ACTIVACION DE CELULAS T Facultad de Cs Exactas, Físico-Químicas y Naturales

Estructura del TCR

Inmunología (3077)
2018

Dra. Noemí Amalia Rodríguez

 OBJETIVOS DE APRENDIZAJE

 Describir las características del receptor antigénico del LT

 Conocer los mecanismos de activación de las células T-CD4+ y CD8+
 Entender los mecanismos efectores que se ponen en marcha luego
de la activación.
 Estudiar las bases de la cooperación T/B en la activación de los LB2
 ACTIVACION DE LA CELULA T

Areas T de órganos secundarios: cuando la CPA presenta péptidos

Ubicación antigénicos a un LTh en reposo (CD4+-Th0). CPA interactúa con LT por
medio del complejo péptido-CMH y TCR.

Se induce Activación y proliferación de Th, por mecanismo autócrino dependiente de

IL-2 que secreta el mismo linfocito.

Grandes cantidades de LTh, lo que posibilita que algunos de ellos

Se producen interactúen luego con LB que presenten el mismo epitope en el mismo tipo
de CMH-II o con otros LT (CD8+).

Es necesario que moléculas co-estimulatorias, presentes en la membrana de las dos

células, se reconozcan y reaccionen y que la CPA secrete sustancias solubles que
colaboran en la estimulación del linfocito.
Activación de LT vírgenes y efectores por el Ag

• Ag trasportados por CDs hasta el

ganglio linfático, son
reconocidos por LT vírgenes, que
son activados para diferenciarse
en LT efectores y de memoria.
• Los efectores pueden
permanecer en los ganglios
linfáticos o migrar a los tejidos
infectados.
• En el foco infeccioso los LT
efectores son activados por un
nuevo contacto con el Ag para
realizar las funciones efectoras
(Ej: activación de macrófagos)
 La activación de LT requiere de:

Participan moléculas de adhesión, aproximan a

Adhesión las células y las mantienen unidas:
*CD58 CD2 *LFA-1 ICAM-1 *VCAM VLA-4

Participan el complejo péptido-CMH y el TCR, la molécula

CD4 (Ag por vía exógena, bacterias, parásitos) o CD8 (virus o
patógenos del interior celular), y CD3.
Reconocimiento
Primera señal de activación
Específica

Producida por CPA. Involucra moléculas: B7 que se une a

CD28 del LT
Co-estimulación Segunda señal de activación
Inespecífica
Si B7 se une a CTLA-4 señal de inhibición.

* B7: B7.1/B7.2= CD80/CD86

 Sinapsis Inmunológica

El reconocimiento de péptido-CMH inicia el proceso que Formación de la sinapsis inmunológica

conduce la inducción de los complejos de señales

CD4/8 asociados a motivos ITAM fosforilados de las

cadenas ζ, generan sitios de ataque para ZAP-70 (inicia la
cascada de activación).

Luego que el TCR reconoce el Ag presentado por CPA, se producen transmisiones para
la activación de los procesos inmunológicos. La sinapsis estabiliza y ayuda en la
interacción entre las dos células, que debe prolongarse durante tiempo suficiente para
que la RI sea llevada a cabo
Modelo de reconocimiento de un complejo péptido-CMH por LT

Reconocimiento del
Ag: señal específica

Esquema de una molécula del CMH unida a un péptido, que lo

muestra al TCR del LT, que a su vez reconoce dos aminoácidos
polimórficos de la molécula del CMH y uno del péptido.
Receptor de reconocimiento antigénico de las células T (TCR)

Heterodímero:
 Dos subunidades proteicas, α/β
(γ/δ), glucosiladas, unidas por
puentes disulfuro.
• Cada cadena: un dominio
extracelular variable (V) y uno
constante (C), un dominio
transmembrana hidrofóbico y una
porción intracitoplasmática
 La yuxtaposición espacial de Vα y
Vβ determina el sitio de
reconocimiento antigénico del Rc.
 Cada clon de LT expresa un Rc con
especificidad distinta y reconoce al
Ag (péptido) junto con CMH.
 Transduce la señal de activación al
Complejo CD3
interior de la célula.

