Lisofosfatidil colina 0.

17
Separación de fosfolípidos por Esfingomielina 0.26
cromatografía en capa fina y Fosfatidil colina 0.33
determinación de colesterol en la yema Fosfatidil serina 0.33
de huevo Fosfatidil etanolamina 0.71
Lípidos neutros 1.0

Introducción
Relación de frentes
Debido a que los lípidos son insolubles en agua, su Bismuto
extracción y el posterior fraccionamiento requiere de
disolventes orgánicos. No. de Frente del Medida de Rf
mancha eluyente mancha
Los lípidos neutros (triacilgliceroles, ceras, pigmentos, (cm) (cm)
etc.) se extraen fácilmente de los tejidos con éter etílico, 1 1.1 0.2
cloroformo o benceno, disolventes en los que no se 2 1.7 0.309
5.5
produce la agregación de lípidos promovida por las 3 2.8 0.509
interacciones hidrofóbicas. Una solución extractiva muy 4 3.9 0.709
utilizada es una mezcla de cloroformo, metanol y agua, 5 5.3 0.963
inicialmente en proporciones que sean miscibles
produciendo una sola fase.
Los lípidos que contienen colina aparecen como
Después de homogenizar en éste disolvente para manchas de color rojo-naranja
extraer todos los lípidos, se añade más agua al extracto
Mancha 1: Cercano a lisofosfatidil colina
resultante que se separa en dos fases, metanol/agua
(fase superior) y cloroformo (fase inferior) Mancha 2: Cercano a fosfatidil colina o serina
En general, las mezclas complejas de lípidos se separan Mancha 3: Fosfolípido no reportado en huevo
por las diferencias en la polaridad o solubilidad en
disolventes apolares. Los lípidos que contienen ácidos Mancha 4: Cercano a fosfatidil etanolamina
grasos en enlace éster o amida se pueden hidrolizar
Mancha 5: Cercano a lípidos neutros
tratándolos con un ácido, álcali o enzimas hidrolíticas
específicas (fosfolipasas, glucosidasas) para analizar Molibdato (molibdato de amonio)
sus componentes.
No. de Frente Medida
mancha del de
Objetivos de la práctica Rf
eluyente mancha
(cm) (cm)
Separar los fosfolípidos de la yema de huevo a través 1 0.9 0.18
de cromatografía de capa fina.
2 1.4 0.28
Resultados y Discusión 3 5 2.3 0.43
4 3.4 0.68
Separación de fosfolípidos por cromatografía 5 4.8 0.96
en capa fina
Cromatografía Se mineraliza al fósforo orgánico contenido en la cabeza
polar de los fosfolípidos mediante una hidrólisis ácida,
A medida que el disolvente asciende por la placa por de acuerdo al método de Hess y Derr. El fósforo
acción de la capilaridad arrastra consigo a los lípidos. inorgánico se hace reaccionar con molibdato de amonio
Los lípidos menos polares son los que se desplazan en medio ácido, formando un complejo fosfomolibdato.
más rápidamente ya que tienen menos tendencia a Revela los fosfolípidos como manchas azules.
unirse al gel de sílice (una forma de ácido silícico,
Si(OH)4) Mancha 1: Cercano a lisofosfatidil colina

Mancha 2: Cercano a esfingomielina

RF reportados Mancha 3: Fosfolípido no reportado en huevo

Fosfolípido RF Mancha 4: Cercano a fosfatidil etanolamina

Mancha 5: Cercano a lípidos neutros muestra de yema de huevo. Y mediante las relaciones
de frente calculadas de pudo determinar el carácter
Yodo polar o apolar de cada uno de los componentes
No. de Frente Medida mencionados.
mancha del de
Rf Fuentes de consulta
eluyente mancha
(cm) (cm)
1 1.4 0.21538462 Nelson D.L., Cox M.M., “Lehninger Principios de
2 2.1 0.32307692 Bioquímica” Editorial OMEGA, 3ª edición, pp. 377-378,
(2001)
3 6.5 2.9 0.44615385
4 4.3 0.66153846
5 5.8 0.89230769

Reacciona reversiblemente con los dobles enlaces de

los ácidos grasos confiriendo a los lípidos que los
contengan un color amarillo o marrón

Mancha 1: Fosfolípido no reportado en huevo

Mancha 2: Cercano a fosfatidil colina o serina

Mancha 3: Fosfolípido no reportado en huevo

Mancha 4: Fosfolípido no reportado en huevo

Mancha 5: Fosfolípido no reportado en huevo

Ninhidrina

No. de Frente del Medida de

mancha eluyente mancha Relación
(cm) (cm)
1 1.9 0.39130435
2 4.6 2.4 0.5

3 4.4 0.95652174

Revela fosfolípidos que contienen

PE(fosfatidiletanolamina), PS(fosfatidilserina), LPE
(lisofosfatidiletanolamina) y LPS (lisofosfatidilserina)
(mejor conocidos como aminoácidos) como manchas de
color rojo-violeta

Mancha 1: Fosfolípido no reportado en huevo

Mancha 2: Fosfolípido no reportado en huevo

Mancha 3: Cercano a lípidos neutros

Conclusión

Se cumplió el objetivo de identificar la presencia

(análisis cualitativo) de fosfolípidos en general,
fosfolípidos con grupo “colina”, fosfolípidos con grupo
amino libre y fosfolípidos con dobles enlaces en la