Departamento de Parasitología y Microbiología

1. Bioseguridad
- El Centro de Control y Prevención de Enfermedades de EEUU, (CDC) detalla
4 niveles de Bioseguridad para el manejo de agentes biológicos, por lo tanto,
nuestros laboratorios, que desarrollan las tareas con muestras infecciosas,
hacen uso de equipos y documentos que se desarrollan según protocolos
establecidos.
- Los niveles de bioseguridad pueden ser clasificados en 4.
a) NIVEL DE BIOSEGURIDAD 1
- Agentes que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en los
seres humanos o animales
- Escaso riesgo para el individuo y para la comunidad. Ej. E.coli
b) NIVEL DE BIOSEGURIDAD 2
- Agentes patógenos que pueden producir enfermedades humanas o
animales, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y el
riesgo de propagación es limitado en el laboratorio y la comunidad.
- Riesgo individual moderado para los individuos y limitado para la comunidad.
Ej. S. typhi, virus Hepatitis B
c) NIVEL DE BIOSEGURIDAD 3
- Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser
humano o el animal. Existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.
- Son de alto riesgo para el individuo, bajo para la comunidad. Ej. M.
tuberculosis, Brucella sp
d) NIVEL DE BIOSEGURIDAD 4
- Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser
humano o el animal y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro.
Normalmente, no existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.
- Son de alto riesgo para el individuo y para la comunidad. Ej. virus Ebola

1.1. Laboratorio básico de nivel I y II

Nuestro laboratorio se dedica la análisis de agentes de biológicos del grupo

I, II y III

- En cuanto al trabajo de los agentes biológicos del grupo I y II, seguimos los
siguientes procedimientos:
  El trabajo se realiza sobre mesadas de trabajo utilizando prácticas
estándar.
 Se usarán en todo momento túnicas y guantes protectores
adecuados para el trabajo en el laboratorio.
 Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de
protección cuando sea necesario proteger los ojos y el rostro de
salpicaduras, impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial.
 En las zonas de trabajo estará prohibido comer, beber, aplicar
cosméticos o manipular lentes de contacto.
 Estará estrictamente prohibido pipetear con la boca. Para extraer o
agregar líquidos y/o soluciones deben utilizarse dispositivos
pipeteadores mecánicos o automáticos.
 Todos los procedimientos deben llevarse a cabo con precaución a fin
de minimizar la creación de salpicaduras o aerosoles.
 Todos los derrames, accidentes y exposiciones serán notificados al
supervisor; se seguirán prácticas estrictas para la contención de los
derrames.
- En cuanto a los agentes biológicos del grupo III, contamos con una cabina
biológica tipo II, la cual:
 Además de proteger al operario, ofrecen protección al producto de
contaminación externa.
 Son válidas para el manejo de agentes biológicos de los grupos 1, 2
y 3.
2. Equipos
2.1. Microscopios
Es un equipo que consta de un juego de lentes que permiten al ojo humano
observar detalles que a simple vista seria imposible observar.
Permite determinar la presencia de parásitos, larvas, restos de tejido,
componentes de la sangre y otros cuerpos
En análisis patológicos permite estudiar tejidos para determinar
enfermedades, malformaciones o deficiencias.
2.2. Centrifugas
Se utilizan para la separación de solutos de sus solventes.
2.3. Balanza analítica
Permite utilizar una correcta cantidad de los reactivos a utilizar.
 2.4. Esterilizadores/Autoclaves
Utilizan el vapor para esterilizar los equipos e instrumentos,
eliminando las bacterias, virus, hongos o esporas presentes
2.5. Espectrofotómetro
Se utiliza para el análisis de muestras fisiológicas, basándose en el
principio de que cada compuesto químico absorbe o emite energía
lumínica de diferente longitud de onda. Esta longitud puede estar en
el espectro de luz visible o en otra parte del espectro
electromagnético.

