Material de Cultivo Celular

Las condiciones de cultivo varian ampliamente según el tipo de célula utilizada,

pero el ambiente artificial donde las células se cutivan consiste invariablemente
de: un contenedor apropiado con un sustrato o medio que provea los
nutrientes esenciales (aminoácidos, carbohidratos, vitaminas, minerales),
factores de crecimiento, hormonas y gases. La mayoría de las células son
adherentes y deben ser cultivadas adheridas a un sustrato sólido o semisólido,
mientras que otras pueden crecer flotando en medio de cultivo (en suspención).

Victoria Alonso
valonso@fbioyf.unr.edu.ar
Material de Vidrio  

Empleado usualmente como sustrato de cultivo tiene como ventajas su escaso

costo y su facilidad de limpieza y esterilización. Asimismo es especialmente útil
para su posterior observación al microscopio por su calidad óptica. Actualmente
se utiliza material de plástico descartable para este fin.

Prácticamente todos los Medios se preparan y esterilizan para su

almacenamiento en botellas de vidrio.

También se utilizan diferentes tipos de pipetas de cristal, probetas, vasos y

matraces para el trabajo rutinario del Laboratorio.
Plástico descartable

Tissue Culture
CELLSTAR® Cell Culture Products

1 Cell/
•  Estéril por irradiación.
Cell Culture
•  El plástico más empleado es el poli-estireno, Products
de buena calidad óptica. Debido a

Microplates
2 HTS-
que este plástico es hidrofóbico requiere un tratamiento
CELLSTAR ® con irradiación-gamma
Standard Cell Culture Flasks
o mediante descargas eléctricas que produzca una
For cell culture, superficie
Greiner hidrofílica.
Bio-One offers standard and filter The s

3 Immunology/
cap cell culture flasks with growth areas of 25 cm2, 75 cm2 to eff
•  El tratamiento es característico de los diferentes proveedores, y por ello los
and 175 cm2. Suspension culture flasks complete the range provid
in the sizes of 50 ml, 250 ml, 550 ml and 650 ml. desig
productos varían en calidad de uno a otro.

HLA
All Greiner Bio-One cell culture flasks are made of high-grade mediu
polystyrene. For adherent cell culture, the surfaces of our conta
•  Otros plásticos que se emplean son polivinilo-cloruro, policarbonato (PVC), poli
standard and filter cap cell culture flasks are physically ensur

4 Microbiology/
surface-treated to improve cell adhesion and proliferation. Both

Bacteriology
tetrafluoretileno (teflón, PTFE), etc.

Purpose Beakers
661 160
5 Tubes/Multi- 660 160
Sta
• Imp
658 170
thro
trea

• Ce
sta
Handling
6 Liquid

(wit

• Ca

• Gra
7 Molecular

690 160
Biology

690 170

Stand
n
Material de Plástico: Contenedores y superficies  

Se debe seleccionar según los requerimientos de:

Como elegir el adecuado??

•  Características de las células:
o  Anclaje dependiente
o  Anclaje independiente
o  Ambas

•  Sistema de cultivo
o  Monocapa estacionaria è Flasks, placas
o  Monocapa en movimiento è Botellas roller
o  Suspensión estacionaria è Flasks o placas
o  Suspensión en movimiento è Spinner flasks o bioreactores

•  Tamaño del cultivo:

