A.

- BASE TEORICA DE LAS POSIBLES PATOLOGIAS ASOCIADAS QUE JUSTIFICAN LA INDICACION

MEDICA DE PARTE DE UN MEDICO.

La orina, producida en el riñón y descargada a través de la pelvis renal y los uréteres hacia la vejiga, es estéril en el
individuo sano. Se desarrolla infección cuando las bacterias logran ingresar a ese ambiente y pueden persistir en él, sobre
todo a través de una vía ascendente de bacterias residente de la flora perineal, provenientes de la flora del intestino grueso.

Entre los factores que favorecen el acceso de las bacterias el más importante es el coito, que desplaza bacterias de forma
transitoria al interior de la vejiga y pone en riesgo a la mujer por la corta longitud de la uretra. Otro es la manipulación de
la uretra como el sondeo. Las bacterias también pueden alcanzar las vías urinarias desde la corriente sanguínea, lo cual es
menos frecuente y requiere una infección en otro sitio. La persistencia se favorece por factores del hospedero que
interrumpen o retardan el flujo urinario, como instrumentación, obstrucción o anomalías estructurales. Los factores
bacterianos incluyen la capacidad de adherirse al uroepitelio y producir otros factores como las exotoxinas. Los miembros
del género Proteus, productores de ureasa, se vinculan con cálculos urinarios, que por sí mismos son factores que
predisponen a la infección.

El urocultivo es el cultivo de orina para diagnosticar infección sintomática del tracto urinario o infección asintomática
(bacteriuria asintomática) en pacientes con riesgo de infección.
Está basada en la presencia de un número significativo de bacterias (generalmente >100.000 bacterias/ml.)

La piuria, junto con la bacteriuria, es un dato muy importante para el diagnóstico de infección del tracto urinario, ya que
prácticamente está presente en todas las infecciones urinarias. Una excepción es la bacteriuria asintomática en la que la
piuria puede estar ausente.

El urocultivo se hace colocando la orina en un medio propicio a la reproducción de bacterias, llamado medio de cultivo. Si
la orina contiene gérmenes, en 48 horas se podrá identificar la formación de colonias de bacterias y así se puede
identificar qué tipo de bacteria está presente y que antibióticos son eficaces para luchar contra ellas (antibiograma)
.
En el resultado de la cultura de orina habitualmente están presentes el tipo de bacteria, el número de colonias formadas y
la lista de antibióticos sensibles y resistentes. Voy a hablar de los resultados en detalles más adelante.

La mejor y la prueba más adecuada para el diagnóstico de una infección urinaria, sea una infección de la vejiga, llamada
cistitis, o una infección de los riñones, llamada pielonefritis, es el urocultivo

Un error muy común, inclusive para algunos doctores, es cerrar el diagnóstico de infección del tracto urinario basándose
solamente en los resultados de la análisis de orina (examen general de orina). Muchas veces el paciente sufre
innecesariamente tratamientos con antibióticos solamente por presentar leucocitos en la orina o presentar discreta
hematuria

Es importante destacar que análisis de orina es una prueba de orina que ayuda mucho en el diagnóstico de enfermedades
urinarias, sin embargo, es muy inespecífica y sola no debe cerrar cualquier diagnóstico. Por ejemplo, una infección del
tracto urinario suele dar leucocitos y sangre en la orina; sin embargo, otras enfermedades también, como piedras en los
riñones, algunas ETS (enfermedades de transmisión sexual) y nefritis, para quedarnos solamente en 3 ejemplos.

El urocultivo es la prueba de orina que identifica la bacteria causante de infección del tracto urinario. De forma más
simple, podemos decir que análisis de orina nos muestra las consecuencias de una posible infección urinaria, mientras que
solamente el urinocultivo es capaz de identificar el germen que causa la infección.
El urocultivo es importante en algunos casos:

