Transcrição em Eucariontes

Nos eucariontes, o RNA é produzido no núcleo, e os RNA que codificam proteínas devem ser transportados para o

citoplasma para tradução dos ribossomos.

A maioria dos procariontes possui uma única RNA polimerase para transcrição de todos os tipos de RNA, já os

eucariontes possuem três RNA polimerase.

Cada RNA polimerase é responsável pela transcrição de uma classe específica de genes.

Os transcritos primários dos genes que codificam proteínas sofrem modificações antes de serem

transportados para o citoplasma: são adicionados revestimentos (caps) de7’metil guanosina às pontas 5’dos

transcritos primários; caudas poli (A) são adicionada às pontas 3’ dos transcritos; seqüências íntrons são

removidas.

Três RNA Polimerases / Três conjuntos de genes:

Todas as três enzimas eucarióticas, designadas RNA polimerases I, II, III, são mais complexas que a RNA

polimerase de procariontes (E. coli), pois as RNA polimerases eucarióticas requerem a assistência de outras

proteínas chamadas fatores de transcriçãopara iniciar a síntese de cadeias de RNA.

A RNA polimerase I está no nucléolo (região onde o RNAr é produzido e combinado a proteínas ribossomais),

e ela catalisa a síntese dos RNA ribossomais; a RNA polimerase IItranscreve genes nucleares que codificam

proteínas; a RNA polimerase III catalisa a síntese de moléculas de RNAt, e também de pequenos RNA nucleares.

Início das cadeias de RNA: Todas as RNA polimerases eucarióticas requerem a ajuda de fatores protéicos

de transcrição para começar a síntese de uma cadeia de RNA. Esses fatores de transcrição devem se ligar a

uma região promotora no DNA e formar um complexo de iniciação apropriado antes que a RNA polimerase se

ligue e inicie a transcrição. O início da transcrição envolve a formação de um segmento localmente desenrolado

de DNA, dando um filamento de DNA que está livre para funcionar como molde para a síntese de um filamento

complementar de RNA.

A formação do segmento localmente desenrolado de DNA para iniciar a transcrição envolve a interação de

vários fatores de transcrição com sequências específicas no promotor para a unidade de transcrição

Promotores reconhecidos pela RNA polimerase II: elementos curtos conservados situados antes do local da

transcrição.
 TATA box: é o primeiro elemento conservado mais próximo do sítio de transcrição. Sua sequência é TATAAAA

na posição – 30. Seu papel é importante no posicionamento do ponto de início da transcrição.

CAAT box: é o segundo elemento conservado. Sua sequência é GGCCAATCT na posição –80.

Cada Fator de transcrição que ajuda a RNA polimerase II para o início da transcrição é chamado TFIIX (X

é a letra que identifica o fator individual):

TFIID – é o primeiro a interagir com o promotor – sua proteína de ligação é a TATA (TBP);

TFIIA e TFIIB; TFIIF se liga à RNA polimerase II e depois ao complexo de iniciação

– e promove desenrolamento do DNA;

TFIIE se junta ao complexo de iniciação ligando-se ao DNA e em seguida ao ponto de iniciação da

transcrição;

TFIIH e TFIIJ se juntam ao complexo após TFIIE.

Alongamento da cadeia de RNA e a Adição de revestimentos de 5’ metil guanosina: O alongamento da cadeia

ocorre pelo mesmo mecanismo das células procariontes. No início do alongamento da cadeia ocorre a adição da 7-

metil guanosina (7-MG): adicionado quando cerca de 30 nucleotídeos já foram transcritos. O revestimento de 7-

MG contém uma ligação incomum 5’-5’ trifosfato e mais alguns grupos metila. Os 7-MG são reconhecidos por fatores

envolvidos no início da tradução a protege as cadeias nascentes de RNA da degradação por endonucleases.

