Laporan Praktikum Genetika

PENGAMATAN KROMOSOM POLITEN Drosophila Melanogaster

Rizka Alawiyah*, A. Destiana, A. Kenanga, D. Wulandari, H. Nabilah, I. Choir, N.J. Kristianto, N. Pertiwi,
R.K. Putri, S.D. Anasari, G. Prayogi, N.A. Ulfha
Universitas Indonesia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Departemen Biologi
Maret 2014

Abstrak

Kromosom politen (“polytene chromosome” atau “salivary gland chromosome”) disebut sebagai kromosom yang
paling besar, oleh karena itu kromosom tersebut dimasukkan ke dalam kategori kromosom raksasa. Kromosom
tersebut dapat mencapai ukuran kira-kira 100 kali panjangnya kromosom tubuh lalat dewasa. Kromosom politen hanya
ditemui pada jenis larva diptera akibat adanya peristiwa endoreduplikasi. Struktur kromosom politen berbeda dengan
kromosom normal yaitu terdiri dari kromosenter, band, interband, dan puff. Kromosom politen dapat ditemukan pula
pada bagian tubuh diptera lainnya seperti kelenjar saliva, proventrikulus, rektum, pertengahan lambung, dan tubulus
malphigi. Larva instar III Drosophila melanogaster merupakan larva yang dijadikan sebagai bahan pengamatan
praktikum kromosom politen karena tubuhnya yang transparan sehingga memudahkan praktikan untuk mengisolasi.
Larva instar III juga memiliki organ tubuh yang lengkap dan terdapat banyak kromosom politen. Struktur kromosom
politen terlihat jelas di bawah mikroskop cahaya setelah diberi zat warna asetokarmin saat mengisolasi kelenjar ludah.