 Monómeros γ, δ y ε unidos
no covalentemente.
 También forma parte cadena
ζ, homodímero que posee
gran parte de la molécula en
el citoplasma con regiones
ITAM, ricas en tirosinas y
susceptibles de ser
fosforiladas en el proceso de
transducción de señales de
activación hacia el interior
celular.

 CD4 y CD8: moléculas co-receptoras.

La asociación con TCR favorece la
activación celular.
 Para activarse, un LT debe recibir distintas señales:

Generada por la interacción del TCR con el

Específica
complejo péptido-CMH.

Por interacción de moléculas accesorias expresadas

en LT y CPA.
• Imprescindible para la activación de LT; depende de
moléculas co-estimulatorias.
Inespecífica • Induce al LT a producir IL-2 y IL-2R, la célula
prolifera y se diferencia, generando células efectoras
y de memoria.
• Sin co-estímulo, no se producen estas citoquinas, se
genera un estado de no respuesta o anergia
irreversible y la célula muere.
 Inespecíficas (mediadas por
Señales de activación del LT
moléculas co-estimulatorias)

B7.1 y B7.2 (CD80/86) (superfamilia

de Ig): se expresan sólo en CPA.
Estimulan proliferación de LT.
Interactúan con moléculas de LT.

 CD28 (superfamilia de Ig): se expresa

en 95% de LT-CD4 y 50% de LT-CD8.
La unión a B.7 induce co-estimulación
Señal específica de LT naive, generando la síntesis de
la cadena α del IL-2R y producción de
IL-2, (induce expansión clonal T).

 CTLA-4: Homóloga a CD28. Envía

Señal inespecífica
señales inhibitorias de activación
celular. Limitan la producción de IL-2
y regulan la respuesta proliferativa
de los LT activados. Su expresión es
transitoria.
Interacciones moleculares entre CPA y LT
 Funciones de los coestimuladores en la activación del LT

A. CPA en reposo expresan pocos

o ningún coestimulador y no
A activan los LT vírgenes (el
reconocimiento del Ag sin
coestimulación hace a los LT
anérgicos (falta de respuesta)).
B. Microorganismos y citoquinas
producidas durante una
B respuesta Innata activan las
CPA para que expresen
coestimuladores (moléculas
B7). Las CPA se hacen entonces
capaces de activar a LT
vírgenes. CPA activadas
también producen citoquinas
como IL-12, que estimulan la
diferenciación de los LT
vírgenes en células efectoras.
 Esquema de las interacciones moleculares en la activación de LT

Interacción CD40 - CD40L CD40L: proteína de membrana

de la superfamilia del TNF-α,
se expresa en los LT activados.

La interacción CD40L en LT con CD40 de CPA aumenta las respuestas de los LT (activa a
las CPA). El reconocimiento del Ag por LT junto con la coestimulación induce la
expresión del CD40L en LT activados. CD40L une a CD40 situado en las CPA y puede
estimular la expresión de moléculas B7 y la secreción de citoquinas que activan los LT.
 En qué consiste la activación?

LT naive expresan constitutivamente Rc-

IL-2 de baja afinidad (expresan cadenas
βγ, no expresan α).
La activación de LT conduce a la
producción de una cadena α (CD25) del
Rc-IL-2, formando un heterodímero αβγ,
Rc de alta afinidad, que permite la
expansión del LT en respuesta a
concentraciones fisiológicas de IL-2.
Al expandirse, cada LT producirá (entre 5
a 8 días) una progenie de 10.000 células
hijas (14 a 20 divisiones celulares).
 La activación de CD28 estimula en las
células T la síntesis de la proteína Bcl-XL Regulación de la expresión del Rc-IL-2.
(promueve la supervivencia de las células • LT en reposo expresan IL-2Rβγ (afinidad moderada
expandidas). por IL-2).
• La activación de LT por el Ag, coestimuladores y la
propia IL-2 lleva a la expresión de la cadena IL-2Rα y
del complejo IL-2Rαβγ (afinidad alta).
Fases de las respuestas de los L T

