Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
SÃO CRISTÓVÃO-SE
2019
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SERGIPE - UFS
CENTRO DE CIÊNCIAS EXATAS E TECNOLOGIA – CCET
DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE ALIMENTOS – DTA
SÃO CRISTÓVÃO-SE
2019
SUMÁRIO
1. INTRODUÇÃO ..................................................................................4
2. OBJETIVOS.........................................................................................4
3. MATERIAIS E MÉTODOS.................................................................4
4. RESULTADOS E DISCUSSÕES........................................................5
5. CONCLUSÃO......................................................................................5
REFERÊNCIAS....................................................................................6
4
1. INTRODUÇÃO
As enzimas são catalisadores biológicos poderosos e específicos. De
natureza proteica, aumenta a sua velocidade de reação sem afetar o equilíbrio (
Figura 1).
FIGURA 1: reação de equilíbrio da enzima
2. OBJETIVOS
Verificar o efeito da concentração da sacarose na atividade da B-frutofuranosidase
ou invertase de Saccharomyces cerevisiae. Determinar o Km e Vmáx de uma enzima.
3. MATERIAIS E MÉTODOS
Materiais
-Tubos de ensaio, pipetas, banho maria, termômetro,
- Solução de sacarose 10 mg/mL em Tampão acetato 0,1 M pH 5,0
- Solução de invertase de levedura Saccharomyces cerevisiae em Bicarbonato de
sódio 0,15 mol/L
- Solução de DNS.
Procedimento Experimental
Foi colocado 4mL da solução de sacarose 10 mg/mL em Tampão acetato 0,1 M
pH 5,0, já preparada, em cada tubo, foi incubado por 10 min a 40ºC para
equilibrar da temperatura. Após equilibrar a temperatura adicionou-se 1,0 mL de
invertase na diluição 0,5x10-3 mg/mL, homogeneizou e retomou para a
incubação a 40ºC por 30 minutos. Retirada da incubação, os tubos seguiram para
um banho de gelo, para inibir a reação. Depois de resfriado, adicionou-se 4,0 mL
de DNS e levou-se para o banho maria por mais 10 minutos. Esperado resfriar,
foi retirado 1mL da mistura, adicionado em um tubo, completado com 9mL de
água e seguiu-se para a leitura da absorbância a 570nm.
4. RESULTADOS E DISCUSSÃO
Para encontrar a velocidade inicial (Tabela 02), foi feita o cálculo da
concentração de glicose através da equação padrão da reta, y = 2,1243x + 0,0289.
Sendo y a leitura da absorbância, 570 nm (Tabela 01).
Através da curva cinética obtida na prática (Figura 01), é possível identificar que
a reação não atinge a sua velocidade máxima.
0.000009
0.000008
0.000007
VELOCIDADE (G/L.MIN)
0.000006
0.000005
0.000004
0.000003
0.000002
0.000001
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO (G/L)
500000
400000
1/[V]
300000
200000
100000
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
1/[S]
5. CONCLUSÃO
REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA
FOOD INGREDIENTES BRASIL. Enzimas: natureza e ação nos alimentos.
2011. Disponível em < http://www.revista-fi.com/materias/166.pdf>. Acessado em
24 de maio de 2019
Nelson, David L.; COX, Michael M. Princípios de bioquímica
de Lehninger. Porto Alegre: Artmed, 2011. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2014. Pg
200, 203
10