 Cuando, después de la evaluación clínica, el médico no está todavía seguro para tratar una infección del tracto
urinario.
 Cuando el primer curso de antibióticos no consigue eliminar la infección.
 Cuando existe sospecha de pielonefritis.
 En mujeres embarazadas.
 En los casos de infecciones urinarias de repetición.
 En casos de fiebre sin origen definido.
 Antes de procedimientos urológicos.
Muchas veces el médico está seguro del diagnóstico de infección del tracto urinario, pero pide para ver el antibiograma y
decidir cuál es el mejor antibiótico para el caso. Esto es muy común en las mujeres con cistitis de repetición que
hicieron varios cursos de antibióticos a lo largo de la vida y presentan algunas bacterias resistentes a algunos
medicamentos.
B.- MUESTRAS REQUERIDAS PARA EL ANALISIS.
 Orina (de preferencia la 1º del día)
 Punción suprapúbica
 Por cateterismo
 Muestras de pacientes con sonda vesical.
 Orina por nefrostomía
C.- INDICACIONES Y MEDIDAS NECESARIAS PARA UNA BUENA TOMA DE MUESTRA PARA EL
CULTIVO QUE CORRRESPONDE.

TOMA DE MUESTRAS EN MUJERES:

o La muestra debe ser tomada preferentemente en el Laboratorio. Si ello no es posible, seguir las
mismas instrucciones en su casa.
o Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe tener a la mano lo
siguiente: a) jabón desinfectante; b) agua hervida o agua estéril; c) gasa estéril o un paño
acabado de lavar; y d) el recipiente para tomar la muestra (Urolab).
o Proceda primero a lavarse las manos y luego siéntese en el inodoro, lo más hacia atrás que
pueda. Separe los labios genitales con una mano y mantenga los pliegues separados y proceda a
asearse toda la zona genital con el jabón desinfectante. Enjuague con abundante agua estéril y
luego seque bien con gasa estéril o con un paño limpio.
o Proceda a recoger la orina, destapando previamente el frasco SÓLO EN EL MOMENTO
DE LA MICCIÓN y sin tocar con los dedos su interior, coloque la tapa con el lado plano hacia
abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa. Empiece a orinar en la poceta y recoja en
el frasco sólo la muestra del chorro del medio es decir, NO DEBE RECOGER NI LA
PRIMERA, NI LA ÚLTIMA PARTE DEL CHORRO DE ORINA.
o Tape muy bien el frasco y rotúlelo con su nombre. Tráigalo al Laboratorio lo más pronto
posible, en un recipiente con hielo, cuidando de que no se bote el contenido del Urolab.
TOMA DE MUESTRA EN HOMBRES:
o La muestra debe ser tomada preferentemente en el Laboratorio. Si ello no es posible, seguir las
mismas instrucciones en su casa.
o Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe tener a la mano lo siguiente:
a) jabón desinfectante; b) agua hervida o agua estéril a temperatura ambiente; c) gasa estéril o un
paño acabado de lavar; y d) el recipiente para tomar la muestra (Urolab).
o Lavarse con jabón desinfectante primero las manos y luego la cabeza del pene empezando por la
abertura uretral y continúe en dirección a usted, como muestra la ilustración, previa retracción del
prepucio, si no está circuncidado. Luego enjuagar bien con agua estéril o previamente hervida (a
temperatura ambiente) y secar con gasa estéril o con un paño recién lavado.
o Destape el Urolab sólo en el momento de la micción y sin tocar con los dedos su parte interna,
coloque la tapa con el lado plano hacia abajo. Comience a orinar en la poceta y recoja en el
