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​INFORME CRIMINOLOGÍA

- OBJETIVO Y SOSPECHOSOS - HIPÓTESIS


Nuestro objetivo es encontrar a los La hipótesi a la que hemos llegado es la
asesinos de los padres e hijos de la siguiente: ​Hacer una PCR con
familia Erlenmeyer y Clotenc. electroforesi para comparar los ADN de la
Para encontrar al asesino nos hemos escena del crimen y de los sospechosos y
decantado por tres sospechosos que son así encontrar al asesino. ​Con esta
los siguientes, el primero es un nieto hipótesis empieza nuestra investigación
extramatrimonial que viene a reclamar la para encontrar a los asesinos de la familia
herencia, el segundo es la ama de llaves Erlenmeyer y Clotenc.
que ha tenido un romance secreto con la
madre y por último es el contable que
dirigía los números de la empresa de
vinos pero ha sido despedido.

- Fonamentació teòrica de la tècnica:

PCR​: Es una técnica para hacer muchas


copias de una determinada región de Electroforesi: La electroforesis en gel es
ADN. La PCR depende la Taq polimerasa una técnica utilizada para separar
para la elongación de la cadena. Los fragmentos de ADN según su tamaño.Las
cebadores son específicos y localizan la muestras de ADN se cargan en pozos del
región de ADN a amplificar. Además se gel y se aplica una corriente eléctrica para
necesita el ADN de los pacientes y una arrastrarlas a través del gel. Los
master mix para la realización de la fragmentos pequeños atraviesan el gel
técnica. más rápido que los grandes.
La reacción de la PCR se somete Cuando un gel se tiñe con un pigmento
repetidamente a un ciclo de cambios de que se une al ADN, los fragmentos de
temperatura que permiten la producción ADN pueden verse como bandas.
de muchas copias de la región. El ADN
amplificado se visualiza mediante la
electroforesis en gel​.

- Puntos fuertes y débiles de la tècnica:


Puntos fuertes: ​Es una práctica barata y rápida , proporciona resultados fiables de una alta
sensibilidad y especificidad.
Puntos débiles: ​Los primers tienen que ser específicos para la región que quieres replicar.
Estos solo pueden amplificar el segmento si se conocen las secuencias flanqueantes de la
región diana. Y, por último, no es posible determinar la cantidad de pares de bases
exactamente ya que la electroforesis es una prueba semicuantitativa​.

- Procediment de la tècnica:
Material de PCR: ​
Eppendorf de PCR, Micropipeta, Termociclador, Guantes, Gradeta,
Contenidor de residus biològics.
Material de Electroforesis: ​Tubos con producto de PCR, Puntas con filtro, Micropipeta,
Cubeta de electroforesi, Fuente de electroforesi, Guantes, Soporte de gel

- PCR - ELECTROFORESIS​:
● Preparar el material ● Preparar el material necesario
necesario. ● Realizar los cálculos para preparar
● Seguir las instrucciones el gel de agarosa (3g de agarosa
que trae el kit de PCR. en 100 ml de TAE 1x)
● En los eppendorf de PCR ● Preparar el gel de agarosa
se tienen que añadir ,en ● Utilizar el SYBR SAFE DNA para
cada uno, 20 μl de la visualizar el gel
MASTER MIX y 20 μl de ● Utilizar los tubos de la PCR y
cada ADN. centrifugar 1s a máximas rpm
● Para el control negativo, se ● Añado x microlitros de Orange G a
añade 20 μl de agua cada tubo de DNA
destilada. ● Hacer un spin a cada tubo
● Se hace una mezcla por ● Poner el gel en la cubeta de
inmersión en cada electroforesis
eppendorf. ● Llenar la cubeta de electroforesis
● Encender el termociclador con TAE 1x cubra todo el gel
● Se ponen los tubos en el ● Cargar 20 microlitros en las
termociclador muestras de cada pozo
● Al acabar el Termociclador ● Conectar la cubeta a la fuente de
colocamos los tubos en el la electroforesi
congelador ● Programar la fuente para correr a
100V durante 30 min.
aproximadamente
- Resultats.
Una vez ya se ha realizado la electroforesi se tiene que llevar el gel de la cubeta al
transiluminador para ver el resultado.
En nuestro caso observamos cómo actuó el marcador, el cual se veía diferenciado por los
pares de bases. El ADN de la escena del crimen apareció amplificado en la electroforesi con
dos bandas. En el caso de los sospechosos 1 y 2 también aparecieron 2 bandas en cada
carril pero estas no correspondían con la escena del crimen. Finalmente, el ADN del
sospechoso 3 solo se pudo observar 1 banda en el carril que tampoco coincidía con las de
la escena del crimen.

El resultado fue el siguiente:

El primer carril corresponde al Marcador, el segundo a


la escena del crimen y los 3 carriles siguientes a los 3
sospechosos (en orden)

- Discussió dels resultats


Tras haber analizado los resultados de la electroforesi no podemos concluir quién es el
asesino de la familia Clotenc-Erlenmeyer. El resultado de los sospechosos 2 y 3 no se
acercan al resultado de la escena del crimen por lo que descartamos que ellos sean los
asesinos. Por otro lado, el ADN del sospechoso 1 se acerca al de la escena del crimen ( la
altura de las bandas son parecidas), no obstante, al no ser exactos no poden determinar
que este sea el culpable del crimen.
- Conclusions finals
Con la discusión de los resultados de la PCR y electroforesis, podemos concluir que
ninguno de nuestros sospechosos es el asesino.
Creemos que la técnica realizada es la correcta pero no hemos hecho una buena elección
de sospechosos.
- Bibliografia
https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/p
olymerase-chain-reaction-pcr

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