Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Laboratorio dedeBiología
Escuela General
Enfermería
Licda. Swuanny
Elaboración: ValeskaValeska
Licda. Swuanny Villagran Herrarte
Villagran Herrarte (QB)
Lic.Lic. VíctorHugo
Víctor Hugo Soto
Soto Gramajo
Gramajo(QF)
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li
Calendarización de prácticas de laboratorio 2017
Li
No. Biología Celular
NOMBRE DE LA PRÁCTICA FECHA
1 Bioseguridad 13/02/2017
2 Microscopía 20/02/2017
3 Biomoléculas 27/02/2017
4 Células Procariotas y Eucariotas 06/03/2017
5 Organelos y Estructuras Celulares 13/03/2017
6 Transporte a través de membranas 20/03/2017
7 Enzimas 27/03/2017
Visita al CIAT y Examen parcial 3/04/2017
8 Respiración celular 17/04/2017
9 Fermentación 24/04/2017
10 Fotosíntesis 8/05/2017
11 Mitosis 14/05/2017
12 Meiosis 22/05/2017
13 Extracción de ADN 29/05/2017
Examen Final 5/06/2017
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
4. Haber cumplido con las tareas preparativas de cada práctica, las cuales incluyen: la información
solicitada en el cuaderno, una lectura a conciencia de la práctica y cualquier investigación previa
que se haya solicitado (ya sea escrita o no). Se realizará un examen corto al inicio de cada
práctica para asegurar que el alumno conoce el tema a tratar y procedimiento a seguir. Queda a
discreción del instructor permitir la entrada de un alumno que evidentemente no maneje el
conocimiento previo requerido.
5. Utilizar el equipo de protección personal todo el tiempo que se encuentre dentro de las
instalaciones del laboratorio. Como equipo de protección se incluye:
a. Bata blanca con las siguientes especificaciones: que cubra hasta la rodilla, mangas largas,
confeccionada con tela de algodón. Cierre con botones y el logo de la Universidad con el
nombre del estudiante. La bata debe permanecer siempre abotonada.
b. Zapatos bajos completamente cerrados, que cubran todo el pie consuela antideslizante.
c. Lentes de protección.
d. Pantalón largo.
El no cumplir con esta regla es causa justificada para retirar a un alumno del laboratorio del día,
perdiendo el derecho a presentar examen, cuaderno, práctica y reporte. De reincidir, el alumno
puede ser retirado definitivamente del laboratorio.
Sin embargo, antes de poder realizar cualquier trabajo dentro del laboratorio, el estudiante deberá
demostrar que tiene el conocimiento adecuado para poder realizar dicho trabajo. Cada práctica de
laboratorio cuenta con un cuestionario, conocido como Pre-laboratorio, el cual queda como
responsabilidad del alumno resolver antes de la práctica, como preparación a la prueba escrita que
se llevará a cabo al inicio del laboratorio y que evaluará la práctica anterior como la práctica a punto
de realizarse. Cabe resaltar que al inicio de cada práctica se llevará a cabo un corto de laboratorio,
con un tiempo aproximado de 3 minutos cada uno. A continuación se detalla el contenido y la
evaluación de todo el trabajo del laboratorio.
Pre-laboratorio
Li
1. El cuaderno de laboratorio está diseñado para cumplir como evidencia del trabajo que se ha
realizado durante cada práctica de laboratorio, por lo que en dicho cuaderno deben ir todas las
Li
anotaciones de cada práctica, de manera ordenada, limpia y legible. Un trabajo que no puede
leerse, no tendrá validez alguna.
2. Biología
Cada estudiante debe poseer Celular
un cuaderno de laboratorio que cumpla con las especificaciones
establecidas en el Reglamento del Laboratorio. Durante la primera sesión de laboratorio se decidirá
sobre el color a usarse en cada sección para el cuaderno de laboratorio. Si alguna persona desea
usar el cuaderno de laboratorio de otro curso que haya llevado previamente, puede hacerlo,
siempre y cuando se identifique claramente el cuaderno y la sección que se utiliza. No pude usarse el
mismo cuaderno para dos cursos simultáneos en un mismo ciclo.
3. El cuaderno de cada estudiante se evaluará al final del semestre con un valor sobre 100 puntos,
donde el valor neto será de 2pts., considerando los siguientes aspectos:
Aspecto
4. Firmas
5. Presentación (bien forrado e identificado)
6. Legibilidad, limpieza y orden
La principal forma de evaluación del trabajo hecho durante el laboratorio, así como la comprensión
obtenida después de realizada la práctica, es el reporte de laboratorio. En éste se evidencia el nivel
de comprensión y la calidad del trabajo realizado por el estudiante.
Reporte de laboratorio
No. de la práctica
Nombre de la práctica
IMPORTANTE: NO se tolerará ningún tipo de copia en los reportes de laboratorio. Cualquier indicio
de plagio (reproducción no autorizada de una publicación, palabra por palabra, incluyendo Internet)
será castigado con una nota de cero en el reporte. Cualquier indicio de copia (entrega de reportes
idénticos por parte de dos o más alumnos) será evaluado como un cero para todos aquellos
estudiantes que tengan el reporte igual, sin importar quién lo generó ni quién lo copió. Todo caso
quedará documentado, y una reincidencia puede significar el retiro definitivo del o los alumnos
involucrados del laboratorio del curso.
Apreciación
A lo largo del semestre serán calificadas las cualidades de cada estudiante durante la práctica del
laboratorio, como por ejemplo: la actitud, compromiso, trabajo en el laboratorio, respeto, interés,
etc, características que tendrán una ponderación de 1 punto neto.
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li
Evaluación Final de Laboratorio:
Li
Aspecto a evaluar
Biología Celular Valor
(pts.)
Exámenes cortos 13
Cuaderno de laboratorio 2
Reportes de laboratorio 7
Apreciación 1
Investigación aplicada 1
Examen parcial 3
Examen Final 3
Total 30
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 1
Li
Bioseguridad y trabajo dentro del Laboratorio de Biología General
Li
I. Introducción Biología Celular
El trabajo dentro de un laboratorio, cualquiera que sea su naturaleza, conlleva un grado de
responsabilidad tanto para el instructor como para el estudiante, donde no solamente se ha de
pensar en la seguridad de los asistentes al laboratorio y de la comunidad, sino también la seguridad
de la muestra que se trabaja. El trabajo en el campo de biología general en ocasiones implica el uso
de material bioinfeccioso, por lo que es importante conocer e implementar normas de
bioseguridad. En esta práctica se revisarán los conceptos de bioseguridad, simbología en
bioseguridad, las técnicas de protección personal, limpieza y desinfección de superficies,
clasificación y manejo de desechos generados durante las prácticas, entre otros aspectos de
importancia en materia de seguridad.
II. Objetivos
Que el estudiante:
1. Integre a su actividad de laboratorio, las medidas de bioseguridad apropiadas, según sea
necesario.
2. Maneje muestras en el laboratorio de forma segura, tomando en cuenta la integridad
propia y de la muestra misma, para resguardar su salud y la fiabilidad de los resultados
obtenidos a partir de la muestra.