Kata kunci: Larva instar III, kromosom politen, endoreduplikasi, kelenjar saliva

1. Pendahuluan tubuh yang lengkap. Drosophila melanogaster juga

Drosophila melanogaster atau yang lebih
dikenal dengan lalat buah merupakan salah satu
serangga yang menjadi objek penelitian para ilmuan.
Penggunaan lalat buah sebagai objek penelitian dengan
beberapa alasan yaitu memiliki fase hidup yang singkat,
mudah dibiakkan dalam laboratorium, memiliki organ
memiliki metamorfosis yang sempurna yaitu terdiri dari
embrio, telur, larva instar I, larva instar II, larva instar
III, pre pupa, pupa, dan imago. Pada fase larva instar III
ditemukan adanya kromosom politen lebih tepatnya di
bagian kelenjar saliva. Pada praktikum kali ini, praktikan
akan mengamati struktur kromosom politen yang
terdapat pada kelenjar saliva.
 Kromosom merupakan badan di dalam inti sel,
berbentuk benang yang berasal dari kromatin dan terdiri
dari DNA yang berfungsi memindahkan kromosom
genetik (widyatamma 2009: 283). Kromosom dibangun
oleh struktur pembentuknya yang terdiri dari sentromer
yaitu daerah pada kromosom yang membagi kromosom
menjadi dua lengan dan memiliki peran penting saat
proses mitosis dan meiosis (Russell 1994: 200). Struktur
kromosom terbagi menjadi kromatid yaitu bagian
kromosom yang memiliki 2 lengan yang simetris (Hartl
& Jones 1998: 98). Kromonema yaitu bagian kromosom
yang muncul sebagai filamen tipis dan dapat diamati
selama proses profase pada pembelahan mitosis.
Kromonema berbentuk melingkar dan memutar di dalam
kromosom saat tahap awal kondensasi. Kromomer
berupa manik-manik kecil yang terakumulasi sebagai
material kromatin dan dapat dilihat selama fase pakiten
pada meiosis (Hartl & Jones 1998: 799). Telomer
berfungsi menjaga agar ujung kromosom tidak rusak dan
terurai (Hopson & Postlethwait 2006: 1107). Satelit
merupakan hasil dari penyempitan sekunder di lengan
kromosom. Bentuk dan ukuran satelit selalu konstan dan
tidak semua kromosom memiliki satelit. Variasi ukuran
satelit dapat dilihat pada kromosom akrosentrik 13, 14,
15, 21, dan 22 . Pada sentromer terdapat kinetokor.
Kinetokor merupakan tempat melekatnya benang spindel
saat proses pembelahan sel (Hartl & Jones 1998: 86).
Kromosom tersusun atas pita terang dan pita
gelap. Pita terang disebut sebagai eukromatin yaitu
bentuk yang mengalami sedikit pemadatan dengan lilitan
yang renggang. Eukromatin mengandung sedikit DNA
yang terekspresikan. Eukromatin berbentuk padat pada
saat pembelahan sel, tetapi strukturnya kembali
merenggang selama fase interfase. Pita gelap disebut
sebagai heterokromatin. Heterokromatin merupakan
bagian kromatin yang mengalami kondensasi sehingga
strukturnya memadat dan terlihat seperti lilitan hitam
yang menggumpal.. Heterokromatin dapat diamati pada
fase interfase (Raven, et al. 2011: 211). Porsi DNA pada
heterokromatin umumnya tidak ditranskripsi tetapi DNA
tersebut memiliki andil dalam mengontrol ekspresi gen
(Campbell dkk 2002: 369).
Kromosom politen (“polytene chromosome”
atau “salivary gland chromosome”) disebut sebagai
kromosom yang paling besar, oleh karena itu kromosom
tersebut dimasukkan ke dalam kategori kromosom
raksasa. Kromosom tersebut dapat mencapai ukuran
kira-kira 100 kali panjangnya kromosom tubuh lalat
dewasa (Suryo 1995: 80). Dalam kromosom politen
banyak mengandung untai kromosom akibat dari proses
replikasi berulang-ulang. Kromosom politen memiliki
daerah tertentu dengan pita-pita yang jelas untuk diamati
dan diidentifikasi dengan mudah (Fried & Hademenos
2006: 122).
Kromosom politen memiliki struktur yang
berbeda dengan kromosom normal. Struktur kromosom
politen terdiri atas kromosenter adalah bagian terbesar
kromosom politen yang menjadi pusat melekatnya
perpaduan daerah heterokromatin sekitar sentromer
(Suzuki & Griffiths 1967: 167). Interband adalah bagian
kromosom yang terlihat terang disebabkan karena
benang-benang kromatin yang terkandung di dalamnya
tidak sedang menggulung atau terurai. Band merupakan
bagian kromosom yang berwarna gelap disebabkan
karena benang-benang kromatin sedang menggulung.
Band mengandung banyak DNA dan variasi materi
genetik (Pollard & Earnshaw 2008: 221).
Proses terbentuknya kromosom politen diawali
dengan bertambah panjang serta diameternya kromosom
sel kelenjar ludah yang disebabkan karena pada tahap S
interfase baik kromosom maupun kromomer membelah.
Kelenjar ludah tidak pernah mengalami pembentukan
spiral (“coiling”) sehingga kromosom tidak memendek
akan tetapi tampak sangat panjang. Molekul DNA dalam
tiap benang kromatin selalu mengadakan replikasi sel
langsung diikuti oleh G1, kemudian S, G2 lagi, dan
seterusnya sehingga materi DNA tertumpuk di dalamnya pada praktikum tersebut terbagi menjadi tahap isolasi
(Suryo 1995: 84). Organisme yang memiliki kromosom dan tahap pewarnaan.
politen dikarenakan materi-materi kromosom tidak Tahap isolasi larva instar III Drosophila
tertranskripsikan sehingga menyebabkan gen-gen dalam Melanogaster yaitu, larva diambil dari medium biakkan
