GRUPO: “B”

APRECIACION CRITICA

En mi apreciación me parece un artículo super completo, y para mí es super

nuevo esto sobre la Selección, caracterización y aplicación de aptámeros de ADN

para la detección de la proteína MPT64 secretada por Mycobacterium

tuberculosis, es algo nuevo, pero super interesante. Lo que me llamo mas la

atención es que la Mycobacterium tuberculosis (Mtb) , un agente etiológico de la

tuberculosis (TB), es importante para el control global de esta enfermedad. Los

aptámeros se han convertido en un rival potencial para los anticuerpos en

terapias, diagnósticos y biosensores debido a sus características inherentes. El

objetivo del presente estudio fue seleccionar y caracterizar aptámeros de ADN de

cadena simple contra la proteína MPT64, una de las proteínas

secretadas predominantes dein vitro utilizando la evolución sistemática de

ligandos a través del método de enriquecimiento exponencial (SELEX). La

selección se inició con un grupo de ssDNA biblioteca con región de 40 nucleótidos

aleatorizada. Se realizaron un total de 10 ciclos y se identificaron diecisiete

aptámeros con secuencias únicas mediante secuenciación. Se realizó un análisis

Dot Blot para monitorear el proceso SELEX y para realizar las pruebas

preliminares sobre la afinidad y especificidad de los aptámeros. Elensayo

deoligonucleótidos ligados aenzimas (ELONA) mostró que la mayoría de los

aptámeros eran específicos de la proteína MPT64 con una correlación lineal

de R 2 K D = 0.94 para los más selectivos. Usando la Resonancia de Plasmón de

Superficie (SPR),constante de equilibrio de disociaciónSe obtuvieron 8,92 nM. El

análisis bioinformático de los aptámeros más específicos reveló la existencia de

una secuencia conservada y distinta, y un posible sitio de unión en MPT64. La

especificidad se determinó probando ESAT-6 y CFP-10 no

ALUMNA: CORO ALVA, FIORELLA LISSETH

GRUPO: “B”

objetivo. Insignificante reactividad cruzada confirmó la alta especificidad del

aptámero seleccionado. El aptámero seleccionado se probó en muestras

de esputo clínico utilizando ELONA y tuvo una sensibilidad y especificidad de

91.3% y 90%, respectivamente. Se usaron métodos de microscopía, positividad de

cultivo y amplificación de nucleótidos como estándares de referencia. Los

aptámeros estudiados podrían utilizarse más para el desarrollo de herramientas de

diagnóstico médico y ensayos de detección para Mtb

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