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ESTERILIZACION

OBJETIVOS
 Reconocer cuales son los agentes de control más empleados para combatir los
microorganismos.
 Conocer el efecto que causa uno de los grandes agentes de control microbiano sobre la
célula.
 Destruir todos los gérmenes vivos que existan sobre los objetos o sustancias que se
desean libre de ellos (Asépticos).
MARCO TEÓRICO
Un microorganismo es un agente microscópico vivo e imperceptible a los sentidos que
generalmente esta agrupado en colonias, aunque bien puede estar como una unidad formadora de
colonias (U.F.C), la que se desarrolla en un medio apropiado para formar colonias perceptibles.
Los microorganismos pueden ser patógenos (productores de ciertas enfermedades) o banales (los
habitualmente hallados en los alimentos, el aire, el polvillo ambiental, que no perjudican al
hombre).
El hecho que existan distintos tipos de gérmenes en el medio ambiente, crea grandes dificultades
en los estudios bacteriológicos, cuando es necesario obtener las especies microbianas en estado
de pureza, ya que tanto el instrumental como los medios de cultivo son invadidos con suma
facilidad por los microbios del medio ambiente.
Las principales razones para controlar a los microorganismos pueden resumirse de la siguiente
forma:
 Para evitar la transmisión de las enfermedades y las infecciones
 Para eliminar los microorganismos de un hospedador que está infectado.
 Para eliminar microorganismos de diferentes materiales y así evitar su deterioro y
alteración
Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes físicos, agentes
químicos o por procesos físicos y agentes quimioterapéuticos. Se dispone de una gran variedad
de técnicas y agentes que actúan de maneras diferentes y cada uno tienen su aplicación y límite
de uso.
Un agente físico es una propiedad o condición que causa un cambio, por ejemplo, la temperatura,
la presión radiación y los filtros.
Un agente químico es una sustancia que causa una reacción específica y que caracterizan por una
estructura molecular típica, por ejemplo, tenemos los compuestos fenólicos, los alcoholes,
alógenos (cloro y yodo), aldehídos, oxido de etilo, fenoles.
Un proceso físico es un procedimiento que causa un cambio, por ejemplo, la filtración, la
esterilización, incineración, higienización.
Se utilizan varios términos específicos para escribir a estos agentes y procesos:
Esterilización: el proceso que destruye todas las formas de vida se llama esterilización, un
objeto estéril, en sentido microbiológico está libre de microorganismo vivos. Un objeto o una
sustancia esta estéril o no esta estéril, no puede estar nunca semiesteril o casi estéril.
Desinfectante: un agente, usualmente un producto químico que mata las células vegetativas,
pero no necesariamente las formas esporuladas de los microorganismos productores de
enfermedades, se denomina un desinfectante. El termino se aplica comúnmente a sustancias
usadas sobre objetos inanimados. La desinfección es el proceso mediante el cual se destruyen las
células vegetativas, pero no necesariamente las esporas de los agentes infecciosos.
Antisépticos: una sustancia que se opone a la infección (sepsis) o previene crecimiento o acción
de los microorganismos, bien sea destruyendo o bien inhibiendo su crecimiento o actividad, se
denomina un antiséptico. El termino esta usualmente asociado a sustancias aplicadas al cuerpo.
Higienización: un agente que reduce la población microbiana hasta niveles que se juzgan
seguros para las exigencias de la salud pública se denomina un higienizante. Usualmente es un
agente químico que más el 99.9% de las bacterias en crecimiento. Los higienizantes suelen
aplicarse a objetos inanimados y generalmente se emplean en el cuidado diario de equipos y
utensilios en las plantas lecheras y de preparación de alimentos, así como para los vasos, platos y
utensilios en los restaurantes. El proceso de desinfección producirá higienización. Sin embargo,
en el sentido estricto, higienización implica una condición sanitaria o de limpieza cosa que la
infección no implica necesariamente.
Germicida: un agente que mata las células vegetativas, pero no necesariamente las formas
esporuladas de los gérmenes se llaman germicida. El germicida actúa como un desinfectante.
Bactericida: un agente que mata las formas vegetativas de las bacterias. Del mismo modo, los
términos fungicida, varicida y esporacida se refieren a agentes que matan a los hongos, virus y
esporas respectivamente.
Control de microorganismos por agentes físicos y/o procesos físicos
Sin una condición o propiedad física que causa un cambio. La temperatura, la presión, la
radiación, la desecación, así como la filtración son ejemplos de agente físicos.
TEMPERATURA
Es un factor de enorme importancia ya que la temperatura influye mucho en las velocidades de
reacción de todos los procesos químicos metabólicos ligados al crecimiento de todo organismo.
El aumento o la disminución de la temperatura pueden retardar en algunos casos el crecimiento,
e incluso pueden destruir al microorganismo contaminante. La temperatura es una magnitud que
expresa el nivel del calor que sufre un cuerpo, entonces, el control de microorganismos por
aumento de la temperatura es igual que por el aumento de calor medio donde se encuentra.
Así pues la utilización de calor es un método bueno para lograr la esterilidad de los medios de
cultivo, materiales y otros elementos, pero la combinación de la temperatura (calor) y agua
(humedad) puede ser aplicado para la esterilización mas efectiva de diferentes elementos y
materiales.
Los métodos más usados en el control de microorganismos con la temperatura incluyen el calor
húmedo, el calor seco, la refrigeración y la congelación.
Calor Húmedo: El efecto que causa este calor es matar al microorganismo pro la coagulación de
sus proteínas cuando se encuentran en una zona atmosfera húmeda y sometidos a altas