3. Conozca la forma correcta de descartar cada uno de los desechos generados durante las
prácticas de laboratorio
III. Alcance
Que el estudiante:
1. Aplique las reglas de bioseguridad en su trabajo diario.
2. Sea capaz de descartar de manera correcta los distintos tipos de desechos generados
durante la práctica de laboratorio..
IV. Antecedentes
Li
responsable tanto de brindar capacitación adecuada como de evaluar el trabajo de quienes
trabajan dentro del laboratorio (OMS, 2005).
Biología
Antes de definir las necesidades Celular
de un laboratorio en cuanto a bioseguridad, es imperante hacer la
distinción entre dos conceptos relacionados: bioseguridad o seguridad biológica y bioprotección.
La bioseguridad es el término que se utiliza para referirse a los principios, técnicas y prácticas
aplicadas con el objetivo de evitar exposición no intencional a patógenos y toxinas, o su liberación
accidental (OMS, 2005).
Los errores humanos, las técnicas de laboratorio incorrectas y el mal uso de los equipos, son las
principales causas de accidentes de laboratorio e infecciones relacionadas. Es por ello que es
necesario cumplir con métodos técnicos diseñados para reducir al mínimo los accidentes de
laboratorio más comunes (OMS, 2005).
Figura 1.1
Fuente: Cortez, MF., et al. (2013). Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos. Chile, Chile: Instituto de Salud Pública de Chile.
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Fuente: Cortez, MF., et al. (2013). Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos. Chile, Chile: Instituto de Salud Pública de Chile.
Fuente: Cortez, MF., et al. (2013). Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos. Chile, Chile: Instituto de Salud Pública de Chile .
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
B. Niveles de bioseguridad
Li
Existen diferentes niveles de bioseguridad en los laboratorios, de acuerdo al tipo de
microorganismo que se manipule. A continuación se muestra una tabla con los tipos de
Li
microorganismos y los niveles de bioseguridad correspondientes, así como el tipo de práctica que
se realiza y el equipo de seguridad necesario:
Biología
Tabla 1.1 Relación de los grupos de riesgo con Celular
los niveles de bioseguridad, las prácticas y el equipo
3 Riesgo individual elevado, riesgo Contención Diagnóstico Prácticas de nivel CSB además de
poblacional bajo:
Nivel 3 especial, 2 más ropa otros medios de
Agentes patógenos que suelen investigación especial, acceso contención
provocar enfermedades humanas o controlado y primaria para
animales graves, pero que de ordinario flujo direccional todas las
no se propagan de un individuo a otro. del aire actividades
Existen medidas preventivas y
terapéuticas eficaces.
4 Riesgo individual y poblacional elevado: Contención Unidades de Prácticas de nivel CSB de clase III
Agentes patógenos que suelen Máxima patógenos 3 más cámara de o trajes
provocar enfermedades graves en el Nivel 4 peligrosos entrada con presurizados
ser humano o los animales y que se cierre hermético, junto
con CSB
transmiten fácilmente de un individuo salida con ducha de clase II,
a otro, directa o indirectamente. y eliminación autoclave de
Normalmente no existen medidas especial de doble puerta (a
preventivas y terapéuticas eficaces. residuos través de la
pared), aire
filtrado
Las partículas que se desprenden (aerosoles) durante la manipulación de las muestras se depositan
Li
rápidamente en la superficie de las mesas de trabajo y sobre las manos del operador. Es por ello
que toda persona que trabaja dentro del laboratorio debe llevar puestos guantes, evitando tocarse
Li
la boca, los ojos y el rostro, así como llevarse objetos a la boca (bolígrafos, lápices, goma de
mascar). Por la misma razón, no debe llevarse al laboratorio objetos personales que no sean
Biología Celular
estrictamente necesarios, ni debe aplicarse cosméticos, tomar alimentos ni hablar por teléfono. Los
sistemas de protección personal más importantes son los siguientes:
1. Bata: las batas cubren tanto la vestimenta como las regiones expuestas de los brazos. Por esta
razón la bata debe cumplir con las siguientes especificaciones: blanca, manga larga, que cubra
hasta la rodilla, con botones o broches al frente que permitan mantenerla cerrada en todo
momento que el individuo se encuentre dentro del laboratorio (Cortez, MF. et al., 2013).
2. Lentes de bioseguridad: Los ojos proveen una superficie acuosa en el cuerpo por medio del cual
pueden ingresar los patógenos. Es por ello que deben estar protegidos en todo momento, a
través del uso de lentes de protección de laboratorio. No se deben de utilizar lentes de
contacto dentro del laboratorio (Cortez, MF. et al., 2013).
3. Mascarillas: Se debe usar mascarilla cada vez que exista la posibilidad de exposición de la
mucosa nasal u oral a cualquier fluido biológico o a sus aerosoles y en procedimientos en los
que se está en riesgo de inhalación de vapores de sustancias tóxicas. Los tipos de mascarillas
son las siguientes:
a. Mascarilla quirúrgica: Se debe utilizar siempre que exista riesgo de salpicaduras con sangre u
otro fluido potencialmente infeccioso para evitar la exposición de la mucosa oral y nasal.
b. Mascarilla de alta eficiencia: Se debe utilizar siempre que exista riesgo de generación de
aerosoles de agentes que se puedan transmitir por inhalación. Por ejemplo cada vez que se
manipulan fuera del CBS, muestras que provienen de un paciente en el que se sospecha
Mycobacterium tuberculosis. Su uso es exclusivo en áreas técnicas del laboratorio. Pueden
ser reutilizadas por el trabajador siempre y cuando se mantenga limpia, no deformada y con
el filtro seco.
c. Mascarilla autofiltrante: Se debe utilizar al manipular o estar expuesto a productos químicos
como gases, vapores o sus combinaciones con productos contaminantes particulados.
Existen varios tipos de acuerdo a la protección respiratoria que ofrecen (Cortez, MF. et al.,
2013).
4. Guantes: Son recomendados para eliminar o disminuir el riesgo de contacto de las manos con
sustancias tóxicas o microorganismos potencialmente presentes en cualquier muestra clínica
como también en el manejo de cepas en el laboratorio de microbiología. Los guantes
desechables se clasifican de acuerdo al material, a continuación se muestra los diferentes tipos
de guantes y su uso adecuado:
Li
e. Neopreno: disolventes, aceites, sustancias ligeramente corrosivas (ácidos, álcalis).
f. Algodón: retarda el fuego, absorbe la transpiración (Cortez, MF. et al., 2013).
Biología
Antes y después del uso de guantes Celular
debe realizarse lavado de manos. Su eliminación debe hacerse
junto con los residuos contaminados del laboratorio, en contenedor con bolsa roja. En la toma de
muestras clínicas, los guantes deben ser cambiados entre paciente y paciente, y desechados en
bolsa roja. El uso de este implemento es exclusivo en áreas técnicas del laboratorio y deben
descartarse antes de abandonar las instalaciones del laboratorio (Cortez, MF. et al., 2013).
