Disciplina:

Fundamentos de Genética e Biologia Molecular

Turma: Fisioterapia (1o Ano)

Transcrição e Tradução
Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
E-mail: marilanda_bellini@yahoo.com
Blog: http://marilandabellini.wordpress.com
 Dogma Central
Replicação

DNA Duplicação DNA

(Transcrição)

RNA

(Tradução)
RIBOSSOMO

PROTEÍNA

2
 Gene
Genética – Mendeliana
Porção do cromossomo que determina um único caráter (fenótipo).

Molecular – Beadle e Tatum, 1940

Segmento de material genético que determina ou codifica uma enzima.

1 gene
uma enzima (proteína)

Um gene codifica pelo menos uma cadeia polipeptídica, um tRNA, ou

um rRNA, como produto final em Eucariotos.
 Gene
Estrutura Geral de um Gene

DNA não-molde 5’ ACGTTTCGACCGG 3’

DNA molde 3’ TGCAAAGCTGGCC 5’

RNA transcrito 5’ ACGUUUCGACCGG 3’

 Gene: Íntrons e Éxons
• Íntrons:
São sequências de DNA não-codificantes, intercalantes.
Removidos por Reações de Recomposição (Splicing).

• Éxons:
São as sequências de DNA que se expressam, codificam
um gene.

Splicing
 Disciplina:
Fundamentos de Genética e Biologia Molecular
Turma: Fisioterapia (1o Ano)

Transcrição
Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
E-mail: marilanda_bellini@yahoo.com
Blog: http://marilandabellini.wordpress.com
 TRANSCRIÇÃO

Diversidade & Complexidade

Expressão gênica

•Síntese de DNA
precisa e uniforme

•Transcrição
estado fisiológico da célula

extremamente variável, para atender às suas
necessidades.
 TRANSCRIÇÃO
Características Gerais: Fita DNA Molde

RNA

Complementar a Fita
Molde de DNA

Semelhante a fita de
DNA não-molde

A=U

•Antiparalelismo

•Síntese 5’
3’
 RNA polimerases

Proteínas
Ligam-se e
Processam

DNA
Síntese

mRNA.
 RNA polimerases

Proteínas
•RNA-polimerase (RNApol):
Ligam-se e
•Não necessita de iniciador (primer)
Processam
• Funções
DNA reconhecem sequências específicas
de DNA e se ligam a elas
Síntese desnaturam DNA
expõem a
seqüência de nucleotídeos a ser

mRNA.
copiada
mantém estável a dupla fita aberta
mantém estável fita híbrida

DNA:RNA
terminam síntese
restauram DNA
imediatamente
após à da síntese
 RNA POLIMERASE
RNA polimerase específica
síntese de RNAs específicos:

Tipo Localização Sintetiza

RNA pol I Nucléolo RNA Ribossômico (rRNA)
RNA pol II Nucleoplasma RNA mensageiro (mRNA)
RNA pol III Nucleoplasma RNA transportador (tRNA)
 MOLÉCULAS DE RNA

• RNA mensageiro
•carrega a informação copiada do DNA sob a forma de
inúmeros triplets (trincas) cada um especificando um
aminoácido.

• RNA transportador
•decifra o código representado pelo mRNA.

• RNA ribossômico
•associa-se com uma série de proteínas para formar os
ribossomos.
 RIBOSSOMOS

Complexo RNA-proteína

Direciona o crescimento da cadeia polipeptídica

Move-se ao longo da cadeia de mRNA

 Transcrição

Etapas:
1. Início:

2. Alongamento:

3. Término:
 Transcrição

Etapas:
1. Início:
ligação do complexo de iniciação e da
RNA polimerase à região promotora

2. Alongamento:

3. Término:
 Transcrição
Início (mRNA)

-50 -30 -10 +10 +30

+1

Fita molde 3’ 5’
ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’

•Seqüências PROMOTORAS
início da síntese

• elementos promotores: seqüências de 100 a 200 nucleotídeos
próximos ao sítio de início da transcrição (-30) que possuem
seqüências consenso TATAAAA denominadas “TATA box”.
• TF = fator de transcrição
 Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30

+1
TBP
Fita molde 3’ 5’
ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’

1 ) TFIID = Liga-se a TATA Box

TBP + proteinas associadas
 Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30

+1
TBP
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’

1) TFIID = Liga-se a TATA Box

TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
 Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30

+1

TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’

1) TFIID = Liga-se a TATA Box

TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
3) TFIIB
 Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30

+1

TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ TFIIF 3’

1) TFIID = Liga-se a TATA Box

TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
 Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30

+1
RNA pol II
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ TFIIF 3’

1) TFIID = Liga-se a TATA Box

TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA pol
 Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30

+1
RNA pol II
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
TFIIE
TATAAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF 3’
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 )TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA polimerase II
6) TFIIE = se liga ao complexo de iniciação e ao DNA, após o
ponto de início da transcrição
 Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30

+1
RNA pol II
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
TFIIE
TATAAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF 3’
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 )TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA polimerase II
6) TFIIE = se liga ao complexo de iniciação e ao DNA, após o
ponto de início da transcrição
 Transcrição
Início
-50 -30 -10 +10 +30

