Вы находитесь на странице: 1из 25

Workshop

„Applying Environmentally Friendly Technologies in Integrated Pest


Management Systems”

Микроорганизмы с ценными свойствами


и применение их в биотехнологиях
А Лобан Л.Л., ИТИ «Биотехника», Украина

This Programme is co-funded by the


European Union
1

49
62 12 природных изолятов (потенциальные
промышленно-ценные штаммы : тест-объектов – биологические объекты для
-Pseudomonas fluorescens шт. AP33 (доминирующий производства перспективных
- Pseudomonas aureofaciens шт. 306 комплекс СЗР):
- Bacillus subtilis шт. 26Д фитопатогенов) - Bacillus subtilis шт. 1
- Gliocladium virens шт. Gv-30 -Bacillus thuringiensis sp. шт. Ж3
- Metarhizium anisopliae шт. МАЛИ -Pseudomonas fluorescens шт. 2
- Trichoderma viride шт. М-10 -Bacillus thuringiensis var. kurstaki шт.
BTK-4
-Trichoderma viride шт. ЮКС-07

В ИТИ “Биотехника” создана коллекция культур микроорганизмов для биологизации


земледелия, которая собрана по принципу актуальности в биометоде и служит для
решения задач сельськохозяйственного производства

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
Штаммы, задепонированные в Украинской коллекции НАН 2

№ Номер в Украинской
Наименование биологического агента
з/п коллекции

1 Arthrobotrys oligospora шт. № 12 ІМВ F-100047


2 Bacillus thuringiensis var. kurstaki шт. ВТК-4 ІМВ В-7173

3 Beauveria bassiana шт. 3300 ІМВ F-100044


4 Beauveria bassiana шт. 71661 ІМВ F-100051
5 Metarhizium anisopliae шт. МАЛИ ІМВ F-100090
6 Pseudomonas fluorescens шт. 2 ІМВ В-7533
7 Pseudomonas fluorescens шт. АР33 ІМВ В-7206
8 Salmonella enteritidis var. Issatschenko шт. К-28 ІМВ В-7207

9 Trichoderma viride шт. Т-4 ІМВ F-100046


10 Verticillium lecanii шт. С-3 ІМВ F-100045

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
Интенсификация сельскохозяйственного производства предполагает 3
широкое применение химических пестицидов, что увеличивает
опасность загрязнения ими окружающей среды и продуктов
растениеводства
Химические пестициды не владеют
избирательностью, поэтому уничтожают не
только вредителей, они способны причинить
значительный ущерб фитоценозам, уменьшая в них
количество полезных микроорганизмов и насекомых.
Альтернативные способы защиты
сельскохозяйственных растений от болезней и
вредителей связаны с разработкой новых
биопрепаратов не только функционально
эффективных, но и экологически безопасных как для
человека, животных, полезной фауны, так и для
почвенной микробиоты, а, следовательно, и для
состояния грунтов.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
4

Актуальность разработки новых


биотехнологий, в первую очередь, связана с
биологическим земледелием, к которому
проявляют интерес во всём мире

Очевидно, что с точки зрения природоохранного


земледелия, именно биологические средства
защиты растений – единственная и надежная
альтернатива химическим пестицидам.

This Programme is co-funded by the


European Union
Главные условия для создания эффективных 5
биопрепаратов на основе микроорганизмов

❖ высокий уровень проявления энтомоцидной или фунгицидной


активности относительно вредоносных объектов;
❖ широкий спектр активности по отношению к фитопатогенам и
фитофагам, т. е. к объектам, поражаемых данным препаратом;
❖ способность к продуцированию витаминов и гормонов роста, т. е.
биологически активных веществ (БАВ), которые влияют на
различные физиологические процессы растений, регулируют
состояние покоя и прорастания семян, улучшают
корнеобразование, цветение и созревание плодов, повышают при
этом резистентность растений к действию стрессовых факторов.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
Создание биопрепаратов на основе биотехнологических 6
агентов

Исследование штаммовых
характеристик и
биологической активности в
лабораторных условиях
Поиск перспективных штаммов
с агрономически-ценными
свойствами Депонирование штамма в
Депозитарии непотогенных
Определение культур микроорганизмов с
таксономического статуса определением их
вирулентности
Подготовка
нормативно-
технической Создание технологий
документации изготовления препаратов в
условиях биопроизводств

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
7
Технологические характеристики биологических агентов
Скорость и синхронность Устойчивость
Высокая штамма к
спорообразования (для
продуктивность воздействию
бацилл и
штамма неблагоприятных
микроскопических
грибов ) факторов

Максимальное
накопление Длительность
титров и сохранения
ценных микроорганизма и
метаболитов в его метаболитов в
биопрепарате готовом препарате

