Informe de laboratorio 03/BIOQUÍMICARECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

AÑO DEL DIALOGO Y LA

RECONCILIACIÓN NACIONAL
UNIVERSIDAD NACIONAL
“SANTIAGO ANTÚNEZ DE MAYOLO”
FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL

CURSO : BIOQUÍMICA

TEMA : RECONOCIMIENTO DE LAS PROTEÍNAS POR

PRECIPITACIÓN Y COLORACIÓN

DOCENTE : Msc. CABELLO CHAVEZ Pablo Edwin

ALUMNOS :
 COCHACHIN FIGUEROA BRAYZA

 JAVIER ALVA SUSAN

 PARIA MILLA ANIBAL

HUARAZ-PERU
2018

TÍTULO: RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

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ÍNDICE
I. INTRODUCCIÓN..........................................................................................2
II. OBJETIVOS.................................................................................................4
OBJETIVO GENERAL:...................................................................................4
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:............................................................................4
III. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL............................................................4
A. COCAGULACIÓN POR CALOR:..............................................................4
IV. MATERIALE................................................................................................7
V. RESULTADOS..............................................................................................9
COAGULACIÓN POR CALOR........................................................................9
PRECIPITACIÓN EN FRIO CON ÁCIDOS FUERTES........................................9
PRECIPITACIÓN POR SALES DE METALES PESADOS..................................10
REACCION DE BIURET...............................................................................10
VI. DISCUSIÓN..............................................................................................11
VII. CUESTIONARIO......................................................................................11
VIII. CONCLUSIÓN........................................................................................12
LAS TECNICAS DE RECONOCIMIENTO POR PRECIPITACION:....................12
LAS TECNICAS DE RECONOCIMIENTO POR COLORACION:.......................12

I. INTRODUCCIÓN
Desde los tiempos remotos hasta en la actualidad la estructura del hombre
sigue siendo compleja, pero el ser humano siempre ha hecho lo posible
para mantener su cuerpo equilibrado pese a no saber los procesos que
ocurren en él, y la pregunta es ¿Cómo lo hacen?, fácilmente consumiendo
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productos alimenticios como lácteos, frutas, carnes, verduras y entre otros

más, quienes brindan aminoácidos esenciales, ya que estos no pueden ser
sintetizados por el cuerpo, también encontramos otro tipo de aminoácidos
que si son sintetizados por el cuerpo y son los no esenciales.
El aminoácido cumple una función muy importante que al agruparse
logran formar proteínas, pero los aminoácidos no siempre se unen de una
sola manera sino de diversas formas es por eso que permite la formación
de diversas proteínas, estas son muy importantes para las funciones
estructurales, inmunológicas, catalíticas, transporte, hormonal, entre otras
más.
Las proteínas esta compuestas por enlaces peptídicos, asimismo son
biomoléculas de gran peso molecular y posee estructura compleja,
presentando así cuatro tipos.
Por lo tanto, mediante este informe se buscará dar a conocer cómo se
puede realizar el reconocimiento de las proteínas ya se por precipitación y
coloración en el laboratorio de bioquímica, para hacer este experimento se
utilizamos elemento muy especial que es el huevo en el cual podemos
encontrar proteínas como la ovoalbúmina, con albúmina, duomicode,
flavo proteínas, lisozima, adivina y la ovomucina, pero la que más se uso
fue la ovoalbúmina.
Esta práctica realizada nos permitirá ver que técnicas se usan para
reconocer las proteínas y ver para que son de gran ayuda.

II. OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL:
 Utilizar técnicas que permitan el reconocimiento por precipitación y
coloración las proteínas, aminoácidos específicos y proteínas de
origen biológico.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
 conocer los aminoácidos esenciales y no esenciales.
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 Conocer las proteínas del huevo y los reactivos que se usaron.

III. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

La reacción por precipitación son reacciones útiles para eliminar o
aislar proteínas de una solución: Reacción de precipitación que
producen desnaturalización o Coagulación irreversible

A. COCAGULACIÓN POR CALOR: Algunas proteínas no presentan

ningún cambio de solubilidad por debajo de 35ºC, todas las
proteínas sufren un fenómeno de desnaturalización cuando la
temperatura pasa de 35ºC y la alteración es total al llegar a
80ºC, la coagulación de proteínas es un proceso irreversible
debido a la desnaturalización cambiando su estructura nativa.

