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PRÁCTICA 3
PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS EN CONEJOS
ALUMNOS:
• Chávez Hernández José Ignacio
• Flores Portillo Angel Alexis
• Gómez Téllez Vianey Lucille
• Lamas Ayala Jorge Luis
• Parra López Isadora
• Valadez Gil Juan Emanuel
PROFESORAS:
Chávez Infante Verónica
Cabrera Laura Cristina
Moreno Guerrero Karen Gisela
Ocampo Ocampo Israel
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PRÁCTICA 3
PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS EN CONEJOS
1. OBJETIVOS
1.1 Objetivo General
Producir anticuerpos policlonales con eritrocitos como antígeno en conejo () como sistema de
producción.
2. INTRODUCCIÓN
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3. MARCO TÉORICO
Los antígenos son moléculas de procedencia exógena o endógena que resulta extraña al organismo,
para aquellos antígenos que inducen una respuesta inmune se ha propuesto el término inmunógeno.
La inmunogenicidad es la potencia o capacidad que tiene una molécula para generar una respuesta
inmune y depende tanto de su naturaleza, como de la inherente al individuo en el que actúa. Por
ejemplo, es importante el tamaño del antígeno, polisacáridos de alto peso molecular frecuentemente
resultan inmunogénicos, sin embargo, otras moléculas de menor tamaño, pero con gran complejidad
estructural también son efectivas. (Vega, 2009)
Los anticuerpos son proteínas que pertenecen a la fracción γ-globulina del suero, están constituidos
por dos cadenas proteicas: pesada y ligera. Aunque de estructura semejante, existen varias clases
inmunoglubulinas que se diferencian por sus características fisicoquímicas, fisiológicas e
inmunológicas. Se producen en el organismo en respuesta a los antígenos, y estos son capaces de
interaccionar específicamente entre sí.
La formación de anticuerpos tiene lugar en células procedentes de la medula ósea, llamadas linfocitos,
que en presencia del antígeno maduran. Cada linfocito produce un único anticuerpo, sin embargo, en
el suero sanguíneo de un animal inmunizado no aparece solo un anticuerpo, sino una mezcla de
heterogéneos de ellos, llamado antisuero o anticuerpos policlonales. (Coll, 1993)
Los anticuerpos policlonales frecuentemente reconocen múltiples epítopes haciéndolos más tolerantes
a pequeños cambios en la naturaleza del antígeno. Son frecuentemente la opción preferida para la
detección de proteínas desnaturalizadas; también pueden ser generados en una variedad de especies,
incluyendo conejos, cabras, ovejas, asnos, gallinas y otros, dándole al usuario muchas opciones en el
diseño experimenta. A veces son usados cuando la naturaleza del antígeno en una especie no
estudiada no se conoce y al unirse a múltiples epítopes generalmente proveen una detección más
robusta. (Calderón, 2007)
Eritrocitos humanos como antígeno.
Los antígenos de los eritrocitos están compuestos por azucares que protruyen de la membrana de la
superficie de estos, unidos a un componente denominado ceramida.
Por lo tanto, son una serie de cuatro azúcares se une a la ceramida, a esta estructura se le unen otros
azucares que le dan la especificidad a cada antígeno. (Arbeláez, 2009)
La respuesta es del tipo humoral, es decir es mediada por inmunoglobulinas, cuyas funciones
principales son: neutralización, opsonización y activación del complemento. Los anticuerpos
sanguíneos son usualmente IgG y/o IgM y en casos raros IgA. (Grispan, 1983)
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4. METODOLOGÍA
4.1 Obtención del suero pre-inmune y post protocolo del sujeto de pruebas
*Es necesaria una prueba de esterilidad en medio fluido de tioglicolato de acuerdo al MGA 0381
de la FEUM.
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4.3.1 Calendario de inmunización
Tabla 1. Calendario de inmunización de conejo con suspensión de eritrocitos humanos al 47 % de Transmitancia como
antígeno.
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5. RESULTADOS
5.1 Resultados de precipitación en medio sólido: inmunodifusión doble
Tabla 2. Resultados de la prueba de precipitación en medio sólido.
Suero post-
protocolo de
inmunización
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5.2 Resultados de precipitación en medio líquido: Precipitación en capilar
Tabla 3. Resultados de la prueba de precipitación en medio líquido.
Suero post- -
protocolo de
inmunización
1 2 6 7 10 11 12
3 4 5 8 9
Figura 3. Resultados de la prueba de precipitación en capilar a las 24 horas. (1) dilución 10-1, (2) dilución 10-2 (3) dilución
10-3 (4) dilución 10-4 (5) dilución 10-5 (6) dilución 10-6 (7) dilución 10-7 (8) dilución 10-8 (9) dilución 10-9 (10) dilución 10-
10 (11) Solución madre de eritrocitos al 47.3 % T (12) Suero preinmune
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1 2 3 6 7 10 11 12
4 5 8 9
Figura 4. Resultados de la prueba de precipitación en capilar a las 48 horas. (1) dilución 10-1, (2) dilución 10-2 (3) dilución
10-3 (4) dilución 10-4 (5) dilución 10-5 (6) dilución 10-6 (7) dilución 10-7 (8) dilución 10-8 (9) dilución 10-9 (10) dilución 10-
10 (11) Solución madre de eritrocitos al 47.3 % T (12) Suero preinmune
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6. ANÁLISIS DE RESULTADOS
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7. CONCLUSIONES
8. REFERENCIAS
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ANEXOS
A1. PROTOCOLO DE EXTRACCIÓN DE SANGRE A HUMANOS
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A2. PROTOCOLO DE INMUNIZACIÓN
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A3. MANEJO DE ANIMALES
ADVERTENCIA
Nunca se debe manipular a los conejos por las orejas o por las patas, eso puede causarles daños
permanentes.
SUJECIÓN
Existen diversas maneras de sujetar al conejo, una de ellas es la siguiente: Se realiza con la mano
derecha, se suspende de la piel floja de la región del dorso y la nuca del conejo, y con la mano izquierda
se le sujeta por debajo de los muslos como si se lo fuera a sentar sobre la palma de la mano, con el
objeto de sostener el peso del animal.
TRANSPORTE
El transporte debe hacerse siempre realizando movimientos lentos, sin gritos o sonidos repentinos.
TÉCNICAS DE MANEJO PARA USO DE VÍAS DE ADMINISTRACIÓN EN CONEJOS
Fuentes, F., Mendoza, R., Rivera, R. Vara, M. (2010). Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio. Recuperado de:
http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Manejo.cuidado.conejos.pdf consultado 06/10/18.
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