LAPORAN PRAKTIKUM METODE PEMISAHAN

PERCOBAAN X

KROMATOGRAFI KERTAS

OLEH:

NAMA : NURUL HASANA AKMAR

NIM : F1C1 17 024

KELOMPOK : X (SEPULUH)

ASISTEN : FIRA FINGKI

LABORATORIUM KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS HALU OLEO

KENDARI

2019
 I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Cabang ilmu kimia memerlukan metode pemisahan campuran menjadi

komponen-komponennya bahkan banyak juga bidang yang lain yang telah

mempergunakan teknik-teknik kimia untuk memecahkan berbagai macam

permasalahan yang luas sehingga penemuan teknik pemisahan yang

berkemampuan tinggi akan sangat dirasakan manfaatnya dalam banyak ilmu

pengetahuan modern. Salah satu tehnik pemisahan dalam ilmu kimia adalah

teknik kromatografi.

Kromatografi diaplikasikan untuk memisahkan campuran dari

substansinya menjadi komponen- komponennya. Kromatografi bekerja

berdasarkan prinsip yang sama yaitu seluruh bentuk kromatografi memiliki fase

diam (berupa padatan atau cairan) dan fase gerak (berupa cairan atau gas).

Berdasarkan fase gerak dan fase diam yang digunakan, kromatografi dibedakan

menjadi kromatografi cair-padat (kromatografi dengan fase diam berwujud padat

dan fase gerak berwujud cair), kromatografi gas-padat (kromatografi dengan fase

diam berwujud padat dan fase gerak berwujud gas), kromatografi gas-cair

(kromatografi dengan fase diam berwujud cair dan fase gerak berwujud gas) dan

kromatografi cair-cair (kromatografi dengan fase diam berwujud cair dan fase

gerak berwujud cair).

Kromatografi kertas sebagai analisis kromatografi dengan kertas sebagai

penyerap selektif dapat sebagai sobekan kertas yang bergantung dalam larutan

yang akan dianalisis. Prinsip kromatografi kertas ialah adsorbsi dan kepolaran,
dimana adsorbsi didasarkan pada panjang komponen dalam campuran yang

diadsorbsi pada permukaan fase diam dan kepolaran komponen, berpengaruh

karena komponen akan larut dan terbawa oleh pelarut jika memiliki kepolaran

yang sama serta kecepatan migrasi pada fase diam dan fase gerak.

Jarak antara jalannya pelarut bersifat relatif. Oleh karena itu, diperlukan

suatu perhitungan tertentu untuk memastikan spot yang terbentuk memiliki jarak

yang sama, nilai perhitungan tersebut yakni nilai Rf. Semakin besar nilai Rf dari

sampel maka semakin besar pula jarak bergeraknya senyawa tersebut pada plat

kromatografi lapis tipis. Identifikasi nilai Rf memiliki nilai yang sama senyawa

tersebut dikatakan memiliki karakteristik yang sama dan bila nilai Rfnya berbeda,

senyawa tersebut dapat dikatakan merupakan senyawa yang berbeda. Berdasarkan

latar belakang diatas maka dilakukanlah percobaan Kromatografi Kertas.

B. Rumusan Masalah

Rumusan masalah pada percobaan kromotografi kertas adalah

bagaimana cara menghitung nilai Rf cuplikan tertentu dengan metode

kromotografi kertas?

C. Tujuan Percobaan

Tujuan yang ingin dicapai pada percobaan kromotografi kertas adalah

untuk mengetahui cara menghitung nilai Rf cuplikan tertentu dengan

menggunakan metode kromotografi kertas.

D. Manfaat Percobaan

Manfaat yang dapat diperoleh pada percobaan ini adalah agar dapat

menghitung nilai Rf cuplikan tertentu dengan mmetode kromotograafi kertas.

 II. TINJAUAN PUSTAKA

Kromatografi adalah teknik yang membantu pemisahan bahan kimia dari

sampel biologis. Pentingnya terletak terutama pada penggunaannya sebagai alat

analisis. Kromatografi kertas tidak menjadi populer sampai karya Consden dkk.