frasco sólo la muestra del chorro del medio, es decir, NO DEBE RECOGER NI LA PRIMERA
NI LA ÚLTIMA PARTE DEL CHORRO DE ORINA.
o Tapar bien el frasco, rotularlo con su nombre y traerlo al laboratorio lo más pronto posible, en un
recipiente con hielo y cuidando de que no se bote.
Cantidad − Urocultivo habitual: recomendado 5-10 mL
D.- MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS PARA EL AISLAMIENTO BACTERIANO DE LA MUESTRA A
INVESTIGAR. TIPOS Y CLASIFICACION, CARACTERISTICA DE LAS COLONIAS EN ELLOS.
- AGAR SANGRE - AGAR MACCONKEY (CRECIMIENTO EN AMBAS)
Si creció en ambos medios se reconoce que es: Bacilos gram –
MCK: Lactosa +: Colonias Rosadas (Escherichia coli) Lactosa -: Colonias incoloras (Serratia spp.)
AS: Tipos de hemolisis: Beta hemolisis (Staphylococus spp, Estreptococo grupo B)
- AGAR SANGRE
Si solo crecio en AS se reconoce que es: Coco gram + (Redondas, elevadas, pigmentadas, olor rancio, levemente
convexas, bordes enteros, superficie lisa)
- AGAR MACCONKEY
Si solo creció en MCK , No se reporta, se solicita una nueva muestra
COLORACION GRAM:
AS: Staphylococus spp: Col. Esféricas, agrupadas, en forma de racismo de uvas, en pares o tétradas en ocasiones
E.- MEDIO DE TRANSPORTE SI FUESE NECESARIO.
1. En freezer por un período de 24 hs
2. A temperatura ambiente hasta 2 horas
3. En heladera (4ºC) hasta 24 horas.
Urocultivo habitual:
− Envase sin conservante (utilizado en el hospital): entrega inmediata
− Envase con conservante (utilizado en ámbito extrahospitalario):
• Temperatura: 2-8º C.
• Plazo de entrega en el laboratorio:
- Recomendado: ≤ 24 h.
- Límite: 48 h
-Punción suprapúbica: temperatura ambiente hasta 24 hrs
F.- BACTERIAS (CARACTERISTICAS GENERALES) QUE SE PUEDEN AISLAR DE ESAS MUESTRAS
INVESTIGADAS.
₪ Escherichia coli (90%)
₪ Klebsiella spp.
₪ Enterobacter spp.
₪ Serratia spp.
₪ Enterococus spp.
₪ Proteus spp.
₪ Pseudomonas spp.
₪ Acinetobacter spp.
₪ Candida spp
₪ Staphylococus spp.
₪ Estreptococo grupo B (imprescindible en embarazadas)
La infecciones mixtas causadas por 2 o mas bacterias no se dan po lo que se indica una contaminación, la presencia de
piuria (leucocitos en sedimento urinario) y la bacteriuria (presenica de bacterias en laorina) indican un posible diagnostico
de infección urinaria como también la degradación de nitratos a nitritos: Escherichia coli, Klebsiella spp, Proteus spp,
Pseudomonas spp.
G.- ANTIBIOGRAMA.
El tratamiento de las sepsis urinarias debe hacerse desde un inicio con los antibióticos y antisépticos urinarios de mayor
especificidad y eficacia posibles, sin embargo para ello es necesario disponer de un antibiograma que requiere un mínimo
de 72 a 96 horas para ser reportado por cualquier laboratorio. la sensibilidad de los distintos patógenos para las vías
urinarias varía, no sólo de una zona geográfica a otra, sino también entre las áreas de atracción de cada centro hospitalario;
debido a esto los estudios de sensibilidad realizados en un centro específico tienen poco valor para ser generalizados y por
ello cada hospital debe contar con su propio análisis de sensibilidad. Servirá para poder administrar durante las primeras
24 horas el medicamento estadísticamente más efectivo para cualquier tipo de piógeno y durante las 48 a 72 horas
siguientes basándose en la tinción de gram y de nuevo en las mejores combinaciones estadísticas en relación al piógeno y
al tipo de paciente infectado.