• El reconocimiento de Ag por LT
induce la secreción de
citoquinas (IL-2).
• En los LT-CD4 se induce la
expansión clonal como resultado
de la proliferación celular y
diferenciación de LT en células
efectoras o de memoria.
• En la fase efectora, LT-CD4+
efectores responden al Ag
produciendo citoquinas que
ejercen acciones, como el
reclutamiento y activación de
los leucocitos (macrófagos), la
activación de LB o LT-CD8+
(responden matando a otras
células).
 Mecanismos de Se inducen interacciones moleculares que
transfieren información desde el receptor hacia
activación intracelular
componentes ubicados en citoplasma y núcleo
CASCADA de activación: Se produce por fosforilaciones generadas por señales
del complejo TCR-CD3, llegan al núcleo de la célula y regulan la expresión génica.

Vías transduccionales activadas

en el LT a través del TCR

Las señales de activación

llegan al núcleo y
transcriben genes

Citoquinas (IL-2, IL-4,

NFAT NFκB AP-1 Transcripción de genes IL-5, etc.); receptores.
 Diferenciación de LT-CD4+

La activación implica la diferenciación en diversos perfiles La interacción LT-CD4+ naive

con Ag en tejidos linfoides
periféricos induce la
diferenciación a perfiles Th1,
Th2, Th17 (activa diferentes
efectores).
 Predominio Th1: se activan
LT-CD4+ naive funciones inflamatorias de
macrófagos y respuesta celular
frente a parásitos intracelulares.
 Diferenciación a LTh2:
colaboran en las respuestas
humorales y en la producción de
eosinófilos y mastocitos.
Citoquinas presentes durante las
primeras fases de activación y
proliferación de LT-CD4+
definen el perfil
Esquema de diferenciación de las células T CD4+

Th1 Th2
 Genera estímulos en LT: se activa, se expresan genes
El reconocimiento péptido-CMH
que estaban silentes, algunos codifican citoquinas
y moléculas co-estimulatorias
capaces de activar otras células y participar en la
inducción de su propia división celular.

El LT cumple con dos funciones

 AMPLIFICA LA RESPUESTA INMUNE: modifica el comportamiento de otras células.
 SE DIVIDE: origina nuevos LT que expresan el mismo TCR clonotípico, aumenta el
número de células que reconocen al Ag en un 2° encuentro.
 Cuando un LT interacciona con Ag a través del TCR específico, se activan mecanismos
bioquímicos: la célula en reposo (G0) entra en ciclo celular y pasa a fases G1/S.
 Como consecuencia de ello la célula sintetiza moléculas funcionalmente activas, que le
permitirán cumplir funciones específicas. Es decir, que en términos estrictamente
inmunológicos, UNA RESPUESTA INMUNE SE HA PUESTO EN MARCHA.
 Si predominan Th1 se activan las funciones inflamatorias de macrófagos y la Respuesta
Celular frente a parásitos intracelulares.
 Si se diferencian células Th2, éstas actuarán colaborando en las respuestas humorales.
Citoquinas producidas por LTh1
y propiedades más importantes

IL-2
Activación de LB, LT,
células NK y macrófagos

INF-γ
Inhibición del perfil Th2.
Estimulación de células Th1.
Activación de células NK y
macrófagos
 Citoquinas producidas por células Th2
y propiedades más importantes

 IL-4  IL-13
Estimula el Estimula el
crecimiento y la crecimiento de
diferenciación de LB. Suprime la
LB. Activa células función de los
cebadas. Inhibe macrófagos
perfil Th1

IL-10
 IL-5 Inhibe la función
Estimula el IL-9 de las células
crecimiento de LB. Factor de Th1. Suprime la
Moviliza y activa crecimiento de función de los
eosinófilos LT macrófagos
 Citoquinas tipo Th1 y Th2 y mecanismos de acción

 Activación de LT citotóxicos  Producción de IgA

 Activación de macrófagos  Producción de IgE
 Producción de IgG escasa  Producción de IgG escasa
Esquema de las interacciones de un LT-CD4+ y otros linfocitos

Célula
CDs
infectada

LT-CD8+ LB

LT-CD4+ LT-CD4+
Th1 Th2

CDs
 Consecuencias de la activación linfocitaria

 Proliferación: expansión clonal de las células activadas.

