Guías para Prácticas Inmunologia2019 PDF

Facultad de Medicina Humana y Ciencias de la Salud
INMUNOLOGIA-MANUAL DE LABORATORIO M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY
GUÍA DE PRÁCTICAS
INMUNOLOGÍA
CICLO : VII
DOCENTE: M. Sc. SÁNCHEZ MENDOZA HENRY
2019 - I
M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

PRÁCTICA N° 01
RECONOCIMIENTO DE LEUCOCITOS:
FORMULA DIFERENCIAL
1. OBJETIVOS
 Reconocer las distintas formas de células sanguíneas y las formas de los núcleos de
los leucocitos
 Observar sus formas de los núcleos, diferenciando sus formas.
 Utilizar adecuadamente el material de laboratorio.
2. RESULTADOS DE APRENDIZAJE ESPERADOS

 Reconocimiento por parte del alumno de los diferentes tipos de leucocitos: su forma de
célula, tamaño y forma del núcleo.
3. INTRODUCCIÓN
El núcleo el elemento constante en las células animales y vegetales, es generalmente
en algunos casos de forma esférica, en algunos casos tiene la misma forma de célula
y ocupa mayormente una posición central.
Algunas regiones celulares tiene el pH alcalino y se tiñen con los colorantes ácidos,
otros tienen el pH ácido y se tiñen con colorantes básicos; sin embargo, es necesario
señalar tanto el núcleo como el citoplasma tienen características anfotéricas de
manera que se pueden teñir el núcleo con algunos colorantes ácidos y el citoplasma
con algunos colorantes básicos.
La tinción con colorante Wright, que se usa para la tinción de leucocitos es de tipo
Romanowsky, mezcla de azul de metileno así como eosina, queda una coloración
purpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofilico y da color
rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina.

HEMOGRAMA DE SCHILLING: En un frotis de sangre coloreado, se

encuentran 100 leucocitos y determina qué porcentaje corresponde a cada tipo de
leucocitos. En el adulto normal, se puede considerar como normal. Bl=5000
a10000 mm3.
DIFERENTES FORMAS DE LOS LEUCOCITOS:
4. MATERIALES Y EQUIPOS
4.1 MATERIALES
4.1.1 BIOLÓGICO
- Muestras: sangre
4.1.2 DE VIDRIO
- Laminas
- aguja n° 21
- tubo lila con EDTA

4.1.3 DE METAL
4.14 REACTIVOS Y COLORANTES

- colorante: Wright
- aceite de inmersión
- Guantes
4.2 EQUIPOS
 Microscopio óptico
5. PROCEDIMIENTO
- Limpie y desinfecte con alcohol la pulpa del dedo índice.
- Pinche con una lanceta estéril y coloque una gota de sangre en un extremo de la
lámina
- Hacer un frotis de la gota de sangre con otro porta. El frotis se hace extendiendo
la sangre de forma rápida y continua arrastrando una lámina portaobjeto sobre la
que contiene la sangre con un ángulo de inclinación de unos 45° y dejar secar al
aire.
- Colorear con coloración Wright se agrega gotas hasta que la lámina este cubierta
por completo dejar en reposo 2 minutos.
- Agregar el doble de agua destilada por cada gota del colorante utilizado. Dejar en
reposo de 8 minutos.
- Lavar con agua corriente y secar al medio ambiente
- Observar con objetivo de inmersión (aceite de Inmersión).
- Esquematizar. Dos campos de los 100 observados.

6. MANEJO DE RESIDUOS SÓLIDOS O LÍQUIDOS

- Se trata de detallar el proceso a seguir para la eliminación de los Residuos sólidos y
líquidos generados en la práctica del laboratorio, teniendo en cuenta el impacto de
éstos en el ambiente.
7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 JANEWAY, C Inmunología Edit. Current Biology Limited 4ra Edición Editorial Masson S.A.
Barcelona España 2.000
 ABBAS, A. Inmunología celular y Molecular 4ta Edición Editorial McGraw-I-lilt
Interamericana Madrid 2002

PRÁCTICA N° 02
RECUENTO DE LEUCOCITOS Y PLAQUETAS
1. OBJETIVOS
 Determinar la cantidad de leucocitos en el ser humano.
 Determinar la cantidad de plaquetas en el ser humano.
 Utilizar adecuadamente el material de laboratorio.