1. PROCEDIMIENTO
a) Enumerar los tubos de ensayo.
b) En el tubo Nº 1 colocar 5ml de agua destilada
(blanco o control)
c) En el tubo Nº2 colocar 5 ml de albúmina de
huevo al 25%.
d) Someter progresivamente los tubos en baño
maría colocando un termómetro en la solución
de albumina.

B. PRECIPITACIÓN EN FRÍIO CON ÁCIDOS FUERTES: Cuando la

solución e proteínas se acidifican adquieren una carga neta
positiva. Las proteínas actúan como base y pueden formar sales
con los ácidos o aniones que si se eles añade.
1. PROCEDIMIENTO CON ÁCIDOS MINERALES
a) Enumerar dos tubos de ensayo.
b) En el tubo 1 colocar 2ml de agua destilada y
agregar 5 gotas de HNO3 cc. por las paredes.
c) En el tubo 2 colocar 2 ml de solución albúmina al
2% y agregar 5 gotas de HNO3cc. Por las paredes.
2. PROCEDIMIENTO CON ÁCIDOS ORGÁNICOS
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a) Enumerar dos tubos de ensayo.

b) El tubo 1 colocar 2ml de agua destilada.
c) Al tubo 2 colocar 2ml de solución albúmina al
2%.
d) A los dos tubos agregar 1 ml de ácido trícloro
acético al 10%, mesclar y observar.
C. PRECIPITACIÓN POR SALES DE METALES: Las proteínas en
presencia de cationes de metales pesados se forman sales de
proteínas metálicas que pueden ser solubles según la naturaleza
metal.
1. PROCEDIMIENTO
a) Enumerar 3 tubos de ensayo.
b) El tubo 1 colocar 2 ml de agua destilada.
c) Al tubo 2 colocar 2 ml de solución de albumina al
2%.
d) Al tubo 3 colocar 2 ml de solución de albumina al
2%.
e) Al tubo 2 agregar 5 gotas de HgCl2 al 5%,
observar la formación de proteinato de mercurio.
f) Al tubo 3 colocar 5 gotas de (CH3- COO)2 Pb. Al
10%(acetato de plomo) observar.

D. REACCION DE BIURET: El sulfato alcalino de cobre reacciona con

dos compuestos que tienen dos o más enlaces peptídicos dando
un complejo de coloración violeta. La intensidad del color
obtenido es una medida del número de enlaces peócicos
presentes en la proteína.
1. PROCEDIMIENTO
a) Enumerar 3 tubos de ensayo.
b) El tubo 1 colocar 2 ml de agua destilada.
c) Al tubo 2 colocar 2 ml de solución de
fenolftaleina al 2%.
d) Al tubo 3 colocar 2 ml de albumina de huevo al
2%.
e) Añadir a cada tubo 2ml del Reactivo de Biuret.

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f) Mezclar y observar.
E. REACCIÒN XANTOPROTEICA: Los aminoácidos que contienen un
núcleo aromático forman nitroderivados de color amarillo cuando
se calienta con HNO2 cc (ácido nítrico concentrado). Las sales de
estos derivados son de color naranja.(ESTE EXPERIMENTO NO SE
REALIZÓ)
1. PROCEDIMIENTO
a) Enumerar 3 tubos de ensayo.
b) El tubo 1 colocar 2 ml de agua destilada.
c) Al tubo 2 colocar 3 ml de albumina de huevo al
2%.
d) Añadir a cada tubo 1ml de HNO3 cc.
e) Observar el precipitado blanco, hervir en baño
maría hasta que tome un color amarillo.
f) Alcalinizar con 3ml de solución de NaOH al 40%

IV. MATERIALES

AC.TRICLORO ACETICO
TUBOS DE ENSAYO HCL
10%

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HgCL2 GOTERO PIPETA

VASO PRECIPITADO AGUA DESTILADA FENOLFTALEINA

AC. GLUTAMICO NaOH TRIPODE Y REJILLA

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PROPIPETA HUEVOS

V. RESULTADOS

COAGULACIÓN POR CALOR

Tubo Agua Ovoalbúmina Baño Observaciones

destilada al 25% maría
1 5ml 0 + Se calienta y
evapora
2 0 5ml + Se congela la
clara de huevo

RESULTADO ESPERADO
El tubo que contiene proteína albumina será el único que presente
la coagulación de la proteína.