o  0,5-1 x 106 células confluentes/cm2
o  1-2 x 106 células/ ml de cultivo (en agitación)
 neck rectangular (also hexagonal) glass T-flasks in the 1940s. Today, plastic flasks are available with a range
Botellas o flasks
of growing areas, a variety of shapes, with several different neck designs. Choice of design depends on the
cell culture techniques used as well as personal preference. The more common sizes are listed below.
sigma.qxd 5/17/2005 2:27 PM Page 2
Tamaños   Description Growth area (cm²) Recommended working Cell yield*
volume (mL)
T-25 25 5 to 10 2.5 × 106
T-75 75 15 to 25 7.5 × 106
LT U R E T-150 150 30 to 50 15.0 × 106
T-175 175 35 to 60 17.5 × 106
T-225 225 45 to 75 22.5 × 106
*Cell line dependent. Based upon a density of 1 × 105 cells/cm².
Flask Shapes
Cell culture
Formas   dishesa flask shape is usually a matter of personal preference:
Choosing
Cell culture dishes offer the best economy and access to the growth surface.
This makes them the vessels of choice for cloning or other manipulations such
as scraping that require direct access to the cell monolayer. They must be used
with incubators that control CO2 and humidity. Most manufacturers offer
dishes in four diameters: 35 mm, 60 mm, 100 mm, and 150 mm. These are
nominal diameters and may not be the actual diameter of the growth surface.
Cell culture dishes are available with either specially treated surfaces for
growing anchorage-dependent cells, or untreated (native) surfaces for
growing suspension cultures where attachment is not desired.

Description
Triangular and modified Growth area (cm²)
Rectangular flasks haveWorking
a volume (mL)neck and Cell yield*RoboFlask vessels are
Angled
Triangular: buen acceso
triangular 35
de la pipeta
flasks offer rampyfromscraper
8 the bottom a lostoángulos. Su base
the 1 to 2traditional ancha
straight 0.8 ×provee mayor
106robotics-compatible c
estabilidad. good pipette60 and cell canted 21neck for easier pour- 4 to 5neck flasks utilize the 2.1 × 106culture flasks offering
Rectangular:scraper
pueden accesstener
100 to the una rampa desde el fondo del
ing and55pipette access. Most 10 to 12 cuello angular para
entire bottom area5.5 × 106facilitar
92.6 cmel
2
cell growth
volcado y el acceso
corners. Thea pipetas.
150 wider baseOtra alternativa
canted neck flasks
148 sonalsolas
have tradicionales con cuello
for cell growth.
28 to 32 14.8 ×angular
Their 106surface o
area. The flas
recto las cuales permiten
provides
*Cell que se upon
added stability.
line dependent. Based utilice toda
an antitip ofel1to×área
skirt
a density para el crecimiento
enhance
105 cells/cm². design saves oncelular.
space Su arediseño
designed for use
ahorra espacio y reduce el contacto del medio con el cuello yand
stability. la reduces
tapa. medium automated cell cultur
sloshing into the neck. systems utilizing a
 recommended for use in all CO2 incubators, especially for
long-term use. The vent cap was a Corning innovation that
Forma de las botellas de cultivo
first appeared in 1988.

Cuellos
Flask2:26
5/17/2005 NeckPM Styles
Page 1

Straight neck flasks are ideal for larger medium volumes

Cuello   recto:  ideal  para  volúmenes  grandes  de  medio  ya  que  disminuye  
since this design reduces medium sloshing into the cap.
el  contacto  del  medio  con  la  tapa.  
 Canted neck flasks allow easier pouring and improved access
e Flasks Cuello  inclinado:  permite  volcar  el  contenido  de  la  botella  y  hace  más  
to the flask for pipetting or scraping. The canted neck
design waseal  p
sencillo   Corning innovation
ipeteo   oof  ssizes, that first
craping.    and appeared
Corning and Costar flasks
®
in 1974.
® are available in a variety designs cap
 
styles to meet your needs.

 Angled
◗ Manufactured from optically clear virgin polystyrene

◗ Treated for optimal cell neck improves pipette access and reduces medium
attachment
Cuello  angular:  mejora  el  acceso  de  la  pipeta  y  reduce  el  contacto  del  
sloshing
◗ Printed with lot numbers for easeinto the neck. This patented design was a Corning
in traceability
medio  con  la  tapa.  
◗ 100% integrity tested innovation that first appeared in 1988.

