanosa, en tanto que hemiacetales o
hemicetales intramoleculares, pueden reaccionar con los alcoholes para formar glucósidos
liberándose en el proceso una molécula de agua. El compuesto resultante, un disacárido, estará
formado por dos monosacáridos unidos mediante enlace glucosídico (Figura 2.)[ CITATION biosf \l
9226 ]. Este tipo de reacción química que ocurre durante la síntesis de la mayoría de los polímeros
orgánicos a partir de sus subunidades, se conoce como condensación.

FIGURA 2. Obtenció de un Disacárido. [ CITATION biosf \l 9226 ]

Ejemplos: Maltosa (tiene características reductoras y se utiliza para fabricar cerveza) Sacarosa (Es
el azúcar que se obtiene industrialmente, y en la naturaleza en los frutos, semillas y néctar) Y en la
Isomaltosa (presente en los polisacáridos).

1.3 Oligosacáridos:

Los oligosacáridos son compuestos que consisten de un número relativamente pequeño de

monosacáridos, los que se encuentran unidos entre sí por enlaces glicosídicos. Estas sustancias
tienen generalmente gusto dulce, son solubles en agua y si poseen un grupo hemiacetálico libre,
presentan poder reductor. Según el número de monosacáridos constituyentes, se formarán
disacáridos, trisacáridos, tetrasacaridos, etc. Se considera que pertenecen al primer grupo sustancias
con 10 monosacáridos o menos.

Los oligosacáridos, al igual que sus constituyentes, son sustancias ópticamente activas. Aquellos
que poseen grupos hemiacetálicos libres, presentan también formas anómeras alfa y beta.

Ejemplos: Su grupo más importante son los disacáridos, como la lactosa, sacarosa y maltosa.

1.4 Polisacáridos:

Contienen más de diez monosacáridos, su función en el organismo se relaciona con labores de

estructura o de almacenamiento. (UM,2005)
Ejemplos: Glucógeno (Reserva en animales), Celulosa (Estructural de los vegetales en los que hay
pared celular), Quitina (Forma el exoesqueleto en artrópodos y pared celular de los hongos).

1.5 Isomería en carbohidratos: Aquellos carbohidratos con la misma configuración en su carbono

de referencia que el D-gliceraldehído, son designados como isómeros D (el OH del carbono de
referencia está a la derecha), y aquellos con la configuración del L-gliceraldehído, son isómeros L
(el OH del carbono de referencia está a la izquierda). Por ejemplo, de las 16 posibles aldohexosas, 8
de ellas son D y los 8 restantes L. Muchas de las hexosas que se encuentran en los organismos
vivientes son isómeros tipo D, lo que indica inmediatamente, la estereoespecificidad de las enzimas
que las utilizan como substrato. (Vásquez, 2003)

FIGURA 3. Isomería D- y L- de la glicerosa y de la glucosa. (Vásquez, 2003)

2.
2.1 Glucolisis: Glucolisis o glicolisis es la ruta metabólica, formada por diez reacciones (Tabla 1.
Reacciones de la glucolisis) enzimáticas, mediante la que se degrada una molécula de glucosa hasta
dos moléculas de piruvato, además de producir energía en forma de ATP y de NADH. Es una ruta
metabólica universalmente distribuida en todos los organismos y células. Su función es la
degradación de glucosa y otros monosacáridos para la obtención de energía. Posee 4 fases:

a) Preparatoria: Cuatro reacciones: dos son de fosforilación y consumen 2 ATP por molécula de
glucosa.

b) la ruptura de la hexosa produce 2 triosas, que acaban en 2 moléculas de gliceraldehido-3-P.

c) De beneficios: Oxidación del gliceraldehido-3-fosfato (x 2) hasta piruvato (x 2) y formación

acoplada de ATP en 2 de las reacciones, en total se forman 4 ATP y 2 NADH. [ CITATION unnsf \l
9226 ]

TABLA 1. Reacciones de la glucolisis [ CITATION unnsf \l 9226 ]

2.2 Glucogénesis: Glucogénesis significa síntesis de glucógeno. El primer paso de la glucogénesis
es la conversión de glucosa-6-P en glucosa-1-P por la fosfoglucomutasa (Figura 3.) la cual se une a
ATP para dar glucosa:

La glucógeno sintasa adiciona glucosa mediante un enlace 1,4 al glucógeno liberando UDO
[ CITATION Gar01 \l 9226 ]:

FIGURA 4. Formación de UDP-glucosa y alargamiento de la cadena de glucógeno [ CITATION

Gar01 \l 9226 ]
Por cada molécula de glucosa incorporada al glucógeno se consume 1 mol de ATP, el cual se
recupera cuando la glucosa-1P se transforma en glucosa-6-P y entra en la ruta glucolitica. Por
consiguiente, teniendo en cuenta esta ruta, se generan 3 moles de ATP por cada mol de glucosa-1-P
que se libera del glucógeno. [ CITATION Gar01 \l 9226 ]

2.3 Glicogenólisis: proceso mediante el cual se degrada el glucógeno. La importancia de este

proceso en el hígado es el aporte de glucosa a la sangre con lo que contribuye al mantenimiento de
la glicemia; sin embargo, en el músculo no hay aporte de glucosa a la sangre y el músculo utiliza la
glucosa proveniente de la glucogenólisis como fuente de energía que precisa durante la realización
de ejercicios físicos. El glucógeno fosforilasa es la principal enzima de este proceso; actúa
escindiendo los enlaces glicosídicos a1-4 utilizando un grupo fosfato, por lo que se forma glucosa-
1-fosfato como producto. (Cardella, 2007)

2.4 Gluconeogénesis: Es la síntesis de glucosa (y glucógeno) a partir de fuentes diferentes a los

carbohidratos. La gluconeogénesis cubre las necesidades corporales de glucosa cuando el
carbohidrato no está disponible en cantidades suficientes en la alimentación. Además de las
cantidades insuficientes de glucosa en la alimentación, la gluconeogénesis se activa cuando
disminuyen las reservas corporales de carbohidratos. Esta gluconeogénesis transcurre en el hígado,
y en menor medida en el riñón. Los precursores que no son carbohidratos, y pueden transformarse
en glucosa, incluyen el lactato y piruvato, productos de la glucolisis e intermediarios dl ciclo de
Krebs y a la mayor parte de aminoácidos; así como el glicerol de las grasas. Sin embargo, en primer
lugar, todas estas sustancias deben convertirse en oxalacetato, que es el material de partida para la
gluconeogénesis.[ CITATION Mel07 \l 9226 ]

3. Cromatografia de capa fina

Es una técnica analítica rápida y sencilla que permite determinar el grado de pureza de un
compuesto, comparar muestras y realizar el seguimiento de una reacción. Todo esto es posible ya
que la muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lámina de plástico o aluminio que
previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la
lámina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclados (fluyente o
fase móvil). A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente,
se produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el
adsorbente. (Willard, L.& Merritt J,1991)

La relación entre las distancias recorridas por el soluto y por el disolvente desde el origen de la
placa se conoce como Rx, y tiene un valor constante para cada compuesto en unas condiciones
cromatografías determinadas. El Rf consta de lo mismo a excepción de que se utiliza el
desplazamiento del patrón. (Willard, L.& Merritt J,1991)
FIGURA 4. Representación de los valores de cromatografía de capa fina. (Willard y Merritt, 1991)

4.

PRUEBA FUNDAMENTO RANGO DE COLORACIO

CUALITATIVA DETECCIÓN N

Este reactivo identifica El ensayo de Benedict +

BENEDICT azucares reductores basados permite el Rojo-naranja
en su capacidad de reducir el reconocimiento de -
ion cúprico (Cu2+) a oxido carbohidratos reductores Verde
cuproso a pH básico.
Los azúcares son La prueba de Seliwanoff +
SELLIWANOFF distinguidos a través de su es una prueba química Rojo
función como cetona o que se usa para distinguir
aldehído. Si el azúcar entre aldosas y cetosas.
contiene un grupo cetona, es
una cetosa, y si contienen un
grupo aldehído, es una
aldosa.
Contiene ion cúprico que se Se utiliza para +
BARFOED reduce hasta óxido cuproso diferenciar Rojo, Naranja
más rápidamente con los monosacáridos de
monosacáridos que con los disacáridos
disacáridos.
Tanto las pentosas como las Forma complejos de Pentosas
BIAL hexosas se deshidratan en coloración sólo con las Azul-verde
 un medio acido concentrado pentosas.
dando furfural (a partir de Hexosas
pentosa) o 5- verde, café o
hidoximetilfurfural (a partir café-rojiza
de hexosas)