3. Algunos criterios útiles para el diagnóstico de parásitos humanos

3.1. Regla de oro en Parasitología.
Recobrar, identificar y demostrar el parasito, para poder determinar
la etiología del proceso de infección o enfermedad.
a) Métodos directos: Identificar parásitos o sus productos de
reproducción
b) Métodos indirectos: Obtener con pruebas serológicas y de otro
tipo resultados que, unido a la clínica y a otras consideraciones, dan
un diagnóstico probable.
3.2. Ejemplos de muestra a enviar a laboratorio
- Heces
- Sangre
- Orina
- Secreciones
- Esputo
- Excreciones
- Pus
3.3. Métodos directos
- Baermann-extrae larvas
- Flotación de Sheather
- Raspado de úlcera perianal-demuestra trofozoitos de Entamoeba histolytica
en amebiasis cutis
- Lavado bronquial-demuestra estadios de Pneumocystis carinii en algunas
situaciones de inmunocompromiso.
 3.4. Métodos indirectos
- Inmunológicos
- Hemaglutinación indirecta para tripanosomiasis americana
- Inmunohistoquímicos - microsporidiosis
- Rayos X - de abdomen para visualizar cambios en diagnostico de
angiostrongilosis abdominal
- Pomografía axial computarizada
- Neurocisticercosis
- Resonancia magnética - - Péptidos sintéticos, otra tecnología biomolecular-
diferenciar Trypanosoma cruzi de T. rangeli

4. Procedimientos para identificar parásitos intestinales

Uno de los métodos que realizamos en nuestro laboratorio consiste en el método
Graham.
4.1. Diagnóstico de Enterobius vermicularis por el método Graham
(Cinta adhesiva transparente)
- El ciclo biológico de E. vermicularis comienza durante la noche. Cuando la
hembra migra fuera del lumen del intestino grueso y realiza la puesta de
huevos. Este evento biológico hace que el diagnóstico de la parasitosis
mediante las técnicas coproscópicas convencionales sea poco eficaz,
necesitándose por lo tanto una técnica ovicoscópica: Búsqueda de huevos
fertilizados (Cazrla y coils. 2006)
4.1.1. Propósito

Recobrar huevos de Enterobius vermicularis de la región anal y

perianal de individuos infectados. Hembras de E. vermicularis migran
del ciego e intestino grueso a la región exterior del ano, adonde
depositan huevos casi infectantes, razón por la cual casi nunca se
ven en las heces. Para diagnosticar infecciones por E. vermicularis,
la cinta transparente adhesiva es el método indicado.

4.1.2. Preparación del paciente

La toma de esta muestra es fácil de realizar aún por personas de poca

preparación o analfabetas, siempre que se provea una explicación
clara y sencilla. Para este o cualquier otro método que se utilice, la
muestra debe tomarse antes que el paciente se lave, bañe o defeque,
 durante la noche o inmediatamente al levantarse por la mañana (F.
vermicularis) NOTA: En ocasiones se pueden ver los gusanos
adultos al separar los glúteos o sobre las heces a! defecar. Si esto
sucede, deberán llevarse al laboratorio para la confirmación
morfológica. Como instrucción a la madre, se le indica de recogerlos
y colocarlos en alcohol o vinagre en un bote limpio y llevarlos al
laboratorio.

4.1.3. Materiales
- Porta-objetos de 7.5 X 2.5 cm
- Baja-lenguas o palo de paleta
- Cinta transparente adhesiva de 2 cm de ancho Xilol
- Etiquetas Pipeta Pasteur y bulbo o perilla de goma
- Frasco con desinfectante para descartar material
4.1.4. Procedimiento
- Colocar una tira de cinta transparente adhesiva sobre un porta-objetos limpio
y seco, dejando un extremo doblado por debajo de la lámina y en el otro
pegar una etiqueta y escribir la identificación del paciente.
- Al momento de tomar la muestra, pelar la cinta suavemente del porta-objetos,
tomándola por la parte etiquetada.
- Colocar el porta-objetos sobre un baja-lenguas o palo de paleta y doblar la
cinta sobre un extremo de éste, con la parte adhesiva hacia fuera.
- Con el paciente en decúbito, apartar los glúteos con una mano y apretar la
cinta adhesiva firmemente a un lado y otro de los pliegues perianales.
- Volver a colocar la cinta sobre el porta-objetos y descartar el baja-lenguas.
La muestra puede transportarse o guardarse protegida, hasta el momento
del examen.
- Para examinar, desprender la cinta transparente hasta la parte expuesta,
agregar 1-2 gotas de xilol a la lámina y apretar de nuevo la cinta en su lugar.
El xilol (puede ser tolueno) aclara la preparación, elimina las burbujas de aire
y hace más visibles los huevos. Examinar inmediatamente al microscopio.
4.1.5. Características de los huevos de E. vermcularis

Los huevos de Enterobius vermicularis se observan de cáscara

transparente, alargados u ovoides, con un lado más aplanado; tienen
un embrión en su interior y miden entre 50- 60 μm por 20-30 μm.