Prácticas estándar para Técnicas generales de infrarrojos Análisis Cuantitativo

Esta norma ha sido publicada bajo la designación fija E 168; el número inmediatamente después de
la designación indica el año de adopción original o, en el caso de revisión, el año de la última revisión.
Un número entre paréntesis indica el año de la última aprobación. A epsilon superíndice (mi) indica
un cambio editorial desde la última revisión o re-aprobación.mi).

1.Alcance

1.1 Estas prácticas abarcan las técnicas más frecuentemente utilizados en los análisis cuantitativos
de infrarrojos. Prácticas asociadas con la recolección y análisis de datos en un ordenador están
incluidos, así como las prácticas que no utilizan un ordenador.

1.2 Esta norma no pretende considerar todos los problemas de seguridad, si los hay asociados en
su uso es responsabilidad del usuario de esta norma establecer las prácticas de seguridad y salud y
determinar la aplicabilidad de las limitaciones reglamentarias antes de su uso. Indicaciones de
peligro, aparecen en la Sección 6 y Nota A4.7, A4.11 Nota y Nota A5.6.

2. Documentos de referencia

Normas ASTM:

E 131 Terminología relacionada con Espectroscopia Molecular

E 334 Práctica de técnicas generales de infrarrojos Microanálisis 2

E 932 Práctica de descripción y medición del rendimiento de los espectrómetros infrarrojos

dispersiva2

E 1252 Práctica de Técnicas Generales para el Análisis Cualitativo de infrarrojos

E 1421 Practica de descripción y medición del rendimiento de infrarrojos por transformada de Fourier
(FT-IR) Espectrómetros: Nivel Cero y Uno Pruebas de nivel

E 1655 Prácticas de infrarrojos multivariante Análisis Cuantitativo 2

3. Terminología

3.1 Para definiciones de términos y símbolos, consulte la terminología E 131.

4. Significación y Uso

4.1 Estas prácticas están destinadas a todos espectros- infrarrojos. Para los principiantes, estas
prácticas servirán como una visión general de las técnicas de preparación, operación y cálculo. Para
las personas con experiencia, estas prácticas servirán de revisión cuando se necesitan técnicas de
poco uso.

5. Aparato

5.1 Las técnicas de infrarrojos descritos aquí suponen que el equipo sea de, al menos, la calidad
comercial habitual y cumple con las especificaciones estándar del fabricante. Para los instrumentos
de dispersión, también se refieren a la práctica E 932. Para Transformada de Fourier y los
instrumentos de dispersión, también se refieren a las prácticas E 1421 y E 932, respectivamente, y
por microanálisis con estos instrumentos véase la norma ASTM E 334.

5.2 En el desarrollo de un método espectroscópico, es la responsabilidad del originador para

describir la instrumentación y el rendimiento necesario para duplicar la repetibilidad y el sesgo de un
método. Es necesario especificar este comportamiento en términos que pueden ser utilizados por
otros en las aplicaciones del método.

6. Riesgos

6.1 Los usuarios de estas prácticas deben ser conscientes de que hay peligros inherentes asociados
con el uso de instrumentos eléctricos, las células de infrarrojos, disolventes y otros productos
químicos, y que estas prácticas no pueden y no a sustituir un conocimiento práctico del instrumento,
células y productos químicos utilizados en un análisis particular.

7. Consideraciones para las mediciones cuantitativas de infrarrojos

7.1 Análisis infrarrojo cuantitativo se hace comúnmente con instrumentos rejilla, filtro, prisma, o
interferómetro. Las siguientes directrices para establecer un procedimiento de análisis más
adecuados son:

7.1.1 Siempre opere el instrumento de la manera más estable y condiciones reproducibles

alcanzables. Esto incluye instrumento tiempo de calentamiento, equilibrio de la temperatura de la
muestra y exacto. Reproducción de pruebas de rendimiento de instrumentos para ambas normas. y
muestras. Después de la calibración, use configuraciones equivalentes para analiza Para todos los
instrumentos de infrarrojos, consulte los Recomendaciones para la configuración del instrumento.
Después de la calibración, Utilice estos mismos ajustes para el análisis

7.1.2 Los valores de absorbancia a números de onda analíticas debe caer dentro del intervalo
aceptablemente precisa del espectrómetro particular utilizado. En general, una sola medición de la
absorbancia tendrá la mejor relación señal a ruido cuando se encuentra en el intervalo de 0,3 a 0,8
unidades de absorbancia (AU) (1).3 La sensibilidad de los espectrómetros de transformada de Fourier
(FT-IR) es tal que los valores de absorbancia más bajos se pueden usar con bastante eficacia.