daerah eukromatik menjadi aktif. Ekson-ekson, seluruh dengan pinset dan dipindahkan ke kaca objek yang
protein dan RNA kemudian berasosiasi dengan sudah ditetesi larutan NaCl 0,9 % sebanyak 1 tetes.
kromosom tersebut. Gen-gen dapat menjadi aktif suatu Pemberian larutan NaCl 0,9 % sebagai larutan fisiologis
waktu, tetapi dapat dihambat fungsi sintesis proteinnya. yang bertujuan agar larva instar III tidak mengalami
Peningkatan aktivitas gen pada kromosom-kromosom kekeringan saat diisolasi atau tubuhnya tidak terlalu
politen larva Drosophila telah divisualisasikan sebagai hancur saat proses pembedahan. Kaca objek kemudian
gelembung (puff) (Starr & Taggart 1995: 242). diletakkan di bawah mikroskop stereo untuk dilakukan
Kromosom politen dapat dijumpai pada kelenjar isolasi kelenjar saliva larva. Tubuh larva ditusuk dengan
ludah larva diptera, karena kebanyakan ahli fokus pada jarum sonde pada bagian kepala dan badan. Bagian
penelitian kelenjar ludah. Kromosom politen dapat tubuh larva yang ditusuk jarum ditarik ke arah yang
ditemukan pula pada bagian tubuh diptera lainnya berlawanan agar tubuhnya terpisah dengan kepala
seperti kelenjar saliva, proventrikulus, rektum, sehingga didapat kelenjar saliva. Kelenjar saliva akan
pertengahan lambung, dan tubulus malphigi (Klug & tampak seperti benang tipis. Kelenjar saliva kemudian
Cummings 1994: 41). Drosophila melanogaster dibersihkan dari kotoran lemak atau potongan tubuh
memiliki kromosom politen karena selama lainnya yang menempel.
perkembangan larva, kelenjar ludahnya memiliki sel-sel Tahap pewarnaan, kelenjar saliva yang sudah
yang sangat besar. Sel-sel kelenjar ludah kemudian tidak bersih diberi setetes pewarna asetokarmin dan
membelah lagi, tetapi mengalami pembesaran ukuran didiamkan selama ± 10 menit. Perlakuan kelenjar saliva
seiring dengan perkembangan larva (Suryo 1995: 78). dengan pemberian asetokarmin dan didiamkan selama
Tujuan dilakukannya praktikum tersebut adalah waktu tertentu bertujuan agar zat warna meresap ke
memahami dan mengetahui struktur, fungsi, serta dalam sel sehingga sel terwarnai dengan baik dan mudah
terbentuknya kromosom politen. Kedua, mengetahui untuk mengamatinya. Tahap selanjutnya adalah objek
teknik isolasi yang baik dan benar pada kelenjar ludah ditutup dengan kaca penutup cover glass dan ditekan
larva III Drosophila melanogaster kemudian dengan ibu jari. Proses tersebut bertujuan agar sel tidak
mengamatinya. tertumpuk dan kelenjar ludah hancur sehingga mudah
untuk diamati (Suryo 1995: 78-79). Preparat kemudian
2. Metodologi diletakkan di bawah mikroskop cahaya dengan
perbesaran 40x untuk diamati struktur dan bentuk
Alat-alat yang digunakan dalam praktikum kromosm politen.
pengamatan kromosom politen yaitu mikroskop cahaya,
mikroskop stereo, jarum sonde, pinset, cawan petri, kaca 3. Hasil dan Pembahasan
objek, kaca penutup, dan pipet. Bahan yang digunakan
Larva instar III Drosophila melanogaster
terdiri atas NaCl 0,9 %, pewarna asetokarmin, larva
merupakan larva yang dijadikan sebagai bahan
instar III Drosophila Melanogaster, dan tisu. Cara kerja
pengamatan praktikum kromosom politen karena
tubuhnya yang transparan sehingga memudahkan politen karena memiliki perbesaran yang cukup yaitu
praktikan untuk mengisolasi. Larva instar III juga 40x perbesaran.
memiliki organ tubuh yang lengkap dan terdapat banyak
kromosom politen. Kromosom politen ditemukan pada
kelenjar saliva larva instar III Drosophila melanogaster
karena adanya peristiwa endoreduplikasi.
Endoreduplikasi peristiwa replikasi pada pada fase S
yang tidak diikuti oleh fase mitosis sehingga terjadi
penggandaan kromosom homolog yang saling
bersinapsis tanpa mengalami pembelahan. Kelenjar
saliva berbeda dengan bagian tubuh larva Drosophila
melanogaster lainnya yang juga mengandung kromosom
politen karena pada kelenjar saliva mengalami replikasi
sebanyak 10 kali lebih banyak dari bagian tubuh lainnya
Gambar 1. Kromosom politen Drosophila
(Hartl & Jones 1998: 264-265).
melanogaster
Sumber: Dokumentasi pribadi
Hal pertama yang dilakukan adalah mengisolasi
Perbesaran: 40x
larva instar III dari medium biakkan. Langkah kedua
yaitu meneteskan larutan NaCl 0,9 % dengan pipet. Praktikan berhasil mengamati dan menemukan
Pemberian larutan tersebut bertujuan agar larva tidak kromosom politen pada larva instar III Drosophila
mengalami kekeringan saat proses isolasi atau tubuhnya melanogaster. Pada gambar kurang begitu jelas terlihat
tidak terlalu hancur saat proses pembedahan. strukturnya karena hanya menggunakan mikroskop
Pembedahan pada larva menggunakan jarum sonde agar cahanya dengan perbesaran 40x, sedangkan struktur
bagian kepala dan tubuh dapat dipisahkan dengan dapat dilihat dengan jelas apabila perbesaran 100x. Pada
sempurna. Kelenjar saliva kemudian dibersihkan dari gambar hanya dapat terlihat jelas segerombolan
kotoran pengganggu atau dalam hal ini lemak-lemak kromosom yang membentuk kromosom raksasa.
yang menempel. Pemberian zat warna asetokarmin pada
kelenjar saliva bertujuan agar sel terwarnai dengan jelas 4. Kesimpulan