5. Protección de los pies: Es recomendable el uso de zapato cerrado, puntera cerrada, sin tacos
(Cortez, MF. et al., 2013).
Esta función es responsabilidad del estudiante, debe realizarse al inicio y término de la jornada de
trabajo. Para las mesas de trabajo, se recomienda el uso de hipoclorito de sodio en concentraciones
en rango de 0.05 a 0.5% lo que dependerá de las características y facilidad de limpieza del material
de la superficie, así, en materiales porosos y superficies difíciles de descontaminar, se recomienda
el uso de concentraciones de 0.5%; si el material en cambio, es liso y de fácil limpieza, puede
descontaminarse con concentraciones más bajas de hipoclorito. El uso de alcohol al 70% en
superficies ha demostrado tener menor eficacia debido a su rápida evaporación y este se utiliza
después de haber realizado la descontaminación con el hipoclorito de sodio (Cortez, MF. et al.,
2013).
1. Colocar toallas de papel absorbente sobre el derrame, de manera que se cubra toda el
área involucrada.
2. Verter sobre las toallas de papel solución de hipoclorito de sodio al 0.5%.
3. Dejar actuar el hipoclorito de sodio durante 10 minutos.
4. Retirar las toallas de papel y descartar en contenedor con bolsa roja.
5. Limpiar con etanol al 70% y papel absorbente (Cortez, MF. et al., 2013).
Li
Biología Celular
Tabla 1.2: Tipos de residuos
Residuos peligrosos
Categoría 1 Categoría 2 Categoría 3 Categoría 4
Contaminados por Residuos sospechosos de Residuos que por sus
1. Residuos consistentes o sustancias radioactivas. contener agentes características físicas,
contaminados por drogas La segregación, patógenos en químicas y
citotóxicas almacenamiento, concentración o cantidad microbiológicas,
2. Residuos consistentes o transporte y tratamiento suficiente para causar pueden ser
contaminados por solventes de estos residuos debe enfermedad a un huésped entregados a la
orgánicos halogenados realizarse conforme a la susceptible. se incluyen:
recolección municipal,
3. Residuos consistentes o normativa vigente. 1. Cultivos y muestras y pueden ser
contaminados por solventes Considerando las almacenadas.
dispuestos en un
orgánicos no halogenados características que 2. Residuos patológicos relleno sanitario, ya
4. Residuos consistentes o presentan los
que no representan un
contaminados por sustancias laboratorios del país, el 3. Sangre y derivados riesgo adicional para la
orgánicas peligrosas manejo de estos residuos 4. Cortopunzantes salud. Adicionalmente,
5. Residuos consistentes, que no será abordado en esta 5. Residuos de animales se consideran los
contienen o están guía.
cadáveres o partes de residuos especiales
contaminados por metales animales que han sido
pesados
sometidos a
6. Residuos consistentes o tratamiento de
contaminados por sustancias descontaminación
químicas inorgánicas peligrosas dentro de laboratorio
sustancias.
que los genera.
Descarte de
Punzocortante: todo
agente capaz de perforar
de alguna manera la
bolsa.
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li
Li
Biología Celular
Fuente: Cortez, MF., et al. (2013). Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos. Chile, Chile: Instituto de Salud Pública
de Chile.
F. Accidentes laborales
1. Accidentes cortopunzantes
Estos accidentes ocurren durante la manipulación, limpieza y desecho de elementos corto punzante
como agujas, bisturís, material de vidrio, entre otros. Continua siendo la recapsulación de agujas y
el llene excesivo de las cajas cortopunzantes las principales fuentes de riesgo y para el personal que
realiza el aseo el principal riesgo se encuentra en las bolsas de basura doméstica en la que se
eliminó una aguja. Estas deben depositarse en los recipientes para eliminar material cortopunzante,
cuya característica principal es estar fabricados en material resistente. En el caso de cortes o
perforaciones, se recomienda los siguientes procedimientos:
a. Lavar inmediatamente con mucha agua y buscar, inmediatamente, notificar al instructor.
b. Si el accidente es con material cortopunzante que está en contacto con alguna sustancia
química peligrosa puede ocurrir también quemadura e incluso intoxicación grave o hasta
envenenamiento. En ese caso, además de los procedimientos ya descritos, llame,
inmediatamente al área competente de su centro, informe el nombre de la sustancia
química involucrada en el accidente y siga las orientaciones.
c. Si hay cortes es necesario cuidar, primero, la herida, siguiendo los procedimientos
recomendados en el párrafo anterior. Después, es necesario remover los trozos de vidrio
utilizando pinzas estériles.
d. Si los pedazos de vidrio están sobre la mesa de trabajo, utilice una pinza para retirarlos; si
es- tuvieran en el piso, recoja los pedazos con una pala. Bajo ningún concepto recoja los
pedazos de vidrio con las manos ni permita que otras personas lo hagan.
e. En el caso de accidentes cortopunzantes con exposición a material biológico, luego de
realizar las acciones inmediatas descritas anteriormente se procederá seguir las directrices
institucionales con la intención de clasificar el riesgo y realizar la toma de muestra para
serología que corresponda (Cortez, MF. et al., 2013).
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
2. Accidentes con sustancias químicas o biológicas que afecta mucosa ocular.
Li
En el caso de proyección de sustancias químicas o biológicas sobre la mucosa ocular se deben
observar los siguientes procedimientos:
Li
1. No friccionar los ojos y lavarlos inmediatamente en el lava-ojos.
2. Es necesario lavar con mucha agua durante 10 minutos o más hasta que la sustancia sea
totalmente removida.
Biología Celular
3. Si el accidentado estuviera usando lentes de contacto, ellas sólo deben ser retiradas
después del lavado.
4. Buscar atención médica inmediata, para lo cual deben existir procedimientos locales.
5. Tener claridad del nombre del producto químico o del tipo de material biológico
involucrado en el accidente para la correcta evaluación y conducta específica.
6. En el caso de accidentes con exposición a material biológico se debe, extraer muestras de
sangre para la realización de exámenes serológicos, según lo definido a nivel local (Cortez,
MF. et al., 2013).
Las quemaduras son lesiones producidas por contacto térmico, químico o físico, pueden afectar la
piel, conjuntiva y mucosa. Pueden generarse lesiones que van desde inflamación tisular leve hasta
lesiones inflamatorias severas que conducen a la muerte. El manejo y tratamiento debe iniciarse en
el sitio del accidente, identificar el origen de la quemadura, mantener la calma, solicitar ayuda y
realizar una atención rápida ya que puede disminuir en forma importante la lesión, complicaciones
y sus secuelas (Cortez, MF. et al., 2013).
V. Prelaboratorio:
VII. Referencias
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 2
Li
Microscopía
I. Introducción
Li
Biología
una sola célula (unicelulares) Celular
Las células conforman todos los organismos vivos, ya sean estos organismos compuestos por
o cientos o millones de células (multicelulares). La observación de
las células se logra gracias a los microscopios. El uso correcto de los microscopios es importante
para realizar observaciones de estructuras microscópicas incapaces de ser observadas a simple
vista, por lo tanto, en la presente práctica de laboratorio se abordarán temas sobre microscopía
como los tipos de microscopios que existen y sus aplicaciones, partes del microscopio óptico,
manipulación correcta y cálculo de magnificación
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
a. Ocular: parte óptica del microscopio que consiste en un lente colocado en la parte
superior del tubo del cuerpo. Pueden existir microscopios monoculares (un solo ocular)
o binoculares (con dos oculares).