◗ Sterilized by gamma irradiation

Tapas
Certified nonpyrogenic
◗

Flask Cap Styles

Tapas   selladas:   para   usar   en   sistemas   cerrados,   no   permiten   el   paso   de  
Plug seal caps feature one-piece linerless construction and
líquidos  ni  gases.  
are designed for use in closed systems, providing a liquid-
 
and gas-tight seal. When loosened, this cap can also be
used in open systems. This cap design was a Corning inno-
Tapas   2po   fenólico:   cuando   se   dejan   flojas   permiten   el   intercambio   de  
vation that first appeared in 1974.

gases.  
Phenolic styleScaps
e  uare
san   en  sistemas  
designed abiertos  
(when loosened) que  requieren  la  entrada  de  gases.    
for use in
open systems requiring gas exchange. With the caps slightly
 
loosened, gas is exchanged between the environments
inside and outside of the flask.
Tapas   ven2ladas:   con?enen   una   membrana   impermeable   de   0.2   µm  
sellada   en   la   tapa   que   provee   un   intercambio   gaseoso   consistente   pero  
Vent caps contain a 0.2 µm nonwettable membrane sealed
to the cap, providing consistent, sterile gas exchange while
minimizando  
minimizing los   riesgos  
the risk of contamination. These de  
capscontaminación.  
are highly Son   recomendadas   para   usar  
recommended for use in all CO incubators, especially for
en  incubadores  
long-term use. The vent capdwas
2
e  CaOCorning
2,  especialmente  
innovation that para  uso  prolongado.  
first appeared in 1988. 1

Flask Neck Styles

Straight neck flasks are ideal for larger medium volumes
 with incubators that control CO2 and humidity. Most manufacturers offer
dishes in four diameters: 35 mm, 60 mm, 100 mm, and 150 mm. These are
Placas ® Cell Culture Dishes
CELLSTAR nominal diameters and may not be the actual diameter of the growth surface.
Cell culture dishes are available with either specially treated surfaces for
growing anchorage-dependent cells, or untreated (native) surfaces for
Cell suspension
growing Culture cultures
Disheswhere attachment is not desired.
628 160
• Improved Description
cell adhesion • 8.7 Growth
to 143 cm2
area (cm²) Working volume (mL) Cell yield*
639 160 through physical surface growth areas
treatment 35 8 1 to 2 0.8 × 106
• Easy stacking
60 21 4 to 5 2.1 × 106
• Vents ensure optimal
gas exchange 100 55
• Maximal transparency 10 to 12 5.5 × 106
664 160 for excellent microscopic
150
• Sterile and user-friendly analysis
148 28 to 32 14.8 × 106
627 160 *Cell line dependent. Based upon a density of 1 × 105 cells/cm².
packaging
• New: 35 ø dish also
• Available in the sizes available with 4 internal
35, 60, 94, 100 and
page 21 wells www.atcc.org Email tech@atcc
145 mm ø

Like all Geiner Bio-One products, cell culture dishes are For exact dimensions of our cell culture dishes, please refer to the Culture Vessels and Surfa
manufactured according to our high quality standards. Dishes are product data sheets on our website.

Tissue Culture
Multiwell plates
available in a wide variety of different dimensions and growth areas.
In the case of 58 cm2 and 143 cm2 dishes, an extra high profile CELLSTAR® Cell Culture Products
with a height of 20 mm is available. These widely used vessels were originally designed for virus titration, but have since become popu

Placas con pocillos o multiwell
CELLSTAR® Cell Culture Multiwell
1 Cell/
many other applications, especially hybridoma production, high-throughput screening, and tox
testing. Multiwell plates offer significant savings in space, media, and reagents when compared to an e
Plates
number of dishes. They are more convenient to handle, especially if the pipettors, plate washers, rea

Microplates
and other equipment for processing these plates are used. They must be used with incubators that co

2 HTS-
662 102 humidity and CO2 levels.
Cell Culture Multiwell Plates
662 160
Cat.-No. 6, 627
12,160 627 170
24,Description
48 Well Format 628 160 632 171
Growth well (cm²) Working volume/ well (mL) Cell yield*

3 Immunology/
ø [mm] x height [mm] 35 x 10 35 x 10
96-well 60 x 15 0.32 94 x 16 0.1 to 0.2 0.32 × 105
Cell Culture Inserts p. 1 I 40 ff.
Growth area [cm2] 8.7 48-well
0.93/well 21 1.00 58 0.3 to 0.6 0.8 × 105
24-well 1.88 0.5 to 1.2 1.9 × 105

