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Trujillo – Perú
2018
PRESENTACIÓN
Los autores.
INDICE
PRESENTACIÓN.............................................................................................................................. 2
I. GENERALIDADES: .................................................................................................................. 4
1. Título: ................................................................................................................................ 4
2. Equipo de investigación: ................................................................................................... 4
3. Tipo de investigación:........................................................................................................ 4
4. Área/ línea de investigación .............................................................................................. 5
5. Unidad académica: ............................................................................................................ 5
6. Institución y localidad donde se desarrollará el proyecto: ............................................... 5
7. Duración total del proyecto: ............................................................................................. 5
II. PLAN DE INVESTIGACIÓN: .................................................................................................... 5
2.1. Planteamiento y formulación del problema: ................................................................ 6
2.2. Antecedentes: ............................................................................................................... 6
2.3. Justificación: .................................................................................................................. 6
2.4. Objetivo general: ........................................................................................................... 7
2.5. Objetivos específicos: .................................................................................................... 7
2.6. Marco teórico: ............................................................................................................... 7
2.7. Hipótesis: ..................................................................................................................... 11
2.8. Materiales y metodología: .......................................................................................... 11
2.8.1. Materiales: .......................................................................................................... 11
2.8.2. Metodología: ....................................................................................................... 12
2.10. Cronograma: ............................................................................................................ 16
III. RESULTADOS ................................................................................................................... 17
3.1. ANÁLISIS DE RESULTADOS........................................................................................... 18
IV. CONCLUSIONES ............................................................................................................... 19
V. ANEXOS ............................................................................................................................... 20
VI. BIBLIOGRAFIA: ................................................................................................................ 22
I. GENERALIDADES:
1. Título:
1.1.Autores:
Agip Montenegro, María del Carmen.
magip1@upao.edu.pe
Barreto Abanto,Renzo
rbarretoa1@upao.edu.pe
3. Tipo de investigación:
4
4. Área/ línea de investigación
5. Unidad académica:
Universidad Privada Antenor Orrego
Escuela profesional de Medicina Humana
Facultad de Medicina Humana
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2.1. Planteamiento y formulación del problema:
¿Es Cryptococcus neoformans encontrado en las deyecciones de las
Columba livia, un factor desencadenante de ciertas enfermedades leves o
crónicas en el ser humano?
2.2.Antecedentes:
2.3.Justificación:
La identificación del cryptococcus neoformans en las heces de las
palomas de la ciudad de Trujillo, permitirá un mejor control y limpieza
de todo el panorama que se evidencia cotidianamente en parques
públicos, plazas, etc., donde niños y adultos gozan de momentos de
esparcimiento y que puede ser un foco infeccioso dañino para la salud.
El motivo principal de la presente investigación, es el de identificar el
hongo Cryptorcoccus Neoformans en las heces de las palomas y si este
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es un factor desencadenante de enfermedades siendo así un peligro
latente para la sociedad. Se valorará cualitativamente y cuantitativamente
el grado de peligro que representa para la salud.
2.4.Objetivo general:
2.5.Objetivos específicos:
2.6.Marco teórico:
CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS:
Es un hongo saprófito de amplia distribución mundial que se puede aislar
de suelos y heces de aves, principalmente de palomas.(1) Han sido
identificadas dos variedades del hongo, C. neoformans var. neoformans,
de distribución mundial, aislada de diversas fuentes y es la principal
responsable de las infecciones en pacientes inmunocomprometidos, y C.
neoformans var gatti de una distribución más restringida, y que se ha
identificado principalmente en individuos inmunocompetentes.(2)
AGENTE CAUSAL
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Su incapacidad para fermentar carbohidratos y asimilación de mio
inositol.
La producción de las enzimas ureasa y fenoloxidasa, con
producción de melanina.
Su estado teleomorfo es la filobasidiella neoformans..
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La enzima fenoloxidasa oxida las catecolaminas, convirtiéndolas en
melanina (melanogénesis).La melanina protege al criptococo de la
temperatura, la radiación, y algunas enzimas defensivas del hospedero. El
Sistema Nervioso Central, es rico en catecolaminas, en el LCR no hay
factor anticriptococósico, y sí hay sustancias estimulantes de su
crecimiento como la asparagina y la creatina, por eso, este germen tiene
un neurotropismo positivo.
EPIDEMIOLOGÍA
FACTORES PREDISPONENTES:
VIH
Tratamientos esteroideos prolongados
Linfomas
Sarcoidosis
Diabetes Mellitus
PATOGENIA
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Generalmente hay ausencia de respuesta inflamatoria y de necrosis, y las
lesiones se producen por la compresión y el desplazamiento de grupos
quísticos de hongos o granulomas incompletos. En los pulmones, la
respuesta inflamatoria es mayor, y puede incluir a macrófagos, células
gigantes, células plasmáticas y linfocitos. No está aclarado el papel de
algunas infiltraciones eosinófilas encontradas en pulmones de algunas
personas en contacto con el criptococo.
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Otros estudios no muestran diferencias significativas en la frecuencia de
aislamiento entre los excrementos secos y los frescos [8], o incluso aíslan
el microorganismo con más facilidad de heces frescas [9]. Parece que la
alta concentración de creatinina en el estiércol de paloma favorece el
crecimiento de los criptococos, pero, además, las heces de pichón, brindan
otras características: ambiente alcalino, hiperosmolar y rico en muchos
compuestos nitrogenados, además de la creatinina.