Siempre que la línea de base pueda estimarse con precisión (ver Sección 12). Las absorbancias
superiores a 0,8 UA deben ser evitado siempre que sea posible debido a la posibilidad de no
linealidad causada por instrumentos, tanto para dispersiva (2) como Espectrómetros FT-IR (3,4).
Variación de la concentración y La longitud del recorrido de la muestra se puede utilizar para ajustar
los valores de absorbancia en El rango óptimo. Cuando se determinan múltiples componentes en
una muestra particular, es aceptable usar valores de absorbancia fuera del rango óptimo, (5) sin
embargo, absorbancias mayores debe evitarse que 1.5 AU (2-4). Bandas de absorción más débiles
de componentes de alta concentración se pueden seleccionar para proporcionar Valores de
absorbancia dentro del rango óptimo.

7.1.3 Los métodos de análisis más precisos son implementado con muestras en solución. Con
muestras líquidas que no son excepcionalmente viscoso, los mejores resultados se obtienen si la
célula no se mueve después de la muestra primero se introduce en el instrumento (el método de
células fijadas). La razón es que la posición celda de muestra es difícil de reproducir con precisión
por la inserción en los titulares de células típicas. Se pueden unir accesorios y tubos adecuados a la
celda para permitir que la muestra cambie de manera fluida. Cuando no es práctico utilizar una celda
de flujo continuo, la celda debe ajustarse bien en el soporte para que los movimientos laterales y de
inclinación están restringidas.

7.1.4 A menos que haya una razón para sospechar depósito sobre o la contaminación de la célula a
partir de las muestras, es generalmente preferible para lavar la muestra actual con la siguiente
muestra, si la muestra se dispone de suficiente. El volumen de muestra usado para ras la célula debe
ser al menos cinco veces (y preferiblemente más, por ejemplo, 20 veces) el volumen entre los puntos
de entrada de muestras y de salida de la célula.

7.1.5 Para algunas bandas, el número de onda de máximos cambios de absorbancia como función
de la concentración. Del mismo modo, la posición de los puntos de línea de base puede cambiar con
la concentración. La selección de los puntos de referencia debe hacerse con cuidado para tener en
cuenta el cambio de la absorbancia máxima. Se plantea la cuestión de si es preferible medir
absorbancias a ubicaciones número de onda fija o en la máxima observada de la banda analítica. El
mejor enfoque es la prueba empírica tanto del punto fijo y los métodos de seguimiento de la
evaluación.

7.1.6 Siempre que sea posible, trabajando directamente en la absorbancia es preferible. Es decir, ya
sea el instrumento o procesador de datos asociado hace que la conversión necesaria de
transmitancia a la absorbancia. Si espectros no se puede obtener en la absorbancia, entonces la
ecuación A12.1 y A12.2 en el anexo A12 se pueden utilizar para convertir los datos.

7.1.7 Use regiones espectrales que ofrecen la mayoría de la información sobre analito. Seleccionar
números de onda analíticas donde el componente tiene una relativamente gran capacidad de
absorción. Además, otros analitos deben tener un efecto mínimo en la absorbancia medida.

7.1.8 El rendimiento del espectrómetro debe ser suficientemente bueno para dar linealidad adecuada
de respuesta para el intervalo deseado de concentraciones. La relación señal-ruido, S / N, debe ser
aceptable para la precisión deseada.

7.1.9 Selección de números de onda de análisis de tal manera que la linealidad de la absorbancia-
concentración relación está menos afectado. Interacción molecular, la dispersión del índice de
refracción, y la no linealidad espectrómetro.

8. Teoría para análisis de un solo compuesto

8.1 Espectrometría cuantitativa se basa en el Beer Bouguer-Lambert (en adelante, de Beer) la ley,
que se expresa para el caso de uno de los componentes como:

A= abc

Donde:

A= absorbancia de la muestra a un numero de onda especificada

B= capacidad de absorción del componente en este número de onda

b= muestra de longitud de la trayectoria, y

C= concentración del componente .

