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UNIVERSIDAD DE LOS ANDES| LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR

INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO

1.

A. R/ Todo dio negativo ya que no logramos observar ninguna banda, probablemente por errores
en la preparación del gel de agarosa.

B. Se debe ver una banda por pozo, no pudimos observar ninguna banda en el transiluminador
debido a que se pudieron haber cometido varios errores durante el desarrollo de la PCR, por
ejemplo, errores sistemáticos en la extracción del ADN o en la preparación del gel para el corrido
electroforético.

C. El tamaño que se esperaba observar de la banda en el producto de la PCR debía ser entre cero y
407 Pb, que fue la porción de ADN de Candida albicans que se quería amplificar.

D.

R/Un control positivo es un control experimental que da un resultado positivo al final del
experimento. Este tipo de prueba siempre da buen resultado como un “si”. Es una buena indicación
para saber si la prueba funcional. Por lo tanto, los controles positivos se utilizan para evaluar la
validez de una prueba. En nuestro experimento el control positivo fueron las dos muestras que
contenían ADN pero que por errores en la práctica no se lograron evidenciar las bandas que estos
debían dar.

Un control negativo es un control experimental que no da una respuesta a la prueba. El control

negativo tampoco está expuesto a la prueba experimental directamente. Se realiza en paralelo al
experimento como un experimento de control. En nuestro caso, el control negativo fue la muestra
que se le adiciono solamente agua y no contenía ADN de Candida albicans.

Referencia:

Espinosa, L. ( s.f.). Guía práctica sobre la técnica de PCR. Las herramientas moleculares, 517-549.
Obtenido de http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/530/cap17.pdf

E.

R/ No se logró observar nada en el gel de agarosa, debido a múltiples errores que pudieron afectar
el corrido electroforético, el gel de agarosa o la muestra de ADN, por ejemplo, el congelamiento y
el descongelamiento de los reactivos probablemente no se hizo de manera adecuada, lo que pudo
cambiar los gradientes de concentración dentro de los tubos de PCR; por otro lado el TBX pudo estar
en mal estado produciendo errores en la electroforesis e impidiendo la correcta observación del
producto de PCR. Otro factor que pudo estar implicado en el error del experimento es no realizar
de forma correcta el pipeteo y otras técnicas usadas en el laboratorio, también la contaminación de
los instrumentos pudo influir degradando las muestras de ADN. Consideramos que la mejor forma
de mejorar la realización de PCR y visualización de su producto es siendo más estrictos en los
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métodos presentados en la literatura y comprobando el estado optimo de los materiales (reactivos,

instrumentos de laboratorio, etc.), a la vez que la esterilidad de estos para evitar contaminación de
las muestras.

Referencia:

Espinosa,L. ( s.f). Guía práctica sobre la técnica de PCR. Las herramientas Moleculares, 517-549.
Obtenido de http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/530/cap17.pdf

2.

R/ Logramos determinar el peso molecular de la banda

mediante la construcción de una gráfica en la cual el eje x
representa Dx y el eje Y el log M.W, posteriormente se realizó
una regresión lineal que nos permitió encontrar el valor de X, lo
que nos permitió encontrar el valor de y al que le sacamos el
antilogaritmo, el cual es el valor correspondiente al peso
molecular de banda de estudio, que en nuestro caso fue de
971,4