Li
platina y permite focalizar la luz en la muestra. El condensador se puede subir o bajar
con el mando condensador.
d. Biología
Diafragma: Si está Celular
situado debajo del condensador se denomina diafragma de campo o
inmediatamente por debajo de la platina, diafragma de iris. Su función es regular la
intensidad de la luz que pasa a la muestra localizada en la platina. Se necesita más luz
cuando se utiliza un objetivo con magnificación mayor.
g. Base: también llamado soporte, sostiene todo el sistema mecánico y óptico del
microscopio.
h. Brazo: es utilizado para transportar el microscopio y sostener parte del sistema óptico
(los objetivos y oculares).
Los microscopios compuestos están conformados de dos sistema de lentes: objetivos (lo que
Li
agranda) proyecta una "imagen virtual" en el tubo del cuerpo y al lente ocular, lo que permite
aumentar el tamaño de la imagen más allá y proyecta la imagen hacia el ojo. La magnificación total
Li
de un microscopio es producto de la magnificación o aumento del objetivo más el aumento del
ocular.
Lo que significa que cuando se produce la imagen que se observa es 400 veces más grande que el
tamaño del espécimen real (Departamento de Biotecnología, s.a.).
V. Prelaboratorio:
a. Computadoras
b. Microscopio óptico
c. Láminas fijas
d. Papel limpialentes
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
VII. Procedimiento
Li
a. Identificación de las partes del microscopio óptico, montaje de láminas fijas y visualización
bajo los diferentes objetivos:
VIII. Referencias
Deutch, CE., Boorse, GC., Sandrin, TR. y Seidel B. (s.a.). Cell Biology Laboratory: Student
Laboratory Manual. Arizona State University. USA.
Li
Nombre: _______________________________________ carné__________________fecha:_____________
No. y nombre de la práctica ________________________________________________________________
Li
Biología Celular
HOJAS DE MICROSCOPIA
Muestra: ________________________________________
Montaje: ________________________________________
Tipo de tinción: ___________________________________
Aumento: ________________________________________
Descripción: ______________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
Muestra: ________________________________________
Montaje: ________________________________________
Tipo de tinción: ___________________________________
Aumento: ________________________________________
Descripción: ______________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li No. 3
Práctica
Li Biomoléculas
I. Introducción
Biología Celular
Los seres vivos se componen de moléculas con una organización estructuralmente compleja.
Estas moléculas se conocen como moléculas biológicas o biomoléculas, pues son la base de la
estructura de las células, tejidos y están formados principalmente por átomos de carbono que
se unen con otros átomos, entre ellos, oxigeno, hidrogeno, nitrógeno, fosforo entre otros.
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
Las principales biomoléculas son los carbohidratos, los lípidos, las proteínas y los ácidos
nucleicos. Los azucares o carbohidratos son las biomoléculas más abundantes en la tierra y
constituyen valiosas formas de almacenamiento de energía, y por lo tanto son fuentes de
energía celular; también son importantes como componentes estructurales de las células.
Los lípidos son biomoléculas insolubles en agua, son los componentes principales de las
membranas plasmáticas; además ceden el doble de energía que los carbohidratos, por lo que
son utilizados como almacenamiento a largo plazo de grandes cantidades de energía; también
son precursores de las hormonas y de los ácidos biliares.
Las proteínas están formadas por subunidades denominadas aminoácidos. Se encuentran en las
membranas celulares, catalizan cientos de reacciones bioquímicas, constituyen importantes
defensas contra invasores externos y determinan el aspecto físico de la célula y su
funcionamiento. Los ácidos nucleicos desempeñan su principal función al conformar el material
genético y proporcionan energía química que enlaza las reacciones metabólicas de los seres
vivos (Salazar C, 2009).
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
V. Prelaboratorio:
Li
a.
Li
Distinga entre los siguientes términos:
Hidrocarburo/carbohidrato
Glucosa/fructosa/sacarosa
Biología
Azúcar reductor/azúcar Celular
no reductor
Glucolípido/fosfolípido
Polisacárido/polipéptido
b. ¿Cuáles son las funciones de las siguientes moléculas: Glucosa, Almidón y celulosa?
c. ¿Qué es el ADN y cuál es su función?
d. Explique con sus propias palabras que es una Solución Patrón y como se relaciona con
una Solución Muestra (Armar su propio concepto según bibliografía consultada).
e. ¿Cuáles son las funciones de las grasas en los animales?
f. Mencione enfermedades causadas por desórdenes de proteínas, carbohidratos y lípidos.
VII. Procedimiento
a. Preparación de Soluciones Patrón
Almidón: En un tubo de ensayo, tome 1 ml de muestra de Almidón que se encuentra en el
laboratorio y agréguele 1-2 gotas de reactivo de Lugol. La muestra se tornara de color azul-
violeta a negro.
Azucares reductores: En un tubo de ensayo, tome de 1-2 ml de solución de glucosa al 5%,
agregue 5 gotas de reactivo de Benedict, calentando de 5 a 10 segundos a llama directa. Se
evidenciara un cambio de coloración de verde-naranja hasta un precipitado rojo ladrillo.
Lípidos: Tome aproximadamente 1-2 ml de cualquier aceite de cocina (Aceite de Oliva o de
Cocina) en tubo de ensayo y agregue el reactivo de Sudán III. La formación de un anillo rojo
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
en el borde dela muestra es una reacción positiva.
Li
Proteínas: En un tubo de ensayo, tome una muestra de solución de la proteína Albumina,
Li
tome 2 ml de muestra y agréguele 5 gotas de reactivo de Biuret. Si la reacción es positiva se
observara una coloración Violeta.
b. Biología
Preparación de Muestras Celular
Papa: Tome varios trozos de papa y colóquelo en un mortero, agregue 4 ml de agua
destilada y machaque con el pistilo hasta obtener jugo. Tome 4 tubos de ensayo y
enumérelos de 1 a 4, en cada uno de ellos coloque 1 ml aproximadamente del jugo de
papa.
Tubo No. 1: Agregue 1 o 2 gotas del reactivo de Lugol. Compare con la solución
Patrón y anote el resultado en su hoja de reporte.
Tubo No. 2: Agregue 5 gotas de reactivo de Benedict . Caliente directamente
en el mechero (llama), -Tener cuidado con las proyecciones-. Compare con la
solución Patrón y anote el resultado en su hoja de reporte.
Tubo No. 3: Agregue 1 a 3 gotas del reactivo de Sudan III. La formación de un
anillo rojo en el borde la muestra es una reacción positiva para los lípidos.
Tubo No. 4: Agregue 5 gotas del reactivo de Biuret. Compare con la solución
Patrón y anote el resultado en su hoja de reporte.
