MÉTODOS

 Reacción de antrona
En un tubos de ensayos agregar aproximadamente de 2 ml de las soluciones problemas ,
agregar 5 gotas del rectivo de antrona , agitar y observar
 Reacción de molisch
Agregar 2 gotas de la solución de - naftola, 2 ml de la sustancia problema. Añada
cuidadosamente por las paredes del tubo aproximadamente 1 ml de H2SO4 concentrado
hasta que se formen dos capas , observe cuidadosamente cualquier cambio de color en la
interfase delos dos líquidos. Repita el procedimiento para cada una de las muestras
problemas disponibles, y también con el agua en vez de la muestra problema
 Reacción de Fehling
En tubos de ensayo mezcle 2 ml de la solución A de Fehling con 2 ml de la solución B de
Fehling, agregar 2 ml de la solución problema. Introduzca los tubos en baño María
previamente calentado, continúe el calentamiento,registre el tiempo necesario para la
aparición de un precipitado rojizo.Caliente como máximo 25 minutos.
 Reacción de Tollens
Coloque en un tubo de ensayo 1 ml de reactivo de Tollens, añada 2 ml de la solución
problema, caliente en baño María 10 ó 15 minutos. Observe si hay formación de espejo de
plata.
 Reacción de Seliwanoff
Mezcle 1 ml del reactivo con 1 ml de la solución problema al 5%. Caliente la mezcla a
ebullición, el desarrollo de un color rojo en 2 minutos, es indicativo de que la prueba es
positiva, para presencia de cetosas.

 Preparación de Ozasonas
En un tubo de ensayo, coloque 0,2 g de clorhidrato de fenilhidrazona y 0,3 g de acetato de
sodio disueltos en 3 ml de agua, agregue 1 ml de la solución problema. Caliente por 20
minutos, enfríe y observe. Mida el tiempo de formación de cada osazona.
 Hidrólisis de la Sacarosa
Tres tubos de ensayo, conteniendo cada uno 4 ml de solución acuosa de sacarosa al 50%,
se colocan en baño María y se les agrega igual volumen de 39 agua al primero, al segundo
HCl al 10%, y al tercero de NaOH al 10%. Se calientan y después se ensaya una porción de
cada uno de ellos con el reactivo de Fehling. Qué grado de hidrólisis observó en cada caso?
 Hidrólisis del Almidón
Mezcle 1 g de almidón molido con 10 ml de agua fría, y vierta esta suspensión en 200 ml
de agua hirviendo. Enfrie 5 ml de esta solución, y agregue 4 gotas de lugol. Al resto de la
solución añada 10 ml de HCl concentrado y lleve a ebullición A cada 5 minutos, tome 2
porciones de 3 ml cada una y haga la prueba de Fehling en una y en la otra, previo
enfriamiento con baño de hielo, la prueba del lugol.