 Conocer la cantidad de leucocitos por mm3 de sangre.
 Conocer la cantidad de plaquetas por mm3 de sangre.
3. INTRODUCCIÓN
En el adulto normal, los leucocitos se pueden considerar como normal. Bl=5000 a
10000 mm3.
Las plaquetas son de 1 a 3 micras de diámetro. Provienen del megacariocito.
Corpúsculos enucleados. En sus funciones: Conducen a la formación local de
trombina que ayuda a formar un coágulo, el primer paso en la cicatrización de una
herida. Al liberar serotonia produce vasoconstriccion. Se aglutinan para formar el
tampón blanco (tromboplaquetarío) que detendrá inicialmente el sangrado. Protege
los endotelios vasculares.
Activar al factor III plaquetario (tromboplastina tisular) que indica la activación de
la coagulación. Libera al Factor IV plaquetario que inhibe al a heparina Libera
(activa) a la trombostenina (proteína contractil) que causa retracción (encogimiento
contracción) del coágulo (trombo). En el adulto normal las plaquetas se puede
considerar 150 000 a 450 000 mm3.

a. MATERIALES
4.1.1 BIOLÓGICO
- Muestras: sangre
4.1.2 DE VIDRIO
- Laminas
- aguja n° 21
- cámara Newbawer
4.1.3 DE METAL

- colorante: Turck
- colorante: Oxalato de amonio
- Guantes
b. EQUIPOS
5. PROCEDIMIENTO:
Recuento leucocitos
- Pinche con una lanceta estéril
- Colocar 95 uL de reactivo Turk en tubo de ensayo de 5 ml.
- Agregar 5 uL de sangre total y mezclar.
- Dejar reposar por 10 minutos.
- Montar la laminilla de vidrio en la cámara de Newbawer para recuento. Debe
estar limpia y seca.
- De la mezcla retirar 10 uL y colocar en la cámara de Newbawer.
- Dejar 3 minutos que los leucocitos se sedimenten.
- Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar en
los 4 cuadrados angulares.
- Reportar resultados.

Recuento de plaquetas

- Pinche con una lanceta estéril
- Colocar 95 uL de reactivo Oxalato de amonio en tubo de ensayo de 5 ml.
- Agregar 5 uL de sangre total y mezclar.
- Dejar reposar por 10 minutos.
- Montar la laminilla de vidrio en la cámara de Newbawer para recuento. Debe
estar limpia y seca.
- De la mezcla retirar 10 uL y colocar en la cámara de Newbawer.
- Dejar 3 minutos que los leucocitos se sedimenten.
- Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar en
los 5 cuadrados angulares.
- Reportar resultados.


7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
 JANEWAY, C Inmunología Edit. Current Biology Limited 4ra Edición Editorial Masson
S.A. Barcelona España 2.000

PRÁCTICA N° 03
ANTÍGENOS SANGUÍNEOS
RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUÍNEOS:
SISTEMAS ABO y RH
1. OBJETIVOS
• Reconocer los grupos sanguíneos de los sistemas ABO y Rh a través de aglutinación
directa.
• Analizar e interpretar los resultados en relación con los factores responsables de la

herencia.
• Conocer la importancia de la identificación de los grupos sanguíneos.

 Reconocimiento por parte del alumno sobre que es una inmunoglobulina y aun antígeno.
3. INTRODUCCIÓN
El grupo sanguíneo al que pertenece un individuo está determinado por los antígenos de
membrana de sus eritrocitos y los anticuerpos del suero. Algunos antígenos y sus
anticuerpos se encuentran además en las secreciones. Los anticuerpos del suero suelen
producir aglutinación (Reacción antígeno-anticuerpo en e cual el Ag olido forma un
cristal con el anticuerpo soluble), de los eritrocitos portadores de antígenos de grupo
distinto. Por ello, algunos grupos sanguíneos, como los del sistema ABO o el facto Rh,
ha de tenerse en cuenta a la hora de realizar transfusiones sanguíneas o transplante de
órganos. Por ejemplo, las reacciones de aglutinación que revisten peligro, son aquellas
en los que los anticuerpos del receptor aglutinan los eritrocitos del donante.