HLA
Total volume [ml] 665 102 10 10 28 80
665 180 12-well 3.83 1.0 to 2.4 3.8 × 105
Working volume [ml] 5 0.1/well 6–7 15 – 16

4 Microbiology/
657 160 6-well 9.40 2.0 to 3.0 9.5 × 105

Bacteriology
657 185 Cell culture multiwell plates are available in the following versions:
Vents + *Cell line dependent.
+ Based upon a density of 1 × 105 cells/cm².
+ -
• With hydrophilic surface • With hydrophobic surface
TC surface treatment + surface treatment)
(TC + for for+ suspension cultures
+
677 102 Roller bottles
improved cell adhesion and hybridoma cells
Sterile 677 180 + + + +

Purpose Beakers
The roller bottle was developed for cultivating large numbers of anchorage-dependent cells.²0 Today

5 Tubes/Multi-
Quantity per bag/case 10/740
provide 10/740
a more economical 10/600
means 10/480 large volumes of cells using essentially the same cu
for cultivating
Properties • Compatible with common instruments and automated systems.
techniques as with flasks
New but
For further information please
with considerably less labor. Besides the traditional smooth wall design,
visit our website.
• High clarity and low autofluorescence bottles are available with small ridges that approximately double the surface area available for gro
• Easy-to-open packaging
 in a wide range of sizes including
many other applications, especially hybridoma production, high-throughput screening, and toxicity ◗
the 250 mL and 1L shown here.
esting. Multiwell plates offer significant savings in space, media, and reagents when compared to an equal
numberBotellasof dishes.
"roller bottles".
roller
Se trata deThey
tubos, are more
con una cara convenient
plana sobre la queto
se handle, especially
fija el cultivo, if the
y que se incuban pipettors,
en los
Spining flask
incubadoresplate washers, readers,
◗
and other
dotados equipment
de "roller". for processing
Existen variantes
producción de gran número de células.
these plates
con una gran superficie are(espirales
de adhesión used. de They musty que
plástico...) be seused with
destinan a laincubators that control
◗
humidity and CO2 levels.

Description Growth well (cm²) Working volume/ well (mL) Cell yield* ◗
96-well 0.32 0.1 to 0.2 0.32 × 105
48-well 1.00 0.3 to 0.6 0.8 × 105 D
24-well 1.88 0.5 to 1.2 1.9 × 105 ◗
12-well 3.83 1.0 to 2.4 3.8 × 105
◗
6-well 9.40 2.0 to 3.0 9.5 × 105
*Cell line dependent. Based upon a density of 1 × 105 cells/cm². ◗
◗
Roller bottles
The roller bottle was developed for cultivating large numbers of anchorage-dependent cells.²0 Today they Ta
provide a more economical means for cultivating large volumes of cells using essentially the same culture
echniques as with flasks
Incubador but with considerably less labor. Besides
tipo “roller” the traditional smooth
“Roller bottles” Figure 11. Ready-to-use
wall design, roller disposable C
bottles are available
a fase gaseosa. withmássmall
Los componentes ridges
significativos de lathat approximately
fase gaseosa son el oxígeno ydouble the
el dióxido de surface area available
carbono: Corning forspinner
growingvessels avoid the 1
cells without
Oxígeno. increasing
Las necesidades thepara
de oxígeno dimensions
la mayor parteof de the bottles.
los cultivos celulares es cubierta con la tensión atmosférica, cleaning and sterilizing problems
2
aunque existen cultivos, especialmente los cultivos de órganos que requieren una tensión de oxígeno superior (del 95%)
posiblemente debido a la geometría del órgano y a las dificultades de difusión del gas en su interior. Se ha propuesto
common with reusable glass
(McKeehan y col.,Description
1976) que los requerimientosGrowth
de selenioarea
en el (cm²)
medio podrían serWorking
debidos avolume (mL)
su papel en la detoxificación Cellspinner
yield* flasks. 5
de radicales de oxígeno, especialmente en los medios sin proteínas séricas.
Small 490 100 to 150 4.9 × 107 1
Dióxido de carbono. El dióxido de carbono juega un complejo papel en el medio debido a que influye la cantidad de CO2
disuelto, el pH y la Standard
cantidad de iones HCO3-. Las reacciones850
que tienen lugar en el medio 170
son: to 250 8.5 × 107
3
Pharmaceutical 1750
⎯⎯→ ⎯⎯→
340 to 500 17.5 × 107
H2O + CO2 ←⎯⎯ H2CO3 ←⎯⎯ H+ + HCO3−
*Cell line dependent. Based upon a density of 1 × 105 cells/cm².
[1] 6
⎯⎯→
1
NaHCO3 Na+ + HCO3− [2]
Surface Coatings and Feeder Cells
←⎯⎯
3
El incremento de la concentración de ión bicarbonato desplaza la ecuación [1] hacia la izquierda, de modo que el pH se
establezca en 7,4. Se puede emplear asimismo otra base, por ejemplo NaOH, siendo la ecuación: *A
Most tissue culture work uses disposable polystyrene †O
vessels. The vessel surface NaOH + H2COis 3 ←
treated
⎯ ⎯→ to render
⎯⎯→ it+
⎯⎯ NaHCO3 + H2O ←⎯⎯ Na + HCO3 + H2O
−
[3]
hydrophilic (wettable). Most cell lines in the ATCC
6
collection are cultivated on treated plastic surfaces in
De modo que para establecer un pH determinado se debe tener en cuenta especialmente los niveles de bicarbonato sódico
y la tensión de CO . Cada medio tiene una concentración recomendada de bicarbonato y tensión de CO para alcanzar el pH
2 2
correcto. Sin embargo, se emplean otras sustancias tamponadoras en la formulación de muchos medios en la actualidad, lo
 Color-coded magnifier stripes make volume reading e

