UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE ENFERMERÍA

´´PRACTICA # 03´´

TEMA: Demostración de los factores que modifican la actividad de

una enzima

ALUMNO : Manuel Orlando Zamata Sánchez

ASIGNATURA: Bio-Quimica

AÑO : 2018

CICLO : 2° Segundo Ciclo

DOCENTE : Q. F. Nelson Ursia Yengle

 DEMOSTRACIÓN DE LOS FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD DE UNA ENZIMA

I.- JUSTIFICACIÓN

Las enzimas son compuestos de naturaleza proteica que tienen la propiedad de acelerar las
reacciones químicas sin modificar la constante de equilibrio del sistema. Su actividad es
afectada por diversos factores:

• Concentración de sustrato • Inhibidores

• PH • Fuerza iónica, constante dieléctrica,
• Concentración de enzima etc.
• Temperatura
II.- OBJETIVOS

Al término de la práctica estaré en condiciones de:

 Demostrar el efecto de los factores en una acción enzimática: concentración de sustrato,

concentración de enzima, concentración de pH y temperatura sobre la actividad
enzimática de la amilasa salival sobre el almidón.
III.- MATERIAL Y REACTIVOS:

 Solución de almidón 1%  Solucion salival

 Solucion de Na al 2%  Alcohol etílico
 Tubos de ensayo  Gradillas
 Buffer fosfato pH = 6,6  Agua destilada
 Buffer fosfato pH = 8,0  Frasco lavador
 Pipetas  Solucion de lugol
 Hielo  Solucion de HCL 0,05 N
IV. - PROCEDIMIENTO:

COMPONENTES I II III IV V VI

Solución de almidón 1% 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL

Buffer fosfato pH = 6,6 5 mL 5 mL 5 mL ----- 5 mL 5 mL

Buffer fosfato pH = 8,0 ----- ----- ----- 5 mL ----- -----

Solucion de Na al 2% 1,4mL ----- 1,4mL 1,4mL 1,4mL 1,4mL

Agua Destilada 2,6mL 3,4mL 2,4mL 2,0mL 2,0mL 2,0mL

Pre incubar a 37° C por 5 min del tubo I al tubo V y el tubo VI se coloca en hielo

Solucion salival 10% ------ 0,6mL 0,2mL 0,6mL 0,6mL 0,6mL

Volver a colocar a baño maria a 37°c, durante 20 min. Desde el tubo I hasta el tubo V. El tubo VI
colocarlo en hielo.

ACTIVIDAD ENZIMATICA

COMPONENTES IA IIA IIIA IVA VA VIA

Alicuota del sist. anterior 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL

Soluc. HCL 0,05 N 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL

Soluc. Lugol 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL

V.- RESULTADOS

 Antes de agregar la amilasa salival:

Todos los tubos (I, II, III, V y VI) eran incoloros, excepto el tubo IV que poseía una
coloración ligeramente amarilla debido al buffer fosfato pH 8
 Luego de agregar la amilasa salival y el lugol:
Se observa que en el tubo I se encuentra de un color azul oscuro, y el resto de tubos (I, II,
III, V y VI) eran de color amarillo y algunos poseían pequeños trocitos de color azul

VI.- DISCUSIÓN

 En el tubo I :
Al no poseer enzima no se degrado al almidón, dando la color correspondiente con el
lugol (azul oscuro)
 En el tubo II:
Hubo una degradación del almidón dando el color amarillo por presencia de la enzima
(amilasa salival), pero al no poseer NaCl no hubo una degradación completa dándose a
sobrar pequeños grupitos de color azul (almidón)
 En el tubo III, IV, V, VI:
Hubo una degradación del almidón dando el color amarillo por presencia de la enzima
(amilasa salival) y con mayor eficiencia al poseer NaCl.

VII.- CONCLUSIÓN

Concluyo que los:

 Diferentes factores ambientales como la variación de pH, temperatura o presencia de algún

cofactor pueden afectar a la actividad enzimática.
 Variando los distintos factores que modifican la actividad enzimática de la alfa amilasa salival
pudimos determinar las condiciones óptimas a las que trabaja de mejor manera.

 La presencia del NaCl hace más eficiente el trabajo de catalizacion de la enzima sobre el
almidón.

VIII.- BIBLIOGRAFÍA

https://www.youtube.com/watch?v=Kz7u1AB0kzk
ps://es.slideshare.net/WilmerPea2/determinacin-de-actividad-de-peroxidasa
J. Luque, y A. Herráez (2001) Biología Molecular e Ingeniería Genética. Ediciones Harcourt.
C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.G. Ahern (2002) Bioquímica. 3ª Edición. Pearson Educación.
P. Roca, J. Oliver y A.M. Rodríguez (2003) Bioquímica. Técnicas y Métodos. Editorial Hélice.
XI.- ANEXOS