sehingga mudah untuk mengidentifikasi kromosom.

Kromosom politen pada kelenjar saliva larva
Kelenjar ludah yang sudah diberi zat warna kemudian
instar III memiliki struktur yang berbeda dari kromosom
ditekan dengan ibu jari, hal tersebut bertujuan agar
normal. Kromosom politen terjadi akibat peristiwa
kelenjar ludah pecah dan selnya menyebar sehingga
endoreduplikasi. Praktikan mampu mengidentifikasi
tidak ada lagi penumpukkan sel. Mikroskop yang
struktur yang terdapat pada kromosom politen yang
digunakan saat menisolasi kelenjar saliva adalah
terdiri atas kromosonter yang merupakan tempat
mikroskop stereo. Mikroskop stereo digunakan untuk
melekatnya perpaduan daerah heterokromatin sekitar
mengisolasi kelenjar ludah karena bagian tubuh larva
sentromer. Interband adalah bagian kromosom yang
terlihat jelas di bawah mikroskop stereo. Mikroskop
terlihat terang disebabkan karena benang-benang
cahaya digunakan untuk mengamati struktur kromosom
kromatin yang terkandung di dalamnya tidak sedang
menggulung atau terurai. Band merupakan bagian
kromosom yang berwarna gelap disebabkan karena
benang-benang kromatin sedang menggulung. Puff
merupakan gelembung yang terdapat pada lengan
kromosom. Teknik isolasi kelenjar saliva dilakukan
dengan pemberian larutan NaCl 0,9 % dengan tujuan
agar larva tidak kekeringan karena tubuh larva bersifat
isotonis dengan larutan. Pemberian zat
asetokarmin juga penting dilakukan untuk lebih
memudahkan dalam mengidentifikasi
kromosom politen di bawah mikroskop cahaya dengan
perbesaran 40x.
Daftar Pustaka
Campbell, N.A., J.B. Reece & L.G. Mitchell. 2002.
Biology. California The Benjamin.
Fried, G.H dan G.J Hademenos. 2006. Schaum’s outline
of theory and problems of biology. Edisi ke-2.
Diterjemahkan oleh Penerbit Erlangga. Jakarta:
x + 368 hlm.
Hartl, D.L., E.W.Jones. 1998. Genetics; Principles amd
Analysis. Jones dan Bartlett Publisher, United
States: xxiv+840 hlm.
Hopson, J.L dan J.H. Postlethwait. 2006. Modern
Biology. Edisi ke-6. Holt, Rinehart, dan Wiston.
Klug, W.S dan M.R Cummings. 1994. Concepts of
Genetcis. Prentice-Hall Inc. United States of
America: xvi + 779 hlm.
Pollard, T.D dan W.C. Earnshaw. 2008. Cell Biology.
Edisi ke-2. Elsevier Inc. China: xviii + 905 hlm.
Raven, et al. 2011. Reproduction and Heredity. Biology.
Edisi ke-9. McGraw Hill Companies. United
warna States: i + 1238 hlm.
Russel, Peter J. 1994. Fundamentals of Genetics. Harper
struktur Collins College Publishers, Inc., New York: xvi
+ 528 hlm.
Suryo. 1995. Sitogenetika. Gajah Mada University Press.
Yogyakarta: xvi + 446 hlm.
Suzuki, D.T dan A.J.F Griffiths. 1976. An introduction
to genetic analysis. W.H Freeman and
Company. United States of America: xii + 468
hlm.
Starr, C dan R. Taggart. 1995. Biology: The Unity and
Diversity of Life. Wadsworth Publishing
Company. United States of America: xxxviii +
932 hlm.
Widyatama, et al. 2009. Kamus kedokteran. Penerbit
Widyatama. Jakarta: x + 570 hlm.