Negative graduations allow additional working volum

- Bulk packed for large-scale sterile and nonsterile li

Bidirectional graduations provide choice of ascending
Corning offers three styles of cryogenic vials as well as storage racks and boxes.
Crioviales

Grads. (mL)
Negative

10.0
10.0
N/A
0.2
0.2

2.5
3.0
3.0

0.2

2.5
0.2

0.2
Exclusive antidrip tip assures accurate delivery

Individually Wrapped, Paper/Plastic Wrap

External Thread Cryogenic Vial Internal Thread Cryogenic Vial External Thread

Stripette Pipets Ordering Information

Plug Seal Cap

- Individually wrapped, paper/plastic

www.cultek.com

Available in 25, 50, and 100 mL sizes

Color-coded polypropylene cap ◗ Color-coded polypropylene cap

- Individually wrapped, clear plastic

Individually Wrapped, Clear Plastic Wrap

◗
inserts simplify vial identification. inserts simplify vial identification. Sure-grip plug seal

Graduations
◗
Available in variety packs of white, Available in variety packs of white, screw cap

1/100
1/100

1/100
1/100

1/100
1/10
1/10
1/10
2/10

1/10
(mL)
Stripette® Serological Pipets

1/2
blue, green, red, and yellow. blue, green, red, and yellow.

1
◗ Inner cap ring
Silicone washer provides a secure Silicone washers or rubber assures a tight

Three packaging options:

◗ ◗
seal. O-rings provide a secure seal. seal.
Page 23

n de células en placa
◗ Easy-to-read black graduations for Easy-to-read black graduations ◗

Capacity
partial volumes en las que es necesario separar las for partial volumes

(mL)

100
lar representan dos aplicaciones células entre sí y

10
10
25
50
1
1

5
2

2
d celular. Para conseguirlo es necesario romper la
◗ Self-standing base, self-locking skirtmalla de proteínas que forman la self-locking skirt
◗ Self-standing base,
2:29 PM

idas mediante procesos que separen las moléculas proteicas de la matriz extracelular
que permiten la unión), o bien rompiendo proteolíticamente (mediante la acción de

CLS4492*
CLS4011
CLS4012

CLS4051
CLS4101

CLS4251
CLS4501
CLS4484

CLS4485

CLS4487
CLS4021

CLS4486
Cat. No.
Warning! Do not use cryogenic vials for storage in the liquid phase of liquid nitrogen. Only store vials in the vapor phase above
pueden clasificar en tres categorías:
the liquified gas. Always use appropriate safety equipment when removing vials from cryogenic storage.
5/17/2005

Scrapers y pipetas
cribar, rascar, etc...). En cultivos celulares se emplean con frecuencia los métodos de
◗
◗
◗
◗
◗
◗
arrancar las células adheridas.