Fundamento teórico:
A principios del siglo XIX, K. Landsteiner observó que al mezclar eritrocitos de una
persona con el suero de otra, a veces, se producían aglutinaciones. Es así que
estudiando este comportamiento de los eritrocitos, se percató de que en la población
existen individuos de tres fenotipos diferentes correspondientes a los grupos A, B y O.
El AB menos frecuente fue descubierto un año después por dos discípulos de
Landsteiner. Su estructura está codificada por un gen I que tiene 3 alelos IA, IB, i;
siendo los alelos IA y IB codominantes y ambos dominantes sobre el i. (IA = IB > i)
(Tabla 1).
Sistema ABO
• GRUPO A. Son las personas cuyos glóbulos rojos poseen antígenos del tipo A y
carecen de cualquier otro tipo. En suero anticuerpo B
• GRUPO B. Son las personas cuyos glóbulos rojos poseen antígenos del tipo B y
carecen de cualquier otro tipo. En suero anticuerpo A
• GRUPO AB. Son las personas que poseen al mismo tiempo antígenos del tipo A y
del tipo B. NO ANTICUERPOS
• GRUPO 0. Son las personas cuyos glóbulos rojos carecen de antígenos de tipo A y
B. En suero anticuerpo A Y anticuerpo B
SISTEMA Rh

En 1940, Landnsteiner y Wiener descubrieron otra diferenciación hereditaria en la

sangre. El llamado factor Rh. Inyectaron sangre de Macacus rhesus en conejos,
obteniendo de estos un suero, capaz de aglutinar los eritrocitos de los monos y que al
ser inyectados en humanos, se observó que podían aglutinar los eritrocitos de un 85%
de los neoyorquinos, llamados Rh positivos, a diferencia del 15% que no reaccionaron,
a los que se denominaron Rh negativos. Poco tiempo después se dieron cuenta de que el
carácter Rh negativo es recesivo frente al Rh positivo.
Esta clasificación se basa en la existencia en la membrana de los glóbulos rojos de un
antígeno denominado D.
En el mismo año se comprobó que las transfusiones de sangre Rh positivos a individuos
Rh negativos provocaban crisis hemolíticas, a pesar de que fueron del mismo grupo
sanguíneo del sistema ABO, lo que llevó a reconocer que este factor está involucrado
en la producción de la enfermedad hemolítica del recién nacido (eritroblastosis fetal).

a. MATERIALES
4.1.1 BIOLÓGICO
- Muestras: sangre
4.1.2 DE VIDRIO
- Laminas
- aguja n° 21
4.1.3 DE METAL

- Sueros anti A, anti B y anti D (anti Rh)
- Alcohol yodado
- Algodón
- Palitos mondadientes
- Guantes
b. EQUIPOS
5. PROCEDIMIENTO:
La técnica que permite la identificación de los grupos sanguíneos se basa en la aglutinación o
no de los eritrocitos, empleando para ello los respectivos sueros.
Procedimiento:
1. Desinfecte la pulpa del dedo índice con un algodón empapado de alcohol yodado e
inmediatamente haga una punción con la lanceta.
2. Coloque de manera inmediata, tres gotas de sangre en cada uno de los tres depósitos
cóncavos de la lámina de aglutinación.
3. Adicione una gota del suero anti A sobre la primera gota de sangre, una gota del suero
anti B a la segunda gota de sangre y una gota de suero anti D (anti Rh) a la tercera gota.
4. Rápidamente homogenice, moviendo de manera circular, cada gota con su respectivo
anticuerpo,, empleando para ello diferentes palitos mondadientes.
5. Dejar reposar brevemente (aproximadamente 1 a 2 minutos).
6. Observe los resultados y determine a qué grupo sanguíneo corresponde su muestra, por
medio de la aglutinación o no ocurrida.
7. Anote los resultados obtenidos de los integrantes de su mesa en la siguiente tabla,
esquematizando lo observado.

REACCION DE
AGLUTINACION GRUPO SANGUINEO
Sistema Factor
ALUMNO Anti A Anti B Anti D ABO Rh


 JANEWAY, C Inmunología Edit. Current Biology Limited 4ra Edición Editorial Masson
S.A. Barcelona España 2.000
ACTIVIDADES
1. ¿Por qué una vez extraída la sangre se debe proceder con rapidez?
2. Que es lo que contiene los reactivos de la prueba.

PRÁCTICA N° 04
LA INMUNOLOGÍA Y LA HEMATOLOGÍA
1. OBJETIVOS
• Reconocer las partes de la sangre: plasma y elementos formes
• Conocer la importancia de la sangre en la inmunología.

