Pre analíticas de la toma de muestra

Una buena toma de muestra abarca una cantidad de condiciones y requerimientos que se
deben tener claros a la hora de realizar la toma. Para muy pocos exámenes el paciente sí
debe seguir instrucciones específicas antes de la toma o recolección de la muestra, entre
ellas: estar en ayunas, presentarse en cierto momento del día, seguir alguna dieta especial
por un período de tiempo, no fumar, y/o realizar una limpieza especial.

El estar en “ayunas” significa NO ingerir alimentos o bebidas por un período de tiempo

determinado. Para algunos exámenes esto es necesario, debido a que los niveles en la
sangre de sustancias como por ejemplo la glucosa, varían durante la digestión. Mientras se
esté en ayunas, el paciente sólo puede ingerir agua. No es permitido comer nada, ni tomar
café, ni jugo, ni té, sólo agua. No se puede masticar goma de mascar, aunque sea de las que
no contienen azúcar, pues la digestión se activa y los resultados de las pruebas se afectarían.
En cuanto a los medicamentos se pueden tomar, a menos que el médico permita que no se
tomen. En caso de tomarlos, debe ser con agua. De la misma manera debe seguir al pie de
la letra las instrucciones suministradas por el laboratorio para la toma de muestras
recolectadas por ellos mismos (muestra de Orina, muestra de Materia fecal, Muestra de
esputo, entre otras).

Conservación

Factores Condicionantes De La Muestra.

Se han descrito factores pre analítico que pueden afectar de forma decisiva a la calidad de
los resultados finales. Algunos de los factores relacionados con el paciente son
inmodificables y por tanto no controlables, es decir, no podemos actuar sobre ellos (sexo,
edad, raza, embarazo, etc), sin embargo la correcta identificación de los mismos puede
ayudarnos a evitar interpretaciones erróneas. Existen otro grupo de factores pres analíticos
que si son modificables y sobre los que conviene actuar adoptando medidas de
homogenización que nos van a permitir minimizar la influencia que estos factores ejercen
sobre el resultado final.
La determinación de ciertas magnitudes requiere una preparación previa por parte del
paciente ( dieta, medicación, ayuno, selección de dia del ciclo menstrual, etc) y en algunas
ocasiones los especímenes son recogidos por el paciente en su propio domicilio ( orina,
heces, etc) por lo que es necesario que previamente reciba las instrucciones verbales y por
escrito,, necesarias para asegurar una correcta preparación.

En términos generales:
Ante cualquier extracción sanguínea es recomendable que el paciente realice un ayuno
previo de 8- 12 horas, si ello no está contraindicado.
Ante una prueba funcional, es recomendable que el paciente realice reposo continuo en
cama y ayuno de 8 horas. Estás pruebas se realizaran bajo control médico, disponiéndose de
los medios de control adecuado (esfingomanometros, tiras para la determinación de
glucosa, etc) y de los fármacos necesarios para interrupción de la prueba funcional si fuera
preciso.
PREPARACION DEL PACIENTE
Dieta y/o Ayuno
Por regla general ante cualquier extracción sanguínea se debe mantener un ayuno de 8-10
horas.
Para el estudio de Perfil lipídico se recomienda al paciente hacer su alimentación normal el
día previo al examen y no debe ingerir bebidas alcohólicas por lo menos 48 horas antes. Un
ayuno prolongado puede conducir a resultados inesperados, tales como una disminución de
la glucosa o de las proteínas sanguíneas.
Si es Imposible el ayuno debido a estado de URGENCIA se debe interrogar al paciente
sobre la ingesta reciente de líquidos y alimentos, y tenerla en cuenta a la hora de los
resultados.

Ejercicio físico
Se debe interrogar al paciente sobre la realización de ejercicio reciente, anotarlo en caso
afirmativo y tener en cuenta a la hora de los resultados puesto que Esta actividad induce al
consumo de combustible metabólico, a la producción de metabolitos, y a modificar la
permeabilidad de las células de nuestro organismo, por cuya razón, se producirán cambios
en las magnitudes biologicas de por ejemplo, aumento inmediato y transitorio del potasio,
de las enzimas CPK, GOT, o el aumento con efecto prolongado de la enzima GPT, y
cambios hormonales. Cambios en la distribución de volumen entre distintos
compartimientos y pérdida de volumen por sudoración.
Medicación

Se debe tener en cuenta el consumo de medicamentos por parte del paciente puesto que
existen un buen número de fármacos que pueden interferir con las relaciones químicas del
ensayo y repercutir en los valores séricos. Por ejemplo, los anticonceptivos orales pueden
provocar un aumento de las enzimas hepáticas GOT, GPT y Gamma GT; El ácido
acetilsalicílico puede prolongar PT y PTT.
Bebidas alcoholicas
La ingesta de bebidas alcohólicas la noche previa a la toma de una muestra de sangre puede
determinar cambios en las concentraciones de ciertas enzimas del hígado (Gamma GT), o
dar valores de glucosa un poco más bajo de lo normal.

Tabaquismo y drogas de adicción

El consumo de tabaco aumenta la concentración Carboxihemoglobina, catecolamina,

cortisol sérico, como un aumento del hematocrito y hemoglobina

CONDICIONES PREVIAS A LA EXTRACCION DE MUESTRAS

Postura: Se debe tener en cuenta el estado del paciente. Las modificaciones posicionales
afectan: Albumina, Proteínas, Diversas enzimas, calcio, bilirrubina, Colesterol,
triglicéridos. La Toma de la Muestra se aconseja hacerla con el paciente acostado, de no
poder hacerlo se hará con el paciente sentado.
Paciente Encamado: La extracción de sangre aumenta entre un 5% y 15% la concentración
de los componentes celulares (hemograma y de las moléculas de gran tamaño del plasma
(proteínas, enzimas, colesterol, triglicéridos…), con respecto a las concentraciones
obtenidas en el paciente en posición vertical.
Paciente Ambulatorio: Produce un movimiento de agua desde el compartimiento
extravascular al intersticial: la consecuencia es una reducción de volumen plasmático (que
puede llegar hasta el 12% en individuos normales), con el consiguiente aumento en la
concentración sanguínea de componentes celulares y macromoleculares.
Este efecto de la postura, puede pronunciarse aún más en pacientes con tendencia a
presentar edemas (insuficiencia cardiaca, cirrosis hepática)

Infusiones y Transfusiones:
La contaminación de las muestras de laboratorio por soluciones de infusión intravenosa, es
la forma de interferencia pre analítica más común y más relevante en el paciente
hospitalizado. La transfusión sanguínea durante o en las horas previas a la extracción de
sangre puede producir cambios en la concentración de potasio, LDH y otras magnitudes
La sangre no debe extraerse del brazo en el cual se realiza la infusión. Después de la
infusión debe esperarse como mínimo 1 hora para la recolección de muestras sanguíneas.
Si La muestra proviene de un catéter, debe lavarse primero con solución salina isotónica y
los primeros 5ml de sangre deben ser descartados.

Intervenciones diagnósticas y terapéuticas.

Numerosas pruebas diagnósticas e intervenciones terapéuticas pueden producir
interferencias en las determinaciones analíticas de un laboratorio. La cirugía, punciones,
biopsias, inyecciones intramusculares, endoscopia, utilización de medios de contraste,
diálisis, radioterapia inducen un aumento de los llamados “reactantes de fase aguda”,
además muchas de estas intervenciones diagnostico-
Terapéuticas producen ansiedad y stress emocional en el paciente, y los consiguientes
cambios hormonales ( aldosterona, catecolaminas, cortisol..) pueden ser responsables de
alteraciones en los resultados del laboratorio clínico.

Torniquete
El uso excesivo de este puede producir éxtasis venoso localizado, la muestra se hace
hemoconcentrada, induciendo valores erróneamente altos para todos los especímenes
proteicos y todas las especies ligadas a proteínas. El mismo no debe prolongarse por más de
1 minuto.
Se pide al paciente que cierre el puño, lo cual distiende las venas, el ejercicio excesivo del
puño debe evitarse, dado que el mismo puede producir elevación en la concentración de
potasio, como en la de la LDH.

OBTENCION DE LA MUESTRA.
IDENTIFICACION DEL PACIENTE Y DE LA MUESTRA

Antes de proceder a extraer la muestra se debe examinar solicitud para constatar que ha
sido correctamente facturada. En una solicitud debe constar, como mínimo, el nombre y los
dos apellidos del paciente, su edad o fecha de nacimiento, historia clínica, firma y código
del médico, la fecha de extracción de la muestra, diagnostico presuntivo y las pruebas de
laboratorio que se solicitan. Ya que incluyen todos los datos que identifican
inequívocamente al paciente.
El correcto cumplimiento de estos datos facilitara las actuaciones del laboratorio y la
correcta interpretación de los resultados. El no cumplimiento de estos datos podrá ser
motivo de rechazo por parte del laboratorio
Recuerde que toda solicitud incompleta conlleva un retraso en la recepción de los
resultados y puede hacer necesaria una nueva extracción en caso de que haya dudas sobre la
identidad del paciente o de la muestra. La confusión en los nombres o el intercambio de
peticiones o muestras entre dos pacientes puede tener muy serias consecuencias en su
diagnóstico o/ y tratamiento.
SISTEMAS EMPLEADOS PARA LA RECOLECCION DE MUESTRAS
Múltiples sistemas son empleados para la obtención de muestras sanguíneas, dentro de los
cuales se encuentran:

A la hora de la extracción sanguínea se debe escoger la aguja apropiada teniendo en cuenta

el grosor de la vena escogida para la venopuncion, existen diferentes diámetros y calibres
de las agujas entre los que se encuentran:
Calibre Diámetro
19 1.0mm
20 1.9mm
23 0.6mm
25 0.5mm

En niños menores de 5 años es recomendable utilizar agujas de calibre 23 o 25.

TUBOS Y CONTENEDORES

Dependiendo de la prueba a realizar la muestra deberá tomarse en diferentes tubos. Cabe

resaltar que los tubos traen una marca que indica hasta donde debe llegar el volumen de
sangre.
Anticoagulante

Sin anticoagulante

*existen tubos tapa roja que tienen sistema clot activation, el cual acelera la retracción del
coagulo y deben ser mezclados después de la extracción sanguínea.

EDTA
Las sales de sodio y potasio en este acido se comportan como poderosos anticoagulantes ya
que inhiben la participación del ion calcio en la cascada de la coagulación de la sangre.
El anticoagulante EDTA es de elección en hematología ya que no afecta la morfología de
las células hemáticas y no modifica la velocidad de sedimentación globular.
Sólo forma artefactos tras demoras muy prolongadas, de forma que se pueden hacer
extensiones de sangre aceptables después de 2 o 3 horas y, si está refrigerada, los recuentos
celulares son válidos durante 24 horas.

HEPARINA DE LITIO

No afecta al tamaño celular o al hematocrito. Es el mejor anticoagulante para la prevención

de la hemólisis y para las pruebas de fragilidad osmótica. No es satisfactoria para recuentos
leucocitarios o plaquetarios debido a que agrega las células.

CITRATO DE SODIO

Es de elección para las pruebas de hemostasia y la velocidad de sedimentación. Actúa a

través de la precipitación del calcio.
La concentración de citrato de sodio utilizada como anticoagulante es una variable pre
analítica importante porque puede variar el tiempo de coagulación del plasma sanguíneo ya
que la cantidad de citrato presente afecta la concentración de calcio utilizada en estas
pruebas.

EXTRACCION DE SANGRE

Es el espécimen más usado habitualmente para los estudios analíticos por la riqueza de
datos que puede aportar, por su funcionalidad y por ser relativamente fácil su obtención.
Dependiendo del tipo de estudio que se vaya a realizar, el tipo De muestra puede coincidir
con el espécimen (sangre total) o ser una parte del mismo (plasma, suero).
Una correcta extracción de sangre es parte fundamental del proceso analítico. En las
páginas previas, se han dado algunos consejos sobre el momento óptimo para la extracción
de sangre y se ha subrayado la importancia de registrar las “incidencias de extracción” en el
lugar adecuado de la Historia Clínica. Una de las Incidencias de extracción más importantes
de registrar, especialmente en unidades con pacientes críticos y en Urgencias, es la hora
exacta de extracción, pues puede ser importante en la interpretación de los resultados y en
la adopción de medidas terapéuticas.

