Trabajo Práctico

Control de Calidad

“Sueros de Control Interno In House”

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 Sueros de Control de Calidad Interno “In House”
El control de calidad es el estudio de aquellas causas de variación de las cuales es responsable el laboratorio y de
los procedimientos utilizados para identificar y minimizar dichas variaciones incluyendo todos los errores que se
producen en el laboratorio entre el momento del recibo de la muestra y la entrega del resultado.
Sus objetivos consisten en asegurar que los productos finales, es decir los valores analíticos reportados por el
laboratorio clínico sean suficientemente confiables y adecuados a la finalidad que persiguen y en un sentido más
amplio, asegurar que todos los laboratorios produzcan valores analíticos que cumplan en todo momento
precisión y exactitud aceptables.
Para efectuar el control de calidad intralaboratorio existen diversos sistemas y todos tienen por objeto controlar
la precisión y la exactitud. Actualmente el sistema más utilizado es el concerniente a los sueros de control, estos
pueden ser de origen comercial o bien de elaboración propia del laboratorio.

El control de calidad interno según la OPS corresponde a la evaluación externa a los reactivos, monitorea única
y exclusivamente la variabilidad de los ensayos y NO evalúa la sensibilidad de los reactivos. Considerando lo
anterior se tiene un seguimiento continuo de una muestra repetida que es corrida diariamente, generalmente
son calificados con buen desempeño, esto permite observar “diferencias” durante el proceso, que pueden
afectar los resultados en muestras reales. En este sentido a el uso de un control interno comercial o de
preparación casera independiente del reactivo nos ayuda a verificar el desempeño analítico de un método y
alertar al operativo de los problemas que pueden invalidar la utilidad clínica de los resultados.

Control de precisión
Representa el grado de concordancia entre medidas repetidas efectuadas sobre una misma muestra en
condiciones constantes y determinadas. En el laboratorio rara vez se obtiene el mismo resultado en la misma
muestra, más bien, se obtienen valores dispersos y su distribución es una medida de la precisión del método.

La calidad del resultado se evalúa estadísticamente mediante la desviación estándar (SD) y el coeficiente de
variación (CV) y permite detectar errores fortuitos, es decir aquellos errores producidos por diferentes causas y
que afectan irregularmente al valor analítico y son difíciles de identificar.
Para medir la precisión generalmente se utiliza un sistema muy básico que consiste en la recolección se sueros
humanos remanentes de aquellos que han sido empleados en los dosajes de rutina y que no presentan ictericia,
hemolisis ni lipemia, conocido también como pool de sueros, sueros de control interno o controles internos.
Este sistema consta de cuatro fases que son: recolección de sueros, preparación del pool de sueros, periodo de
control (periodo previo y periodo de control propiamente dicho) e interpretación de resultados.

Controles internos: Propiedades

• Poseer una composición similar a las muestras verdaderas

• Deben ser procesados e interpretados de igual manera que las muestras

• Estar disponibles en cantidad suficiente para un período adecuado de trabajo (por ej.: 6 meses o más)

• Ser estables en el período de uso

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• Estar fraccionados de acuerdo a su empleo (deben estar presentes en cada corrida)

• Presentar poca variación en su concentración de alícuota a alícuota o vial a vial

Material y método
PREPARACION DEL CONTROL DE CALIDAD INTERNO

El método de preparación del pool de sueros presentará ligeras variaciones según el área de aplicación al que
esté destinado su uso, por ejemplo, para realizar un suero de control serológico para el banco de sangre, se
deberán obtener los sueros positivos a través de un Convenio de Colaboración con el Centro Nacional de la
Transfusión Sanguínea y solicitud de los sueros positivos para serología infecciosa VIH/SIDA, Hepatitis B,
Hepatitis C, Sífilis y Chagas; otras determinaciones analíticas, como las determinaciones en química sanguínea,
no requieren de este tipo de suministro externo para realizar los sueros de control de calidad.

Preparación de sueros de control para química sanguínea

 Recolección
- Colocar los sueros recolectados en el día, a un frasco de plástico con tapa rosca y congelar a -20 °C.
- Agregar diariamente suero, directamente a la mezcla congelada hasta reunir una cantidad de 500 ml.
 Preparación del pool
- Descongelar el pool de sueros a temperatura ambiente.
- Mezclar el mismo con agitador magnético durante 30 seg.
- Centrifugar a 5000 rpm a 4°C durante 30 min
- Decantar el suero, hacer un solo volumen y volver a agitar durante 30 min
- Alicuotar en tubos pequeños de plástico con relación a las necesidades de un día de trabajo
- Congelar los mismos a -20°C hasta el momento del uso.