 Reconocimiento por parte de los alumnos de los componentes de la sangre
2. INTRODUCCIÓN
La sangre es un tejido conectivo especial líquido que tiene gran importancia fisiológica
ya que en ella se encuentran CÉLULAS Y SUSTANCIA IMPORTANTES PARA LA
VIDA.
Este líquido es de color rojo en las arterias por la presencia de oxígeno y de color azul
en las venas por la gran concentración de CO2.
Las partes de la sangre:
1. PLASMA: parte liquida el 55% del volumen de sangre. Presenta:
1.1 Agua: 95%
1.2 Solutos: 5%: glucosa, lípidos, proteínas (albumina, globulinas, fibrinógeno),
enzimas, hormonas, sales minerales, iones (Na, K, Mg, Ca, Fe, etc), urea, ácido
úrico, creatinina, vitaminas hidrosolubles y liposolubles.
2. ELEMENTOS FORMES: parte sólida de la sangre
2.1 Leucocitos: 7-20 um
2.2 Trombocitos: 2-3 um menos de 1%
2.3 Eritrocitos: 7-8 um el 45% del volumen de glóbulos rojos en la sangre
(hematocrito).

Suero y plasma: cuando se extrae sangre venosa y la depositamos en un tubo de

ensayo esta sangre se coagulara y liberara un líquido sobrenadante SUERO, pero si al
momento de extraerla le agregamos un anticoagulante Heparina se le denominara
PLASMA.
Las venas cefálica, mediana o accesoria cefálica y basílica son las más convenientes para la
venopunción.

a. MATERIALES
4.1.1 BIOLÓGICO
- Muestras: sangre
4.1.2 DE VIDRIO
- Laminas
- aguja n° 21
4.1.3 DE METAL

- Alcohol yodado
- Algodón
- Tubo vacutainer sin anticoagulante tapa de color rojo (suero)
- Adaptador de tubo al vacío.
- Ligadura
- Guantes
b. EQUIPOS
4. PROCEDIMIENTO:
Procedimiento:
1. Realice la antisepsia de la vena elegida para la extracción con un algodón
empapado de alcohol.
2. Coloque la ligadura a 8 cm del codo realizando un torniquete en dicho lugar.
3. Fijar la guja al adaptador portagujas del tubo al vacío, reiré capuchón de la aguja.
4. Se introduce la aguja con un ángulo 20°-30° con el bisel hacia arriba.
5. Estabilizar aguja y adaptador con una mano, presionar con el dedo pulgar para que
se perfore el tubo.
6. Se retira el torniquete, retire el tubo y la aguja con el adaptador.
8. Se coloca algodón en el lugar de la punción.
9. Se centrifuga el tubo a 3500 rpm por 5minutos.


ACTIVIDADES
1. ¿Qué tipos de tubos existe para extraer sangre al vacío?

2. ¿Cuál es la diferencia entre “Suero” y “Plasma” sanguíneos?
3. Haga una lista de todas las enzimas, proteínas, hormonas, lípidos y carbohidratos
que hay en el suero/plasma.

PRÁCTICA N° 05
INMUNODEFICIENCIA SECUNDARIA-VIH:
RAPID TEST INMUNOCROMAOGRAFÍA
1. OBJETIVOS
• Reconocer los diferentes tipos de VIH que existen
• Conocer las diferentes formas de diagnosticar VIH-SIDA

 Reconocimiento por parte de los alumnos de los exámenes que se pueden realizar para
diagnosticar VIH-SIDA.
3. INTRODUCCIÓN
El VIH, tiene la particularidad de dañar al sistema de defensas del organismo, como
queda de manifiesto por la severa disminución e incluso eliminación de los linfocitos T
CD4+ ("helper") que lo caracteriza, en consecuencia, el individuo queda inerme frente a
la agresión de múltiples agentes infecciosos y la muerte se produce.
El VIH está clasificado en la familia Retroviridae y pertenece a la subfamilia de los
lentivirus. Se distinguen dos tipos de VIH: VIH-1 y VIH-2, siendo el VIH-1 más
importante debido a su potencial patogénico mayor, reflejado en su rápida diseminación
por todo el mundo.
El VIH-1 infecta las células CD4+ del sistema inmune, conduciendo a una profunda
depresión de la inmunidad
ESTRUCTURA DE VIRION VIH-1
Con un core con forma de cono compuesto por proteínas. Dentro de esta cápside o
nucleoide se encuentran dos hebras idénticas de ácido ribonucleico (RNA), el material
genético del virus, estrechamente asociadas con la enzima transcriptasa reversa que
transcribe el RNA viral en DNA en la célula hospedera