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
Формирование производства и реализации 8
биопрепаратов
Исследовательские Биолаборатории,
институты - разработчики биофабрики

Органическое производство
Биологические
сельскохозяйственной
средства
продукции

Органическая с.-г.
продукция

Потребители

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
9
Перспективные микроорганизмы, используемые в
технологиях производства биопрепаратов
• Мицелиальный гриб Trichoderma viride шт. Т-4 с
ростстимулирующими и фунгицидными свойствами.
Задепонирован в Депозитарии Института микробиологии и
вирусологии им. Д.К. Заболотного, служит основой для
производства Триходермина (ТУ У 72.1-00495929-016:2016). На
агаризованных питательных средах образует мицелиальную
массу зеленого цвета, хорошо растет на селективных средах для
микроскопических грибов (Сабуро, сусло-агаре, среде Чапека).
Образует биологически - активные вещества с фунгицидным и
ростстимулирующим действием. И поскольку гриб владеет
гиперпаразитарной активностью - препарат на его основе
способен подавлять широкий спектр грибных фитопатогенов,
вызывающих фузариозы, фитофторозы, гнили (белую, серую,
сухую, корневую), паршу, милдью, оидиум, курчавость листьев.
Применяют на овощных, зерновых, зернобобовых, плодовых
культурах и винограде. В жидком препарате содержится не
только мицелий, споры, хламидоспоры с титром
жизнеспособных клеток не менее 2,0.109 КОЕ/см3, но и
биологически-активные вещества(БАВ), способные угнетать
вредоносные объекты и обеспечить эффективность защитных
мероприятий на уровне от 60 % до 95 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
10
• Ризосферные бактерии Pseudomonas fluorescens шт. 2
и Pseudomonas fluorescens шт АР 33 задепонированы
в Депозитарии Института микробиологии и
вирусологии им. Д.К.Заболотного НАН. Используются
в биотехнологиях при производстве биофунгицидов
Флуоресцин БТ и Планриз БТ с титрами от 4,0.109
КОЕ/см3 до 5,0.109 КОЕ/см3 ( соответственно ). В обеих
препаратах жизнеспособные микроорганизмы рода
Pseudomonas при культивировании их в жидких
питательных средах образуют биологически активные
вещества: феназин-карбоновые кислоты,
сидерофоры, цитокинины. БАВ стимулируют рост
растений с одновременной защитой зерновых,
плодовых и ягодных насаждений, цветочно-
декоративных растений, винограда от вредоносных
объектов: мучнистой росы, бурой ржавчины, парши,
септориоза, черной ножки, гнилей, милдью, оидиума,
фузариоза, фитофтороза. Биологическая
эффективность от 87 % до 96 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Pseudomonas aureofaciens шт 5, задепонирован в 11
Депозитарии Института микробиологии и вирусологии
им.Д.К.Заболотного НАН. На агаризованых питательных
средах ( МПА и Кинг В) образует пигмент оранжевого цвета,
дифундирующий в толщу агара и комплекс кислот,
обеспечивающих защитные функции в биопрепарате с
антигрибной активностью которые способны подавлять или
замедлять рост фитопатогенов. Pseudomonas aureofaciens
шт 5 – действующий биологический агент в биофунгициде
Биоспектр БТ (ТУ У 72.1-00495929-013:2016). Биоспектр БТ
(аналог Гаупсина) с титром не ниже 5,0.109 КОЕ/см3.
Применяется для защиты: томатов, огурцов, перца, и других
овощных культур, плодово-ягодных насаждений,
технических зерновых, цветочно-декоративных растений и
подавляет вредоносные объекты: гельминтоспориоз,
курчавость листьев персика, фузариозное увядание,
гнили(белую, серую, сухую, корневую, листовую),
монилиальный ожог, ограничивает численность
плодожорок косточковых и личинок колорадского жука
младших возрастов. Биологическая эффективность от 60%
до 88%, иногда достигает 95%.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Основой для производства Трихопсина БТ эффективного 12
комплексного биштаммового препарата с инсектофунгицидными и
ростстимулирующими свойствами служат два штамма :
мицелиальный гриб Trichoderma viride шт Т-4 (T.v) и ризосферная
бактерия Pseudomonas aureofaciens шт. 306 (P.a) , которые
задепонированы в Коллекции непатогенных микроорганизмов
института микробиологиии вирусологии им. Д.К.Заболотного НАН.
На агаризованных средах мицелиальный гриб T.v образует
субстратный и воздушный мицелий зеленого цвета и
многочисленные конидии. В жидкой питательной среде мицелий,
споры, хламидоспоры образуют биомассу с биологически
активными веществами антимикозного действия. Pseudomonas
aureofaciens – биологический объект, образующий комплекс
кислот и пигментов, который за счет синергизма с T.v продуцирует
более активные вещества, подавляющие возбудителей
гельминтоспориоза, парши, курчавости листьев, фитофтороза,
фузариоза, гнилей, монилиального ожога, милдью, оидиума
винограда. Кроме того, Трихопсин БТ ограничивает численность
плодожорок косточковых и личинок колорадского жука младших
