VALIDCION DE TRES DISTINTOS METODOS ANALÌTICOS PARA

IDENTIFICAR METALESPESADOS EN DIFERENTES TIPOS DE AGUA

Validation of three different analytical methods to identify heavy metals in different types of
water

Sánchez, Alonzo
Facultad de Ingeniería Química-Universidad Nacional Del Callao

RESUMEN
El propósito de este trabajo es evaluar la efectividad y validación de métodos analíticos para
determinar presencia de metales pesados en nuestras diferentes tipos de aguas. Los métodos
que se presentan son: Espectroscopia de absorción atómica (permite la identificación de
arsénico y selenio),Azul de molibdeno por espectrofotometría ultravioleta visible ( permite
identificar arsénico) y Método electro analítico por voltamperometria de redisolución anódica
( permite identificar plomo y cadmio). El primero cumplió los límites de exactitud y precisión
en su ejecución. El segundo cumple todos los parámetros de validación normados, lo que
garantiza una mayor confiabilidad en el trabajo analítico. Los resultados del último
demostraron que es posible el uso de esta técnica analítica para determinar trazas de estos
metales en agua potable con niveles de detección acorde a las normativas vigentes.

Palabras clave: metales pesados, validación, voltamperometria, espectroscopia,

espectrofotometría, redisolución anódica.

ABSTRACT

The purpose of this work is to evaluate the effectiveness and validation of analytical methods
to determine the presence of heavy metals in samples of different types of waters. The
methods presented are: Atomic absorption spectroscopy, Molybdenum blue by visible
ultraviolet spectrophotometry and Electroanalytical method by voltammetry of anodic
redissolution. The first met the limits of accuracy and precision in its execution. The second
one fulfills all the validated parameters of normative validation, which guarantees a greater
reliability in the analytical work. The results of the last one showed that it is possible to use this
analytical technique to determine traces of these metals in drinking water with levels of
detection according to the regulations in force.

Keywords: heavy metals, validation, voltammetry, spectroscopy, spectrophotometry, anodic

