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DIRECTOR 1.
ISRAEL ALBERTO BARROS PORNOY
M.S.C. Ciencias Y Tecnología de los alimentos.
DIRECTOR 2.
JAIRO ENRIQUE VENGOECHEA PIÑERES
Químico Farmacéutico
GRUPO DE INVESTIGACION.
GIAL. (Grupo de investigación en alimentos)
2
ESTUDIO IN VITRO DE LOS EXTRACTOS DE LA PLANTA DEL MARAÑÓN
(ANACARDIUM OCCIDENTALES) CON ACCIÓN HIPOGLICÉMICA PARA SU
USO COMO ALIMENTO NUTRACÉUTICOS.
ESTUDIANTES INVESTIGADORES
3
INDICE
Contenido
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. .............................................................. 8
1.1 DESCRIPCIÓN DEL PROBLEMA.............................................................. 8
1.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA ............................................................ 9
2. JUSTIFICACION ............................................................................................... 9
3. OBJETIVOS.................................................................................................... 10
3.1 OBJETIVO GENERAL. ................................................................................ 10
3.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS. ...................................................................... 10
4. RESULTADOS ESPERADOS ........................................................................ 10
4.1 RESULTADOS DIRECTOS. ........................................................................ 10
4.2 RESULTADOS INDIRECTOS. ..................................................................... 11
5. USUARIOS DIRECTOS E INDIRECTOS POTENCIALES DE LOS
RESULTADOS DE INVESTIGACION. .................................................................. 11
5.1 USUARIOS DIRECTOS ............................................................................... 11
5.2 USUARIOS INDIRECTOS ........................................................................... 11
6. IMPACTO ESPERADO................................................................................... 11
6.1 IMPACTO SOCIOECONOMICO .................................................................. 11
6.2 IMPACTO ACADEMICO .......................................................................... 12
6.3 IMPACTO AMBIENTAL............................................................................ 12
7. MARCO TEORICO ...................................................................................... 12
7.1 MARAÑON (ANACARDIUM OCCIDENTALES). ...................................... 12
7.2 CARACTERISTICAS GENERALES............................................................. 13
7.2 CLASIFICACIÓN TAXONOMICA ............................................................. 13
7.3 CARACTERISTICAS BOTÁNICAS .......................................................... 14
7.4 COMPOSICIÓN QUÍMICA Y NUTRICIONAL DE LA HOJA, TALLO
SEUDOFRUTO (PULPA) Y DE LA NUEZ DE MARAÑÓN. ............................... 16
8. USOS.............................................................................................................. 20
8.1 USOS MEDICINALES.................................................................................. 20
8.2 USOS INDUSTRIALES ................................................................................ 20
9. ESTADO DEL ARTE....................................................................................... 21
4
COMPOSICIÓN QUÍMICA Y ACTIVIDAD HIPOGLUCÉMICA DE LOS
EXTRACTOS DE ANACARDIUM OCCIDENTALE L. (MARAÑÓN) .................. 21
CRIBADO DE LA ACTIVIDAD HIPOGLUCÉMICA IN VITRO DE MURRAYA
KOENIGII Y CATHARANTHUS ROSEU ............................................................ 22
COMPOSICIÓN QUÍMICA Y TAMIZAJE FITOQUÍMICO DEL POLVO DE
HOJAS Y RETOÑOS DEL ANACARDIUM OCCIDENTALE L. (MARAÑÓN) .... 23
EFECTOS DEL CONSUMO DE UNA BEBIDA DE CAJUIL (ANACARDIUM
OCCIDENTALE) SOBRE LA RESPUESTA GLUCEMICA E INSULINICA EN
PACIENTES CON DIABETES MELLITUS TIPO 2. ........................................... 23
EL USO POPULAR DE MARAÑÓN (ANACARDIUM OCCIDENTALE L. –FRANZ
EUGEN KÖHLER– 1887) EN TABATINGA (AMAZONAS, BRASIL) Y SU
POTENCIAL COMO PLANTA CICATRIZANTE ................................................. 24
EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN FISICOQUÍMICA DEL ACEITE DE LA
SEMILLA (ALMENDRA) DEL MARAÑÓN (ANACARDIUM OCCIDENTALE L). 24
ANACARDO (ANACARDIUM OCCIDENTALE L.) ............................................. 26
ANALISIS FISICOQUIMICO, SENSORIAL Y MICROBIOLOGICO DEL JUGO
ELABORADO A PARTIR DE LA PULPA DE MARAÑON (ANACARDIUM
OCCIDENTALE L.) ............................................................................................ 26
10. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN ................................................. 27
10.1 TIPO DE ESTUDIO: ...................................................................................... 27
10.2 PLAN DE MUESTREO .............................................................................. 27
10.2.1 Población. ............................................................................................ 27
Se seleccionarán hojas, corteza y frutos de árboles de Anacardium
occidentale (marañón) de la Universidad del atlántico, de acuerdo con los
criterios descritos a continuación: ................................................................... 27
10.2.2 criterios de inclusión ................................................................................ 27
10.2.3 Criterios de exclusión........................................................................... 27
10.2.4 Muestra ................................................................................................ 27
10.2.5 Tipo de Muestreo. ................................................................................. 27
10.3 DISEÑO EXPERIMENTAL ......................................................................... 27
10.3.2 Trabajo de campo. ............................................................................... 27
10.3.3 Distribución geográfica: ....................................................................... 27