temperaturas, además, es mucho más rápido y efectivo su acción.
La esterilización por vapor a presión se lleva a cabo en un auto clave, estos equipos emplean
vapor de agua saturado.
Autoclave: se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión. Una autoclave consta de su
tapa que contiene tornillos, una espira que sirve para que salga el aire y vapor acumulado dentro
la autoclave, también cuenta con un manómetro y termómetro.
En su interior cuenta con una canastilla que es donde van los materiales a esterilizar, y sacando
eso tiene una resistencia circular y un soporte de cesta.
Calor Seco: En una atmosfera seca, totalmente exenta de humedad, las bacterias como muchas
proteínas son más resistentes y no mueren hasta que tiene lugar la oxidación de sus componentes,
lo cual ocurre a temperaturas mucho más elevados que la que requiere para coagular las
proteínas.
Incineración y esterilización al rojo: Métodos usados para esterilizar materiales metálicos,
espátulas, destrucción de carcasas, animales de laboratorio y cualquier otro material de
laboratorio infectado que es preciso eliminar o material que solo se usa por el momento y
constantemente. Estos métodos consisten en la exposición directa del material a la acción de la
llama hasta alcanzar una coloración roja.
Flameado: Método usado para esterilizar bisturíes, agujas hipodérmicas, boca de tubos de
ensayo, porta y cubre objetos, etc. Consiste en pasar varias veces el objeto (de 3 a 4 veces) a
través de la llama sin permitir este alcance el rojo.
Aire caliente: Método usado para esterilizar material de vidrio y objetos metálicos. Se debe
envolver todo el material de laboratorio en papel, además los tubos, erlenmeyers, pipetas y todo
material en forma cilíndrica deben ser cubiertos por un tapón de algodón en su boca. Se usan
temperaturas de 160 grados centígrado por 2 horas y es suficiente para esterilizar el material.
Bajas temperaturas: Las temperaturas por debajo del óptimo de crecimientos microbiano
disminuyen la tasa de metabolismo y si la temperatura es suficientemente baja, cesan el
crecimiento y el metabolismo.
Refrigeración: este método es muy utilizado en los laboratorios de microbiología para mantener
y conservar cepas de microorganismos a temperaturas de 4˚C a 7˚C durante algunos meses.
PRESION OSMOTICA
Es la fuerza o tensión ejercida por el agua que difunde a través de una membrana. A medida que
una solución se carga con un soluto aumenta la presión osmótica del mismo por la aparente
desecación del agua y por ello el aguan contenida en una membrana tiende a difundirse en el
medio que rodea a dicha membrana. Este principio es usado para destruir microorganismos, los
cuales se colocan en una solución concentrada de sal o azúcar para inducir la deshidratación del
microorganismo al perder agua que se difunde en el medio. Generalmente las concentraciones
altas de sal (10 al 15%) y azúcar (50 al 70%) son suficientes para inhibir el crecimiento de
microorganismos. Esta inhibición es la base de la conservación de los alimentos por salazón o
almibrados.
RADIACION
Las radiaciones son letales para el celular microbianas, así como para otros organismos. De los
varios tipos de radiaciones las empleadas con fines de esterilización se encuadran en dos grupos
que se diferencias entre sí por su naturaleza y energía o de tipo no ionizante y en el otro grupo se
encuentran las radiaciones gamma y los electrones de alta energía que constituye el tipo
ionizante de elevada energía. Estas radiaciones comprendes porciones del espectro magnético.
Radiaciones No Ionizantes: los tipos de radiaciones no ionizantes son rayos electromagnéticos
de longitud de onda mayor que la luz visible y que en una gran proporción se absorben como
calor.
Radiaciones infrarrojas: Método usado en los centros de salud para esterilizar material e
instrumentos de vidrio y metálicos por tiempos no mayores de 30 minutos desde el inicio hasta
que se enfría el material, esta radiación alcanza temperaturas de 190˚C. los microorganismos
mueren por la oxidación como consecuencia del calor generado.
Radiaciones U.V.: son germicidas en una longitud de onda de 260 a 270 nm. Son efectivos
contra bacterias no esporuladas, pero algunas esporas pueden sobrevivir si el tratamiento no se
aplica con un tiempo efectivo. Este método de esterilización es usado en el laboratorio de
microbiología para desinfectar superficies, aires, aguas, áreas de cirugía y cuartos estériles, no se
trata de un agente esterilizante muy adecuado pues tiene bajo poder de penetración
especialmente en atmosferas con excesiva cantidad de polvo o en aguas sucias.
Radiaciones Ionizantes: Este tipo de radiaciones pueden ser electromagnéticas o de partículas.
Las primeras son radiaciones de longitud de onda corta tales como los rayos X o los rayos
Gamma y los rayos cósmicos, y las segundas estas constituidas por electrones de alta energía
producidos por generadores de alto voltaje.
FILTRACIÓN
Es un proceso de remoción de bacterias de un fluido al pasarlos a través de un filtro con tamaño
de poro tan pequeño que las bacterias no puedan pasar, este tamaño se mide en m.
Filtros de porcelana: Hechos en porcelana, sin vidrios y con varios tamaños de poros, por el
más fino pasan únicamente ciertos virus pequeños.
Filtros Seitz o discos filtrantes: Constituidos por asbesto de tipo crisólito (químicamente
de silicato magnésico) insertados en un recipiente metálico conectado a un erlemeyer y
conectados a una bomba de vacío, el disco tiene varios grados de porosidad:
clarificación, normal y especial.
Filtros de vidrio sintetizado: Similar al anterior pero el disco está hecho de vidrio finamente
molido y fundido para conseguir la adherencia de las partículas.
Filtros de membrana: Compuestos por celulosa o de sus ésteres (nitrato de celulosa,
acetato de celulosa) y poli tetrafluoretileno. Las membranas tienen varios diámetros y porosidad
varía entre 8 y 0.01 micras.