5. Si usted se encuentra realizando un procedimiento cromatográfico y siembra 15uL de muestra de

un estándar de glucosa 18 mg/dL ¿que cantidad de azúcar depositó en la placa Cromatografía en
microgramos y decigramos?

Muestra: 18 mg/dL Siembra: 15uL

m
[]=
v

mg m mg
18 = 18 ∗0.00015 dL=m
dL 0,00015 dL dL

−3
2.7 x 10 mg=m
En microgramos:

2.7 x 10−5 dg=2.7 ug

6.

6.1 Prueba de Benedict

El resultado positivo en la prueba de benedict indica que hay un error en la glucosa, fructosa,
pentosa o galactosa. Lo que a su vez indica que el paciente sobre de galactosemia Las personas con
galactosemia son incapaces de descomponer completamente el azúcar simple galactosa. La
galactosa compone la mitad de la lactosa, el azúcar que se encuentra en la leche. (UJ, 2015)

Enzima: Sacarasa

Existen 3 formas de la enfermedad:

 Deficiencia de galactosa-1-fosfatouridil transferasa: esta es la galactosemia clásica, la forma

más común y la más grave

 Deficiencia de galactosa cinasa

 Deficiencia de galactosa-6-fosfato epimerasa

6.2 Prueba de selliwanoff

Al dar positiva la prueba de selliwanoff lo que se indica es que hay glucosuria. Es la presencia de
glucosa en la orina a niveles elevados. La glucosa se reabsorbe en su totalidad a nivel de las
nefronas, las unidades funcionales del riñón donde se produce la depuración de la sangre. Sin
embargo, cuando los niveles de glucosa en sangre rebasan un umbral, una cifra alrededor de los 180
mg/dl de glicemia, la nefrona permite que se elimine glucosa por la orina para compensar la
sobrecarga de glicemia que no es compensada por la insulina. (Cañadas, 2016)

La glucosuria asociada a niveles elevados de glicemia, es decir, de glucosa en sangre; es lo que

ocurre en la diabetes mellitus: ante la falta de insulina los niveles de glicemia sobrepasan el umbral
de reabsorción y se pierde glucosa por la orina. (Cañadas, 2016)

La glucosuria asociada a niveles normales de glucosa en sangre; en este caso el problema es una
alteración de los mecanismos de reabsorción de la glucosa en el riñón, de ahí que los niveles de
glicemia sean correctos. (Cañadas, 2016)

Enzima: Los encargados de regular los niveles de azúcar en la sangre son las hormonas, no
enzimas específicamente. Estas hormonas son: Insulina y Glucagón.

6.3 Prueba de glucosa oxidasa: proporciona una prueba específica para la glucosa y la prueba de
la reducción del cobre es un examen general para la glucosa y otras sustancias reductoras.
(Strasinger, 2008)

6.4 Prueba de Bial: Es una prueba específica para la determinación de pentosas. Ya que esta dio
negativo quiere decir que no hay pentosas en el organismo por ende se va presentar deficiencias en
la producción de ATP puesto que la ribosa que es un apentosa es un componente estructural de
nucleótidos en estado libre, como el ATP (adenosintrifosfato); y de ácidos nucleicos, como el ácido
ribonucleico (ARN). (Vaquez, 2011)

6.5 Prueba de barfoed: Esta da un resultado negativo ya que es una prueba utilizada para detectar
monosacáridos, esta prueba fue descrita por el químico chisten thomsen Barfoed y se utiliza
principalmente en la botánica, mas no en los organismos humanos. (Salinas, 2007)

6.6 Prueba de Galactosa

La prueba dio negativo, sin embargo, esta prueba mide el nivel de una sustancia llamada GALT, que
ayuda a descomponer los azúcares de la leche en el cuerpo. Un nivel bajo de esta sustancia ocasiona
una afección llamada galactosemia. (Salinas,2007)

7. Se trabaja con un nuevo colorante para Carbohidratos denominado Orcinol-325, el cual puede
detectar a partir de 70ug de muestra. ¿Qué cantidad en micro litros debe sembrar de una muestra
experimental cuya concentración es de 10mg/dL?