10.3.4 Morfología del tronco ........................................................................... 28
10.3.5 Morfología de la hoja ........................................................................... 28
5
10.3.6 Morfología del fruto .............................................................................. 28
10.3.6 Certificación Taxonómica ..................................................................... 28
10.3.7 Desarrollo del proyecto. ....................................................................... 28
10.4 ESTANDARIZAR EL EXTRACTO CON ANÁLISIS FISICOQUÍMICOS E
INSTRUMENTALES: ......................................................................................... 30
10.5 SUSTANCIAS QUÍMICAS Y REACTIVOS PARA LA DETERMINACIÓN DE
LA ACYIVIDAD HIPOGLICEMICA IN VITRO. ................................................... 31
10.5.1 Determinación de la capacidad de adsorción de glucosa. ................... 31
10.5.2 Efecto de los extractos de plantas sobre la difusión in vitro de la
glucosa. .......................................................................................................... 31
10.5.3 Efecto de extractos de corteza de marañón en cinética de amilolisis in
vitro. ................................................................................................................ 32
10.5.4 Captación de glucosa por las células de levadura. .............................. 32
10.5.5 Análisis estadísticos............................................................................. 32
11. PRESUPUESTO ......................................................................................... 33
12. CRONOGRAMA .......................................................................................... 34
13. BIBLIOGRAFIA............................................................................................ 35
14. ANEXOS ......................................................................................................... 38
14.1 TRABAJO DE CAMPO. ............................................................................. 38
14.2 ESTANDARIZACIÓN DEL EXTRACTO Y PRUEBAS BIOLOGICAS. ....... 39
INDICE DE FIGURAS.
Figura 1: Fruto del Marañón (AnacardiumOccidentales .................................. 12
Figura 2: Árbol de Marañón ................................................................................ 12
Figura 3: espectro de masa obtenido del extracto de corteza en modo
negativo................................................................................................................ 18
INDICE DE TABLAS
Tabla 1: Taxonomía ............................................................................................. 13
Tabla 2: Características botánicas .................................................................... 14
Tabla 3: Porcentaje de los esteroles, material saponoficable y fitoesteroles
de las hojas y los retoños del Anacardium occidentale (base seca) .............. 16
6
Tabla 4: Perfil de ácidos grasos en el polvo y retoños de Anacardium
occidentale (base seca) ...................................................................................... 16
Tabla 5: Minerales en el polvo y retoños de Anacardium occidentales (base
seca) ..................................................................................................................... 17
Tabla 6: Tamizaje fitoquímico del polvo de hojas y retoños de Anacardium
occidentale........................................................................................................... 17
Tabla 7: Composición cuantitativa de flavonoides y fenoles presentes en la
hoja y la corteza de Anacardium Occidentales L. ............................................ 19
Tabla 8: Composición química en 100 gramos de pulpa ................................. 19
Tabla 9: Cantidad de nutrientes por cada 100 gr de nuez ............................... 19
Tabla 10: Presupuesto ........................................................................................ 33
Tabla 11: Cronograma de actividades ............................................................... 34
ANEXOS
Anexos 1:Flujograma de trabajo de campo ...................................................... 38
Anexos 2: Estandarización del extracto y pruebas biológicas. ...................... 39
7
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.
8
Anacardium occidentale L. con el fin de conocer su actividad hipoglicemiante in
vitro y obtener un producto nutracéutico con acción hipoglicemiante. 3
2. JUSTIFICACION
9
y con este conocimiento generar conciencia en su utilidad. Gracias al alto
contenido de metabolitos secundarios.10
Este documento de investigación sirve como un apoyo teórico experimental
fitoquímico y de farmacognosia de la especie en estudio, que tiene como objetivo
evaluar la composición química y la actividad hipoglucémica de los extractos
hidroalcohólicos de las hojas, de la corteza y del fruto de A. occidentale
(marañón). Con fines de obtención de un producto Nutracéutico, el cual puede ser
útil a cualquiera que esté interesado en las propiedades de esta planta y su uso en
la vida cotidiana.
Por último, se desea con esta investigación generar conciencia de la importancia
que tiene la naturaleza en nuestras vidas que, si destruimos nuestro medio
ambiente contaminándolo, talando árboles, quemando hectáreas etc., también
estaremos destruyendo la cura de muchas enfermedades que nos afectan,
tenemos que orientar nuestra cultura a entender que la naturaleza es salud.
3. OBJETIVOS.
4. RESULTADOS ESPERADOS
10
Anacardium occidentale, cuya evidencia documentada sirva como base para
futuras investigaciones que se realicen sobre dicha temática.
4.2 RESULTADOS INDIRECTOS.
6. IMPACTO ESPERADO
11
distribuidores y supermercados que deseen realizar la comercialización para su
consumo.
6.2 IMPACTO ACADEMICO
7. MARCO TEORICO
12
7.2 CARACTERISTICAS GENERALES
Anacardium occidentale, también conocido como, marañón es un árbol originario
del nordeste de Brasil. Los componentes son utilizados en la fabricación de
diversos productos, como por ejemplo Alimentos, cosméticos, medicamentos,
Alimentos y nutracéuticos.
Se caracteriza por ser un árbol de aspecto de gran tamaño, su promedio de altura
mide aproximadamente entre 5 y 10 metros, perenne y cuyo tronco se ramifica a
muy baja altura. La vida de un árbol de Anacardium Occidentales L. es de unos 35
años aproximadamente y produce frutos desde el tercer año de vida.
presenta excelentes propiedades medicinales y nutricionales (Ofusori et al., 2008);
posee ramificación baja y altura media variable de 5 a 14 metros, dependiendo del
genotipo y condición climática, su fruto puede ser rojo y amarillo, es astringente y
nutricional, contiene 47% de grasa, 21% de proteína y 22% de carbohidratos,
vitaminas y aminoácidos (Mestres et al, 2009; Omosuli et al.,2009) el fruto está
unido a un pseudo fruto o nuez de color gris y forma arriñonada con una
composición química del 46.3% de aceite respecto a su peso total (Castro et al.,
2007). Este árbol es ampliamente aprovechado: La corteza se utiliza como
infusión para el tratamiento de la diabetes tipo 2, (Geovanny Ramón Japón,
Viviana García Mir 2017) antiinflamatorio y cicatrizante de heridas (Ana Paula
Perone de Andrade 2012). El fruto es usado en la manufactura de dulces, jugos,
conservas, vinos; es antiescorbútico y diurético; la nuez, se emplea para
endurecer chocolates y en la fabricación de dulces y jugos, (Chipojola et al., 2009).
En la nuez se producen dos tipos de aceites: uno que pertenece a la cáscara
(pericarpio, testa), de shading negro, viscoso, es irritante y cáustico, contiene
compuestos fenólicos (Setianto et al., 2009), cardol y con aplicaciones en la
industria de plásticos, insecticidas y tintas; el otro aceite que es extraído de la
almendra, es de shading amarillo brillante y menos viscoso que el aceite foremost.
7.2 CLASIFICACIÓN TAXONOMICA
Taxonomía Anacardium
occidentales
Phyllum Plantae
Subphyllum Spermatophyta
Clase Magnoliophytina
Subclase Magnoliopsida
Orden Rosidas
Familia Sapindales
Subfamilia Anacardiaceas
Tabla 1: Taxonomía
Fuente: https://www.ecured.cu/
13
7.3 CARACTERISTICAS BOTÁNICAS
CARACTERISTICAS BOTANICAS
Hoja Tronco Fruto Pedúnculo o Composición
seudo fruto química.
Las hojas del Posee un El fruto del Es la parte de En la corteza de
MARAÑÓN tronco corto, MARAÑÓN la planta que marañón
son simples, tortuoso y es una nuez se consume encontramos
alternas, sin con de color como fruta una serie de
estípulas, de ramificación verde fresca. Se metabolitos
ápice dispersa, así grisáceo que trata de un secundarios los
redondeado y como una mide de 2 a 3 pedúnculo cuales son: Las
se copa amplia cm de largo, engrosado, hojas contienen
encuentran en edad tiene forma con forma de flavonoides y
agrupadas en productiva. de riñón, un pera, que antocianinas,
los extremos Su corteza, pericarpio liso mide de 4 a 8 taninos,
de las ramas. de color gris y brillante, un cm de largo, esteroles y
Miden hasta a pardo claro, mesocarpio y posee una triterpenos,
25 cm de contiene una con contenido pulpa glucósidos
longitud y 6 savia de aceites, y carnosa y saponínicos; la
cm de ancho. lechosa. recibe el jugosa. En su corteza
nombre de extremo se contiene
anacardo o ubica el fruto flavonoides y
nuez del verdadero antocianinas,
Marañón. El con forma de taninos,
aceite que se nuez. esteroles y
halla en la triterpenos; la
nuez, el raíz contiene lo
cardol, es mismo que la
muy irritante corteza. El
para la piel y aceite contiene
se extrae sustancias que
calentando causan
las nueces. dermatitis, tales
La nuez es como
muy cotizada pentadecilfenol.
y tiene buen La fruta
mercado de verdadera
exportación. contiene un
aceite cáustico,
el cardol y ácido
anacárdico.
14
Estos también
son capaces de
causar
dermatitis. Se
ha reportado la
presencia de
los siguientes
compuestos en
diferentes
partes del árbol:
acetofenona (-)
–
epiafzelequina,
agathisflavona,
a-amirina,
anacardol,
apigenina,
alcohol
araquidílico,
ácido-p
hidroxibenzoico,
cardonal, (-)-
epicatequina,
cicloartenol, n-
eicosano, ácido
gentisitico,
leucocianidina,
limoneno,
kaempferol,
naringenina,
ácido p -
ocatéquico,
glucósidos de
quercetina,
derivados de
resorcinol,
robustaflavona,
B sitosterol, a-
selineno, y
vitamina C.
Fuente: https://www.ecured.cu/
15
7.4 COMPOSICIÓN QUÍMICA Y NUTRICIONAL DE LA HOJA, TALLO
SEUDOFRUTO (PULPA) Y DE LA NUEZ DE MARAÑÓN.