 2 copias de RNA
 3 enzimas:
Proteasa
Transcriptasa reversa
Integrasa
 p24 - cápside - Ag más fácilmente detectado: diagnóstico
 p17 - proteína de la matriz que rodea al core
 gp120 (externa) y gp41 (transmembrana) fundamentales para la infección
a. MATERIALES
4.1.1 BIOLÓGICO
- Muestras: sangre
4.1.2 DE VIDRIO
- Laminas

- aguja n° 21
4.1.3 DE METAL

- Alcohol yodado
- Algodón
- Tubo vacutainer sin anticoagulante tapa de color rojo (suero)
- Adaptador de tubo al vacío.
- Ligadura
- Guantes
- CASSETT Rapid Test: VIH tipo 1 y 2
b. EQUIPOS
- Centrifuga
5. PROCEDIMIENTO:
Procedimiento:
1. Realice la antisepsia de la pulpa del dedo índice con un algodón empapado de
alcohol yodado e inmediatamente haga una punción con la lanceta.
2. Coloque de manera inmediata, una gota de sangre en cada pocillo del cassets de
rapid-test de VIH.
3. Inmediatamente se coloca dos gotas de diluyente buffer
6. Se coloca algodón en el lugar de la punción.
7. Esperar por 10-15 minutos.
8. Observar y reportar los resultados.

Interamericana Madrid 2002.

Guías para Prácticas Inmunologia2019 PDF

Загружено:

Сведения о документе

Оригинальное название

Авторское право

Доступные форматы

Поделиться этим документом

Поделиться или встроить документ

Параметры публикации

Этот документ был вам полезен?

Это неприемлемый материал?

Авторское право:

Доступные форматы

Guías para Prácticas Inmunologia2019 PDF

Загружено:

Авторское право:

Доступные форматы

Facultad de Medicina Humana y Ciencias de la Salud

INMUNOLOGIA-MANUAL DE LABORATORIO M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

DOCENTE: M. Sc. SÁNCHEZ MENDOZA HENRY

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

2. RESULTADOS DE APRENDIZAJE ESPERADOS

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

HEMOGRAMA DE SCHILLING: En un frotis de sangre coloreado, se

DIFERENTES FORMAS DE LOS LEUCOCITOS:

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

4.14 REACTIVOS Y COLORANTES

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

6. MANEJO DE RESIDUOS SÓLIDOS O LÍQUIDOS

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

RECUENTO DE LEUCOCITOS Y PLAQUETAS

2. RESULTADOS DE APRENDIZAJE ESPERADOS

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

4.14 REACTIVOS Y COLORANTES

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

- Limpie y desinfecte con alcohol la pulpa del dedo índice.

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

6. MANEJO DE RESIDUOS SÓLIDOS O LÍQUIDOS

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUÍNEOS:

• Analizar e interpretar los resultados en relación con los factores responsables de la

• Conocer la importancia de la identificación de los grupos sanguíneos.

2. RESULTADOS DE APRENDIZAJE ESPERADOS

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

En 1940, Landnsteiner y Wiener descubrieron otra diferenciación hereditaria en la

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

4.14 REACTIVOS Y COLORANTES

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

6. MANEJO DE RESIDUOS SÓLIDOS O LÍQUIDOS

2. Que es lo que contiene los reactivos de la prueba.

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

• Conocer la importancia de la sangre en la inmunología.

1. RESULTADOS DE APRENDIZAJE ESPERADOS

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

Suero y plasma: cuando se extrae sangre venosa y la depositamos en un tubo de

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

4.14 REACTIVOS Y COLORANTES

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

5. MANEJO DE RESIDUOS SÓLIDOS O LÍQUIDOS

1. ¿Qué tipos de tubos existe para extraer sangre al vacío?

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

RAPID TEST INMUNOCROMAOGRAFÍA

• Conocer las diferentes formas de diagnosticar VIH-SIDA

2. RESULTADOS DE APRENDIZAJE ESPERADOS

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

M. Sc. SÁNCHEZ M. HENRY

4.14 REACTIVOS Y COLORANTES

6. MANEJO DE RESIDUOS SÓLIDOS O LÍQUIDOS

Вам также может понравиться