Dado que los espectrómetros miden la transmitancia, T, de la radiación a través de una muestra, es
necesario convertir T a A como sigue:
𝑝
𝐴 = − log 𝑇 = − log
𝑃0

Donde

P0 = Entrada de energía radiante en la muestra, y

P= Potencia radiante transmitida a través de la muestra

9. Calibración para una determinación de un solo componente

9.1 La preparación adecuada de la muestra es esencial para cuantitativos análisis. Véase el anexo
A4.

9.1.1 Análisis cuantitativo tiene dos partes distintas: calibración y análisis Para un simple análisis de
un solo componente, seleccionar un disolvente apropiado que es esencialmente libre de interferir
absorciones en el número de onda analítica.

9.1.2 Para la calibración, mida las absorbancias, A, de la soluciones de analitos en varias

concentraciones conocidas, c. Absorción, a, luego se calculan, utilizando la ecuación 1 con la línea
de base correcciones como se describe en las Secciones 12-14. Alternativamente, las absorbancias,
A, de una sola solución en varias celdas de diferentes, pero sabido con precisión, las longitudes de
camino pueden medirse; sin embargo, Los efectos de interacción no serán aclarados de esta
manera.

9.1.3 Calcule el promedio de varios valores para el futuro usar, o dibujar una curva de trabajo analítica
graficando la absorbancia versus concentración para una longitud de trayectoria constante como se
demuestra en la Fig. 1. Use la parte lineal de la curva para calcular a. El cálculo de una curvatura
donde está será presente. Se discutirá en 18.1 y 18.2.

NOTA 1 — En la práctica, la curva de calibración puede no tener una intersección y de cero. Esto
podría deberse a una variedad de factores que incluyen, entre otros, bandas de analito resueltas de
forma incompleta, pérdidas de reflexión e interferencias de disolventes. Es importante que el método
utilizado para calcular la calibración. la curva no obliga a que la intersección sea cero.

9.1.4 Para el análisis, disuelva lo desconocido en el solvente, medir la absorbancia, A, y determinar

la concentración, c, del analito gráficamente o por cálculo. Convertir esto Concentración en solución
a la concentración en la muestra desconocido.

9.1.5 Tanto el tiempo de análisis como la posibilidad de error son menores si las concentraciones de
las incógnitas y la longitud de la trayectoria celular son mantenido el mismo durante una serie de
análisis, y las concentraciones de las soluciones de calibración han puesto entre corchetes el alto
esperado y valores bajos de las soluciones desconocidas (6, 7).
FIG 2 Una curva de trabajo analítico.

10. Teoría de análisis multicomponente.

10.1 La ley de Beer se expresa para una mezcla de n indepen-Absorber componentes con una
longitud de trayectoria única y número de registro único como:

A= a1bc1+a2bc2+ …… anbcn

La ecuación 3 define una absorbancia en un número de onda como debida a La suma de

las aportaciones independientes de cada componente. Para resolver las concentraciones
de n componentes, n Ecuaciones independientes que contienen n mediciones de
absorbancia. en n números son necesarios. Esto se expresa por la constante longitud de la
ruta de la siguiente manera:

A1= a11bc11+a12bc2+ …… a1nbcn

A2= a21bc2+a22bc2+ …… a2nbcn

…………………………….

……………………………...
 Ai= ai1bc1+ai2bc2+ …… ainbcn
Donde:

Ai= Absorbancia total en número de onda.

ain = Absorción en el número de onda i del componente n

b= Longitud de la trayectoria de la celda en la que se encuentra la mezcla.muestreado, y

c= concentración del componente n en la mezcla.

10.2 Durante la calibración, las concentraciones c son conocidos, y se miden las absorbancias A de
referencia corregida. La experiencia Absorción mental-productos de longitud de trayectoria a norte
entonces se calculan b (ver nota 2). Durante el análisis, la longitud de la trayectoria de absorción
productos a en Se conocen b, y se miden las absorbancias A. Luego se calculan las concentraciones
desconocidas (ver Sección 17). Por lo tanto, la calibración precisa generalmente requiere que se
obtengan valores de absortividad experimental de al menos estándares. Se deben cumplir los
siguientes requisitos:

10.2.1 El número de estándares debe ser igual o mayor que el número de analitos, n, y

10.2.2 El número de números de referencia analíticos, i, debe ser igual o mayor que el número de
componentes independientes, norte.

NOTA 2: Todas las conversiones de absorbancia usan transmitancia (es decir, la valor decimal), no
porcentaje de transmitancia. Independientemente de la forma (es decir, decimal o porcentaje), el
término transmitancia se refiere al término P / P de la ecuación 2, y no debe llamarse transmisión.
(Ver Terminología E 131).

10.3 El primer requisito permite al analista usar más que el número mínimo de normas. Sobre
determinación de los estándares permiten la estimación de errores en el resultado analítico. El
segundo requisito permite el uso de más del mínimo número de picos para especificar un sistema
químico, donde se selecciona al menos una banda distintiva para cada componente (7-10).

10.4 Los procedimientos utilizados en el análisis multicomponente será discutido más adelante en la
siguiente sección que también es una introducción a los análisis de fase de solución general.

11. Análisis de soluciones multicomponentes

11.1 Para el análisis cuantitativo de mezclas, la ecuación 4 es de los n componentes de la mezcla

en el número de wa analítico i se determina a partir de Mediciones de absorbancia realizadas en
cada componente tomado. Individualmente. Estas absorbancias deben medirse bajo condiciones
(muestra de la longitud de la trayectoria, la temperatura, presión y disolvente) idénticos a los
utilizadas para las incógnitas, y debe corregirse para las líneas de base como se discute en las
Secciones 12-14. Las mediciones de absorbancia se realizan con concentraciones del analito que
pone entre corchetes las cantidades esperadas en las muestras desconocidas.

11.2 Donde sea posible, preparar muestras como soluciones diluidas. y colocar en celdas de
longitudes de trayectoria apropiadas (típicamente 0.2 a 1,0 mm). Usar concentraciones más bajas
en celdas de longitud de camino más largas en lugar de concentraciones más altas en las células de
longitud de camino más corto a Obtenga valores de absorbancia en el rango de 0,3 a 0,8.
Las concentraciones más bajas minimizarán los efectos no lineales debido a la dispersión. (Es decir,
cambio de índice de refracción con número de onda.

Donde la libertad de los efectos intermoleculares es incierta o donde se sabe que existen efectos
intermoleculares, calibración debe basarse en medidas tomadas de mezclas sintéticas de todos los
componentes como se describe en 15.1.2.

11.3 Disolver un peso conocido de un componente puro en un disolvente infrarrojo adecuado. Medir
la absorbancia en todos los números de onda analíticos y corregir las líneas de base como se discute
en Secciones 12-14. Repita este procedimiento para varias concentraciones cubriendo el rango de
concentraciones esperado en las muestras a analizar, recordando que las concentraciones de los
componentes deben ser linealmente independientes. Absorción de la trama versus concentración
del mismo modo, construir curvas analíticas para este componente en cada uno de los otros números
de onda analíticos.

Repita este procedimiento para cada uno de los n componentes. Así, Hay i gráficos para cada
componente, o un total de i 3 n curvas analíticas, cada una de las cuales arroja uno de los valores
de un segundo.

11.4 El número de mezclas estándar requerido es al menos igual a n, el número de componentes.

Para cada número de curva analítica, habrá un conjunto de al menos n ecuaciones en n incógnitas.
Los n conjuntos de ecuaciones se pueden resolver directamente para los valores de a en b. Si se
utilizan más de n mezclas sintéticas como estándares, se puede utilizar un procedimiento de
mínimos cuadrados para calcular los valores de a en b. Repetir, para obtener información sobre
errores, al menos una mezcla más que el número de analitos necesarios

12. Líneas de base en general

12.1 Cualquier método cuantitativo depende de la elección de un Línea de base reproducible. La

corrección de datos en bruto para la línea de base la absorbancia es importante en algunos métodos.
El factor guía en la selección de línea de base es la reproducibilidad de los resultados. Métodos
utilizados para dibujar líneas de base con instrumentos computarizados son similares en la mayoría
de los casos a los datos registrados en Papel de gráfico. Donde existan diferencias, se explicarán
en Anexo A1

13. Medición de número de registro único.

13.1 Una técnica conocida como el método de “celda en celda de salida” este método a menudo se
utiliza en el trabajo de infrarrojos de un solo haz. En este método, un blanco (es decir, solvente en la
celda, bolita de bromuro de potasio (KBr) u otro sustrato) se mide en un número de onda fijo y luego
se registran las lecturas del analito (7). En el método de celda más simple celda en celda de salida,
se utiliza una línea de base de absorbancia cero (vea Fig, 2). Si el espectro no se puede obtener en
absorbancia, la absorbancia es calculada como en la ecuación A12.1 donde T2 = 1.0 y T1=
trasmitancia en el número de referencia del analito (1.6) (véase la nota 2).

