Preparación de muestra para determinar el porcentaje de cafeína en bebidas

energizantes Vive100, RedBull, Monster.

Laboratorio de química analítica II – Universidad de los Andes.

Materiales:
- Sonicador
- Plancha de Calentamiento
- Pipetas 10 mL (2)
- Probeta de 25 mL (2)
- Erlenmeyer de 10 (3), 25, 50 (2) y 100mL.
- Matraces aforados de 25mL (5) y 250 mL
- Embudo con caña (1)
- Micropipeta 1 mL (3)
- Balón de decantación (3)
- Cartuchos C18 para micro extracción en fase solida (9)
Reactivos:
- Cafeína (2 g)
- Agua destilada y agua tipo 1
- DCM 250mL o Cloroformo 250 mL (El cloroformo es más afín a la cafeína)
- Sulfato de sodio anhidro (10 g)

*Se indica su preparación en el procedimiento.

Diagrama de flujo:
1. Preparación de la muestra y medición.

Mida 20 mL de cada
bebido energética y
transfiéralos a un
vaso de precipitado
de 50 mL
Caliente o Sonique el vaso de
precipitado durante
aproximadamente 30 min con el
fin de liberar todo el CO2 de las
muestras.
Tomar una alícuota de 1:10 y realizar
una extracción liquido-liquido
haciendo uso de DMC.
 Opcional: Una vez generadas las dos
fases, agregar 0,5 g de Sulfato de
sodio anhidro (eliminar toda el agua y
las sales solubles en agua que se
mantienen en el disolvente orgánico)
Una vez separadas las dos fases se
realiza una filtración para eliminar
cualquier residuo.

Opcional: Ya teniendo el filtrado, se

Pre – concentrar de ser necesario y realiza una micro extracción en fase
tomar la medida una vez sea realizado solida utilizando cartuchos C18
la curva de calibración.
Fase móvil: 60-40 Metanol-Agua

2. Solución estándar de cafeína – Solución madre:

Obtención de una solución de 250 mg/L. Se

debe pesar 0,25 g de Cafeína y se debe llevar a
un volumen de 0,25 L mediante la adicionó
agua tipo 1 de calidad analítica.

3. Preparación de patrones de calibración de cafeína.

Se debe preparar patrones con 5 niveles de concentración

conocida de cafeína, de volumen final igual a 25 mL,
partiendo de la solución estándar de cafeína descripta en el V de S. Madre Concentración
inciso 2. (L) (mg/L)
0,001 10
0,002 20
0,003 30
Tomar volúmenes de la solución madre y disolver en …. 0,004 40
Hasta completar el volumen (25 mL) 0,005 50

Ver Volumen de la solución en la tabla del apartado 3.

4. Tomar las medidas de Fluorescencia en primera instancia de la curva de calibración y posteriormente

del analito en cuestión.