Concentración: 10 ml/dl Muestra: 70 ug

 m
v=
[]

mg 1000 ug
10 x =10000 ug /dL
dL 1mg
70 ug
v= =0.007 dL
10000 ug/dL

100000uL
0.007 dL x =700 uL
1 dL

8. Errores congénitos del metabolismo

Los Errores congénitos del metabolismo (ECM) son enfermedades monogénicas, de herencia
autosómica recesiva en su mayoría. La alteración de un gen produce un defecto enzimático, que
conduce a las alteraciones bioquímicas características de cada ECM. (Raimann & Cornejo, 2003)
Importante es tener en cuenta que la mayoría de ECM se manifiestan en la edad pediátrica, desde
las primeras horas de vida y hasta la adolescencia (Raimann & Cornejo, 2003).

TABLA 2. Enfermedades congénitas del metabolismo. (Raimann y Cornejo, 2003)

ENFERMEDAD ENZIMA RUTA PATOLOGÍA
AFECTADA
Enfermedad de la Defecto en la Disfunción Los pacientes entre los 5
Orina Olor a Jarabe descarboxilación cerebral aguda o y 7 días de vida presentan
de Arce oxidativa de los crónica debido a rechazo de la
quetoácidos de Valina, la acumulación de alimentación, vómitos,
Isoleucina y Leucina. leucina y compromiso de
metabolito 2- conciencia, convulsiones,
oxoisocaproato en episodios de hipertonía
sangre y tejidos. seguidos de hipotonía,
orina y piel con olor a
jarabe de arce.

Acidemia Déficit de Propinil CoA Las alteraciones

Propiónica Mutasa (dependiente de bioquímicas más
la Biotina) frecuentes
Acidenia Déficit de Metilmalonil encontradas son
Metilmalónica CoA Mutasa hipoglicemia,
(dependiente de la quetoacidosis con
vitamina B12 aumento del
Acidemia Déficit de Isovaleril Anion Gap, Los pacientes presentan
Isovalérica CoA deshidrogenasa hiperamonemia, rechazo en la
aumeto del ácido alimentación, vómitos,
láctico, compromiso de
trombopeniia, conciencia progresiva
leucopenia y hasta el coma y
anemia. convulsiones.
Déficit Múltiple de Defecto en el Acidosis
Carboxilasas metabolismo de la metabólica grave
biotina y produce con convulsiones,
disminución de actividad alopecia y
de las 4 carboxilasas lesiones cutáneas.
dependientes de ésta:
Propinil coenzima A
carboxilasa, 3
metilcrootinil coenzimo
A carboxilasa, Piruvato
carboxilasa y Acetil
cenzimo A carboxilaza.

Hiperamonemia El déficit en Atrofia cerebral y Anorexia, trastornos del

Carbamilfosfatosistetasa ventriculomegalia sueño, insensibilidad al
, Ornitina . dolor, hipotonía, vómitos,
Transcarbamilasa, Afección en el letargia, hiperventilación,
Argininosuccínico ciclo de la Urea. compromiso de la
Sistetasa, Arginino conciencia en relación a
succínico Liasa o altas ingestas de proteínas
Acidemia o cuadros peligrosos.
Argininosuccínica.
Tirosinemia tipo ### Disminución de Hígado Muerte celular.
Fumarilacetoacetasa
Galactosemia Déficit en Galactosa-1P- Daño de múltiples El paciente presenta
Uridil Transferasa. parénquimas. inapetencia y vómitos,
seguido de ictericia,
hepato y esplenomegalia,
edema y ascitis,
hipoglicemia, rápido
deterioro del estado
general con compromiso
de la conciencia y
convulsiones
 TRATAMIENTO NUTRICIONAL DE LAS ECM

TABLA 3. Tratamiento nutricional de las ECM. (Raimann y Cornejo, 2003)

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