redissolution.
 INTRODUCCIÒN
A nuestro planeta le llamamos el planeta
azul porque estamos rodeados de agua: 71
% es agua y 29 % masa continental. Del
total de agua existente, 97,2 % lo
representan los océanos, es decir agua
salada, la cual no es apta para el consumo
humano; 2,15 % es agua de los glaciares,
cuyo acceso es muy difícil. El resto (0,65 %)
es agua para nuestro consumo.
El porcentaje de agua para el consumo
humano se ve afectado por diversas
variables.
Los diversos factores como los usos del
suelo, la producción industrial y agrícola,
los aumentos de población, y sus impactos
relacionados, continúan ejerciendo una
gran presión sobre los recursos de agua
alrededor del mundo. Al mismo tiempo, el
aumento de residuos municipales y
vertimientos, aguas de desagüe y
productos derivados de la industria,
además de los efectos climáticos globales y
desequilibrios ecológicos comprometen
aun más la calidad del agua.
Los elementos traza, que incluyen a los
metales pesados, llegan a los ecosistemas
acuáticos desde fuentes naturales y
antropicas. Los metales pesados se
encuentran entre los contaminantes
ambientales más importantes debido a su
toxicidad, permanencia y tendencia a
acumularse en los organismos acuáticos,
por lo que su estudio es necesario por el
riesgo ambiental que representan. Las
actividades humanas, tanto industriales
como urbanas, así como las prácticas
agrícolas, pueden incrementar la carga de
metales pesados en los ecosistemas
acuáticos o alterar sus ciclos naturales al
producir concentraciones elevadas en
algún comportamiento particular.
La importancia de la validación de un
método analítico cuantitativo radica en la
necesidad de generar resultados
confiables de los análisis de laboratorio. la
validación es el proceso que sirve para
confirmar que el equipo de análisis ,
método o sistema para una prueba
específica es el idóneo para el uso previsto
( Papadoyannis & Samanidiu, 2016)
Un método validado es parte del sistema
de gestión de calidad de un laboratorio ,
existen varios métodos como el método
espectrofotométrico basado en la
formación del complejo arsénico molibdico
de color azul, entre el arseniato y el
molibdato de amino en presencia de
sulfato de hidracina ( reductor(; el método
por espectroscopia de absorción atómica
por generación de hidruros para la
cuantificación de arsénico y selenio y el
método mediante voltamperometria de
redisolución anódica para cadmio y plomo.
En el presente trabajo, determinaremos la
eficiencia de tres métodos diferentes para
la determinación de metales pesados en
aguas.
MATERIALES Y METODOS
1. Método del azul de Molibdeno
( determinación de Arsénico)
Se utilizo un espectrofotómetro Genesys
UV visible con celdas de 1 cm de camino
óptico.
Para este método se utilizo un volumen de
50 Ml, donde se añadió dos gotas de metil
de naranja en solución y se neutralizo con
hidróxido de amonio diluido, hasta color
amarillo del indicador. Posteriormente, se
añadió gota a gota, acido clorhídrico hasta
color rojo, 10 mL de acido clorhídrico
diluido y 1 mL de solución de bromato de
potasio. Luego se calentó a temperatura de
50 ºC para oxidación del metilo naranja y
del arsénico; se adicionaron 5 mL de
molibdato de amonio y se homogenizo la
solución.
Finalmente, se añadieron 2 mL de solución
de sulfato de hidracina y se mantuvo
durante 10 minutos en baño de agua
hirviendo; se dejo enfriar a temperatura
ambiente y se enrazo.
Curva de calibración
Para la preparación de la curva de
calibración se utilizo una disolución de
patrón de arsénico a partir de la cual se
prepararon patrones en el intervalo de
concentración comprendido entre 0,02 y
0,20 mg/L. Se tratan los patrones igual que
a a la muestra. Se midió la absorbancia a
una longitud de onda de 660 nm.
Los parámetros de validación
determinados fueron linealidad, limite
cuantificación, limite detección y precisión
expuesto en la Norma Cubana ( NC TS
368:2010. Guía para la validación de
métodos de ensayo químicos para
alimentos).
2. Método por voltamperometria de
redisolución anódica(Determinación de
Cadmio y Plomo).
Se utilizo un electrodo de trabajo de
carbón vítreo, electrodo de referencia
Ag/Ag CI (1M KCI) y contra electrodo de
platino, llevados a cabo en una celda de un
comportamiento y tres electrodos,
conectada a un potenciostato CH
Instruments 122OB tipo portátil.
Parámetros de validación: Las curvas de
calibración fueron realizadas en dos rangos
de concentración, de 2ug.L-1 a 10 ug. L-1 y
40 ugL-1 a 120 ug L-1, los análisis fueron
realizados por quintuplicado para
determinar diferencias no significativas con
una confianza estadística del 95 %.
Los ensayos de reproducibilidad fueron
realizados durante 5 días diferentes . la
determinación de exactitud se llevo a cabo
mediante análisis de % recuperación
mediante adición estándar en muestras
reales . la comparación de resultados fue
llevada a cabo mediante el análisis
estadístico de varianza ANOVA y pruebas
parametricas.
Reactivos y muestras reales:
 Solución buffer acetato Ph
4.,6(medio electrolito).
 Solución patrón de 1000 mg.L-1
para preparar las curvas de
calibración de Cd y Pb.
 Reactivos de grado analítico, como
agua desionizada tipo II.
 Potenciostato portátil.
Se recolectaron 25 muestras de agua
potable tomadas en puntos aleatorios de la
ciudad de Machala-Ecuador; fueron
tomados volúmenes de 1 litro en sub-
volúmenes de 100 ml, en intervalos de 5
minutos en cada caso, que fueron
recolectados directamente del grifo de
cada punto de muestreo en envases de
polietileno nuevos previamente lavados
con acido nítrico 1 %, agua desionizada, y
secados. Las muestras fueron acidificadas a
pH=2 antes de su transporte al laboratorio
(American Public Health Asociation,1999).
Para la determinación se realizaron 5
determinaciones diarias durante 5 días.
3. Método por espectroscopia de
absorción atómica mediante
generación de hidruros (Determinación
de Arsénico y Selenio)
Se utilizo baño de María ( que alcance no
menos de 90ºC), espectrofotómetro de
absorción atómica Thermo Elemental,
Solar M5, generador de hidruros, thermo
Elemental , VP-90, Celda T de cuarzo,
calentador eléctrico EC-90, lámparas de
cátodo hueco del elemento a analizar (
Arsenico o Selenio).
El método de referencia aplicado es el
descrito en la edición 22 de los Metodos
Normalizados para el Analisis de Aguas
Potables y Residuales, métodos 3030
F,3114 B Y C Y 3500-SE A. APHA-AWWA-
WEF (2012), es aplicable a todo tipo de
aguas; las muestras y patrones deben
tratarse en igual manera, en especial en lo
relativo a la matriz acida.
Los equipos y materiales
-Baño de Maria que alcance no menos de
90ºC. espectrofotómetro de absorción
atómica thermo Elemental , solar
M5,generador de hidruros, thermo
Elemental, VP-90, Celda T de cuarzo,
calentador eléctrico EC-90, lámparas de
cátodo hueco del elemento a analizar
(Arsénico o Selenio).
 Para Arsénico se coloca 50Ml de
muestra en un erlenmeyer o vaso
de precipitados de 200-400Ml,
adicionar 5 Ml de hci concentrado,
mezclar, adicionar 5 Ml de KI al 10
% y dejar reposar almenos 30
minutos.
 Para Selenio , colocar 30mL
muestra en un tubo de ensayos o
vaso de precipitados, adicionar 15
mL de HCI concentrado , mezclar,
calentar por un periodo de 15 min
a 90 -100 ºC y dejar enfriar, para
aguas residuales o naturales

Las muestras se colectaron en frascos de

plástico limpios con acido nítrico. Las
muestras con turbiedad alta deben ser
filtradas por papel de filtro o membrana
de 0,45 um antes de analizarse, con el fin
de eliminar la materia suspendida. Pueden
almacenarse a temperatura ambiente
hasta seis meses, previa filtración (de ser
necesaria) y acidificación con HNO3 a Ph<2.

Para la preparación de reactivos, patrones

y muestras, se empleo agua desionizada.
Los reactivos son de grado analítico, Acido
clorhídrico concentrado, concentrado
Borihidruro de sodio: disolver entre 0,6 y
0,9 g de NaBH4 Y 0,1 g Na OH en 100 Ml
deagua. Solución patrón trazable del
analito correspondiente y solución
reductora de KI o Nal al 10 % m/v
En la Reducción –digestión de las muestras
, aguas potables o naturales no
contaminadas , se hizo una reducción para
garantizar estado de oxidación 3 y 4 As y
Se, respectivamente