+1
RNA polimerase

Fita molde 3’ 5’
ATATTTT
TATAAAA
Fita não-molde
5’ 3’
Complexos de transcrição
Fator – Promotor
~
RNA polimerases (I, II e III)
+
Fatores específicos de cada enzima

Ínicio da transcrição
 Transcrição

Etapas:
1. Início:

2. Alongamento:
Adição de nucleotídeos à cadeia
polipeptídica, complementando a fita
molde de DNA.

3. Término:
 Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30

+1

RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’

Bolha de transcrição
 Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30

+1
5’ 3’

RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT UGCGA TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’

Bolha de transcrição
 Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30

+1
5’ 3’

RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT UGCGACAU TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’

Bolha de transcrição
 Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30

+1

5’ 3’

RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT UGCGACAU TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’

CTTATT
Bolha de transcrição
GAAUAA
GAATAA
 Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30

+1

5’ 3’
Molécula de RNA precursor
5’

TTATTT
TBP TFIIB
Fita molde 3’ AAUAAA
TFIIA ATATTTT GTACGCTG
TFIIE
TATAAAA CATGCGAC AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF

3’

Bolha de transcrição
 Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30

+1
Molécula de RNA precursor
5’ 3’
7 MG
5’

TTATTT
TBP TFIIB
Fita molde 3’ AAUAAA
TFIIA ATATTTT GTACGCTG
TFIIE
TATAAAA CATGCGAC AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF

3’

7-metil-guanosina Bolha de transcrição

Início da tradução
Protege contra nucleases
 Transcrição
Etapas:
1. Início:

2. Alongamento:

3. Término:
Reconhecimento da sequência de término;
Complexo de iniciação é desligado do DNA;
RNApol é desligada do DNA;.
As fitas do DNA são totalmente renaturadas;
Adição de cauda de poli-A no RNA nascente.
 Transcrição
Término
-50 -30 -10 +10 +30

+1
Molécula de RNA precursor
5’ 3’
7 MG
5’

TTATTT
TBP TFIIB
Fita molde 3’ AAUAAA
TFIIA ATATTTT GTACGCTG
TFIIE
TATAAAA CATGCGAC AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF

3’

Reconhecimento da sequência AAUAAA Bolha de transcrição

 Transcrição
Término
-50 -30 -10 +10 +30

+1
Molécula de RNA precursor 7 MG
5’ 3’

5’
AAUAAA

TBP TFIIB
Fita molde 3’
TFIIA ATATTTT GTACGCTGTAAACGAATAAA
TFIIE
TATAAAA CATGCGACATTTGCTTATTT
Fita não-molde
5’ TFIIF

3’

Reconhecimento da sequência AAUAAA

 Transcrição
Término
-50 -30 -10 +10 +30

+1
Molécula de RNA precursor 7 MG
5’ 3’

5’
AAUAAA

TBP TFIIB
Fita molde 3’
TFIIA ATATTTT GTACGCTGTAAACGAATAAA
TFIIE
TATAAAA CATGCGACATTTGCTTATTT
Fita não-molde
5’ TFIIF

3’

Clivagem Endonucleotídica
poli-A endonuclease/polimerase
 Transcrição
Término
-50 -30 -10 +10 +30

+1
Molécula de RNA precursor 7 MG
5’ 3’

AAUAAA

Fita molde 3’ 5’
...ATATTTT... ...GTACGCTGTAAACGAATAAA...

Fita não-molde5’
TATAAAA CATGCGACATTTGCTTATTT 3’

Complexo de iniciação e RNA pol são desligados do DNA;

As fitas do DNA são totalmente renaturadas.
 Transcrição
Término
Molécula de RNA precursor
(íntrons + éxons)

5’ 3’

7 MG CAUGCGACAUUUGCAAUAAA
AAUAAA AAAAAAAAAAAAAAAAAAA

Adição da cauda de poli-A

(poli-A polimerase)

Cauda de poli-A
Estabilidade
Transporte do núcleo para Citoplasma
 RNA polimerase

• É essencial na transcrição...
(1ª etapa da expressão gênica)

• Ausência de RNA polimerase
proteína

c

VIDA
c

• A inibição da RNA polimerase

 Correlação Clínica
• Antibióticos e Toxinas
têm como alvo a RNA Polimerase:

– Toxina do cogumelo Amanita phalloides ou

“chapéu da morte”
altamente tóxico.
• inibe a subunidade maior da RNA polimerase II

inibindo a síntese de mRNA.

– Ação do antibiótico Rifampicina

• Tratamento de Tuberculose e Hanseníase
 Transcrição
Síntese de RNA
DNA
RNA

RNA polimerases devem reconhecer:

O ponto de início da transcrição
Qual das fitas deve ser usada como molde – transcrita
Região promotora do DNA

Tipos de RNA
RNA ribossômico
RNA mensageiro
RNA transportador

Tipos de RNA polimerase

RNA pol I
RNA pol II
RNA pol III

Correlação Clínica
 Processamento do RNA
• Reações de Recomposição – Splicing

– Processo de remoção de íntrons:

• Spliceossomo (mRNA);
• Autocatalítica (rRNA);
• Atividades Únicas de Nuclease e Ligase (tRNA).
 Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• mRNA
– Spliceossomo
• snRNPs
– Complexos proteína-RNA

• Clivagem íntrons
• Ligação éxons
 Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• rRNA
– Autocatalítica
• Transferências de ligação fósfodiéster.
• Extremidade G - 3’-OH
 Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• tRNA
– Atividade de endonucleases e ligases
 Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• tRNA
– Atividade de endonucleases e ligases

• Endonuclease de recomposição;
• Cliva extremidades dos íntrons.
 Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• tRNA
– Atividade de endonucleases
e ligases

• Endonuclease de
recomposição;
– Cliva extremidades dos
íntrons.

• Ligase:
– Une as extremidades dos
éxons.
 Processamento do RNA
Reações de Recomposição

Processamento
Splicing
 Disciplina:
Fundamentos de Genética e Biologia Molecular
Turma: Fisioterapia (1o Ano)

Tradução
Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
E-mail: marilanda_bellini@yahoo.com
Blog: http://marilandabellini.wordpress.com
 TRADUÇÃO

• mRNA
proteína.

• Cada aminoácido é codificado na seqüência de DNA como

um códon contendo uma seqüência de três nucleotídeos.

• Moléculas de RNA transportador transferem a informação

contida no genoma à uma seqüência de aminoácidos nas
proteínas.
 RNA
TRANSPORTADOR

• Liga-se quimicamente à um
aminoácido específico;

• Pareia com a seqüência do

codon do mRNA adicionando
o aminoácido que carrega à
uma cadeia de peptídeos
crescente.
Tradução
 Tradução
Códon:
Anticódon: C G A C U G G A U C G C

AminoAc: Ala Asp Leu Ala

 CÓDIGO GENÉTICO
Relação entre a sequência de bases no DNA e a seqüência
correspondente de aminoácidos, na proteína, é chamada de
código genético

O código genético encontra-se na forma de trincas – os códons

CÓDIGO GENÉTICO
 Tradução:
aa livre
Gly
Ribossomo Phe His
Glu
Proteína Asp
Met
Ala Cys
tRNA
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA

Molécula de mRNA
codon

Direção do avanço do ribossomo

 Gly
Phe His
Glu
Asp
Met
Ala Cys

5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
 Gly
Phe His
Glu
Met
Ala
Cys Asp

5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
 His
Gly
Met Phe
Ala
Cys
Asp Glu

5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
 Ile
Met His
Ala Gly
Cys
Asp
Glu
Phe

5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
 Lys
Met
Ala Ile
Cys His
Asp
Glu
Phe
Gly

5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
 Met
Ala Lys
Cys
Asp Ile
Glu
Phe
Gly
His

5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
 Met
Ala
Cys Lys
Asp
Glu
Phe
Gly
His
Ile

5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
 Met
Ala
Cys
Asp Leu
Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys

5’ 3’
G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUAAAA
 Met
Ala
Cys
Asp Met
Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys Leu

5’ 3’
U G C GAC GAAU U C G GACACAUAAAAU UA
 Met
Ala
Cys
Asp
Glu Asn
Phe
Gly
His
Ile
Lys
Leu Met

5’ 3’
GAC GAAU U C G GACACAUAAAAU UAAU G
 Met Ala
Cys
Asp
Glu
Phe Pro
Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met Asn

5’ 3’
GAAU U C G GACACAUAAAAU UAAU GAAC
 Met Ala Cys
Asp
Glu
Phe
Gly Gln
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn Pro

5’ 3’
U U C G GACACAUAAAAU UAAU GAAC C CA
 Met Ala Cys Asp
Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn
Pro Gln

5’ 3’
G GACACAUAAAAU UAAU GAAC C CACAA
 Met Ala Cys Asp Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn
Pro
Gln

5’ STOP 3’

CACAUAAAAU UAAU GAAC C CACAAUAA

 Ala Cys Asp Glu Phe
Met Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn
Pro
Gln

5’ STOP 3’
AUAAAAU UAAU GAAC C CACAAUAAAAA
 Ala Cys Asp Glu Phe
Met Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn
Pro
Gln

5’ STOP 3’
AUAAAAU UAAU GAAC C CACAAUAATAC
 Ala Cys Asp Glu Phe
Met Gly
His
Ile
Gln Lys
Pro Leu
Asn Met

5’ 3’
AUAAAAU UAAU GAAC C CACAAUAATAC
 Tradução
1 gene
1 proteína

mRNA
Citoplasma

Ribossomo + tRNA
Códons + Anticódons = aminoácidos

Proteína
 Referências
• 1) LEWIS, B. Genes VII. 7a ed. Artmed Editora, 2001.

• 2) SNUSTAD, P.; SIMMONS, M.J. Fundamentos de Genética. 2ª ed., Rio de

Janeiro, Guanabara Koogan, 2001.