CONTROL DE MICROORGANISMOS POR AGENTES QUÍMICOS


Muchas sustancias químicas son capaces de inhibir o matar microorganismos. Comprenden
desde elementos metálicos pesados como la plata y el cobre, hasta moléculas orgánicas
complejas como los compuestos de amonio cuaternario. los principales grupos de agentes
químicos antimicrobianos son:

Fenol y compuestos fenólicos: Estos compuestos actúan primordialmente desnaturalizando


probablemente las proteínas de la célula y dañando las membranas celulares. Los cresoles son
varias veces más germicidas que el fenol y otros compuestos fenólicos. Los compuestos
fenólicos pueden ser bactericidas o bacteriostáticos dependiendo de la concentración que se
utilicen. Las esporas y los virus son más resistentes a ellos que las células vegetativas
bacterianas. Algunos compuestos fenólicos son altamente fungicidas y su actividad
antimicrobiana se ve reducida por el pH alcalino o por materia orgánica, así mismo las bajas
temperaturas y los residuos de jabón.

Alcoholes: El alcohol etílico a concentraciones de 50 a 70% es efectivo contra microorganismos


vegetativos o no esporulados. El alcohol etílico tiene bajo poder esporicida. El alcohol metílico
es menos bactericida que el etanol. El metanol no se emplea como desinfectante ya que es
venenoso y sus vapores tóxicos pueden dañar los ojos. Los alcoholes con mayor peso molecular
son más germicidas, pero al mismo tiempo son menos inmiscibles con el agua y por el lo se usan
poco. El alcohol es efectivo para reducir la flora microbiana dela piel y para desinfectar
termómetros. Los alcoholes desnaturalizan las proteínas, propiedad que en gran medida explica
su actividad antimicrobiana, son también disolventes de los lípidos y por eso dañan la membrana
celular.

Halógenos y sus compuestos: La familia de los halógenos consta de elementos


como el flúor, cloro, bromo y yodo. El yodo y el cloro son los más usados como agentes
antimicrobianos. El yodo es uno de los germicidas más antiguos y eficaz que se conoce, es
altamente efectivo contra toda clase de bacterias, esporas, hongos y virus.
Detergentes: Los agentes que rebajan la tensión superficial o agentes humectantes son
empleados primordialmente para limpiar superficies. Su acción se basa en el arrastre de los
microorganismos al englobarlos en la espuma. A algunos detergentes se les incorporan algunas
sustancias químicas para aumentar su poder germicida.

PROCEDIMIENTO
A pesar de haber tantos métodos de esterilización, en esta ocasión en laboratorio de uso el
método del Calor Húmedo con el uso de autoclave.
1. Se lavó el material de vidrio, las cajas Petri y las pipetas, con agua y detergente, a
continuación, se secaron los materiales lavados. Paralelo a esto se cortó el papel madera
en partes apropiadas para envolver las pipetas y las cajas Petri, se usó papel madera
porque permite el paso de vapor de agua y posteriormente protege de la contaminación
ambiental.
2. Luego se empezó a envolver los materiales con el papel madera, tomando en cuenta que
las cajas Petri deben estar puestas de la manera en que el docente explico, ya que de esta
manera podremos saber cuál es la parte superior e inferior de la caja Petri.

3. Antes de meterlo a la autoclave se esperó a la preparación de los medios de cultivo ya


que estos necesitan ser esterilizados.
4. Para esto los medios de cultivo en tubos o frascos deben estar con un tapón de algodón,
esto se debe a que debe haber una libre circulación del vapor y la eliminación del aire en

su interior.
5. Se preparó la autoclave, el docente explico la manera de manipular la autoclave, se
verificó la cantidad de agua dentro de él, y se metió todos los materiales dentro del
canastillo de la autoclave, se cerró la autoclave ajustando los tornillos de su tapa en
posición cruzada a fin de asegurar un cierre hermético y parejo. Y se esperó a que salga
todo el aire que había dentro de él manteniendo la espita abierta.
6. Se esperó a q la temperatura suba hasta cierto nivel.
7. Una vez que llego, se empezó a controlar que no pasara ni bajara la temperatura alanzada.
8. Se dejó ahí como 1 hora, y luego se sacaron los materiales de esterilización con sumo
cuidado.

BIBLIOGRAFIA
https://es.scribd.com/document/79337022/OBJETIVOS-DE-LA-ESTERILIZACION
https://es.scribd.com/doc/57250446/LAVADO-Y-ESTERILIZACION-DE-MATERIALES