возрастов. Уровень биологической эффективности от 84% до 95 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Жизнеспособные микроорганизмы Bacillus subtilis 13
шт. ИМВ 215 используют в биотехнологиях при
производстве биофунгицида Бактофит БТ (ТУ У
72.1-00495929-008:2015) с ростстимулирующими
свойствами. Биотехнологический агент Bacillus
subtilis способен образовывать споры и
синтезировать биологически активные вещества с
антагонистическими свойствами относительно
фитопатогенов грибной этиологии. Титры
жизнеспособных бактерий в водной суспензии
Бактофита БТ - 2,0.109 КОЕ/см3. Используют для
защиты овощных культур, плодово-ягодных
насаждений, зерновых, цветочно-декоративных
растений. Препарат на основе Bacillus subtilis
угнетает вредоносные объекты: мучнистую росу,
паршу, фитофтороз, фузариоз, гнили (белую, серую,
сухую, корневую). Используют каждые 8-15 дней.
Уровень биологической эффективности от 84% до
88%.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
14
• Основой препарата Кониотирин БТ служит
гиперпаразитический гриб Coniothyrium
minitans, шт. СМ-20 ,способный
синтезировать энзиматические соединения
типа 1,3 – глюконат, с помощью которых
происходит разрушение склероциев на
подсолнухе. Титр жизнеспособных
микроорганизмов в Кониотирине не ниже
1,0.109 КОЕ/см3. Препарат применяют для
защиты подсолнуха и овощных культур с
целью ограничения популяции возбудителей
белой гнили. Используют для предпосевной
обработки семян в день посадки и для
обработки вегетирующих растений с
интервалом 14-21 день. Уровень
биологической эффективности от 65 % до 85%.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Мицелиальный гриб – гиперпаразит Gliocladium 15
roseum (G.v) способен образовывать не только
мицелий, споры но и биологически – активный
комплекс токсических веществ с
антагонистическим действием относительно
возбудителей болезней грибной этиологии.
Биофунгицид Глиокладин БТ, основой которого
является гриб – гиперпаразит G.v рекомендуется
для защиты подсолнуха, земляники, томатов и
других овощных культур, плодово-ягодных
насаждений, технических, зерновых,
зернобобовых, цветочно-декоративных растений.
Препарат способен подавлять возбудителей гнилей
(белой, серой, сухой), ризоктониоза, фузариоза,
фитофтороза. Используют на всех фазах развития
вегетирующих растений каждые 14-20 дней.
Уровень биологической эффективности от 65% до
85 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Ампеломицин БТ (ТУ У 72.1-00495929-012:2015) - 16
биофунгицид, основой которого являются мицелий
и споры микроскопического гриба из рода
Ampelomyces с титром 4,0.109 КОЕ/см3, а также
метаболиты с антагонистическими свойствами,
которые синтезирует продуцент при его
культивировании в жидких питательных средах.
Используют для защиты томатов, огурцов, перца и
других овощных культур, плодово-ягодных
насаждений, технических, зерновых,
зернобобовых, цветочно-декоративных растений,
винограда. Ограничивает в агробиоценозе
вредоносные объекты, вызывающие
гельминтоспориоз, фитоспориоз, паршу, милдью,
оидиум, курчавость листьев, гнили (белую, сухую,
корневую). Используют каждые 7-12 дней на всех
фазах развития вегетирующих растений. Уровень
биологической эффективности от 71 % до 90 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Микроскопический гриб Beauveria bassiana шт. 71661
(В.В) задепонирован в Украинской коллекции 17
непатогенных микроорганизмов под номером ИМВ
F – 100051. Является продуцентом биоинсектицида
Боверин БТ (ТУ У 72.1-00495929-002:2015). За счет
конидий, мицелия, токсических метаболитов
(боверцина, эстеразы) которые коррелируют с
вирулентностью продуцента, препарат Боверин
способен ограничивать в агробиоценозе численность
чешуекрылых (личинок и нимф белокрылок),
твердокрылых (личинок младших возрастов
колорадского жука), трипсов. Препарат инфекционно-
токсического действия: споры Beauveria bassiana
проникают через кутикулу в тело насекомого, за счет
гиф, которые образуют сплетения (мицелий) и,
благодаря токсическим метаболитам вредители
погибают. Используют для защиты овощных культур в
закрытом и открытом грунте каждые 7-12 дней.
Уровень биологической эффективности от 70 % до
95%.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• В биопрепарате Вертициллин БТ (ТУ У 72.1- 18
00495929-003:2015) действующим началом
являются мицелий и токсические метаболиты
( гидролитические ферменты) с
инсектицидными свойствами гриба
Verticillium lecanii шт. С-3, который
задепонирован в Украинской коллекции
непатогенных микроорганизмов Титр
инфекционных конидий в биопрепарате
2,0.109 КОЕ/см3 . Применение Вертициллина
эффективно в закрытом грунте при
относительной влажности воздуха свыше
85%.Препарат ограничивает численность
белокрылки и тли на овощных культурах.
Используют Вертициллин каждые 10-12 дней
в температурном интервале от 250С до 320С.
Уровень биологической эффективности от 85%
до 100%