External Thread Cryogenic Vials

Manufactured from polypropylene to withstand temperatures down to -196°C
2 Cell Culture PSG_sigma.qxd

Stripette Serological Pipets

Three packaging options

C E L L C U LT U R E

◗ Larger marking spot

◗ Black graduations
Pipets

◗ Certified RNase-/DNase-free
◗ Vials have a silicone washer for a secure seal.
◗ Vials
a adición may been color
de soluciones las que coded with
no hay iones inserts
divalentes (Cat.
o bien No. 430499)
de agentes quelantes
educe la concentración de los iones que estabilizan las uniones de las proteínas de la
◗ Self-standing
eceptores celulares. vials have a special base design allowing them to be locked into cryogenic rack
 Esterilización de material

La necesidad de asepsia para el cultivo celular se extiende no sólo al lugar en que

se realiza el trabajo sino muy especialmente a los recipientes en que se realiza el
cultivo, a los medios líquidos o sólidos, y a los instrumentos que puedan
entrar en contacto con éste en algún momento de su manipulación (pipetas,
puntas de pipeta automática, pinzas, tubos, material variado de vidrio...). Para
esterilizar todo este material, de variada naturaleza se emplean una serie de
métodos: irradiación con radiación gamma o rayos X, esterilización por gas,
autoclavado, filtración,... En el laboratorio general de cultivo de tejidos se suele
disponer de: equipo de filtración y autoclave.  
La esterilización por gas, y la irradiación son técnicas propias de grandes
instalaciones, por ejemplo hospitalarias o industriales  
 Equipos de filtración. En la actualidad se dispone de unidades de filtración estéril muy recomendables para el trabajo
rutinario. Sin embargo, su elevado coste por unidad hace que en muchos casos aún se empleen unidades reutilizables.
Estos equipos de filtración constan o bien de una fuente de vacío conectada a un kitasato dotado de una unidad de
filtración esterilizada por autoclavado, o bien de una bomba peristáltica que fuerza el flujo de solución a través de una
unidad de filtración hermética. En ambos casos la esterilización se produce al atravesar la solución un filtro de poro 0.22
μm.
Equipos de filtración. En la actualidad se dispone de
unidades de filtración estéril muy recomendables para el
trabajo rutinario. Sin embargo, su elevado costo por
unidad hace que en muchos casos aún se empleen
unidades reutilizables. Estos equipos de filtración
constan o bien de una fuente de vacío conectada a un
kitasato dotado de una unidad de filtración esterilizada
por autoclavado, o bien de una bomba peristáltica que
fuerza el flujo de solución a través de una unidad de
filtración hermética. En ambos casos la esterilización se
produce al atravesar
Autoclave.laUnsolución
autoclave es unun filtro que
instrumento depermite
poro 0.22 por calor tanto de sólidos como de líquidos. La
la esterilización
esterilización se realiza habitualmente a 121ºC, 1 atmósfera de sobrepresión durante un tiempo superior a 20 min. Un
µm. autoclave de uso normal en el laboratorio de cultivo de tejidos suele disponer de temporizador y regulador de presión, y en
algunos casos de un ciclo de secado para permitir secar el material sólido (material de vidrio, instrumentos quirúrgicos,
tubos,...).
Autoclave. Un autoclave es un instrumento que permite la esterilización por calor
tanto de sólidos como de líquidos. La esterilización se realiza habitualmente a
121ºC, 1 atmósfera de sobrepresión durante un tiempo superior a 20 min. Un
autoclave de uso normal en el laboratorio de cultivo de tejidos suele disponer de
temporizador y regulador de presión, y en algunos casos de un ciclo de secado
para permitir secar el material sólido (material de vidrio, instrumentos quirúrgicos,
tubos,...).
NORMAS PARA ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE

• Las dimensiones de un paquete deben ser como máximo de 30X30X50

cm. Y su peso no superior a 5 kg.