Nota: se ha demostrado su utilidad en el control de ácido úrico, creatinina, glucosa, proteínas totales y úrea.

SUEROS CONTROL DE CALIDAD INTERNO “IN HOUSE” EN EL ÁREA DE HEMOTERAPIA

La confiabilidad del resultado de un estudio serológico infeccioso para la liberación de una unidad de sangre
depende de la implementación de un Sistema de Calidad, que esté fundamentado en dos pilares base; la
Gestión de Calidad por un lado y por el otro el Aseguramiento de la Calidad, este último implementado bajo
Normas Obligatorias Gubernamentales y Normas de Calidad (ISO 15189, Estándares de la Asociación Americana
de Bancos de Sangre (AABB), Buenas prácticas de manufactura, etc.), dentro del Aseguramiento de la Calidad, el
Control de Calidad Interno en el área de Serología es fundamental. Un estudio serológico infeccioso en el banco
de sangre tiene como objetivo proporcionar resultados correctos positivos y negativos, derivados de un proceso
bajo control, lo anterior permite la aplicación de un diagnóstico, y toma de decisión en la liberación de un
componente de la sangre para uso terapéutico con características de seguridad en el receptor. En estudios o
pruebas de serología infecciosa un factor determinante en el control de calidad, es el control de calidad interno.

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Material y método
PREPARACION DEL CONTROL DE CALIDAD INTERNO

A. Obtención de sueros positivos

Estos se obtienen a través por ejemplo de instituciones como el Malbran, con una solicitud de los sueros
positivos para serología infecciosa VIH/SIDA, Hepatitis B, Hepatitis C, Sífilis y Chagas, incluye el punto de corte de
5 a 6 veces por arriba , especificándose el tipo de equipo y reactivo donde se correrá la prueba.

B. Transporte de sueros positivos.

El transporte se realiza en vehículo oficial con un procedimiento de control de temperatura y tiempo de traslado
por personal capacitado.

C. Entrega recepción de sueros positivos.

La recepción en el banco de sangre de los sueros positivos consiste en la verificación de los requisitos de calidad
(presencia de fibrina, hemólisis, turbidez y especificación de punto de corte solicitado y los datos de las corridas
incluidos los de la prueba confirmatoria).
• Si existe cumplimiento de los requisitos, sigue el proceso.
• No cumple, se desecha como residuo peligroso biológico infeccioso y se notifica al centro de origen.

Nota: Cabe señalar que si se usa suero negativo para realizar las diluciones, este debe cumplir los mismos
requisitos de calidad.

D. Conservación de sueros positivos.

Los sueros positivos se conservan en refrigeración a temperatura controlada de 4 + 1°C.

E. Preparación

1. Se realiza Reactividad inicial del suero positivo.

2. Se caracterizan los sueros, realizando diluciones hasta obtener la reactividad deseada, ajustando a 2 a 3 veces
por arriba del punto de corte. Esta caracterización es específica para el proceso, reactivo, equipo y las propias
condiciones del laboratorio.
3. Se comprueban estabilidad y repetibilidad, realizando de 20 a 30 mediciones en días diferentes y registrando
en el gráfico de Levey & Jennis y validando resultados con reglas de Westgard.
• Si uno de los resultados cae fuera de la variabilidad aceptada, se procede a parar el proceso de estabilidad y
repetitibilidad, se busca causa del efecto y reinicia el proceso en la muestra número 1/20 ó 30.
• Si se logra mantener, sigue el proceso, se asigna media para gráfico de Levey & Jennis.
- NOTA: Es importante reasignar media en las siguientes situaciones: cambio de lote del reactivo, después de
mantenimiento calibración y ajuste del equipo.
4. Producción de Lote y ajuste. Se realiza la producción en base al resultado de repetibilidad y
estabilidad, se realiza producción. Se verifican resultados:
• Si se logra el resultado se procede al envasado,
• Si no se logra resultado, se realiza ajuste.
5. Envasado y etiquetado, Se alícuota en criotubos de plástico en volumen de 0.5ml.
El etiquetado del producto debe cumplir con: Número de Lote, reactividad para el sistema analítico usado en el
banco de sangre y fecha de producción.

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F. Conservación y almacenamiento de controles positivos internos.
La conservación de los controles positivos internos, se conservan en congelación a temperatura
controlada de < 20°C.
El almacenamiento se realiza en cajas específicas para criotubos dispuestos en dirección vertical
debidamente identificadas.

