INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIA BIOLOGICAS

IDENTIFICACION DE
HONGO AISLADO

Micología General y Médica

Q.B.P

Torres Galicia Benjamín

Grupo: 3QM2

Sección 1 Equipo 3

1
 Hongo identificado
Cryptococcus gattii
269
Morfología Colonial
Observaciones: Se pueden observar
lavaduras con una pequeña capsula que
las rodea que se manifiesta de forma
refringente debido a la tinción negativa

Perfiles Enzimáticos
Prueba de Ureasa

Cultivo de la muestra problema en SDA. Izquierda: sembrado en placa,

derecha: sembrado en tubo.

Textura: Cremosa
Superficie: Lisa
Color Anverso: Blanco/Amarillentas
Reverso: Sin pigmento
Caldo Urea de Stuart. Izquierda: tubo sin inocular (naranja), derecha: tubo
inoculado después de la incubación (rosa-rojo).
Observaciones: Colonias de tamaño
limitadas, circulares que tienen un color Observaciones: Se inoculo la muestra
blanco amarillento, con aspecto mucoide y problema en el medio líquido, caldo urea de
brilloso haciéndolo parecer “leche Stuart. Se incubo a 37°C por 48 hrs. Se
condensada”. Se incubo a 37°C por 48 hrs. obtuvo como resultado positivo a la prueba
de la ureasa ya que se observó un cambio
Morfología Microscópica de vire en medio de color naranja a una
coloración rojo-rosa.

Producción de Fenoloxidasa

Agar alpiste negro. Izquierda: agar sin inocular, derecha: agar sembrado
por estría abierta.
Examen directo de la muestra problema con tinta china 40x

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Observaciones: Se sembró por estría un complejo ganglionar que impide la
abierta la muestra problema en agar alpiste diseminación del hongo. En personas
negro. Se incubo a 28°C por 72 hrs. Se inmunosuprimidas se disemina con
obtuvo como resultado positivo a la prueba facilidad por vía linfática y hematógena
de producción de fenoloxidasa ya que se hacia SNC, a partir de donde puede
observó el crecimiento de colonias color diseminarse a piel, hueso y
café. vísceras. Igualmente, puede producir
lesiones en piel por inoculación traumática.
Crecimiento en el medio CGB
Discusión de Resultados
La identificación del hongo se realizó con
varias pruebas.
Se sembró en SDA donde se observaron
colonias lisas de color blanco-amarillento y
de textura cremosas, generalmente
características de las levaduras.
Se realizó un examen directo con tinta china
Agar CGB. Izquierda: agar sin inocular, derecha: agar sembrado por estría
abierta.
para observar la capsula refringente
presente en Cryptococcus que nos sirve
para diferenciarla de otros géneros de
Observaciones: Se sembró por estría levaduras como Candida, Rhodotorula o
abierta la muestra problema en agar Pichia. Además esta prueba se apoyó de la
canavaniva-glicina-azul de bromotimol. Se prueba de la ureasa en caldo urea de Stuart
incubo a 28°C por 72 hrs. Se obtuvo que nos pone en manifiesto la presencia de
crecimiento en el medio CGB (positivo) ya la enzima ureasa para la identificación de
que se observó un crecimiento con un vire levaduras de importancia clínica como:
de color azul. Cryptococcus, Rhodotorula y Trichosporon
(Ureasa +) de otras levaduras como
Candida (Ureasa -). La muestra tuvo un vire
Importancia de color rojo-rosa lo que significa una
La Criptococosis hace referencia a la alcalinización del medio debido a que el
micosis causada por la levadura microorganismo presenta la enzima ureasa,
capsulada Cryptococcus neoformans (C. la cual hidroliza la urea (presente en el
neoformans var. grubii medio) formando amoniaco como producto
y C. neoformans var. neoformans) final, provocando un cambio de pH que se
y Cryptococcus gattii. Este hongo es manifiesta por medio del indicador rojo de
aislado principalmente del guano de aves fenol.
como palomas, pichones, gallinas que Se realizó una siembra de la muestra
pueden ser reservorios o vectores problema por estría abierta en agar alpiste
indirectos que mantienen a la levadura, sin negro para diferenciar especies patógenas
de Cryptococcus (Cryptococcus
adquirir la enfermedad.
neoformans var. grubii,
La infección se adquiere por inhalación de
C. neoformans var. neoformans
blastoconidios poco capsulados, en el y Cryptococcus gattii) por la presencia de la
hospedero desarrolla la cápsula y afecta enzima fenoloxidasa que metaboliza el
inicialmente pulmones, donde ácido cafeínico contenido en el extracto de
generalmente el sistema inmune produce semilla de alpiste negro y producir un
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pigmento de color marrón presente en las
colonias (Positivo) a diferencia de otras
especies de Cryptococcus (C. aerius,
C. flavus, C. terreus, entre otras) no
patógenas que no producen esta enzima y
por lo tanto no forman este pigmento color
marrón en sus colonias (Negativo). Se
obtuvieron colonias de color marrón en el
agar alpiste negro lo que significa que se
trata de una especie patógena.
Por ultimo para diferenciar Cryptococcus
neoformans de Cryptococcus gattii se
realizó la prueba de crecimiento en agar
CGB (canavanine-glycine-bromothymol
blue). El medio CGB se fundamente en la
presencia de L-canavanina como agente
inhibidor de crecimiento de C. neoformans,
aunque existen cepas que son resistentes
a este compuesto para asegurar su
inhibición total al medio se le adiciona
glicina como fuente de carbono, ya que C.
neoformans no la puede asimilar.
Cryptococcus gattii presenta resistencia a
L-canavanina además que puede
degradarlo liberando amonio, como
compuesto final, alcalinizando el medio y
hacerlo que vire a azul debido al indicador
de pH azul de bromotimol. En la muestra
problema se observó el vire de color azul lo
que podemos tomar como conclusión que
se identificó a la muestra problema como:
Cryptococcus gattii

Bibliografía:
 Arenas, R. (2008) MICOLOGÍA
MÉDICA ILUSTRADA, Capitulo 24
Criptococosis, McGrawHill: México.
 Verónica Tangarife C., SSO Docente
2011, Escuela de Microbiología,
Universidad de Antioquiaco.
http://aprendeenlinea.udea.edu.co/l
ms/moodle/mod/page/view.php?id=
100866