MEDIOS DE CULTIVO
OBJETIVO
Conocer la clasificación, preparación, esterilización y distribución de los medios de cultivo.
Adquirir conciencia y practica en el preparado de algunos medios de cultivo.
Preparar medios de cultivo como soporte y fuente de nutriente para el desarrollo de los
microorganismos in vitro.
FUNDAMENTO TEORICO
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los
microrganismos. La composición precisa dependerá de la especia que se quiera cultivar, porque
las necesidades nutricionales varían considerablemente. Hay microorganismos muy poco
exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes
que necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.
Métodos de siembra
Sembrar: Es el acto de colocar el material bacteriológico en el medio de cultivo para promover
su crecimiento y desarrollo, y subsiguiente multiplicación.
El resultado de una siembra se llama: cultivo
Las siembras pueden ser:
Primarias: Cuando el material es inoculado en los medios por primera vez.
Secundarias: Cuando el material a inocular procede de una siembra primaria.
Métodos generales
1. Siembra por dilución: se toma el tubo de ensayo con medio líquido, como el caldo
simple, se toma el material a diluir y se siembra en el tubo con el uso del asa cargada con
el material bacteriológico, se agita, con movimientos moderados.
Medio de cultivo: Liquido
Instrumento: Asa
Finalidad: Poner la bacteria en suspensión
Diluciones sucesivas: Consiste en diluir una muestra hasta conseguir muy pocas células
que, tras inocularse en un medio de cultivo, generen colonias aisladas.
2. Siembra por estrías en superficie: Se siembra el material en la superficie del agar
inclinado en un tubo de ensayo, allí se extiende por toda la superficie con el asa
bacteriológica, previamente esterilizada y cargada con el material a sembrar, haciendo
estrías no muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la parte más profunda
de la superficie inclinada y se termina la estría en la parte más cerca de la boca del tubo.
Medio de cultivo: Agar base inclinado
Instrumento: Asa o aguja bacteriológica
3. Siembra por estría por agotamiento: Con este procedimiento se puede conseguir una
buena separación de las colonias y aislarlas fácilmente. Para ello se funde el medio de
cultivo, se vuelca en caja de Petri y se deja solidificar. Con el asa previamente
esterilizada se toma material de un cultivo heterogéneo y se descarga sobre la superficie
del medio formando estrías. Esto puede realizarse de varias formas:
a. Al comienzo se coloca el inoculo, luego se continua con las estrías. Cuando se
quiere obtener colonias muy separas, se puede utilizar dos o tres placas de Petri,
para lo cual se repite la operación sin tomar con el asa nuevo material.
b. Se puede dividir la placa de Petri en cuatro cuadrantes; una vez depositado el
material en el primero, siguiendo el sentido de las agujas del reloj, se hace una
estría luego en el segundo, tercero y cuarto cuadrante sin cargar nuevamente el
asa; en el último cuadrante aparecerán las colonias aisladas.
c. El inoculo se extiende sobre una pequeña zona de la placa, próxima al borde, se
esteriliza el asa y se traza otra estría a partir del depósito y así sucesivamente.
Medio de Cultivo: Solido en placa Petri
Instrumento: Asa
Finalidad: Obtener colonias aisladas.

4. Por picadura o puncion: Con una aguja se toma el material que se quiere sembrar y se
lo introduce en el tubo, con medio semisólido. Introducir la aguja hasta el fondo,
formando un canal de punción, trayecto por el cual la retiraremos luego. Este método se
utiliza para estudiar la movilidad de las bacterias.
Medio de cultivo: Semisólido
Instrumento: Aguja Bacteriológica
Finalidad: Estudiar la movilidad de las bacterias.
5. Siembra en TSI: El TSI es un medio que contiene glucosa, sacarosa y lactosa, hierro y
un indicador que es el rojo fenol.
En este medio se siembra por picadura y estrías en superficie, como ya se conoce, para
estudiar los cambios que ocurrirán en superficie y profundidad. A lo largo del canal se
desarrollan los microorganismos, y según lo hagan en la parte superior o inferior del tubo,
estarán indicando su comportamiento frente a los azucares, los cambios indican lo
siguiente:
Crecimiento Microbiano en medio liquido
Si la bacteria crece en un medio líquido, en la mayoría de los casos las células que se producen
en cada división continúan su vida independientemente formándose una suspensión de células
libres.
En un cultivo discontinuo de bacterias en medio líquido, se pueden diferenciar cuatro fases en la
evolución de los parámetros que miden el crecimiento microbiano:
I. Fase lag o de adaptación: Durante que los microrganismos adaptan su metabolismo a las
nuevas condiciones ambientales (abundancia de nutrientes y condiciones de cultivo) para
iniciar la fase de crecimiento exponencial.
II. Fase exponencial o logarítmica: En ella la velocidad de crecimiento es máxima y el
tiempo de generación en mínimo. Durante esta fase las bacterias consumen a velocidad
máxima los nutrientes del medio. La evolución del número de células durante esta fase se
explica con los modelos matemáticos que describiremos a continuación.