USO DE SUEROS DE CONTROL INTERNO

A. Preparación de alícuota de control de calidad interno.

Realizar descongelación controlada a temperatura ambiente de 22°C + 2°C, y humedad, inspecciona requisitos
de cumplimiento (turbidez, presencia de burbujas y volumen), si hay cumplimiento sigue proceso, si este no
cumple se desecha como residuo peligroso biológico infeccioso.

B. Incorporación del control de calidad interno a prueba de serología infecciosa de rutina.

Se prepara corrida colocando el control de calidad interno de manera alterna (inicio, en medio o al final),
realizándose la prueba, al final de esta se registran valores en el gráfico de Levey & Jennis y se valida con reglas
básicas de Westgard. Si existe cumplimiento se libera la corrida, si no invalida corrida e inicia la investigación de
causa efecto y somete acciones correctivas.

Resultados
Los resultados serán evaluados a través de estadística básica para el control estadístico del proceso: Promedio X,
Desviación Estándar SD, Gráficos de Levey & Jenning, Reglas de Westgard, etc., en busca de estabilidad y
repetibilidad.
El gráfico de Levey & Jenning es una herramienta que se utiliza para analizar el funcionamientro del control de
calidad, en la que se vuelcan las concentraciones obtenidas de los procesos de control diarios, y los resultados
de la media y las desviaciones estándar de esas mismas concentraciones. El siguiente es un ejemplo de un
gráfico de Levey & Jenning:

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En color verde se puede observar la media obtenida de esas concentraciones, en color violeta la media +/- 1
desviación, en color naranja +/- 2 desviaciones, y en color rojo +/- 3 desviaciones. Estos parámetros sirven para,
aplicándole previamente las reglas de Wesgard, saber qué resultados llaman la atención y asi terminar el
proceso de control de calidad. Las siguientes imágenes ayudaran a comprender las 6 reglas de Wesgard:

Vale aclarar que tanto el gráfico como las 6 reglas de Wesgard no sólo sirven para los controles “in house”, sino
también para cualquier tipo de control.
Por otro lado, la producción y ajuste de lote, requiere un proceso controlado.
El uso de los sueros control interno en el día a día, es tratado al igual que una muestra problema, teniéndose
como algoritmo de trabajo control interno invalidado igual a corrida no liberada, introduciendo los resultados al
procedimiento de acciones correctivas.

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 CONCLUSIONES

La implementación de controles de calidad internos caseros “in house” puede ser una alternativa a los
comerciales, siendo obligado se tenga un sistema de calidad basado en procesos, el diseño del proceso y su
validación, la identificación de desviaciones y sus acciones correctivas, así como la interpretación de las causas
de validación o invalidación de una corrida día a día y las acciones preventivas que aseguren la disponibilidad y
oportunidad de la sangre al paciente.

Es recomendable para su implementación:

1. Obtener como materia de producción suero positivo para serología infecciosa con reactividad de 5 a 6
veces por arriba del punto de corte.
2. La caracterización de los sueros es de 2 a 3 veces por arriba del punto de corte.
3. La estabilidad y repetitibilidad debe hacerse con 20 a 30 muestras y en un tiempo de uno a dos meses,
teniendo como criterios de alarma o invalidación las reglas de Westgard, y que toda invalidación es igual
a búsqueda de causa efecto, acciones correctivas e iniciar en la muestra número uno.
4. Asignar media, y considerar como un debe reasignar media en las siguientes condiciones: al inicio de
nuevo lote, cambio de equipo y después de mantenimiento, calibración y ajuste del equipo.
5. En el envasado debe controlarse la homogenización y la generación de burbujas.
6. La conservación debe será < 20°C, temperaturas por abajo dañan el producto.
7. El estibaje se recomienda sean solo dos cajas.
8. Para el uso la descongelación controlada es importante y la homogenización sin formación de burbujas.
9. Validación del equipo, proceso y resultado.
10. Mantener registros de todas las actividades.

Bibliografia:
http://www.hemobaires.org.ar/pdfs/Clase%20CI%20curso%20de%20formacion%20bioq%20AAHI.pdf

http://www.ops.org.bo/textocompleto/rnbiofa93020207.pdf

http://es.slideshare.net/sameth2006/control-de-calidad-en-qca-clnica1

http://labcontroldecalidad.blogspot.com.ar/2010/11/practica-7-preparacion-de-sueros.html

http://qcnet.com/Portals/75/PDFs/Gaceta%2017.pdf

ttps://books.google.com.ar/books?id=mRiyyuEmd4C&pg=PA67&lpg=PA67&dq=patrones+de+control+de+calidad&source=bl&ots=i72auTex29&sig=DDWDc46REf
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