En el antibiograma, las placas de cultivo o placas de Petri se pueden confeccionar con unos aros embebidos en diferentes
antibióticos. Si el gérmen que crece por el resto de la placa no lo hace alrededor del aro con un determinado antibiótico, es
decir, se inhibe su crecimiento gracias a ese antibiótico, se forma un halo a su alrededor limpio de gérmenes. Este halo
será tanto más grande en diámetro cuanto más sensible sea el gérmen al antibiótico. Ello permite estudiar la sensibilidad
del microorganismo responsable de la infección a numerosos antibióticos en una sola prueba. Con los resultados el
laboratorio informa al médico sobre la sensibilidad o resistencia del gérmen a diferentes antibióticos y el médico elige
aquel que cree más apropiado para tratar la infección teniendo en cuenta las características del paciente.
H.- MARCHA BACTERIOLOGICA
 J.- MOTIVOS DE RECHAZO DE MUESTRA
 Muestras de pacientes que no siguieron las instrucciones
 Muestras conservadas a temperatura ambiente por más de 2 horas
 Recipiente derramado o no rotulado
 Orinas de 24 horas.
K.- CONTROL DE CALIDAD
ETAPA PRE-ANALÍTICA
Antes de iniciar el estudio de la muestra, el microbiólogo debe conocer algunos datos concernientes al paciente: edad,
género, factores predisponentes, síntomas, antecedentes de ITU, tratamiento actual o previo con antibióticos. El paciente
no debe haber recibido terapia antimicrobiana durante los tres días anteriores a la recolección, excepto en los casos de
control de tratamiento y pacientes gravemente enfermos.
ETAPA ANALÍTICA
Procesamiento de la muestra: antes de iniciar el estudio de la muestra, el microbiólogo debe conocer algunos datos
concernientes a la misma.
Muestra: tipo de recolección: chorro medio, punción suprapúbica, sonda (punción, sonda nueva). Conservación.
Preparación del frotis:
Se toma una gota (con pipeta Pasteur) o una asada de orina, se coloca sobre una lámina portaobjeto y se deja secar sin
extender, luego se fija y se colorea con la técnica de Gram. Cuando se sospecha de tuberculosis renal, la orina se
centrifuga y se toma una gota del sedimento, se coloca sobre una lámina portaobjeto, se deja secar sin extender, se fija y
se colorea con la técnica de Zielh Neelsen, para la búsqueda de bacilos ácidos resistentes.
Cultivo y recuento de colonias:
Permite diferenciar la verdadera bacteriuria de una contaminación.
• Método del asa calibrada: Es un método práctico, sencillo y económico, que consiste en sembrar la orina sin centrifugar
con un asa calibrada a 0.001 ml (3mm de diámetro) o 0,01 ml (4mm de diámetro).
PROCEDIMIENTO
1. Mezclar cuidadosamente la orina restante.
2. Insertar el asa estérilisada verticalmente en la muestra y luego diseminarla en las placas AS o MCK realizando una
siembre masiva, Realizar en ambos medios de cultivo realizando la estria en forma de zing zang
3. Incubar las placas durante 18–24 horas a 37 ºC en aerobiosis y el AS en microaerofilia y en anaerobiosis si la muestra
así lo exigiera. En caso de tener cultivos negativos a las 24 horas, se deben incubar 24–48 horas más
Análisis cualitativo
La identificación de los agentes se hace mediante el estudio de las características microscópicas de las colonias y la
utilización de los sustratos del medio, ejemplo: lactosa, hemólisis y la identificación final a través de pruebas fisiológicas
diferenciales, como la prueba de la oxidasa, acción sobre azúcares.
Análisis cuantitativo
Contar el número de colonias y multiplicar por el factor 1000 o 100, de acuerdo a la capacidad del asa utilizada, para
determinar las unidades formadoras de colonia por mililitro de orina (UFC/ml).
Pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos
Generalmente se usa el método de Kirby Bauer, tomando en cuenta para la elección de los antibióticos el agente aislado y
aquellos que más se utilizan en el tratamiento de las ITU
INTERPRETACION:
1. Si no observa ningún crecimiento a las 24 horas de incubación reportar: No hubo crecimiento bacteriano a las 24
horas de incubación
2. Si observa crecimiento a las 24 horas de incubación reportar: Se aísla “genero” + “especie” de la bacteria +
recuento de colonias + antibiograma
CRITERIO KASS
UF/ML
0 – 10,000 No hubo crecimiento bacteriano durante las 24 hr de incubación
10,000 – 50,000 Se recomienda nueva muestra
50,00 – 100,000 Se aísla___________ + Especie______________ + Recuento +Antibiograma
+ 100,0000 Se aísla___________ + Especie______________ + Recuento +Antibiograma

POST-ANALÍTICA
Informe de resultados
 Datos personales del paciente: Nombre y apellidos, cédula de identidad. Nombre del médico tratante
 Fecha de recepción de la muestra y emisión del reporte.
 Tipo de muestra: Orina (especificar método de recolección)
 Examen realizado: Urocultivo o cultivo y antibiograma
 Resultados del examen directo: fresco o frotis
 Agente microbiano aislado (género y especie) y recuento de colonias: