PRÁCTICA N 2.

EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS DE VEGETALES.

SÁNCHEZ AYA Lina Fernanda1 OCHOA GUEVARA Karla Fransheska 2,
Laboratorio de Bioquímica, Departamento de Biología, Facultad de ciencias básicas,
Universidad de Pamplona.

En este informe se analizara el procedimiento general de extracción de ácidos nucleicos llevado a

cabo de la mano con el docente, el cual consiste en la lisis celular (por medio de una mezcla de
detergente /sal), inactivación de las nucleasas intracelulares y en separación de los ácidos nucleicos
de los demás componentes celulares. Finalizando con la precipitación de los ácidos nucleicos por
medio de la acción del alcohol (etanol).La lisis celular depende en gran medida del tipo de muestra
a tratar.
Palabras clave: extracción, lisis celular, inactivación, separación, precipitación, ETANOL.
ABSTRACT.
In this report we will analyze the general procedure of extraction of nucleic acids carried out by hand
with the teacher, which consists of cell lysis (by means of a mixture of detergent / salt), inactivation
of intracellular nucleases and in separation of the nucleic acids of the other cellular components.
Finishing with the precipitation of nucleic acids through the action of alcohol (ethanol). Cell lysis
depends largely on the type of sample to be treated.
Key words: extraction, cell lysis, inactivation, separation, precipitation, ETHANOL.

INTRODUCCIÓN.
Los ácidos nucleicos son macromoléculas constituidas por la unión mediante enlaces químicos de
unidades menores llamadas nucleótidos. Los ácidos nucleicos son compuestos de elevado peso
molecular que están presentes en el núcleo de las células (también en determinados orgánulos como
mitocondrias y cloroplastos). Son las moléculas encargadas de almacenar, transmitir y expresar la
información genética. Existen dos tipos ADN (ácido desoxirribonucleico) y ARN (ácido
ribonucleico).(1)
Los nucleótidos del DNA forman una hélice constituida por dos hebras antiparalelas que se
mantienen unidas mediante puentes de hidrógeno. Para empaquetarse, el DNA se une a
nucleoproteínas, denominadas histonas; y cuando se quieren separar estos componentes, se aplica
tratamiento con ácidos o con concentraciones altas de sales. (2)
Los nucleótidos del RNA se encuentran formados por el azúcar ribosa, unida mediante enlace
glucosídico a una de cuatro bases nitrogenadas (adenina, guanina, uracilo o citocina), formando
moléculas de una sola cadena. (2)
 Estructura de los nucleótidos de los ácidos nucleicos

De acuerdo con el tipo de célula en estudio, para aislar los ácidos nucleicos es necesario romper la
membrana y la pared celular mediante métodos físicos, químicos o enzimáticos, para liberar las
moléculas de DNA al medio extracelular. A partir de esto, la purificación de los ácidos nucleicos se
realiza mediante la extracción de las proteínas y los lípidos con solventes orgánicos, y su
recuperación, en un paso posterior, al precipitarlos con alcohol (isopropanol o etanol). (3)
MATERIALES.
Para el desarrollo experimental de la temática propuesta se requieren de los siguientes materiales los
cuales fueron necesarios para la obtención de resultados satisfactorios. Balanza analítica marca
(ABC) utilizada para obtener las cantidades de masa necesaria de la sal a utilizar. Posteriormente se
utilizaron distintos materiales de vidrio como los: caja petri, varilla de vidrio, vaso precipitado de
50ml y 500ml, pipetas graduadas de distintos volúmenes, vidrio reloj, probetas y otros materiales
auxiliares como, espátula, mortero y gotero.
Entre los reactivos utilizados se encuentran, Etanol al 99.8% y agua destilada. Estos fueron
suministrados por la Universidad.
PROCEDIMIENTO.
Preparación de la solución de lisis para extraer ácidos nucleicos.
Se disolvió 5ml de jabón liquido con 45ml de agua obteniendo un volumen total de 50ml se
agregaron g de NaCl (sal) y se mezcló todo con ayuda de una varilla de vidrio.
Tratamiento de la muestra.
Se maceraron los vegetales en el mortero, esto se hizo en compañía de la solución lisis teniendo en
cuenta la relación muestra/solución anteriormente planteada por el docente.
Precipitación del ADN.
Se midieron 10ml del extracto el cual fue filtrado con anterioridad y se agregó a una probeta de
vidrio de igual manera en una caja petri se midieron y agregaron 10 ml de la muestra ya filtrada.
Posteriormente tanto a la probeta como a la caja petri se agregaron 10ml a cada una de ETANOL.
RESULTADOS.

Imagen 1. Extracción ADN Y ARN de Tomate.

Imagen 2. Extracción ADN Y ARN de Fresa.

Imagen 3. Extracción de ADN Y ARN de Cilantro.

Imagen 4. Extracción de ADN Y ARN de Banano.

 Imagen 5. Extracción de ADN Y ARN de Cebolla.

ANALISIS DE RESULTADOS.
La extracción de acidos nucleicos como mencionamos anteriormente requiere una serie de etapas
básicas:
En primer lugar tiene que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al
núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el
ADN. Los deterjentes en el caso de la practica realizada s trabajo mas especifiamente con jabon
liquido el cual rompe la barrera lipidica. La sal disminuye la solubilidad de las proteinas cubriendo
los terminales fosfatos negativos dandole vía libre al alcohol el cual en este proceso hace que el
ADN pierda contactocon las moleculas de agua que lo rodean y lo aisla de la solucion acuosa,
haciendo que este se precipitey es apreciado como especie de una telaraña. (3)
En todas las extracciones realizadas se videncio una respuesta satisfactoria en la meodología
utilizada ya que en todos expperimentos se evidencio el presipitado de acidos nucleicos donde cabe
resaltar que no se puede hablar de ADN puro ya que este estamezclado con ARN.

CONCLUSIÓN.

BIBLIOGRAFÍA.
(1)Murray W. Nabors Introducción a la Botánica. 2005. Editorial Pearson.
(2)Bioquímica vegetal básica (4). Ácidos nucleicos (2012) Recuperado de:
http://fisiolvegetal.blogspot.com/2012/08/bioquimica-vegetal-basica-4-acidos.html
(3) Malajovich, M. (n. d.) Extracción de ADN. Biotecnología-Enseñanza y divulgación.
[Abril 14,2017]. Recuperado de
https://bteduc.com/guias_es/68_Extraccion_de_ADN_(experimento_ambi guo).pdf