14. Método de referencia (7)

14.1 La técnica de celda en celda fuera fue el método de opción para los primeros instrumentos
infrarrojos de un solo haz. Después de la llegada de los espectrómetros dispersivos de doble haz, la
línea de base del método ha sido el método de elección. Porciones de los datos. Alrededor de la
base de las bandas se seleccionan como referencia. Hay dos variaciones comunes.
Porciones de los datos. Alrededor de la base de las bandas se seleccionan como referencias de
referencia. Hay dos variaciones comunes.

FIG. 2 Una línea de base de absorbancia cero.

14.2 Cuando se elige un punto de referencia, el valor de un absorbancia mínima, A 2, se resta de la

absorbancia máximo, A1, como se demuestra en la Fig. 3. El punto de la absorbancia mínima es
adyacente o, al menos, en la vecindad de la banda en evaluación.

14.3 Se pueden necesitar dos puntos si la banda de interés es superpuesto sobre un fondo inclinado.
Manualmente una línea es dibujado de un lado a otro como en la Fig. 4. Manualmente se dibuja una
línea de un lado al otro como en la Fig. 4. La absorbancia de la banda se calcula como el valor en el
máximo pico A1 menos la absorbancia basal mínimo A23. Un inadecuado la elección de la línea de
base en esta situación puede tener efectos perjudiciales sobre la exactitud del cálculo final.
NOTA 3: se debe realizar el procedimiento de corrección de línea base anterior solo si el espectro se grafica en unidades de
absorbancia. Cuando el espectro es representado en la transmitancia, las dos transmitancias de referencia y la transmitancia
en el número de onda analítica debe convertirse en absorbancia. La absorbancia de referencia corregido se puede calcular
por la ecuación A12.1 en el anexo A12. se requiere conversión a la absorbancia debido a una línea de base lineal inclinada
en la transmitancia se curva en la absorbancia.

15. Análisis de solución

15.1 Liquidos.

15.1.1 Análisis de una mezcla líquida sin el uso de una disolvente de dilución es a veces complicada
por fuerzas intermoleculares. Una banda de absorción puede sufrir cambios de intensidad o cambios
de frecuencia, o ambos, en relación con la misma banda de absorción del componente en solución.
La contribución de absorbancia de un componente en una mezcla rara vez se puede calcular a partir
de su absorbancia medida en el estado puro. Es deseable determinar las absortividades a partir de
mezclas conocidas que tienen proporciones cercanas a las de las muestras.

15.1.2 Preparar mezclas que tienen concentraciones conocidas de varios componentes que cubren
los rangos esperados. Medir las absorbancias corregidas de línea de base en cada una de las
longitudes de onda elegidas para el análisis y sustituirlos (junto con las concentraciones conocidas)
en la ecuación 4. Resolvemos para los productos de longitud ruta de absorción, a en b
directamente desde el conjunto de n simultáneos ecuaciones, o utilizar un método multivariante (vea
anexo A8) si hay suficientes datos disponibles.

15.1.3 Si las concentraciones en las incógnitas varían ampliamente, cálcule un segundo conjunto de
productos de la a en b, un segundo productos es recuperado. Un segundo conjunto puede ser
necesario debido a la presencia de influencias intermoleculares y las diferencias en los valores de
las absortividades así determinadas indicarán el alcance de estas influencias.

15.1.4 Un único conjunto de absortividades puede no ser suficiente para analizar las mezclas que a
lo largo de todos los posibles intervalos de concentración de los componentes, en cuyo caso, se
recomienda la reducción de la gama de concentraciones.

15.2 Sólidos

15.2.1 Para películas moldeadas, películas prensadas o pellets, siga el mismo

procedimiento general que para los líquidos (ver 15.1). Medir el espesor de cada película y
aplicar una corrección proporcional para desviaciones del espesor estándar.

NOTA 4 — Los espectros de películas y pellets pueden complicarse por la presencia de un patrón de
flecos. Para pellets y películas, siga las sugerencias. en A4.5.1.2 y Nota A5.1, respectivamente. Un
patrón de flecos es indeseableorque los valores de absorbancia del analito pueden ser alterados por
su presencia.

FIG 3. Una línea de base de punto. FIG 4. Una línea de base de dos puntos