• No deben ser hechos en forma muy compacta, es decir apretada para

que pueda penetrar y vapor con facilidad.
.
• Se deben colocar controles de esterilización en el centro y exterior de
cada paquete a esterilizar.

• Colocar los paquetes en posición vertical.

• Dejar espacios entre los paquetes.

• Colocar los materiales sin tocar el fondo del autoclave y que descansen
en una rejilla en posición vertical.
• No debe sobrecargarse el autoclave, evitar que la carga quede en contacto
con las paredes o con la puerta.

• Los frascos o botellas, se deben colocar abiertos en posición para permitir la

salida del aire.

• Esterilizar cada tipo de material por separado. Materiales porosos con

porosos y no porosos con no porosos.

• Cronometrar el ciclo, sólo después que el termómetro de la cámara cargada,

marque la temperatura deseada ( 121 C) previa verificación de la presión.

• Al abrir el autoclave conviene dejarlo 5 minutos hasta que escapen los

vapores

• Controlar periódicamente con cultivos especiales de esporas

• Después de cada reparación se debe controlar con cultivos bacteriológicos.

DURACIÓN ENVOLTURA ESTANTE CERRADO

Papel kraft envoltura única 3 semanas

Polietileno 9 meses

Empaques plásticos y sellados 1 año

al calor
 Técnicas de manipulación estéril

La característica principal que define al laboratorio de cultivo celular es el

mantenimiento de la asepsia. La tasa de crecimiento de las células en
cultivo es muy inferior al de los contaminantes habituales: hongos,
levaduras, bacterias y micoplasmas, y por ello para el mantenimiento del
cultivo será vital evitar la aparición en éste de cualquier
microorganismo indeseado.
Diagrama de la sala de cultivo
CHAPTER 4 LABORATORY DESIGN AND LAYOUT 45

Regular incubator Air intake or location of Laminar-flow hood

air conditioner (class II biological
Humid CO2 incubator safety cabinet) with
total extract

CO2 supply Service cart

Inverted
microscope
Refrigerator
Storage rack
Cell
Freezer counter Centrifuge

Water Prep
Bench with shelf over purifier bench

Sterilizing oven
Water
Sink bath
Liquid CO2 cylinders
with automatic Autoclave
changeover Deionised
water supply Air extract

Main entry: double

Two-tiered high- &
asymmetric doors
low-temperature
drying oven
1m
Soaking sinks Washing sinks

Fig. 4.1. Small Tissue Culture Laboratory. Suggested layout for simple, self-contained tissue culture
laboratory for use by two or three persons. Dark-shaded areas represent movable equipment,
lighter-shaded areas fixed or movable furniture. Scale 1:100.
CULTURE OF ANIMAL CELLS

Bench-top Sterilizing and Laminar-flow (biohazard) cabinets with total extract

autoclave drying oven

Service
PREPARATION cart MICROSCOPE
Water AREA Reagent shelving ROOM
purifier (sterile fluids)

Inverted Cell
microscope counter
Washup Air intake or
sinks Liquid location of air Two-tier
Storage nitrogen conditioner at incubator
rack storage high level
Water
Wash- Liquid CO2 Sink bath
up cart cylinders with
automatic Refrigerator
changeover Freezer
Storage CO2
rack incubators 37oC
ROOM
Washup cart Sink Centrifuge
Refrigerator
Freezer CO2
Supply

Soaking Collection Cryo- CO2 Supply

1m
bath tray Air extract freezer
Main entry: double (below)
asymmetric doors

Fig. 4.3. Tissue Culture Lab with Adjacent Prep Room. Medium-sized tissue culture lab (see Fig. 4.2),
but with attached preparation area, microscope room. and 37◦ C room. Scale 1:100.

Air inlet (extracts via hoods)

Área de trabajo dentro de la cabina de bioseguridad