 Migración: inducción de receptores de quimioquinas y moléculas de

adhesión intercelular movilización hacia el foco inflamatorio.

 Polarización: cambios en el citoesqueleto y aparato secretor:

 las vesículas secretoras se dirigen al polo celular en el que se
inicia la señal de activación.
 un polo de la mitosis se sitúa en el sitio de interacción.

 Inducción de actividades efectoras:

Producción de citoquinas
Inducción de actividad citotóxica
Producción de Ac: incremento de la afinidad y cambio de isotipo.
Generación de LT y B de memoria
 Consecuencias de la activación de L T-CD4+

Th1
Th2
La activación de LT-CD4+ naive genera diferentes efectores Th17
Thf
Treg

Todas estas células CD4+ efectoras requieren reconocer nuevamente al Ag y

volverán a activarse, pero no necesitan reconocer moléculas co-estimulatorias

 La activación de un determinado perfil no es excluyente de otro.

Ciertas infecciones virales pueden activar un perfil Th1 (IFN-γ) y Thf (IgG).
Ante M. tuberculosis Th1 y Th17.
Ante helmintos Th2 y Thf .
La infección por T. cruzi induce un perfil Th1 y Th2.
 Activación y diferenciación de LT-CD8+ ( citotóxicos , TC)

se activa en los órganos linfoides secundarios, únicos

LT-CD8+ naive
entornos en los que reciben las señales necesarias.

En área T: interactúan con CDs para detectar péptidos presentados por CMH-I.
Si reconocen péptidos antigénicos, se activan, expanden y diferencian en LT
efectores citotóxicos (Tc).

Específica: por interacción TCR-CD3-CD8 con péptidos-CMH-I de una

CPA infectada.
Coestimulatoria: suministrada por la misma CPA (unión B7 - CD28).
REQUIEREN 2 SEÑALES Una 2º señal de magnitud suficiente para activar LT-CD8+ naive y
generar memoria es por interacción con LT-CD4+ (Th1) Ag-específico.

DEBEN RECIBIR ESTÍMULOS POR PARTE DE IL-2

 Esquema de activación de LT-CD8+ naive:
colaboración de los LT CD4+ (Th1)
1- Reconocimiento de péptidos antigénicos
LT-CD8+ naive requiere presentados por CMH-I a través del TCR.
señales aportadas por CDs
2- Co-estimulatoria. La intensidad de co-
estimulación requerida para activar LT-CD8+ es
mayor que el requerido por los LT-CD4+ naive.

CDs expresa niveles suficientes de moléculas co-

estimuladoras (la célula infectada es una CPA): aporta
2º señal adecuada al LT-CD8+, al menos para
inducir una respuesta primaria.
CDs no expresa niveles suficientes de moléculas
co-estimuladoras (la célula infectada no es una CPA):
requiere colaboración LT-CD4+ (Th1) que
interactúa con CDs, se activa y expresa CD40L (une
CD40 de CDs); induce señal estimuladora.
Aumenta expresión de co-estimuladoras en CDs,
que estará en condiciones de inducir 2º señal
adecuada que active LT-CD8+ naive y genere
memoria inmunitaria.
 Papel de los LT cooperadores (Th1) en la diferenciación de LT-CD8+

LT-CD4+ Th1 promueven el desarrollo de LT-CD8+ por secreción de citoquinas

que actúan directamente sobre los LT-CD8 (A) o activación de CPA para que
sean más eficaces en la estimulación de la diferenciación de los LT-CD8 (B).
 Consecuencias de la activación de los LT-CD8+
Citotoxicidad mediada por células Tc

