PRÁCTICA III UNIDAD

MARCADORES DE INMUNOHISTOQUÍMICA EN CÁNCER DE MAMA

I.- INTRODUCCIÓN.
Inmunohistoquímica
Técnica que usa anticuerpos marcados con enzimas para la localizar antígenos en la
membrana celular, citoplasma o núcleo.
Inmunoperoxidasa
Método de inmuno-localización que utiliza la enzima peroxidasa como trazador de marcaje.
El lugar en que se produce la reacción antígeno-anticuerpo se visualiza añadiendo la enzima
más una sustancia denominada cromógeno.
Al actuar la enzima sobre el substrato interacciona a su vez con el cromógeno y da lugar a
un precipitado insoluble y coloreado.

II.- LUGAR DE TINCION DE MARCADORES TUMORALES

R. ESTRÓGENOS: NÚCLEO
R. PROGESTERONA: NÚCLEO
HERCEPTEST (HER 2 ): MEMBRANA CELULAR
Ki 67: NÚCLEO

III.- EVALUACIÓN DE R. ESTRÓGENOS, R. PROGESTÁGENOS:

 Tinción nuclear de células tumorales (no tinción membrana y/o citoplasma)
 Tinción nuclear de células ductales y lobulillares del tejido mamario no tumoral (si estas
tiñen, la muestra está bien procesada).
 No tinción de células mioepiteliales, estromales, ni inflamatorias (si estas tiñen, la
muestra está mal procesada

IV.- EVALUACIÓN DEL KI 67:

 Tinción nuclear de células tumorales (no tinción membrana y/o citoplasma)
 No tinción de células mioepiteliales, estromales, ni inflamatorias (si estas tiñen, la
muestra está mal procesada)

V.- EVALUACIÓN DE HER2:

• % e intensidad de tinción completa de membrana
• lectura sobre el componente infiltrante.
• ausencia de tinción en células normales
• punto de corte: 10% de las células

VI.- LECTURA MICROSCÓPICA:

 ubicarse en 400X
 elegir al azar 10 campos (± 2000 células)
 contar el # células positivas (expresión nuclear o de membrana celular).
 expresar el % en relación al # total de células tumorales.
 no considerar la tinción en el componente in situ

IV.- OBJETIVOS:
.- Identificar al microscopio de luz, la forma como colorean los marcadores de
inmunohistoquímica: receptor de estrógenos (RE), receptor de progesterona (RP),
Herceptest y Ki 67, en el tejido tumoral de mama.
.- Determinar la utilidad de estos marcadores para establecer la evolución y el tratamiento
de una paciente con cáncer de mama.
.- Interpretar la tinción para RE y RP usando la puntuación ALLRED SCORE.
.- Determinar la respuesta al Tamoxifeno según el resultado de RE y RP.
V.- MATERIALES:
Materiales
- Láminas preparadas de cortes histológicos de tumores malignos de la mama coloreados
con Hematoxilina-Eosina.
- Láminas preparadas de cortes histológicos de tumores malignos de la mama sometidos al
procedimiento de Inmunohistoquímica, con marcadores de receptores de estrógeno y
progesterona, Herceptest, Ki 67,

Equipos e instrumentos:
- Microscopios binoculares
- Proyector de multimedia.

IV.- RESULTADOS
Elabore un cuadro con los resultados de cada marcador de inmunohistoquímica,
obtenidos en cada subgrupo de trabajo.

V.- DISCUSIÓN
Analice los resultados e infiera la respuesta a la terapia que podría usar (ver tabla 2 y
gráfico 1)

VI.- CONCLUSIONES
Anote las conclusiones de los hallazgos de los casos estudiados.

VII.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

VIII.- ANEXOS

Tabla 1. PUNTUACIÓN PARA RECEPTOR DE ESTROGENOS (ER) Y RECEPTOR DE

PROGESTAGENOS (PR) — ALLRED SCORE.
Puntuación Puntuación
INTENSIDAD
para el % CÉLULAS para la
DE LA
porcentaje POSITIVAS intensidad
POSITIVIDAD
(PS) (IS)

0 0 0 ninguna

1 <1% 1 leve

2 1% to 10% 2 intermedio

3 10% to 33% 3 fuerte

4 33% to 66%

5 >66%

El PS y el IS se suman para una puntuación total:

Total Score (TS) = PS + IS Interpretación

0, 2 Negativo

3,4,5,6,7,8 Positivo
 Tabla 2. RESPUESTA AL TAMOXIFENO SEGÚN RESULTADO DE RE Y RP

% DE PACIENTES
STATUS DEL
QUE RESPONDEN
CARCINOMA
AL TAMOXIFENO

ER+ PR+ 75% to 80%

ER+ PR– 25% to 30%

ER– PR+ 40% to 45%

ER– PR– <10%

Tabla 3. PUNTUACIÓN PARA LA EVALUACIÓN DEL HER 2

EVALUACIÓN DEL
PUNTUACIÓN
HER 2
0 Negativo
1 Negativo
2 Dudoso
PATRÓN DE TINCIÓN
. No se observa tinción o
. Tinción débil en menos del10 % de las
células tumorales.
. Tinción de membrana débil, apenas
perceptible en> 10% de las células tumorales.
. Las células presentan tinción de membrana
incompleta.
Débil a moderada tinción de membrana
completa en más del 10% de las células
tumorales.

Fuerte tinción de membrana completa en más

3 Positivo
del 10% de las células tumorales.

Gráfico 1. Algoritmo para los resultados de HER 2