16
Minerales (%) Polvo AO DE (±)
Calcio 0.35 (%) 1.39
Fósforo 0.25 (%) 0.79
Magnesio 0.18 (%) 0.78
Sodio 0.22 (%) 0.39
Potasio 0.57 (%) 1.79
Cobre (mg/kg) 8.00 (%) 1.29
Zing (mg/kg) 28.00 (%) 0.59
Hierro (mg/kg) 200 (%) 0.39
Manganeso (mg/kg) 500 (%) 1.56
Tabla 5: Minerales en el polvo y retoños de Anacardium occidentales (base seca)
AO: Anacardium occidentale, media: ± desviación estándar
Fuente: Composición química y tamizaje fitoquímico del polvo de hojas y retoños
del Anacardium occidentale L. (marañón). (Dr. C. Yordan Martínez Aguilar
17/01/2012)
Metabolitos secundarios Extracto etéreo Extracto etanólico Extracto acuoso
Sudán III (ácidos +
grasos)
Mayer y Wagner - + +
(alcaloides)
Baljet (coumarinas) + ++
Espuma (saponinas) + +
Shinoda (flavonoides) + +
Aceites esenciales +
Wagner (alcaloides) +
Mucilagos -
Felhing (Azúcares + -
reductores)
Bortrager (quinonas) - +
Libermamn-Burchard +
(triterpenos o
esteroides)
Nihidrina (aminoácidos +
libres)
Antocianidinas +
Cloruro Férrico +(Verde oscuro)
(Fenoles o taninos
Tabla 6: Tamizaje fitoquímico del polvo de hojas y retoños de Anacardium occidentale
(-): ausencia, (+): presencia, (++): abundancia
17
Figura 3: espectro de masa obtenido del extracto de corteza en modo negativo
18
Composición Química cuantitativa Concentración [mg/mL]
Hoja [mg/mL]
Flavonoides 2.75
Fenoles 19.18
Corteza Concentración [mg/mL]
Flavonoides 0.73
Fenoles 18.58
Tabla 7: Composición cuantitativa de flavonoides y fenoles presentes en la hoja y la corteza de
Anacardium Occidentales L.
Fuente: Composición química y actividad hipoglucémica de los extractos de
Anacardium occidentale L. (marañón). (Geovanny Ramón Japón 2017).
VARIABLE CONTENIDO
Fibra 0.4 - 1 g
Carbohidratos 9.08 - 9.75 g
Ceniza 0.19 – 0.34 g
Calcio 0.9 – 5.4 mg
Fosforo 6.1 – 21.4 mg
Hierro 0.19 – 0.71 mg
Tiamina 0.023 – 0.03 mg
Agua 84.4 – 88.7 mg
Tabla 8: Composición química en 100 gramos de pulpa
Fuente: COMPOSICION QUIMICA EN 100 g DE PARTE COMESTIBLE/ Purdue University. Fruits of warm
climates.Julia F. Morton, Miami, FL
Carbohidratos 30.19 g
Azúcares 5.91 g
Grasas 43.85 g
Proteínas 18.22 g
Tiamina (vit. B1) 0.42 mg (32%)
Riboflavina (vit. B2) 0.06 mg (4%)
Niacina (vit. B3) 1.06 mg (7%)
Vitamina B6 0.42 mg (32%)
Vitamina C 0.5 mg (1%)
Calcio 37 mg (4%)
Hierro 6.68 mg (53%)
Magnesio 10 mg (3%)
Fósforo 50 mg (7%)
Potasio 660 mg (14%)
Tabla 9: Cantidad de nutrientes por cada 100 gr de nuez
19
8. USOS
8.1 USOS MEDICINALES
20
Industrializable fruto (cáscara), semilla: El aceite que se colecta del proceso de
rostizar la semilla es útil en la elaboración de resinas sintéticas, barnices,
plásticos, en el estampado de tejidos de hilo o de algodón, productos
farmacéuticos, producción de etanol.16
Insecticida / Tóxica corteza, fruto (cáscara): El aceite acre que mana de la
corteza es muy apreciado para elaborar repelentes de insectos. El aceite del fruto
(cardol) se emplea para fabricar insecticidas y se usa para proteger las cubiertas
de los libros, maderas talladas y artículos varios.16
Medicinal, fruto, semilla, hoja, corteza: Se le atribuyen las siguientes
propiedades o acciones: antidisentérica, anti-inflamatoria, antitusiva,
antiparasiticida, afrodisiaca, astringente, diurética, febrífuga, hipoglicémica,
hipotensiva, purgante, refrigerante, estomáquica y tónica. Fruto (aceite, cardol):
poderoso aceite vesicante, vermífugo, se emplea para remover verrugas y para
combatir la lepra y úlceras. Hoja, corteza: diabetes, diarrea e hinchazones de
origen sifilítico. Pedúnculo carnoso o hipocarpio (jugo): hemoptisis, bronquitis y
tos, enjuague para la inflamación de amígdalas. Se usa como tónico general,
ducha para las secreciones vaginales, como astringente para detener sangrados
(extracción de dientes), disentería, hipoglucemia.16
Geovanny Ramón Japón, Viviana García Mir, Osmany Cuesta Rubio, Carmita
Jaramillo Jarmillo, Elizabeth Guzmán Heras en el año 2017 realizaron una
investigación sobre la evaluación de la composición química y la actividad
hipoglucémica de los extractos hidroalcohólicos de las hojas y la corteza de
Anacardium occidentale L. (marañón), realizaron el control de la calidad de las
drogas vegetales y de los extractos hidroalcohólicos 1:1 obtenidos por percolación,
posteriormente identificaron los metabolitos mediante tamizaje fitoquímico. Una
vez caracterizada la composición química por espectrometría de masa empleando
un espectrómetro LTQ-XL y realizada la cuantificación mediante los métodos
espectrofotométricos en el equipo Milton Roy Spectronic 21 d, se evaluó la
actividad hipoglucémica con la prueba de glucosa al 40 % inducida en ratas
21
Wistar, en el estudio se administró metformina por vía oral en dosis de 500 mg/kg
a un primer grupo (control) y los extractos de hojas y de corteza en dosis de 750
mg/kg a otros dos grupos. Transcurridos 60 min de la aplicación de los
tratamientos se indujo la hiperglucemia mediante la administración de la solución
de glucosa (2 mL/200 g) pudiendo así comprobar que los extractos de la hoja del
marañón poseen mayor capacidad hipoglucemiante mostrando un comportamiento
similar a la Metformina, los datos obtenidos en la investigación fueron
corroborados mediante un ANOVA, prueba t de student y regresión lineal con el
software estadístico SPSS versión 21. [3].
22
COMPOSICIÓN QUÍMICA Y TAMIZAJE FITOQUÍMICO DEL POLVO DE HOJAS Y
RETOÑOS DEL ANACARDIUM OCCIDENTALE L. (MARAÑÓN)
En el año 2012 el Dr. C. Yordan Martínez Aguilar, Dr. C. Orlando Martínez Yero,
Dr. Ariel Escalona Arias, Lic. Fernando Soto Rodríguez, Dr. C. y Manuel Valdivié
Navarro realizaron un estudio investigativo que tuvo por objetivo determinar la
composición química y el tamizaje fitoquímico en el polvo de hojas y retoños del
Anacardium occidentale L, para ello seleccionaron diversidad de hojas en cuanto a
su tamaño, realizaron la molienda de las hojas previamente deshidratadas entre
60 a 65 ºC durante 16 horas, con un molino eléctrico de cuchillas paralelas con un
molinaje de 1 mm, al polvo obtenido le realizaron un análisis bromatológico,
determinando: materia seca, proteína bruta, fibra bruta, material saponificable,
esteroles, ácidos grasos totales y proteína soluble. En el cual detectaron mayor
porcentaje de materia seca, seguido de fibra bruta, y mayor porcentaje de fructosa
que de glucosa, estas fueron determinados por cromatografía liquida de alta
eficiencia (HPLC) Hewlett Packard (Seattle, WA). Encontraron por cromatografía
de gases en un cromatógrafo Hewlett Packard 7989 equipado con detector de
ionización de flama (FID) que los ácidos grasos saturados son los mayoritarios, en
especial el octadecanoico; en los monoinsaturados detectaron una mayor
concentración del ácido graso gadoleico y no detectaron ácidos grasos esenciales.
La determinación de minerales como magnesio, potasio y calcio se realizó por
espectrofotometría de absorción atómica en un equipo Perkin Elmer. Además, a
partir de los retoños y las hojas del Anacardium occidentale elaboraron extractos
con éter de petróleo, agua y etanol para hacer un tamizaje fitoquímico, así
detectaron flavonoides y saponinas en los extractos etanolicos y acuosos. Los
datos los analizaron mediante el módulo de estadística descriptiva para ello
emplearon el software estadístico SPSS versión [5].
EFECTOS DEL CONSUMO DE UNA BEBIDA DE CAJUIL (ANACARDIUM
OCCIDENTALE) SOBRE LA RESPUESTA GLUCEMICA E INSULINICA EN
PACIENTES CON DIABETES MELLITUS TIPO 2.
23
cítrico y benzoato de sodio. Después realizaron una prueba de respuesta
glucémica e insulínica postprandial con los 10 sujetos, con ingesta de 50 g de
carbohidratos y 250 mL de agua, una semana después realizaron la prueba, pero
con 250 mL de bebida de cajuil. La respuesta postprandial fue estimada con el
área incremental positiva, con la determinación del área baja lo curva según la
regla de trapezoides. Los resultados que obtuvieron indican que la bebida de cajuil
disminuyo la glucemia a los 120 min después de la ingesta del pan blanco, con
una disminución significativa en el área bajo la curva de glicemia (p<0,05). Los
niveles de glucosa (mg/dL) los determinaron con el método de glucosa oxidasa,
empleando un estuche comercial (Wiener Lab.). Los niveles séricos de insulina
(μUI/mL) los midieron con el método de inmunoensayo enzimático (EIA), utilizando
un estuche comercial (DRG Diagnostics) [6].
EL USO POPULAR DE MARAÑÓN (ANACARDIUM OCCIDENTALE L. –FRANZ
EUGEN KÖHLER– 1887) EN TABATINGA (AMAZONAS, BRASIL) Y SU POTENCIAL
COMO PLANTA CICATRIZANTE
24
extracción mecánica o prensado y a extracción con solventes aplicando dos
métodos: inmersión e inmersión-percolación. El método más eficiente fue el de
inmersión; percolación usando n-hexano como solvente. El rendimiento obtenido
es del (97.78 ± 1.32) %. El análisis de ácidos grasos por HPLC reveló un alto
contenido de ácido oleico (61.36%). De estos resultados se recomienda la
extracción con solventes para la industria de jabones, cosméticos y la extracción
con prensado para la industria alimenticia [8].
25
potencial para el desarrollo de aéreas amazónicas y el fortalecimiento del sector
agrario [9].
ANACARDO (ANACARDIUM OCCIDENTALE L.)
K.P. Prabhakaran Nair realiza un estudio general acerca del árbol del Marañón:
Anacardo (Anacardium Occidentales). En donde se centra principalmente en el
anacardo, teniendo en cuenta su historia, contexto geográfico, comercio,
consideraciones económicas, mejoras genéticas, funciones biológicas y sus
perspectivas futuras. El anacardo, que es originario de Brasil, se cultiva
ampliamente en los trópicos por sus nueces muy nutritivas y sin colesterol. Es uno
de los primeros árboles frutales. Del Nuevo Mundo para ser ampliamente
distribuidos en los trópicos por los aventureros portugueses y españoles, que se
habían desplazado por todo el mundo en una ruta marítima. La planta de
anacardos tiene una historia a cuadros. Tanto en Asia como en África, el anacardo
y sus frutos falsos se han utilizado en proyectos empresariales locales a pequeña
escala durante más de tres siglos. Las grandes empresas basadas en el anacardo
se desconocían hasta principios del siglo XX, cuando el comercio internacional
comenzó a mostrar un gran interés por la nuez. Este es el período en que la
exportación también comenzó desde la India. El anacardo es un árbol versátil. Los
granos contienen una combinación única de grasas, proteínas, carbohidratos,
minerales y vitaminas. La nuez contiene 47 por ciento de grasa, pero 82 por ciento
de esta grasa son ácidos grasos insaturados, y por lo tanto se puede considerar
que no aumenta el colesterol. En resumen, el anacardo es un excelente aperitivo,
un buen aperitivo y un excelente tónico y estimulante para los nervios. Aunque el
cultivo tiene sus raíces en Brasil, es la India la que lo alimentó y lo llevó a la
eminencia internacional. Hoy en día, India es el mayor productor, procesador,
exportador y segundo consumidor de anacardo del mundo [10].
ANALISIS FISICOQUIMICO, SENSORIAL Y MICROBIOLOGICO DEL JUGO
ELABORADO A PARTIR DE LA PULPA DE MARAÑON (ANACARDIUM
OCCIDENTALE L.)
Ana Sarith Amaya Cera y Yorcely Esther Avila Tejera en el año 2014 realizaron
para su trabajo de grado un jugo a partir de la pulpa de marañón, analizando
determinación fisicoquímica y bromatológica, como solidos totales, densidad,
humedad, solido soluble, pH, acidez total, cenizas grados brix y determinación de
vitamina C. Además hicieron una evaluación sensorial el mediante encuestas y
pruebas hedónicas para evaluar la aceptación, siendo aprobado por la mayoría de
los usuarios. Por ultimo determinaron aerobios mesófilos, mohos, levaduras y
coliformes fecales como evaluación microbiológica, el trabajo de grado permitió la
elaboración del jugo de Marañón y fue verificado respecto a la norma NTC 5864
dando como resultado la conformidad de los análisis [11].
26
10. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN
27
Extensión total: 93 km2
Extensión área urbana: 22 km2
Extensión área rural: 50 km2
Altitud de la cabecera municipal (metros sobre el nivel del mar): 5
Temperatura media: 28 °C
Distancia de referencia: 13 km desde Barranquilla [12]
10.3.4 Morfología del tronco
Posee un tronco corto, tortuoso y con ramificación dispersa, así como una copa
amplia en edad productiva. Su corteza, de color gris a pardo claro, contiene una
savia lechosa.
10.3.5 Morfología de la hoja
Las hojas del MARAÑÓN son simples, alternas, sin estípulas, de ápice
redondeado y se encuentran agrupadas en los extremos de las ramas. Miden
hasta 25 cm de longitud y 6 cm de ancho.
10.3.6 Morfología del fruto
El fruto del MARAÑÓN es una nuez de color verde grisáceo que mide de 2 a 3 cm
de largo, tiene forma de riñón, un pericarpio liso y brillante, un mesocarpio con
contenido de aceites, y recibe el nombre de anacardo o nuez del Marañón. El
aceite que se halla en la nuez, el cardol, es muy irritante para la piel y se extrae
calentando las nueces. La nuez es muy cotizada y tiene buen mercado de
exportación.
10.3.6 Certificación Taxonómica
Certificación expedida por el laboratorio: HERBARIO DEL PROGRAMA DE
BIOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO.
10.3.7 Desarrollo del proyecto.
Para el tratamiento del árbol y la recolección del material vegetal, este se hace en
base a las buenas prácticas de recolección recomendada por el ministerio del
medio ambiente y la OMS. También se tiene en cuenta lo recomendado por la
literatura de la farmacognosia.
10.3.7.1 Tratamiento del material vegetal.
Una vez tomadas las muestras del fruto, hoja y corteza, se procede hacer los
extractos, mediante los procedimientos siguientes:
Se lava la muestra vegetal (Hoja, Fruto y Corteza) para eliminar las impurezas o
partículas extrañas que se encuentren adheridas en la Corteza.
28
Una vez limpias se procede a pesar el material vegetal para conocer el
rendimiento del principio activo en la extracción, por gramos de materia prima.