(1944) yang tidak hanya memperkenalkan, tetapi juga menunjukkan aplikasinya.

Bakteriolog, ahli genetika, ahli botani, ahli zoologi, dan berbagai pekerja lainnya

telah menggunakan kromatografi kertas untuk mempelajari protein, asam amino,

karbohidrat, steroid, antibiotik, vitamin, dan banyak zat lain dalam sistem biologis

(Dhindsa and Deepak., 2014)

Kromatografi merupakan salah satu teknik analisis yang terpenting untuk

pemisahan campuran senyawa-senyawa kimia. Pada dasarnya teknik kromatografi

terdiri dua fase yaitu fase diam (berupa cairan atau padat) dan fase gerak (berupa

cairan dan gas). Pemisahan komponen campuran dapat terjadi karena adanya

perbedaan kecepatan migrasi. Sedangkan perbedaan kecepatan migrasi ini timbul

karena adanya perbedaan perbandingan distribusi dari kompenan campuran antara

dua fase tersebut. Kromatografi dapat digunakan untuk menganalisis kualitatif

keberadaan suatu zat (Afriyeni dan Nila., 2016)

Faktor-faktor yang efektif pada proses pemisahan ini meliputi

karakteristik molekuler yang terkait dengan adsorpsi (cair-padatan), partisi (cair-

padatan), dan afinitas atau perbedaan di antara bobot molekulnya, dalam

kromatografi kertas bahan pendukung kromatografi terdiri dari lapisan selulosa

yang sangat jenuh dengan air. Metode ini, kertas saring tebal terdiri dari

penyangga, dan tetesan air yang mengendap di pori-porinya membentuk “fase

cair.” Fase gerak terdiri dari cairan yang sesuai ditempatkan di tangki yang sedang

berkembang. Kromatografi kertas adalah kromatografi “cair-cair” (Coskun.,

2016).

Keuntungan dari kromatografi kertas, metode analitik ini cepat

dilakukan dan mudah dikuasai. Dengan fase gerak yang dipilih dengan benar

pelarut, seorang analis dapat dengan cepat menentukan jumlah konstituen dari

sampel campuran. Keuntungan lain dari metode ini adalah memerlukan sampel

yang relatif kecil, nilai tambah yang besar di dunia yang sadar biaya saat ini.

kekurangan metode ini seperti semua metode analitis, kromatografi kertas

memiliki keterbatasan yakni campuran sangat sulit dipisahkan dengan kertas

kromatografi; dan setiap spesies yang tidak berwarna sulit untuk diamati pada

kromatogram. Juga, kromatografi kertas semata-mata merupakan metode analitik,

bukan metode preparatif. Karena ukuran sampel sangat kecil, sulit untuk

melakukan analisis lebih lanjut setelah konten sampel dipisahkan (Balammal and

Saravana., 2014)

Indeks Retensi Kovats, yaitu indeks retensi berbasis n-alkana sebagai

standar, pada Kromatografi Gas telah diaplikasikan secara luas oleh para analis

kimia, karena lebih reliable dan reproducible dibanding waktu retensi (tR) dan

faktor retensi (Rf), hal ini disebabkan karena Indeks Retensi Kovats tidak sensitif

terhadap perubahan kolom, panjang kolom, diameter kolom, gas pembawa, laju

alir, pre kolom, dan terhadap sedikit perubahan terhadap kondisi eksperimen

lainnya, bila dibandingkan dengan waktu retensi dan faktor kapasitas. (Mahmudi

dkk., 2015).
 III. METODOLOGI PRAKTIKUM

A. Waktu dan tempat

Praktikum kromatografi kertas dilaksanakan pada hari Selasa, 26 Maret

2019 Pukul 13.00-15.30 WITA dan bertempat di Laboratorium Kimia Analitik,

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Halu Oleo,

Kendari.

B. Alat dan Bahan

1. Alat

Alat alat yang digunakan dalam percobaan kromatografi kertas adalah kertas

saring watman, timbangan analitik, batang penganduk, spatula, pipa kapiler,

cumber, gelas kimia 250 mL, gelas ukur 100 mL, dan gelas ukur 10 mL.