Sostenga el beaker en una posición inclinada y lentamente, resbale por las paredes
del mismo 1 ml de alcohol al 95%, dejando que se forme una capa sobre la solución
de germen de trigo, agua y detergente.
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 4
Li
Células procariotas y eucariotas
I. Introducción Li
Biología
En la práctica 2 se resaltó la importancia Celular
del uso de los microscopios para la observación de células
y sus organelos y estructuras. En la presente práctica el estudiante visualizarán algunas de las
diferencias, visible bajo el microscopio, entre células procariotas y células eucariotas en láminas
fijas y en fresco.
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
La célula es la unidad básica de la vida, todas las formas de vida se componen únicamente de 2
tipos de células: procariotas y eucariotas. Las células procariotas son mucho más simples que las
eucariotas, ya que no cuentan con un sistema de membrana que divide a la célula en
compartimentos denominados organelos. Por otro lado, las células procariotas carecen de núcleo
verdadero, de allí su nombre “antes del núcleo”. Además las células procariotas son más pequeñas
que las eucariotas. Generalmente, el núcleo es la organela más prominente de las células eucariotas
y por lo tanto, se observa con facilidad mediante un microscopio óptico. En algunos casos es posible
observar otros organelos como los cloroplastos presentes en las células vegetales (Audesirk T.,
Audesirk G. y Byers B. 2008).
Li
tisular se pueden emplear colorantes inocuos para la vida de las células, no modifican la estructura
de ellas ni interfieren en sus funciones.
Biología
Por el contrario las láminas fijas, Celular
han sido previamente fijadas mediante calor o agentes químicos
como alcoholes para mantener las células en su estado natural e impedir su autolisis
(desintegración) así como evitar la degradación de la muestra en el portaobjetos. En este caso, las
células no se encuentran viables (vivas) pero se asegura que sus estructuras permanecerán intactas
para ser estudiadas por mucho tiempo. Una vez que las muestras han sido fijadas se procede a
realizar la tinción o coloración de las mismas, esto con la finalidad de distinguir y poder estudiar las
diferentes estructuras (Montalvo CE, 2010).
En la presente práctica, el alumno visualizará las diferencias entre células procariotas y eucariotas
en relación al tamaño, forma, color, presencia de organelos y estructuras en montajes frescos y
láminas fijas.
V. Prelaboratorio:
f. Microscopio óptico
g. Computadoras
h. Cámara fotográfica
i. Láminas fijas de bacterias grampositivo con Tinción Gram
j. Láminas fijas de bacterias gramnegativo con Tinción Gram
k. Láminas fijas de frotes sanguíneos teñidos con Wright
l. Láminas limpias
m. Cubreobjetos
n. Palillos
o. Cebolla
p. Azul de metileno
q. Solución salina isotónica
r. Papel limpialentes
VII. Procedimiento
Li
b. Visualización de células eucariotas animales: mucosa oral
1. Tome una lámina limpia y rotule con el nombre de su compañero
Li
2. Tome un palillo de madera y raspe el carrillo de su compañero
3. Coloque la muestra sobre la lámina limpia
4. Colocar una gota de azul de metileno sobre la muestra y colocar inmediatamente un
Biología Celular
cubreobjetos y deje durante 2 minutos
5. Observe bajo el microscopio en objetivo de 10x y 40x
6. Realice un esquema de lo observado y describa en la hoja de microscopía los organelos
y estructuras presentes en la célula, la forma, tamaño y coloración que presentan
(Department of Biotechnology, s.a); (Deutch, CE., Boorse, GC., Sandrin, TR. y Seidel B,
s.a.)
VIII. Referencias
Audesirk T., Audesirk G. y Byers B. (2008). Biología: La vida en la tierra. 8ª Ed. Pearson:
México. 59 – 67.
Deutch, CE., Boorse, GC., Sandrin, TR. y Seidel B. (s.a.). Cell Biology Laboratory: Student
Laboratory Manual. Arizona State University. USA. Pp 87 – 98.
Li
http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/PDF/Portal%20de%20Recursos%20en%20Li
nea/Apuntes/3_tecnica_histologica.pdf
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 5
Li
Observación de estructuras y organelos celulares
I. Introducción
Li
Biología Celular
La célula corresponde a la unidad básica de la vida, todo organismo vivo se encuentra formado de
células y cada una de las mismas con la capacidad de desarrollar una gran cantidad de funciones.
Para sobrevivir, las células obtienen energía y nutrientes de su ambiente, con el fin de producir una
gran variedad de proteínas y otras moléculas necesarias para su crecimiento, metabolismo y
eliminación de sustancias de desecho. Además, las células deben tener la capacidad de
reproducirse para garantizar la continuidad de la vida. Todas estas funciones se encuentran
delegadas a las diferentes estructuras y organelos celulares. Los organelos celulares son cualquier
estructura limitada por membrana en el citoplasma de las células eucariotas. En la práctica se
observarán bajo el microscopio óptico algunos de los organelos celulares presentes tanto en células
vegetales como animales (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008).
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
Aunque las células presentan una gran diversidad todas las células tienen características comunes.
La membrana plasmática es una estructura que permite mantener el contenido interno de la célula
separado del ambiente externo y además es capaz de regular el intercambio de moléculas y
permitir la interacción con otras células, por esta razón, la membrana celular se encuentra presente
en todas las células (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008).
Li
eritrocitos (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008).
Para que la célula sea capaz de realizar las funciones vitales es importante que sea capaz de generar
energía. Este proceso se lleva a cabo principalmente en un organelo denominado mitocondria. A
diferencia del núcleo, un organelo único por célula, pueden existir varias mitocondria por célula. La
cantidad de mitocondrias puede variar de acuerdo al tipo de tejido y esto depende de la cantidad
de energía que el tejido necesite. El tejido muscular cuenta con un alto número de mitocondrias
debido a la demanda energética que tiene este tejido (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008).
Las células en su mayoría comparten los mismos organelos y estructuras, sin embrago existen
ciertos organelos y estructuras que se encuentran presentes principalmente en las células vegetales
como la pared celular, cloroplastos, vacuola central y otros plástidos (ej. Amiloplastos). La pared
celular protege y da soporte a la célula y se encuentra compuesta por celulosa. Los cloroplastos son
organelos encargados de la fotosíntesis y debido a eso contienen pigmentos importantes,
permitiendo su observación bajo el microscopio sin la necesidad de tinciones. Por el contrario los
amiloplastos, plástidos que almacena almidón, para su mejor observación pueden teñirse con lugol
(Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008).
Los cilios y los flagelos permiten el movimiento de algunos tipos celulares o el movimiento de los
líquidos y solutos para que estos pasen por la célula. Los cilios y los flagelos son extensiones finas
de la membrana plasmática, soportadas por una red conformada por microtubulos que
corresponden al citoesqueleto. El término cilios viene del latín “pestañas” y flagelo del latín “látigo”.