Término por clivagem da cadeia e a Adição de caudas 3’ poli(A): As pontas 3’ do transcrito são formadas pela

clivagem do RNA e não por término da transcrição. A transcrição segue até 1000 ou 2000 nucleotídeos além do

sítio 3’ do transcrito final. Isto é, a transcrição continua além do sítio que será a ponta 3’, e o segmento distal

é removido por clivagem endonucleotídica. A remoção ocorre pelo reconhecimento de uma seqüência AAUAAA

perto da ponta da unidade de transcrição. Após a clivagem ocorre a poliadenilação (adição de caudas poli (A) aos

RNAm eucariótico).
ranscrição em Procariontes

As características básicas da transcrição são as mesmas tanto em procariontes quanto

em eucariontes, mas muitos dos detalhes como as sequências promotoras são diferentes. A
RNA polimerase de E. coli foi estudada com mais detalhe. E nela existem aproximadamente,
7.000 cópias de RNA polimerase, onde a maioria está relacionada à síntese de RNA.

Início das Cadeias de RNA: Envolve três etapas, que são:

- Ligação de uma holoenzima RNA polimerase a uma região promotora no
DNA; Desenvolvimento localizado dos dois filamentos de DNA pela RNA polimerase, dando
um filamento molde livre para pareamento de bases com os ribonucleotídios que
chegam; Formação de ligações fosfodiéster entre os primeiros ribonucleotídios na cadeia
de RNA nascente.

- Região Promotora: pequena seqüência de nucleotídeos reconhecida por uma

RNA polimerase como ponto onde deve se ligar ao DNA para iniciar a transcrição.

- Promotores apresentam seqüências de consenso (sequências de nucleotídeos que estão

presentes em elementos genéticos conservados para serem reconhecidas) altamente
conservadas que são reconhecidas pela enzima.

Seqüências de consenso: 35: 5’-TTGACA-3’

10: 5’-TATAAT-3’

Alongamento das Cadeias de RNA: Ocorre dentro da bolha de transcrição. A

polimerase continuamente desenrola o DNA a sua frente e enrola o DNA que está atrás do
sítio de transcrição (já foi transcrito).

A cadeia de RNA nascente vai se desligando do DNA à medida que a RNA polimerase se
move pela dupla hélice. A região de pareamento DNA-RNA é muito curta (cerca de três
pares de bases).
 Figura 8: Separação local dos dois filamentos de DNA (regiões de genes). Um dos
filamentos de DNA atua como molde. RNA polimerase adiciona ribonucleotídeos no sentido
5’-3’. Pareamento entre nucleotídeos complementares (pontes de H).

Término: Ocorre quando a RNA polimerase encontra um sinal de término –

o complexo de transcrição se dissocia e há liberação da molécula de RNA. Existem dois
tipos de terminadores em E. coli: Terminadores dependentes de rô (resulta no término
da transcrição apenas na presença da proteína chamada rô) Terminadores independentes
de rô (resulta no término da transcrição sem o desenvolvimento da proteína rô).

· Os terminadores independentes de rô: apresentam seqüências nucleotídicas ( rica

em C:G seguida de seis ou mais pares de bases A:T, com os A presentes no filamento
molde) capazes de formar grampos (dificultam o movimento da RNA polimerase pela cadeia
de DNA). Os grampos são seguidos de uma seqüência rica em A (a ligação A-U é
facilmente rompida facilitando a liberação do RNA transcrito).

· Os terminadores dependentes de rô: Esse mecanismo ainda é incerto. As

sequências de terminação dependente de rô são de 50 a 90 pares de base de comprimento,
e especificam transcritos de RNA que são ricos em unidades C e sem unidades G. A
proteína rô se liga à cadeia crescente de RNA e se move de 5’ para 3’ ao longo da cadeia do
RNA. Quando a RNA polimerase diminui ou para na seqüência de terminação de rô, a rô se
liga à polimerase e retira o RNA da bolha de transcrição.

Prefácio
thaline_carbonaro@hotmail.com