2. Bahan

Bahan bahan yang digunakan dalam percobaan kromatografi kertas adalah

timah (II) klorida (SnCl2), etil acetoacetate (C6H10O3), etil asetat (C4H8O2), kalium

dikromat (K2Cr2O7), asam asetat glacial (CH3COOH), akuades, 2-propanol, dan

asam asetat (CH3COOH).

C. Prosedur Kerja

Kertas whatman

- diukur 10 x 2 cm
- dibuat garis pada jarak 1 cm dari sisinya,
lalu digaris, kemudian ditandai titik yang
akan diteteskan cuplikan

Kertas saring whatman

ukuran 10 x 2 cm

- diberikan tetesan larutan cuplikan SnCl2 pada

bagian kertas yang telah diberi tanda
- dimasukan dalam chumber yang berisi
pelarut
- ditutup
- didiamkan hingga pelarut meresap hingga ±
3⁄ bagian tinggi kertas
4
- dikeluarkan dari chumber

Kertas saring whatman + larutan

cuplikan + serapan pelarut

- diukur jarak noda

- dicelupkan dalam larutan kalium dikromat
untuk memperjelas noda
- dihitung Rf standard an cuplikan

Rf = 1,52 cm
 IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Pengamatan

1. Data pengamatan

No. Perlakuan Hasil Pengamatan

1 6 mL akuades + 4 mL etil asetat + 80 mL 2-
propanol + 2 tetes asam asetat Larutan Bening
(dimasukkan ke dalam chamber)
2 2,5 gram kalium dikromat dimasukkan ke
dalam labu takar 100 mL + akuades sampai
batas tera, dikocok hingga larut kemudian
dimasukkan dalam botol gelap
3 diambil beberapa tetes SnCl2 di totolkan pada 3,8 cm (jarak titik)
kertas saring kemudian di celupkan dalam
chamber yang berisi pelarut 2,5 cm (jarak noda ke
jarak pelarut)
4 Kemudian kertas saring dicelupkan dalam
wadah yang berisi larutan kalium dikromat

2. Analisis Data

diketahui : Jarak noda ke pelarut = 2,5 cm

Jarak titik = 3,8 cm

ditanyakan : Nilai Faktor Retensi (Rf ) ... ?

Penyelesaian:

jarak gerak zat terlarut

Rf =
Jarak gerak pelarut

3,8 cm
=
2,5 cm

= 1,52 cm
B. Pembahasan

Kromatografi sebagai teknik pemisahan campuran didasarkan atas

perbedaan distribusi dari komponen-komponen campuran tersebut diantara dua

fase, yaitu fase diam (padat atau cair) dan fase gerak (cair atau gas). Kromatografi

melibatkan pemisahan terhadap campuran berdasarkan perbedaan-perbedaan

tertentu yang dimiliki oleh senyawanya. Perbedaan yang dapat dimanfaatkan

meliputi kelarutan dalam berbagai pelarut serta sifat polar. Kromatografi biasanya

terdiri dari fase diam (fase stasioner) dan fase gerak (fase mobile). Fase gerak

membawa komponen suatu campuran melalui fase diam, dan fase diam akan

berikatan dengan komponen tersebut dengan afinitas yang berbeda-beda. Jenis

kromatografi yang berlainan bergantung pada perbedaan jenis fase, namun semua

jenis kromatografi tersebut berdasar pada asas yang sama.

Kromatografi kertas sebagai bentuk kromatografi yang paling sederhana,

mudah dan murah, banyak digunakan untuk identifikasi kualitatif walaupun untuk

analisa kuantitatif. kromatografi dalam fasa diam, berupa air yang terikat pada

selulosa kertas sedangkan fasa organiknya berupa pelarut organik non polar.

Susunan serat kertas membentuk medium berpori yang bertindak sebagai tempat

untuk mengalirkan fase bergerak. Pemilihan kertas menjadi pertimbangan adalah

tingkat kesempurnaan pemisahan, dan kertas yang digunakan pada percobaan ini

yakni kertas saring whatman.