EXTRACCION VENOSA
El Torniquete: se realiza para facilitar la localización de una vena apropiada para realizar la
punción. Normas para la realización del torniquete:
1) Aplicar el compresor en el brazo a una distancia de unos 8–10 cm. de la zona de punción.
2) El objetivo es suprimir completamente el flujo venoso sin interrumpir el flujo arterial: el
pulso debe ser palpable en la arteria radial y, desde luego, no se debe observar cianosis
distal. Un torniquete demasiado prieto puede ocasionar una falsa hiperpotasemia
3) No mantener el torniquete durante mucho tiempo: tiempos de compresión prolongados
(más de 3 minutos) pueden producir cambios significativos en la concentración de células y
macromoléculas en la sangre extraída, especialmente si se mantiene el torniquete durante la
extracción. Lo ideal es un tiempo de compresión no mayor de un minuto con liberación del
compresor cuando la sangre comienza a fluir.
Sitios de punción venosa
Adultos: por lo general se realiza en la parte interior del codo en la vena cefálica o basílica.
También en el dorso de la mano cuando se dificulta la extracción del antebrazo.
Niños de corta edad: por lo general se realiza en la parte interior del codo en la vena
cefálica o basílica. También en el dorso de la mano cuando se dificulta la extracción del
antebrazo.
Recién nacidos: el más escogido es la punción en el talón para pruebas de tamizaje .Pero el
recomendado en volúmenes más altos es la ven punción del dorso de la mano con aguja al
goteo.
Antes de iniciar la extracción sanguínea se debe hacer Inspección y palpación de la vena: El
brazo del paciente debe estar estirado. Examine el brazo y seleccione una vena mientras el
paciente aprieta el puño con fuerza.
La inspección debe realizarse con un orden predeterminado:
a. Fosa ante cubital de ambos brazos (venas medianas, venas basílicas, venas cefálicas)
b. Antebrazo (vena cefálica)
c. Dorso de las manos (venas del dorso de las manos).

1. Prepare todo el equipo necesario

2. Dígale al paciente que cierre el puño
3. Seleccione una vena adecuada
4. Limpiar con etanol al 70%, empezar en la zona de puntura y seguir con movimiento
circular. (Forma de caracol), Esperar q seque el alcohol y No volver a tocar.
5. Colocar el torniquete, el tiempo máximo es de 1 minuto
6. Penetrar la piel con ángulo de 15 grados, con el bisel hacia arriba, siguiendo la geografía
de la vena.
7. Tirar el embolo suavemente para no causar hemolisis de la muestra
8. Libere el torniquete cuando la sangre empiece a fluir
9. Nunca saque la aguja con el torniquete puesto
10. Coloque suavemente un algodón sobre la punción y retire la aguja, descarte la misma en
el guardián
11. Indique al paciente que debe hacer presión sobre el sitio de la punción, no masajes.
12. Invierta los tubos, no los agite
Orden de Extracción de los tubos:
El orden de los tubos es importante para prevenir
La contaminación de las muestras por anticoagulantes no deseados.
Se ha de realizar de la siguiente manera:
1 Tubo para análisis de suero: sin anticoagulante
2 Tubo para pruebas de coagulación: anticoagulante citrato
3 Tubos restantes con anticoagulantes:
EDTA, Heparina de litio, jeringas de gasometría, tubo de velocidad de sedimentación.
El tubo de citrato, destinado a pruebas de coagulación, debe extraerse siempre antes que los
que llevan otros anticoagulantes, de manera que no se contamine con EDTA o Heparina de
litio, lo cual puede interferir en el estudio de coagulación. Si es el único tubo a extraer o
tiene que ser el primero, antes
Se debería llenar un tubo de descarte con unos 5 ml de sangre, con objeto de eliminar la
posible contaminación de la muestra con tromboplastina tisular proveniente del sitio de
punción
CONSERVACION Y TRANSPORTE DE MUESTRAS

La conservación atendiendo a la temperatura y el tiempo de la muestra hasta que llega al

laboratorio y el almacenamiento en el mismo. Teniendo siempre en cuenta y como norma
general que la sangre total hay que centrifugarla lo más rápidamente posible en el caso de
sangre con anticoagulante o pasados 20 - 30 minutos, que es el tiempo de retracción del
coágulo, en sangre sin anticoagulante. Los tubos que se usan habitualmente están tratados
con una sustancia que acelera la formación del coágulo disminuyendo el tiempo de
retracción del coágulo.
Se considera:
 Temperatura ambiente 25 - 28 ºC
 Refrigerada 2 a 8 ºC
 Congelada -20 ºC

Muestra Traslado y Conservación

Suero/ Plasma: Se deben trasladar al laboratorio en el

Tubo Tapa Roja
mínimo tiempo posible, refrigeradas (4°C)
Tubo Tapa lila
Tubo tapa Celeste o en su defecto a Temperatura ambiente, en
 caba con una gradilla para tubos dentro de
un recipiente a prueba de filtraciones.