Método de secado
Luego se procede a secar el material vegetal (Hoja, Fruto y Corteza)22
Secado de la Corteza de Árbol de Marañón (Anacardium Occidentale
L.) al aire libre y al sol.
29
organolépticas y morfológicas. Esto con el objetivo de saber la identidad de las
drogas y para descartar la presencia de adulteraciones de las mismas. 22
Luego del análisis histológico se procede a pulverizar las hojas y el fruto para
obtener un mayor rendimiento en la obtención de los extractos.22
En cuanto al fruto solo con el triturado, se puede obtener un alto rendimiento en su
extracción.22
Control de calidad del material vegetal.
Ensayos Fisicoquímicos y Biológicos cuantitativos: Porcentaje de humedad,
gravimetría (determinación de la pérdida de agua por desecación en una estufa),
Residuos fitosanitarios (presencia de plaguicidas), Análisis microbiológico, Metales
pesados.22
Método de extracción.
Extracción con disolventes, discontinua y por maceración. Solventes a
utilizar: Agua y alcohol 1:1, Alcohol bebible, obtenido de fermentación.
Extracción Discontinua: Se sumerge la droga en el disolvente, por lo que la
totalidad de la droga contacta con el disolvente utilizado para la extracción u la
difusión de los principios activos se producirá en todas direcciones hasta alcanzar
el equilibrio.23
Maceración: Consiste en poner en contacto la droga seca triturada con el
disolvente utilizado para la extracción durante un tiempo determinado, que
depende de las características de la droga y de la naturaleza de los principios
activos (normalmente 7 días). Se utilizará en estas mezclas hidroalcoholicas Agua
y Alcohol 1:1. Luego que hayan pasado los días de maceración, se procede a
filtrar el conjunto obteniéndose por una parte el extracto líquido con los principios
activos y por otra parte un residuo de la droga denominado marco. 23
Anotar los datos obtenidos.
10.4 ESTANDARIZAR EL EXTRACTO CON ANÁLISIS FISICOQUÍMICOS E
INSTRUMENTALES:
Características organolépticas: Olor Color y Sabor.
Densidad: Picnometría.
pH: pH-metro.
Marcha Fitoquímica: Se harán en el extracto hidroalcoholico los ensayos Mayer
(alcaloides), Baljet (coumarinas), Sudan III (ácidos grasos) y aceites esenciales,
Liebermann-Burchard (triterpenos o esteroides), espuma (saponinas), ninhidrina
(aminoácidos libres), Mayer y Wagner (alcaloides), Baljet (coumarinas), Fehling
(carbohidratos reductores), cloruro férrico (fenoles o taninos), Borntrager
30
(quinonas), Shinoda (flavonoides) y antocianidinas, y mucílagos. Se utilizará el
sistema de cruces como criterio de medida para especificar la cualificación de los
metabolitos secundarios. Para identificar los tipos de metabolitos contenidos en la
muestra.22,23
Todas las muestras se realizarán por triplicado. Los datos se analizarán mediante
el módulo de estadística descriptiva y se determinará la media y la desviación
estándar.
Cromatografía de gases: para separar y cuantificar los principios activos.
10.5 SUSTANCIAS QUÍMICAS Y REACTIVOS PARA LA DETERMINACIÓN DE LA
ACYIVIDAD HIPOGLICEMICA IN VITRO.
31
GDRI=100 - (Contenido de glucosa con adición de muestra (mg / dl)) /
(Contenido de glucosa del control (mg / dl)) x 100
10.5.3 Efecto de extractos de corteza de marañón en cinética de amilolisis in vitro.
Se agregarán 40 gramos de almidón de patata a ≈900 ml de tampón fosfato 0,05
M (pH 6,5) 9, 27. La solución después de agitar a 65 ° C durante 30 minutos se
completará hasta un volumen final de 1000 ml para dar un 4%. (w/v) solución de
almidón. Se dializarán 25 ml de la solución de almidón anterior, α-amilasa (0,4%) y
los extractos de corteza de marañón (1%) en bolsas de diálisis con 200 ml de
agua destilada a 37 ° C (pH 7,0) en un baño de agua con agitador9. 23, 26. El
contenido de glucosa en el dializado se determinará a los 30, 60, 120 y 180 min.
Se realizará una prueba de control sin muestras 9, 23, 25, 26. Se determinará el
índice de retraso de diálisis de glucosa (GDRI) utilizando la fórmula descrita. 4
10.5.4 Captación de glucosa por las células de levadura.
La levadura de panadería comercial se lavó mediante centrifugación repetida
(3.000 x g; 5 min) en agua destilada hasta que los líquidos sobrenadantes
estuvieron transparentes y se preparó una suspensión al 10% (v / v) en agua
destilada9, 26. Varias concentraciones de extractos (1– Se agregaron 5 mg) a 1 ml
de solución de glucosa (5–25 mL) y se incubaron juntos durante 10 minutos a 37 °
C. La reacción se inició mediante la adición de 100 µl de suspensión de levadura,
se agitó en vórtex y se incubó a 37 ° C durante 60 min9, 23, 26. Después de 60
min, los tubos se centrifugaron (2,500 × g, 5 min) y se estimó la glucosa en
sobrenadante 9, 26. El porcentaje de aumento en la captación de glucosa por las
células de levadura se calculó utilizando la siguiente fórmula.4
Aumento de la captación de glucosa (%) = (Control de absorbancia - Muestra de
absorbancia) / (Control de la absorbancia) x 100
Donde, el control de Abs es la absorbancia de la reacción de control (que contiene
todos los reactivos excepto la muestra de prueba), y la muestra de Abs es la
absorbancia de la muestra de prueba.4
10.5.5 Análisis estadísticos
Todas las determinaciones se llevarán a cabo por triplicado y los datos se
analizarán mediante ANOVA seguido de la prueba de comparaciones múltiples de
Tukey para diferencias significativas. Los valores se considerarán en p <0.05. Los
gráficos se representarán utilizando un software estadístico.4
32
11. PRESUPUESTO
Se plantea el siguiente presupuesto a utilizar.