PRECIPITACIÓN EN FRIO CON ÁCIDOS FUERTES

Procedimiento con ácidos orgánico.

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Tubo Agua Ovoalbúmina Tricloro Observaciones

destilada al 2% acético al
10%
1 2ml 0 1ml No se forman
nada.
2 0 2ml 1ml Se forma líquido
blanquecino.

PRECIPITACIÓN POR SALES DE METALES PESADOS

Tubo Agua Ovoalbúmina HgCL2 (CH3- OBSERVACIONES

destilada al 2% al 5% COO)2P
1 2ml 0 0 0 No se forman
nada.
2 0 2ml 5gotaas 0 Es más turbio
3 0 2ml 0 5 gotas Es menos turbio
que el tubo 2

REACCION DE BIURET
Tubo Agua Fenilalanina Ovoalbúmina Ácido Reactivo OBSERVACIO
destilada al 2% al 2% glutámico de NES
biuret
1 2ml 0 0 0 1ml Color celeste
sin
precipitación.
2 0 2ml o 0 1ml Color violeta
3 0 2ml 0 1ml Cristalino
4 0 0 0 2ml 1ml No cambia

RESULTADOS ESPERADOS
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El tubo que contiene la proteína albumina será el único que

presente coloración violeta, debido a que contiene enlaces
péptidos.

VI. DISCUSIÓN
 Se discute que al añadir el reactivo de Biuret tanto al agua
destilada como a la ovoalbúmina no se aprecia ninguna
reacción
 La clara de huevo en baño maría se coagula.
 El tricloro con el agua destilada no forman nada.

VII. CUESTIONARIO
1. ¿Qué es la desnaturalización de la proteína albumina del huevo?
La desnaturalización de la proteína albumina es la pérdida de su
estructura cuaternaria, terciaria y segundaria, la cual sola queda su
estructura primaria, pero a partir de esta también se puede formar la
demás estructuras ya que contiene la información esencial, la
desnaturalización es importante para purificar y aislar.
2. ¿Cuáles son los aminoácidos esenciales?
 Valina(Val)
 Histidina(His)
 Arginina(Arg)
 Isoleucina(Ile)
 Leucina(Leu)
 Lisina(Lys)
 Metionina(Met)
 Fenilalanina(Phe)
 Treonina(Thr)
 Triptófano(Trp)

3. ¿Qué técnica le ha permitido identificar los componentes de las

proteínas unidos por enlaces peptídicos?
La técnica que ayuda al reconocimiento es la reacción de Biuret ya que
al unirse el sulfato alcalino de cobre con compuestos de enlaces

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peptídicos brinda una coloración violeta y el color se notara más a

medida que encuentra más enlaces peptídicos.

4. Mencione 4 importancias básicas de las proteínas en la naturaleza

 Las proteínas son de suma importante para la formación de los
anticuerpos.
 Mantiene al cuerpo equilibrado.
 Ayuda para la formación de la estructura del cuerpo.
 Permite la reparación de tejidos dañados.

VIII. CONCLUSIÓN

LAS TECNICAS DE RECONOCIMIENTO POR PRECIPITACION:

- COAGULACIÓN POR CALOR, nos permitió reconocer a la proteína
albúmina, la cual se desnaturaliza a causa de un incremento
excesivo de temperatura formando un coagulo.

- PRECIPITACIÓN EN FRIO CON ACIDOS FUERTES, estos ácidos

reaccionan con la proteína albúmina, la cual se comporta como una
base y forman una floculación, el cual es un precipitado formado
por nitrato de proteínas.

- PRECIPITACIÓN POR SALES DE METALES PESADOS, la proteína

albumina, en presencia de cationes de metales pesados forman
sales de proteínas metálicas, el cual fue la formación de proteinato
de mercurio.

LAS TECNICAS DE RECONOCIMIENTO POR COLORACION:

- REACCIÓN DE BIURET, este reactivo nos permitió identificar los

enlaces peptídicos de la proteína, albúmina, a la cual torno con una
coloración violeta.

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