Sangre venosa/ Arterial: Transportar las muestras de inmediato al

Determinación de Gases Venosos o
laboratorio, sobre hielo o unidad
Arteriales
refrigerante en un recipiente a prueba de
Determinación de Ph
Líquidos Biológicos filtraciones.
Las jeringas heparinizadas deben enviarse
con la punta sellada con un tapón plástico
con cierre hermético.
Sangre venosa/ Arterial: Transportar las muestras de inmediato al
Determinación de Gases Venosos o
laboratorio, sobre hielo o unidad
Arteriales
refrigerante en un recipiente a prueba de
Determinación de Ph
Líquidos Biológicos filtraciones.
Las jeringas heparinizadas deben enviarse
con la punta sellada con un tapón plástico
con cierre hermético.
Orina: Conservar en un lugar fresco o refrigerado
Muestra aislada
a 4º C y llevarla al laboratorio en bolsas
Orina de 24 Horas
plásticas antes de 1 hora post a su
recolección.

Heces Transportar inmediatamente al laboratorio

tras su recolección, si no es posible
mantener la muestra en refrigeración a 4°C

No está indicado congelar sangre total, ya que en la descongelación se pueden producir

hemólisis y otros artefactos
Sangre Arterial
Los sitios más comunes de punción arterial son las arterias femoral, braquial o radial. En
recién nacidos o en lactantes pueden utilizarse otros lugares, como la arteria umbilical a las
arterias del cuero cabelludo. La punción arterial es necesaria fundamentalmente para la
realización de gasometrías, ya que los resultados de la gasometría venosa son generalmente
poco valorables. La punción arterial es un procedimiento delicado, que requiere notable
experiencia. La sangre obtenida por punción arterial debería procesarse inmediatamente
después de extraída, por lo que, lo ideal, es contar con equipos de gasometría en la propia
sala donde se realiza la extracción. En todo caso, el traslado al laboratorio debe ser lo más
rápido posible, pues los resultados son tanto más fiables cuanto con mayor rapidez se
analice la muestra.
Criterios para el sitio de elección

Flujo sanguíneo colateral: Considerando el riesgo de producir una trombosis siempre se

debe asegurar que disminuido u ocluido el flujo sanguíneo, el tejido debe seguir siendo
irrigado. Por ello, la arteria de elección es la radial, previa a efectuarse la prueba de Allen

Accesibilidad del vaso: Las arterias se encuentran en zonas más profundas si se compara
con la distribución venosa en el organismo.

Tejidos peri arterial: Deben ser tenidos en cuenta para no ocasionar lesiones en otros
tejidos. Por ejemplo la arteria humeral está a mayor profundidad y se necesita de mayor
habilidad y precaución para no lesionar el nervio mediano que se encuentra muy cerca.

CRITERIOS GENERALES PARA EL RECHAZO DE MUESTRAS.