III. Fase estacionaria: En ella no se incrementa el número de bacterias (ni la masa u otros
parámetros del cultivo). Las células en fase estacionaria desarrollan un metabolismo
diferente al de la fase exponencial y durante ella se produce una acumulación y liberación
de metabolitos secundarios que pueden tener importancia industrial.
Los microorganismos entran en fase estacionaria porque se agota algún nutriente esencial
del medio o porque los productos de desecho que han liberado durante la fase
exponencial hacen que el medio sea inhóspito para el crecimiento microbiano. La fase
estacionaria tiene gran importancia porque probablemente represente con mayor fidelidad
el estado metabólico real de los microorganismos en los ambientes naturales.
IV. Fase de Muerte: Se produce una reducción del número de bacterias viables del cultivo.
Crecimiento microbiano en medio solido
Las fases, parámetros y cinética de crecimiento discutidas para el caso de los cultivos líquidos se
presentan también en cultivos sólidos. La cinética de crecimiento, en este caso, se puede estudiar
siguiendo la evolución del número de células viables por unidad de superficie o por unidad de
masa.
Cuando una célula aislada e inmóvil comienza a crecer sobre un substrato sólido, el resultado del
crecimiento al cabo del tiempo es una colonia. Por consiguiente, se denomina unidad formadora
de colonia a una célula bacteria viva y aislada que si se encuentra en condiciones de substrato y
ambientales adecuadas da lugar a la producción de una colonia en un breve lapso de tiempo. Si el
numero inicial de bacterias por unidad de superficie es muy alto, la confluencia de las colonias
da lugar a los que se llama césped cuando se realizan los cultivos en placas de laboratorio. En el
caso de microorganismos móviles o en el de los hongos filamentosos que tienen un crecimiento
trófico no se producen colonias aisladas sino formaciones más difusas o miceliares
PROCEDIMIENTO
Medios de cultivo para bacterias

 Agar nutritivo
Materiales:
o Peptona 10.0 g
o Extracto de carne 10.0 g
o Agar-Agar 20.0 g
o Agua destilada 1000.0 ml
o 6 cajas Petri
10.0 g ------ 1000.0ml 20.0 g -------1000.0 ml
X ------- 120 ml X1 -------- 120 ml
X = 1.2 g peptona y extracto de X1 = 2.4 g de Agar-Agar
carne
1. Se midió las cantidades calculadas para 120 ml de agua destilada
2. Se llenó un matraz Erlenmeyer 120 ml de agua destilada
3. Luego se disolvió la peptona y el extracto de carne en el agua, seguido de esto se debe
agregar el agar-agar calculado para 120 ml de agua,
4. Para que el agar se embeba se debe ajustar el PH entre 7.2 y 7.4 con HCl 0.1N o con
NaOH 0.1N.
5. Se tapo el matraz con un tapon hecho de algodón para que haya movimiento de vapor
libremente durante la esterilización.
6. Se metieron al autoclave juntos a cajas Petri para la esterilización.
7. Se espero 60 min, y 15 min mas para que terminara de esterilizarse.
8. Sacaron el matras y las cajas Petri, y se trasvaso en pocas cantidades el medio de cultivo
a las cajas Petri ¡, luego se procedio a sembrar la levadura y el yogurt.

 Agar Papa Glucosa


Materiales
o Papa pelada, cortada cubos 100.0 g
o Glucosa 20.0 g
o Agar-Agar 20.0 g
o Agua corriente 1000.0 ml
20.0 g -------1000.0 ml 100.0 g -------1000.0 ml
X2 -------- 120 ml X2 --------120.0 ml
X2 = 2.4 g de Agar-Agar y Glucosa X2 = 12 g de Papa Pelada
1. Se pelaron las papas y en 120 ml de agua se las hicieron hervir, mientras tanto se
midieron las cantidades de glucosa y agar agar que se necesitaban
2. Una vez que la papa hirvió, se trasvaso el agua al matraz Erlenmeyer y luego se
agregaron los 2.4 g de Agar y Glucosa ya medidos.

3. Se tapó el matraz con un tapón de algodón para que durante la esterilización haya
movimiento libre de vapor.

4. Se prepararon 6 cajas Petri anteriormente preparadas, envueltas con papel madera y se


metieron a la autoclave junto al matraz Erlenmeyer para esterilizarlos.
5. Se dejó en la autoclave durante 60 min. Controlando la temperatura y presión.
6. Una vez pasados los 60 min, se dejó 15 min más.
7. Una vez terminado esto, se sacó el vapor de agua mediante la espita, una vez sacado el
vapor, se retiraron todos los materiales ya esterilizados,

8. Se abrieron las cajas Petri y con cuidado se puso el medio de cultivo en él, esparciéndolo
haciendo movimientos en forma de un 8, para que quede homogéneo, cuando se
gelifique,

9. Una vez hecho esto, se esperó a que los medios de cultivo gelifiquen y se procedió a
sembrar las levaduras y el yogurt. En una de las cajas Petri se sembró bacterias que están
en las manos.
10. Luego de sembrar se procedió a llevar las cajas Petri a un

BIBLIOGRAFIA
https://www.academia.edu/9286004/INFORME_7_CULTIVO_DE_MICROORG
ANISMOS

https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-microbiologia/indice/preparacion-de-
medios-de-cultivo

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