Pemisahan dengan kromatografi kertas prinsipnya sama dengan

mekanisme pada kromatografi kolom. Adsorben dalam kromatografi kertas adalah

kertas saring. Sampel yang akan dianalisis ditotolkan ke ujung kertas berupa zat

warna kemudian digantung dalam wadah sehingga dasar kertas saring dicelupkan

ke dalam pelarut polar yang mengisi dasar wadah.

Perlakuan pertama pada percobaan ini yakni persiapan kertas saring

whatman diukur dengan garis sebesar 7 x 2 cm dan perlakuan kedua yakni

dilakukan penotolan pada garis yang telah diberi tanda menggunakan larutan

warna (tetesan cuplikan) berupa SnCl2 dan dimasukkan kedalam chumber,

chumber berfungsi sebagai alat terjadinya pencampuran antara pelarut dengan

noda atau sampel yang akan dianalisis.

Perlakuan ketiga yakni kertas saring yang telah ditetesi cuplikan

dimasukkan kedalam chumber dan ditutup didiamkan hingga meresap pada kertas

hingga ¾ bagian dari kertas. Ketika sampel bahan kimia berwarna ditotolkan pada

kertas saring, pemisahan warna-warna dari sampel akan terjadi ketikan ujung

kertas dicelupkan ke dalam pelarut. Pelarut berdifusi menaiki kertas, melarutkan

berbagai molekul dalam sampel sesuai polaritas molekul solut dan pelarut.

Perbedaan struktur kimia untuk masing-masing molekul, probabilitas perbedaan

polaritas sekecil apapun pasti ada. Semakin tinggi kelarutan molekulnya, semakin

jauh migrasinya pada kertas. Jika suatu bahan kimia bersifat sangat non-polar, ia

tidak akan larut dalam pelarut yang sangat polar.

Perlakuan terakhir yakni kertas saring yang telah dimasukkan kedalam

chumber tersebut diukur jarak nodanya, lalu dicelupkan kembali kedalam larutan

kalium dikromat dengan tujuan untuk memperjelas noda. Noda-noda berwarna

pada kertas dengan jarak yang berbeda-beda dari garis awal. Noda-noda ini

selanjutnya disebut sebagai kromatogram.

Pengukuran jarak noda ke jarak pelarut diperoleh hasil sebesar 2,5 cm dan

pengukuran jarak titik sebesar 3,8 cm, sehingga dengan diketahuinya masing-

masing jarak noda dan jarak titik nilai faktor retensi dapat ditentukan, dimana

faktor retensi adalah perbandingan jarak tempuh zat terhadap jarak tempuh pelarut

sebesar 1,52 cm.

 V. KESIMPULAN

Berdasarkan tujuan dan pembahasan ada percobaan kromatografi kertas

maka dapat diambil kesimpulan bahwa prinsip dasar pada kromatografi kertas

adalah berdasarkan kromatografi partisi (cair-cair) dimana dengan adanya

perbedaan kelarutan pada tiap-tiap komponen yang akan dipisahkan berdasarkan

fasa diam dan fasa gerak dan nilai Rf yang diperoleh sebanyak 1.52 cm.
 DAFTAR PUSTAKA

Afriyeni, H dan Nila, W. U., 2016, Identifikasi Zat Warna Rhodamin B Pada
Lipstik Berwarna Merah Yang Beredar Di Pasar Raya Padang, Jurnal
Farmasi Higea, 8 (1).

Balammal dan Saravana, K., 2014, A Review On Basic Chromatographic

Techniques, Indian Journal of Pharmaceutical Science & Research, 4(4).

Coskun, O., 2016, Separation techniques: Chromatography, North Clin Istanbul,

doi: 10.14744/nci.2016.32757.

Dhindsa, K. S dan Deepak, S., 2014, Chromatographic Analysis of Free Amino

Acid of Acrida Luqubris A. Giqantia and Chrotogonus Trachypterus, The
International Journal Of Science & Technoledge, ISSN 2321 – 919X.

Mahmudi., Saiful., Khairan., dan Rinaldi, I., 2015, Penentuan Waktu Mati
Memanfaatkan Deret Homolog Alkilparaben Pada Rp-Hplc Dalam
Sistem Pelarut Metanol, Jurnal Natural, 15(2).