Toda Muestra debe contar con criterios mínimos para su correcto análisis. Se deben
RECHAZAR aquellas que no cumplan con estos.
Criterios de rechazo:
La solicitud carece de uno o más de los siguientes datos:
 Nombre y apellidos del paciente (o no son legibles)
 Fecha de nacimiento (o edad)
 Número de Historia Clínica (u otro tipo de identificación numérica)
 Diagnóstico previo (de sospecha o de certeza)
 Código y firma del facultativo que realiza la petición
 Fecha de la petición
 Código de destino (o destino escrito)
 Determinaciones analíticas que se solicitan
 Hojas de petición erróneas, sin petición, sin etiquetado de copias, etc.
 No se anota en la solicitud la diuresis, cuando se envía al Laboratorio una
alícuota de la orina de 24 horas.
EXTRACCIÓN DE OTRAS MUESTRAS: ORINA, LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO Y OTROS LÍQUIDOS
ORGÁNICOS, HECES, SALIVA, MUESTRAS ESPECIALES
a) Orina
- Orina de una sola micción (Elemental de orina)
La muestra idónea es la primera micción de la mañana, ya que es la más concentrada. No
obstante, en determinaciones urgentes, se recogerá la primera orina que realice el paciente.
Es suficiente un volumen de orina de 5-10 mL.
Normalmente el propio paciente recogerá la muestra de orina por lo que se le debe explicar
los pasos a seguir:
1) Se lavará las manos con agua y jabón.
2) A los hombres, se les indicará que deben retraer completamente el prepucio,
manteniéndolo retraído hasta que se haya recogido la muestra de orina. A las mujeres se les
explicará que deben sujetar el frasco sin que éste tome contacto con la vulva, la pierna o la
ropa.
3) La orina debe recogerse, tras desechar los primeros 20-25 mL, en recipientes estériles.
En niños y niñas mayores, la recogida se realiza de forma similar a la de los adultos.
En los niños más pequeños se recogerá en colectores o bolsas estériles especialmente
diseñadas para ello. La sistemática es:
1) Lavado de los genitales y área perineal con agua y jabón.
2) Colocar la bolsa de plástico o el colector.
3) Vigilar la bolsa cada 30 minutos, y tan pronto como el niño haya orinado, se retirará y
enviará al laboratorio. Si la micción no se ha realizado en una hora, se repite la operación
colocando una nueva bolsa.

En pacientes ingresados con imposibilidad de recoger la muestra por sí mismos, se

procederá a realizar sondaje vesical con las medidas asépticas habituales.
En pacientes con sonda vesical permanente la recogida de orina se realizará de la siguiente
manera:

1) Limpiar una zona del catéter con una gasa humedecida en alcohol o Solución yodada;
dejar secar completamente.
2) Pinchar directamente el catéter con aguja y jeringa a través de la Zona desinfectada,
aspirando 5-10 mL.
3) Pasar la orina a un recipiente estéril. No recoger nunca orina de la
Bolsa de recolección

Orina de 24 horas:
La orina excretada durante 24 horas se utiliza para la determinación de algunas magnitudes
bioquímicas cuyo cálculo depende de la cantidad exacta de orina emitida en ese período de
tiempo.

Consulte en las Variables clínicas de la Cartera de Servicios del laboratorio aquellas

determinaciones analíticas que precisan de una recogida de orina de 24 horas.

La recogida se realiza en contenedores de 2.000 mL de capacidad, de boca ancha,

especialmente diseñados para tal fin.
No son válidos otro tipo de recipientes.
En algunos casos (catecolaminas...) se utilizan recipientes a los que se ha añadido algún
tipo de preservante químico (más frecuentemente, ácido clorhídrico).

Si el paciente va a recoger la orina en su casa, es fundamental explicarle

Claramente el procedimiento que debe seguir para hacer una correcta recogida de la
muestra.
Si el paciente está ingresado, no es necesario mandar toda la orina al
Laboratorio: bastará con que se mida, con la mayor exactitud posible, el
Volumen de diuresis de 24 horas y, tras mezclar bien toda la orina recogida, enviar una
alícuota de 10 mL al Laboratorio anotando en la Solicitud el volumen total de orina
recogida
SOLICITUD, FASE INDISPENSABLE DE LA PREANALÍTICA PARA LOS ANÁLISIS
DE SANGRE
La fase inmediatamente anterior a la extracción de sangre para pruebas de
laboratorio, comienza con la solicitud del análisis, pasando por la obtención de la
muestra, y finalizando cuando se empieza el análisis propiamente dicho, debe ser objeto de
atención por parte de todas las personas implicadas en la atención de los pacientes, a fin de
evitar fallos o variables que puedan comprometer la exactitud de los resultados.
De este modo, es importante entender que la fase pre analítica requiere atenciones y
cuidado para detectar, clasificar y adoptar las medidas conducentes a la reducción de
los fallos. Asimismo, cuando se pretende determinar la calidad de nuestros sistemas
analíticos, a través del análisis de su precisión, partimos de que la fase pre analítica está
bien controlada, permitiendo de esta manera que los esfuerzos, llevados a cabo en el
estudio de esa precisión, contribuyan a la mejora de las fases siguientes, esto es,
las fases analítica y post analítica