 El proceso de activación, expansión clonal y diferenciación de LT-CD8+ se

completa 5 días después del encuentro con el Ag.
 En este período los LTc sintetizan granzimas y perforinas.
 LTc efectores migran hacia los tejidos inflamados para detectar células infectadas
por el mismo patógeno que indujo su activación.
 En el sitio de infección contactan con las células del tejido.
 Si reconoce el péptido, aumenta la afinidad de moléculas LFA-1 por sus ligandos
y se activa el potencial citotóxico, llevando a la célula blanco a un proceso de
apoptosis.
Mecanismos efectores:
 Por liberación de granzimas y perforinas
 A través del sistema FasL/Fas
 Luego de volcar el contenido de los gránulos sobre la membrana de la célula
blanco, el LTc se separa y puede volver a reconocer otras células infectadas.
 El LT-CD8+ también puede producir y secretar citoquinas inflamatorias como
IFN-γ y TNF-α
 Citotoxicidad directa específica Elimina células propias infectadas por virus o células tumorales.
Reconocen a la mayoría de células nucleadas (restringidos por
(mediada por LTc)
CMH-I propio).

Fases del mecanismo citotóxico:

 Fase de Activación y diferenciación de precursores hasta LTc
 Fase efectora: destrucción de célula blanco, diferenciable en:
Mecanismos de Citotoxicidad
•Adhesión y contacto LTc y célula blanco.
• Golpe letal
• Disociación del LTc A

• Destrucción de la célula blanco

A- Mecanismo secretor: Granzima-Perforina

B- Mecanismo Fas-FasL
 Activación de los L B
Mecanismo de cooperación entre LT y LB en la RI humoral

 RESPUESTA INMUNE HUMORAL: es inducida por cooperación LTh2-LB.

Se lleva a cabo luego de la activación de LT por CPA en la zona T del órgano secundario.
LT activados proporcionan señales que activan a células B para que proliferen y se
diferencien en células plasmáticas secretoras de Ac (vida media 4 semanas, no tienen Ig
de superficie ni CMH-II).
Los LTh2 activan sólo los LB que reconocen el mismo Ag que ellas.
Los LB reconocen Ag nativos, en solución y sin CPA o restricción MH.
Presentación del antígeno de los linfocitos B a los LTh2

• Ag proteínicos unidos a Igm son

interiorizados por endocitosis y
procesados, y los fragmentos
peptídicos se presentan asociados a
CMH-II.
• LTh2 que se activaron por CDs
reconocen complejos péptido-CMH-II
situados en LB y estimulan respuestas
del LB.
• LB activados expresan
coestimuladores que aumentan las
respuestas de LTh.
• Como consecuencia de la interacción
LB-LTh2, se incrementa en el LB la
cantidad de IL-2R para la IL-2
sintetizada por el LTh2, que se une al
Rc y activa al LB, que finalmente se
diferencia en célula plasmática.
Esquema de procesamiento antigénico y
activación del LB
 • LT reconoce péptidos producidos por degradación antigénica
Mecanismo de cooperación LT-LB
• BCR del LB reconoce un epitope presente en el Ag intacto

Células B naive que pasan a través del tejido linfoide captan y presentan sus Ag específicos.
Las células circulantes atraviesan zonas T y establecen interacciones con LTh2 cuyos
receptores sensan péptidos presentados por CMH-II en la superficie del LB.
Se origina un foco primario de células B activadas y LTh.
El LT reconoce complejos péptido/CMH-II en el LB y sintetiza CD40L.
La interacción con CD40 del LB conduce a esta célula en reposo a la división celular.
LT sintetiza:
• IL-4: junto con CD40L induce la proliferación y expansión clonal de LB que se diferencia en
células plasmáticas secretoras de Ac.
• IL-5 y -6: estimulan la diferenciación de LB en células plasmáticas.
En LB se activan genes para la síntesis de Rc de IL-2 e IL-4, moléculas de adhesión y aumento
de moléculas CMH-II en la membrana, lo que facilita la presentación al LT de péptidos
provenientes de la degradación del Ag.
Esquema de activación de los LB
Mecanismo de cooperación LT-LB
 Fases de la Respuesta Inmune Humoral

La activación de LB la inicia el reconocimiento específico de Ag por BCR de estas

células. El Ag y otros estímulos, como los LTh, estimulan la proliferación y
diferenciación del clon específico de LB. La progenie del clon puede producir
IgM u otros isotipos de Ig (IgG), puede realizar una maduración de la afinidad o
persistir como células memoria.
 BIBLIOGRAFÍA DE CONSULTA
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2009
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