Las concentraciones de esta levadura en el excremento de paloma a
menudo exceden 106 organismos viables por gramo, su alta concentración
en este substrato puede estar también relacionada con su habilidad para
asimilar no sólo la creatinina, sino también la xantina, la urea y el ácido
úrico, compuestos abundantes en los excrementos de las aves aun así, C.
neoformans puede desaparecer cuando los detritos de estas aves se
mezclan con el suelo. De hecho, pocas veces se aísla de suelos
orgánicamente enriquecidos. Se ha estimado que la permanencia de la
levadura en deyecciones de palomas a la sombra, húmedas o desecadas,
puede ser de hasta más de dos años. Aunque hasta hace poco se
consideraba que la exposición directa al sol destruía el hongo o inhibía su
crecimiento, actualmente parece que la capacidad de las especies
patógenas de Cryptococcus para producir pigmentos melanoides no sólo
les permite sobrevivir a la radiación solar, sino que pueden llegar a utilizar
las radiaciones como energía metabólica.
2.7. Hipótesis:
El excremento de paloma con Cryptococcus N. influye significativamente
como factor de riesgo de contraer cryptocococis en pacientes
inmunodeprimidos.
2.8.1. Materiales:
Recursos humanos
Asesores de la investigación.
Estudiante investigador.
Personal de apoyo del laboratorio de microbiología,
Facultad de Medicina Humana de la Universidad Privada
Antenor Orrego.
Recursos de campo
Bolsas plásticas.
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Depresores de madera.
Cámara fotográfica.
Vehículo y gasolina.
Boletas de registro.
Bolígrafos.
Computadora.
Impresora.
Recursos de laboratorio
Láminas portaobjetos.
Masacrillas.
Láminas cubreobjetos.
Asas bacteriológicas.
Beakers( vasos de precipitado)
Tubos de ensayo.
Placas de Petri.
Recipientes de vidrio estériles.
Bandejas.
Guantes quirúrgicos no estériles.
Removedores plásticos.
Agar Sabouraud Dextrosa con cloranfenicol.
Cloranfenicol.
Solución salina estéril al 85%.
Medio líquido de urea.
Agua destilada estéril.
Cristal violeta.
Lugol.
Alcohol acetona.
Safranina.
Tinta china.
Papel absorbente.
Mechero.
Esterilizador de asas.
Incubadora.
Microscopio.
Balanza digital.
RECURSOS BIOLÓGICOS
Muestras coprológicas de palomas (Columba livia).
Palomas
CENTROS DE REFERENCIA
Biblioteca de la Facultad de Medicina Humana
Documentos electrónicos de internet.
2.8.2. Metodología:
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Para obtener una muestra homogénea y representativa, en cada sitio de
muestreo se definieron los siguientes puntos: suelo al abrigo del sol, suelo
con exposición al sol, paredes al abrigo del sol, paredes con exposición al
sol.
Procedimiento de laboratorio:
Homogeneización de la muestra
Luego se pesaron 5 gramos de heces y se le añadieron 30
miligramos de solución salina estéril al 85% y se homogeneizaron
agitándolas vigorosamente por 5 minutos.
Después se dejaron sedimentar por 10 minutos.
A partir del sobrenadante se obtuvo una asada y se sembró sobre
agar de “alpiste negro” Guizotia abyssinica.
La muestra se incubó en un medio aerobio a 27°C de tres a siete
días.
Transcurrido este tiempo, se examinó durante cinco días cada
muestra para identificar aquellas colonias con la presencia de un
pigmento oscuro, indicativo de la fenoloxidasa producida.
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1. En el centro de un portaobjetos, se colocó una gota de agua destilada
estéril, una gota de tinta china y unas gotas de la cepa aislada luego se
mezclaron suavemente.
Prueba de ureasa
1. Se tomó una asada del cultivo fresco. Luego se inoculó 1-1.5 ml. del
medio líquido de urea.
2. Se incubaron a 35°C por 24 horas.
2.9. Presupuesto:
Financiamiento: Autofinanciado
BIENES Y SERVICIOS
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Lápices unidad 3 01.50 04.50
PROCESAMIENTOS DE DATOS
SOPORTE TÉCNICO
Impresora
Microscopio
unidad 1 00.00 00.00
Incubadora
Esterilizador
Balanza digital
RECURSOS DE LABORATORIO
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Tubos de ensayo. unidad 20 00.00 00.00
2.10. Cronograma:
TIEMPO 2018
N° AGOSTO SET OCT NOV DIC
ACTIVIDADES 2 1 2 1 2 1 2 1 2
1 Elaboración del proyecto.
2 Presentación del proyecto.
3 Revisión bibliográfica.
4 Reajuste y validación de
instrumentos.
5 Trabajo de campo y captación
de información.
6 Procesamiento de datos.
7 Trabajo de laboratorio.
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8 Trabajo de laboratorio.
9 Trabajo de laboratorio.
10 Trabajo de laboratorio.
11 Trabajo de laboratorio.
12 Análisis e interpretación de
datos.
13 Elaboración del informe.
14 Presentación del informe.
15 Sustentación
III. RESULTADOS
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6 + -
7 + -
8 + -
9 + -
10 + -
Paloma A
Paloma B
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motivo se sembró 10 tubos de caldo glucosado, cinco de la paloma a y 5 de la paloma
b, para poder observar si la falta de cápsula de estos microorganismos se debía a que
no habían tenido los nutrientes necesarios o el crecimiento era demasiado lento, se
sembró también tubos de agar urea para poder observar la reacción de estor
microorganismos, ya que en la teoría nos indica que el Cryptococcus neoformans es
la única levadura que da ureasa positivo.
IV. CONCLUSIONES
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V. ANEXOS
Anexo 1: Preparación y selección de las muestras.
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Anexo 4: Obtención de muestras directamente de las palomas
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VI. BIBLIOGRAFIA:
1. Tello M., Gutiérrez E., Bejar V., Galarza C., Ramos W., Ortega A. Criptococosis. Lima,
Perú. 2013.
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