Al mencionar las diferencias entre cilios y flagelos resaltan: longitud, número y dirección de la
fuerza que generan. Los cilios poseen la característica particular de ser más cortos y abundantes en
número en comparación con los flagelos, además imparten una fuerza en dirección paralela a la
membrana, como lo menciona Audesirk y colaboradores, semejante a los “remos de una lancha”,
como se observa en la figura 1. Por otro lado, el moviento de los flagelos es similar a una hélice de
una lancha de motor (ver figura 1). (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008) (Campbell N y Reece J.
2005).
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li
Li
Biología Celular
Dentro de los organismos celulares que poseen cilios se encuentran los protozoos del género
Paramecium. Los cilios presentes en estos organismos son utilizados para su locomoción a través
del agua. En cuanto a los cilios presentes en organismos multicelulares conformados por células
animales, su función principal es el desplazamiento de fluidos y las partículas suspendidas para
hacer pasar por una superficie, como por ejemplo, las células que conforman el epitelio respiratorio
o las trompas de Falopio (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008) (Campbell N y Reece J. 2005).
Por otro lado, los flagelos se encuentran presentes en los espermatozoides de forma única. Algunas
especies bacterianas poseen flagelos que permiten su movilización como bacterias del género
Vibrio y especies como Escherichia coli. Las células procariotas no presentan cilios (Audesirk T,
Audesirk G y Byers B, 2008) (Campbell N y Reece J. 2005).
En la presente práctica se podrán observar algunos de los organelos y estructuras de las células
eucariotas vegetales y animales. Los organelos más pequeños necesitan de un microscopio con
mayor resolución, como el microscopio electrónico, por esta razón los organelos y estructuras a
visualizar son: núcleo, membrana plasmática, pared celular, cloroplastos, amiloplastos, cilios y
flagelos (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008).
V. Materiales y reactivos
a. Agua destilada
b. Bisturí
c. Cebolla
d. Cubreobjetos
e. Descarte con cloro
f. Descarte de punzocortantes
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
g. Frote periférico
h. Guantes
i.
j.
Güisquil
Hojas de elodea
Li
k.
l.
Hojas de microscopia
Hojas de yerba de pollo Li
m. Lugol
n. Mango de bisturí Biología Celular
o. Microscopio
p. Papa
q. Portaobjetos
r. Agua con Paramecium
s. Láminas fijas de Giardia, espermatozoides y Trichomonas
t. Lámina fija de epitelio respiratorio (tráquea)
VI. Procedimiento
c. Observación de amiloplastos
1. Realice un montaje en fresco de un corte muy fino de papa y agregue una gota de lugol
a la muestra.
2. Observe bajo el microscopio, dibuje y describa la forma y cantidad de amiloplastos, así
como el color con el que estos se tiñen en presencia del lugol.
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
3. Realice el mismo procedimiento con un corte de cebolla y güisquil y compare cuál de
los 3 montajes presenta mayor cantidad de amiloplastos e investigue la razón.
Li
d. Observación de cilios: Paramecium y tejido de tráquea.
Li
1. Realizar un montaje en fresco con agua destilada de muestra de agua con Paramecium
2. Observar los movimientos de los protozoos mediante los cilios
3. Dibujar los Paramecium y describir sus características.
Biología Celular
4. Montar la lámina fija de Balantidium coli, epitelio respiratorio, trompa de falopio y
observar la presencia del flagelo.
VII. Referencias
Audesirk T, Audesirk G y Byers B, (2008). Biología: La Vida en la Tierra, 8va ed, Ed Pearson,
Castell, AE., Leucuona, MA. Y Samperdro EA. (2013). Manual de prácticas de laboratorio de
Biología celular e histología Médica. Depto de Biología Celular y Tisular, Faculta de Medicina,
UNAM.
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 6
Li
Transporte a través de membrana
I. Introducción
Li
Biología Celular
La célula, para llevar al cabo sus funciones vitales, requiere de un intercambio constante de materia
y energía con su entorno. Para esto, las moléculas, requieren atravesar la membrana que la
recubre. En la presente práctica se observará los cambios celulares ante la exposición de las células
a soluciones con diferentes concentraciones de soluto. Además se evaluará el paso de sustancias a
través de una membrana artificial.
II. Objetivos
III. Alcance
1. Identificar y explicar los cambios que las células sufren ante la exposición a diferentes
soluciones con distintas concentraciones de soluto.
2. Identificar las sustancias que son capaces de atravesar una membrana semipermiable.
IV. Antecedentes
La membrana plasmática, por el tipo de moléculas que la componen, es de naturaleza no polar. Las
moléculas no polares tendrán libre paso a través de ella, dependiendo de su grado de solubilidad en
lípidos y de su tamaño; a mayor liposolubilidad, la penetración es más rápida. Una molécula debe
satisfacer dos condiciones para difundir al interior de una célula a través de la membrana
plasmática: Debe estar presente en concentración más elevada fuera de la célula, y la membrana
debe ser permeable a ella. Una membrana puede ser permeable a un soluto determinado porque
pasa directamente a través de la bicapa de lípidos, o porque es capaz de atravesar un poro situado
en el espesor de la membrana que impide el contacto del soluto con las moléculas lipídicas de la
bicapa (Ducolomb Y, et al; 2012 ).
Cuando se colocan las células en una solución con una concentración salina similar a la de su medio
(isotónica), la concentración de agua permanece constante dentro y fuera de la célula, por lo que su
volumen y forma no se alteran. Los eritrocitos humanos pueden conservarse por largos periodos en
una solución de cloruro de sodio al 0.9% sin presentar alteración ni hemólisis (Ducolomb Y, et al;
2012).
Cuando las células son colocadas en soluciones de menor concentración de soluto que la propia
(hipotónicas), el agua tiende a pasar hacia donde está la mayor concentración, dando lugar a que
las células se hinchen. Por otra parte, cuando se colocan en soluciones de mayor concentración de
soluto que la de ellas (hipertónicas), el agua tiende a salir ocasionando la contracción celular
(Ducolomb Y, et al; 2012 ). Se puede observar este efecto en la figura 1.
Biología
Se esquematiza el efecto de la Celular
osmosis en la figura 2:
a. Ósmosis
Li
1. Realice una punción con lanceta del dedo anular
Li
2. Coloque una gota de sangre capilar en cada tubo rotulado como:
i. Solución hipotónica
ii. Solución isotónica
Biología Celular
iii. Solución hipertónica
3. Agite levemente para homogenizar la muestra
4. Coloque, con la ayuda de una pipeta de plástico, una gota de cada solución sobre un
portaobjetos
5. Posteriormente coloque un cubreobjetos sobre la muestra y observe bajo el
microscopio con el objetivo de 40X, dibuje y describa lo observado
6. Y complete la siguiente tabla:
Concentración de la
Muestra Tipo de solución Descripción
solución
b. Turgencia y plasmólisis
1. Realice un montaje en fresco con agua destilada de una hoja de elodea
2. Observe bajo el microscopio con el objetivo de 10X y 40X
3. En otro portaobjetos coloque una hoja de elodea y agregue 1 gota de solución salina al
15% y coloque el cubreobjeto
4. Espere 5 minutos y observe el montaje en fresco de la elodea con solución salina al
15%
5. Observe bajo el microscopio con el objetivo de 40X, dibuje y describa lo observado.
6. Discuta las diferencias
VIII. Referencias
Audesirk T, Audesirk G y Byers B, (2008). Biología: La Vida en la Tierra, 8va ed, Ed Pearson,
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 7
LiEnzimas
I. Introducción
Li
Biología
Las enzimas son proteínas que Celularbiológicos, acelerando las reacciones y
actúan como catalizadores
disminuyendo la energía de activación. Existen varios factores que modifican la acción enzimática,
desde disminuir la actividad enzimática, inhibir la actividad de la enzima, hasta desnaturalizar
completamente de la enzima de manera irreversible. Dentro de estos factores se encuentran el pH,
la temperatura y los inhibidores. Estos factores se estudiarán durante la siguiente práctica con la
catalasa hepática y la peroxidasa presente en el rábano (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008)
(Ducolomb Y, et al; 2012).
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
Por otro lado, la peroxidasa de rábano cataliza la reacción de varios compuestos orgánicos e
inorgánicos para convertir el H2O2 en agua, como se muestra en la siguiente reacción
(Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008) (Campbell N y Reece J. 2005):
Li
Audesirk G y Byers B, 2008) (Campbell N y Reece J. 2005):
VII. Procedimiento
a. Actividad de la catalasa:
1. Tomar el hígado de res y cortar 8 trozos de 0.5 cms
2. Colocar cada uno de los trozos en 8 tubos de 10 mL y seguir el siguiente procedimiento
con cada tubo:
i. Tubo 1: agregar 2 mL de agua
ii. Tubo 2: agregar 2 mL de H2O2
iii. Tubo 3: agregar 1 mL de NaOH 1N, homogenizar, esperar 1 min y agregar 2 mL de
H2O2
iv. Tubo 4: agregar 1 mL de HCl 1N, homogenizar, esperar 1 min y agregar 2 mL de
H2O2
v. Tubo 5: 1 mL de hidroxilamina al 5%, homogenizar, esperar 1 min y agregar 2 mL
de H2O2
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
vi. Tubo 6: Calentar el tubo en baño maría hasta que el hígado cambié de color y
agregar 2 mL de H2O2
Li
vii. Tubo 7: colocar el tubo en el congelador por 10 minutos y 2 mL de H2O2
viii. Tubo 8: antes de agregar el hígado, triturarlo con un mortero y arena fina.
Li
3. Anotar todas las observaciones y discutir que sucedió en cada uno de los tubos.
VIII. Referencias
Audesirk T, Audesirk G y Byers B, (2008). Biología: La Vida en la Tierra, 8va ed, Ed Pearson.
Campbell N. y Reece J. (2005). Biología. 7ma ed. Buenos Aires, Argentina. Editorial
Panamericana.
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 8 y 9
Li
Respiración Celular y Fermentación
I. Introducción
Li
Biología
Las células necesitan energía Celular
para su metabolismo, en forma de ATP. Esta energía se obtiene
mediante la respiración celular, proceso que se lleva a cabo en la mitocondria. La mayoría de las
células tienen la capacidad de descomponer muchas moléculas para la producción de ATP, sin
embargo la principal molécula aportadora de energía es la glucosa. La primera parte de la
descomposición de la glucosa se conoce como glucólisis, la cual ocurre en el citosol y no
requiere de oxígeno. Si la célula se encuentra en presencia de oxígeno, continua con el proceso
de respiración celular, de lo contrario toma la vía de la fermentación. Ambos procesos se
estudiarán en la siguiente práctica.
II. Objetivos
1. Conocer el proceso de respiración celular y fermentación y las diferencias que existen entre
ambos.
2. Aplicar los procesos de respiración celular y fermentación durante la práctica.
3. Evidenciar los productos obtenidos de la respiración celular y la fermentación.
III. Alcance
IV. Antecedentes
Li
las enzimas piruvato descarboxilasa y alcohol deshidrogenasa:
V. Pre-laboratorio
1. Elodea
2. Frascos de vidrio de 1 L
3. Agua destilada
4. Jugo de repollo morado
5. Papel aluminio
6. Pajilla
7. Beakers de 500 mL
8. Solución de glucosa
9. Solución de Sacarosa
10. Solución de almidón
11. Solución de Fructosa
12. Solución de ovoalbúmina
13. Papel indicador de pH
14. Extracto de levadura
15. Globos
16. Baño maría a 37ºC
17. Guantes S, M y L
18. Dicromato de potasio 1%
19. Ácido sulfúrico concentrado
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
20. Papel filtro
21. Tubos de 10 mL
22.
23.
Embudo de vidrio
Li
Varillas de agitación de vidrio
24.
25.
Estufa
Erlenmeyers 30 mL Li
26. Pipetas de vidrio
Biología Celular
VII. Procedimiento
Li
Aguilar, L. (s.a.) Práctica 3: Fotosíntesis y respiración. Ministerio del Poder Popular para la
Educación U.E. Departamento de Ciencias Cátedra: Ciencias Biológicas. Venezuela.
Biología
Oria, E., Pérez, E., Tomas Celular
A.F. (s.a.) Prácticas de laboratorio de química orgánica. En:
www.books.google.com.pe; 22/08/2016; Química orgánica.
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 10
Li
Fotosíntesis
I. Introducción
Li
Biología
Más del 90% del peso seco Celular
de una planta está constituido por las distintas sustancias orgánicas
que forman sus estructuras celulares o regulan su metabolismo. Aunque los procesos
bioquímicos que dan lugar a esta variedad de compuestos son muy diversos, las cadenas
carbonadas iniciales las proporciona la fotosíntesis (Pérez & Martínez-Laborde, 1994).
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
V. Pre-laboratorio
a. Escriba 3 ejemplos de pigmentos distintos a la clorofila que se encuentran en las plantas y
cuál es su función o importancia.
b. Describa la importancia de la fotosíntesis en las plantas.
c. ¿Puede una planta realizar fotosíntesis si se encuentra en la sombra?
d. ¿En qué estructuras celulares se lleva a cabo la fotosíntesis?
2.
Li
Agregue 2 gotas del indicador de pH, azul de bromotimol, a cada tubo de ensayo. Si la
solución es ácida, se observará una coloración amarilla. Si la solución es básica, se
observará una coloración azul. Si la solución es neutra, se observará una coloración
verde. Biología Celular
3. Si el agua en los tubos no es neutra, agregue ácido (HCl 0.01N) o base (NaOH 0.01N),
hasta obtener la coloración verde.
4. Inspire normalmente y luego burbujee con una pajilla en los tubos 1 y 2, durante 2
minutos. Observe y anote los cambios que ocurren en los tubos.
5. Coloque una rama de Egeria en los tubos 1 y 3.
6. Tape los 4 tubos y expóngalos a la luz solar.
7. Observe los tubos cada 15 minutos. Anote los cambios. Haga su observación final a los
60 minutos.
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 11
LiMitosis
Li
I. Introducción
Biología Celular
La mitosis (del griego mitos, hebra) es la división del núcleo celular y la correspondiente
segregación cromosómica en dos núcleos hijos, que irá seguida de la división del citoplasma o
citocinesis. Este proceso se da en células eucariotas y dentro de estas en las células somáticas.