Resultados
 Prueba de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión de
la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol formando
así complejos coloreados. Esta prueba se realizó en las 5 muestras problemas en las que
en solo la de fructosa y sacarosa fue positiva ya que La fructosa es una cetosa razón por la
cual obtenemos un resultado positivo Y la sacarosa no es cetosa pero esta formada por
una aldosa y una cotosa razón por la cual el resultado también es positivo.
 Reacción de Molish :En esta prueba se observó una aparición de un anillo purpura en el
sitio de contacto de los dos líquidos, tanto en el tubo que contenía fructosa y como él de
sacarosa, lo que indica la presencia de carbohidratos. Mientras los demás tubos que
contenían almidón, maltosa y glucosa no se presentan la interfase de color violeta, esto se
debe, a que la adición del ácido fue rápida, aclarando que esta reacción tiñe a todos los
carbohidratos. Además, esta reacción es de adición nucleuofilica, en el cual el ácido
sulfúrico concentrado presenta una hidrolisis en los enlaces glúcosidicos para dar una
coloración violeta positivos para hidratos de carbono.
 Prueba de felling :En esta prueba una vez traídos los tubos de ensayo del calentamiento
se pudo detectar que un precipitado de color rojo ladrillo en los tubos que contenían
glucos, fructosa y maltosa se presentó el precipitado con menor cantidad, a diferencia de
las pruebas que contenían sacarosa y almidón no se presentó precipitado. Todo esto
quiere decir que los dos anteriores pruebas resultaron negativos osea que no son
azucares reductores mientras que la glucosa, maltosa y fructosa resultaron positivas ósea
que estas tres si son azucares reductores
 Reacción de Tollens : En esta prueba se observó la formación de un color espejo plata en
las paredes del tubo de ensayo de las soluciones de glucosa, maltosa y fructosa, esto se
debe, que todos los carbohidratos que tenga un grupo carbonilo real o potencialmente
libre (azúcar reductor) van a reaccionar con Tollens para producir el correspondiente
acido, esto se evidencia en la formación del espejo de plata. Caso contrario ocurrió con la
sacarosa y almidón que no presentaron dicho espejo, ya que azucares no reductores, por
ende no van a reaccionar con el reactivo de Tollens.
 Prueba de osazonas
Después de realizado el procedimiento en el laboratorio para esta prueba se pudo detectar
un cambio de color a un amarillo y la presencia de unos cristales pero solo en los tubos de
fructosa y glucosa y en los maltosa y sacarosa hubo una mínima e insignificante presencia
de cristales y cambio de color y finalmente en el tubo que tenía. Almidón no se presentó
ningún cambio, todo esto se debió a la que esta prueba solo identifica a los carbohidratos
monosacáridos por esta razón miramos que los cambios se dieron en la glucosa y fructosa
ya que ellos son los dos monosacáridos que se encontraban en las muestras problemas.
 Hidrolisis de sacarosa
para verificar la prueba de “Hidrólisis de la sacarosa” se usa reactivo de Fehling y nos da un
precipitado de color rojo lo que indica que la prueba es positiva pero en este caso La
sacarosa no hidrolizada al someterse a la reacción de Fehling da un resultado negativo
debido a que es un disacárido formado por glucosa y fructosa pero como fue sometida a
temperatura la sacarosa fue hidrolizada .
 Prueba de Antrona
En esta prueba se logró observar un cambio de color, a amarillo por parte del tubo que
contenía sacarosa y fructosa, sin embargo, esta prueba es una prueba general para la
identificación de carbohidratos, sobre todo en azúcares que forman parte de las hexosas o
pentosas. Esto se pudo dar debido a que la prueba dio positiva en dichos tubos por sólo la
agitación, mientras que en los demás era necesario el sometimiento a baño María para
apreciar el cambio de color.

 Hidrólisis del Almidón

A la solución preparada se le adicionó HCl y al adicionarle lugol, se formó el color
característico azul. En el primer tiempo se logró observar que ésta permaneció igual tanto
en la prueba de Fehling como en la prueba de lugol, pero luego a los cinco minutos se
comenzó a notar cambios en la muestra, lo que indicó esto, es que a la medida que el tiempo
iba transcurriendo el ácido iba provocando la hidrólisis del almidón.

Conclusiones
 Podemos concluir que las muestras de glucosa, fructosa, maltosa y galactosa son azúcares
reductores, ya que se formó un precipitado de color rojo ladrillo (óxido cuproso)
  En cambio la sacarosa es un azúcar no reductor, debido a que no se formó un precipitado
de color rojo ladrillo
 La reacción de Molish es un método cualitativo la cual se utiliza para poder observar la
presencia de carbohidratos en una muestra desconocida y a su vez poder determinar si en
la muestra se forma de manera inmediata el precipitado con el óxido cúprico (Cu2O)
tendríamos un monosacárido y si se tarda un tiempo más prolongado en formar el
precipitado se trataría de un disacárido.
 En las muestras de Fructosa y Sacarosa una vez terminado el proceso de la reacción de
Seliwanoff, nos emite una coloración roja, la cual nos indica que hay presencia de cetosa
en la muestra de azúcar. Puesto que la sacarosa no es una cetosa pero esta formado por
glucosa y fructosa. La Fructosa al separarse de la glucosa y junto con el (HCl) que es un
componente del reactivo de Seliwanoff obtenemos un resultado positivo.

Bibliografia

 http://books.google.com.ec/books?id=8SAtkthrFEkC&pg=PA92&lpg=PA92&dq=REACCI%C
3%93N+DE+SELIWANOFF&source=bl&ots=oDroujs11b&sig=i59OkAJmwiADPtoly3uvPdJ_x
hA&hl
 https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i