Aportes Aportes
Recursos (universidad investigadores Total
del Atlántico)
Personal
Estudiantes $ 1.200.000 $ 1.200.000
Director $ 1.500.000 $ 1.500.000
Gastos de materiales
Materia prima $ 600.000 $800.000 $ 1.400.000
Papelería $ 200.000 $ 200.000
Reactivos $ 1.100.000 $ 1.100.000
Equipos $ 1.800.000 $ 1.800.000
Servicios técnicos
Trabajo de
Campo $ 1.500.000 por
(Recolección del 3 muestras en
material vegetal) duplicado
Tratamiento del
material vegetal
y obtención del
extracto. $ 1.500.000
Análisis in vitro
Salida de campo o viajes
Laboratorio $ 800.000 $ 200.000
Universidad del
atlántico
Otros viajes $ 300.000 $ 300.000
$ 9.200.000
Tabla 10: Presupuesto
33
12. CRONOGRAMA
Tabla 11: Cronograma de actividades
Tiempo (meses)
ACTIVIDADES Mes 1 Mes 2 Mes 3 Mes 4
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
1. Compra de
materiales
(materia prima,
insumos, etc.)
2. Adecuación del
área de trabajo
3. Obtención del
material vegetal
(Hoja, corteza y
fruto)
4. Elaboración del
diseño
experimental
5. Tratamiento del
material vegetal.
6. Estandarización
del material
vegetal
7. Análisis in vitro
de la actividad
hipoglicemiante
del extracto.
34
13. BIBLIOGRAFIA.
4. Bhutkar, M., Bhinge, S., Randive, D., Wadkar, G. and Todkar, S. (2019).
Cribado de la actividad hipoglucémica in vitro de Murraya koenigii y
Catharanthus roseu. [online] Revistaseug.ugr.es. Available at:
http://revistaseug.ugr.es/index.php/ars/article/view/7413/6903 [Accessed 27
Jan. 2019].
5. Martínez Aguilar, Y., Martínez Yero, O., Escalona Arias, A., Soto Rodríguez,
F. and Valdivié Navarro, M. (2019). Composición química y tamizaje
fitoquímico del polvo de hojas y retoños del Anacardium occidentale L.
(marañón). [online] Scielo.sld.cu. Available at:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-
47962012000100001 [Accessed 28 Jan. 2019].
35
Core.ac.uk. Available at: https://core.ac.uk/download/pdf/12818506.pdf
[Accessed 25 Mar. 2019].
10. World Health Organization. Quality control methods for herbal materials;
2011.
12. Nair, K. (2010). Cashew Nut (Anacardium occidentale L.). The Agronomy
and Economy of Important Tree Crops of the Developing World, pp.21-66.
36
17. Croat, T.B. 1978. (Flora de la Isla de Barro Colorado). Duke, J.A. 1965.
18. Bruice, P. and Bruice, P. (2006). Study guide & solutions manual [for]
Essential organic chemistry. 4th ed. Upper Saddle River, N.J.: Pearson
/Prentice Hall.
19. Burrows, A.; Holman, J.; Parsons, A.; Pilling, G.; Price, G. Chemistry3:
introducing inorganic, organic and physical chemistry. 2009. 1st Ed.
23. Villar del Fresno, A. (1999). Farmacognosia general. 1st ed. Madrid:
Síntesis, pp.50-76.
25. Skoog, D., Holler, F., Crouch, S. and Skoog, D. (2008). Principios de
análisis instrumental. 6th ed. Mexico, México: Cengage Learning Editores
S.A. de C.V., pp.336-389; 430-447; 498-541; 762-864.
37
14. ANEXOS
14.1 TRABAJO DE CAMPO.
TRABAJO
DE CAMPO
Finca km7 el KM 7
3 árboles de antigua vía de puerto
Anacardium Colombia, Universidad
Occidentale L. del Atlántico.
(Marañón)
b.
RECOLECCIÓN
Toma de muestras
Árbol
6 am
38
14.2 ESTANDARIZACIÓN DEL EXTRACTO Y PRUEBAS BIOLOGICAS.
OBTENCIÓN Y
ESTANDARIZACIÓN
DEL EXTRACTO DE
CORTEZA DEL
MARAÑÓN
Molienda
Extracción
Filtración
Actividad
Estandarizar el extracto
Biológica
Características organolépticas,
Determinación de pH, densidad, solubilidad.
Estandarización
la actividad del extracto
hipoglicémica in Cromatografía de gases: para
separar y cuantificar los
vitro en muestras principios activos.
de sangre.
39