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Микроскопический гриб Metarhizium anisopliae 19
(синоним Entomophthora anisopliae) используют в
биотехнологиях при создании биоинсектицида
Метаризин БТ (ТУ У 72.1-00495929-010:2015) .
Гриб – продуцент образует конидии ,мицелий и
токсические метаболиты, которые попадая через
желудочно – кишечный тракт или через наружные
поверхности насекомых, вызывают гибель
вредителей. Используют для защиты овощных,
плодово-ягодных, технических, зерновых,
зернобобовых и цветочно-декоративных растений.
Вызывает супрессию вредоносных насекомых:
двукрылых, жесткокрылых (личинок младших
возростов колорадского и майского жуков),
жужелиц трипсов. Применяют на всех фазах
развития растений каждые 10-12 дней. Уровень
биологической эффективности от 66 % до 73 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Ризосферные бактерии Bacillus thuringiensis var. 20
thuringiensis u Bacillus thuringiensis var.kurstaki являются
действующим началом в биоинсектицидах
Битоксибациллине БТ (ТУ У 72.1-00495929-006:2015), и
Бецимиде БТ (ТУ У 72.1-00495929-005:2015)
(соответственно). Титр жизнеспособных микроорганизмов
в этих биоинсектицидах не ниже, чем 2,0.109 КОЕ/см3.
Действующим началом в обоих препаратах есть спорово-
кристаллический комплекс с токсинами: β-экзотоксином и
δ-эндотоксином (в Битоксибациллине) и только с
параспоральными кристаллами δ-эндотоксина-в
Бецимиде. Бациллярный биоинсектицид
Битоксибациллин используют для защиты овощных,
плодово-ягодных, технических, зерновых, зернобобовых
культур, цветочно-декоративных растений от
жесткокрылых, паутинного клеща, вредителей хлебных
запасов, тли. Бецимид ограничивает численность
листоверток, яблонной плодожорки, чешуекрылых не
только в полях, садах, теплицах, но и в лесных хозяйствах.
Уровень биологической эффективности бациллярных
инсектицидов от 62 % до 95 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
21
• Микроскопический хищный гриб Arthrobotrys
oligospora (А.о.) используют в биотехнологиях при
производстве биопрепарата нематицидного действия
Нематофагина БТ (ТУ У 72.1-00495929-004:2015) .
Споры, мицелий гриба Arthrobotrys oligospora и его
токсические метаболиты ( линолиевая кислота и
комплекс ферментов-протеаз) обладают токсигенным
действием на галловые нематоды в открытом грунте .
Продуцент способен образовывать ловчие петли,
которые, захватывая нематоды, вызывают их гибель.
Гриб - продуцент питается тканями мёртвых нематод
и по завершению этого процесса образует конидии.
Нематофагин БТ обеспечивает защиту земляники,
клубники от галловых нематод в открытом грунте.
Применяют на цветочно-декоративных, овощных и
зеленных культурах. Продуцент синтезирует фермент
протеазу, влияющую на биологическую активность
Нематофагина, которая находится на уровне от 70 %
до 85 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
• Современная зерновая форма 22
Бактороденцида БТ создана на основе
бактерий Salmonella enteritidis var.
Issatschenko шт. К-28 (S.e.), которые владеют
селективной патогенностью относительно
мышевидных грызунов с титром
жизнеспособных клеток не ниже, чем 2,0.109
КОЕ/см3. Бактерии-продуценты (S.e.)
способны синтезировать О-антиген
родентицидного действия Бактороденцид
БТ (ТУ У 72.1-00495929-017:2015) -
микробиологический препарат
родентицидного действия, который
используют вместо химических препаратов с
аналогичными свойствами. Уровень
биологической активности не ниже 90 %.

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
23
Инженерно – технологический
институт «Биотехника»
научно – исследовательский отдел
промышленной микробиологии №II
тел. (048)-770-56-72,
email : biotehnica.od@gmail.com

Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября


This Programme is co-funded by the 2018
European Union
Кишинев, Республика Молдова, 6-7 октября
This Programme is co-funded by the 2018
European Union