II. Objetivos
III. Alcance
a. Observar al microscopio las distintas fases de la mitosis celular en células vegetales, para lo
cual realizaran montajes por medio de una técnica sencilla.
IV. Antecedentes
El resultado esencial de la mitosis es la división del genoma de la célula madre en dos células
hijas. El genoma se compone de una determinada cantidad de cromosomas, hebras de ADN
muy enrolladas que contienen la información genética vital para la célula. Dado que cada
célula hija debe ser genéticamente idéntica a la célula madre, esta última debe hacer una
copia de cada cromosoma antes de la mitosis. En la Interfase, el periodo que precede a la fase
mitótica, la célula se prepara para dividirse, acumula sustancia nutrivas, crece y duplica su
material genético.
V. Pre-laboratorio
c. Defina los siguientes términos:Li Citocinesis, huso mitótico, cromosoma, cromátide,
locus, célula somática, interfase, material genético.
Biología
d. ¿Cuál es la importancia Celular
de la interfase?
e. ¿Cuál es la importancia de la Mitosis?
f. Dibuje un esquema de las fases de la mitosis.
a. Microscopio compuesto
b. Mechero de alcohol
c. Cubre y portaobjetos
d. Tijeras
e. Papel limpia lentes
f. Pinzas
g. Agua destilada
h. Vidrio reloj
i. Fosforos
j. Objetivo de inmersión
k. Aceite de inmersión
l. Orceina acética en goteros
m. Meristemos de cebolla
n. Lápiz con borrador nuevo (aportado por el estudiante)
VII. Procedimiento
14. Tome una raíz de cebolla y colóquela en un vidrio reloj. Separe delicadamente el
meristemo terminal (aprox. 1mm) utilizando pinza y tijera.
15. Agregue unas gotas de orceína acética y caliente suavemente, sin dejar que hierva. Es
importante que el colorante no se seque, para lograrlo debe retirar el vidrio reloj de la
llama al observar la producción de vapores blancos. Repita este procedimiento al
menos tres veces.
16. Tome el meristemo y colóquelo sobre un portaobjetos, agregue agua destilada y
coloque sobre un cubreobjetos. Presione suavemente con el borrador de un lápiz
sobre el cubreobjetos para disgregar el tejido y separar las células.
17. Examine la preparación usando el objetivo de menor aumento para localizar el lugar
donde exista más probabilidad de encontrar células en división. Una vez conseguido
esto, observe con el objetivo seco fuerte y con objetivo de inmersión.
18. Dibuje y describa lo observado. Identifique células en la interfase, profase, metafase,
anafase y telofase.
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 12
LiMeiosis
I. Introducción
Li
Biología
origen a células hijas, este Celular
Todas las células crecen y cuando alcanzan el tamaño adecuado, sufren divisiones que dan
proceso se realiza en todos los seres vivos, ya sean unicelulares o
pluricelulares. En los seres pluricelulares se presentan dos clases de células, que son las
somáticas y las germinales. Las somáticas sirven para el crecimiento, mantenimiento,
reparación y desarrollo de los tejidos; las germinales son las encargadas de la reproducción.
Estas se dividen mediante procesos diferentes, las somáticas por medio del proceso llamado
“Mitosis” y las germinales por medio del proceso llamado “Meiosis”.
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
La Meiosis consta de dos fases o divisiones celulares: la primera división meiótica incluye
profase I, metafase I, anafase I y telofase I; mientras que la segunda división meiótica consta de
profase II, metafase II, anafase II y telofase II. Las dos divisiones meiótica sucesivas dan lugar a
cuatro núcleos cada uno, con un número haploide de cromosomas. Las cuatro células
resultantes de las dos divisiones meióticas son gametos maduros que no experimentan
ninguna división más, ni meiótica ni mitótica.
Li
V. Pre-laboratorio
g. Investigar e ilustrar cómo se Liforman los cromosomas y el papel de las proteínas
histonas en su formación.
Biología
h. Dibujar y describir las 8 fases deCelular
la Meiosis.
i. Ilustrar la Espermatogénesis y la ovogénesis e identificar diferencias entre ambos
procesos.
j. Describa las principales diferencias entre Mitosis y Meiosis.
a. Microscopio
b. Preparaciones Fijas de células en Meiosis
VII. Procedimiento
Li
Li
Biología Celular
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Práctica No. 13
Li
Extracción de ADN
I. Introducción
Li
Biología
El ácido desoxirribonucleico (ADN) es una Celular
macromolécula clasificada como ácido nucleico. El
ADN se encuentra formado por nucleótidos unidos mediante enlaces fosfodiester y contienen
la información para la síntesis de todas las proteínas requeridas por la célula. En las células
eucariotas el ADN se encuentra presente en el núcleo, rodeado por la envoltura nuclear,
mientras que en las procariotas, al carecer de núcleo verdadero, el ADN se encuentra presente
en el nucleoide. En la presente práctica se realizará la extracción de ADN de diferentes
muestras como fresas, alverja, carne molida, cebolla, espinaca y brotes de soja o alfalfa
(Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008) (Campbell N y Reece J. 2005).
II. Objetivos
III. Alcance
IV. Antecedentes
El ADN es una macromolécula esencial para la vida, ya que contiene la información necesaria
para la síntesis proteíca, permitiendo de esta manera el suministro de las proteínas necesarias
para el metabolismo celular. El ADN se convierte en ARN en el núcleo y este último, lleva la
información para la síntesis de una proteíca hacia el retículo endoplasmático rugoso, donde en
los ribosomas se lee y se transforma en una proteína (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008)
(Campbell N y Reece J. 2005).
Li
proteínas con altas concentraciones de sales y posterior precipitación del ADN con alcohol
absoluto (isopropílico, isoamilíco o etílico) en frío. El ADN extraído se observa como una red de
delgadas fibras con aspecto algodonoso (Audesirk T, Audesirk G y Byers B, 2008) (Campbell N y
Reece J. 2005). Biología Celular
V. Pre-laboratorio
VII. Procedimiento
Li
7. Tomar 5 mL de la muestra con el buffer de lisis y colocar en un tubo de 10 mL.
8. Añadir 5 mL de alcohol isoamílico o alcohol isopropílico a 0ºC deslizando lentamente por las
paredes. Se deben formar 2 fases, la fase superior debe estar formada por el alcohol.
Biología Celular
9. Dejar reposar al menos por 10 minutos y observar la formación de hebras algodonosas que
corresponden al ADN extraído.
10. Comparar la cantidad de ADN extraído de cada una de las muestras.
VIII. Referencias
Audesirk T, Audesirk G y Byers B, (2008). Biología: La Vida en la Tierra, 8va ed, Ed Pearson.
Campbell N. y Reece J. (2005). Biología. 7ma ed. Buenos Aires, Argentina. Editorial
Panamericana.
Laboratorio de Biología General
Licda. Swuanny Valeska Villagran Herrarte
Lic. Víctor Hugo Soto Gramajo
Li
Li
Biología Celular