EJERCICIOS DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

ESTEQUIOMETRÍA DE PROCESOS FERMENTATIVOS

1. Un investigador quiere cultivar una levadura (50% C y 7% N) en cultivo por

lotes (discontinuo o batch). Desea comenzar desde una concentración
inicial de biomasa de 0.5 g/l, dejando que el cultivo crezca por 5 horas (t d =
45 min.). Como fuente de carbono desea utilizar sacarosa y como fuente de
nitrógeno (sustrato limitante) usará sulfato de amonio. Para proporcionar las
otras sales y vitaminas dispone de un preparado comercial concentrado que
no necesita ser formulado. Calcule las concentraciones iniciales de carbono
y nitrógeno.

Nota: el tiempo de duplicación es el tiempo necesario para que la biomasa

se haga el doble de la inicial.

2. En un experimento de laboratorio se cultivó la bacteria E. coli. Diseñar el

medio de cultivo con Mg como nutriente limitante, si se desea un
incremento total de biomasa de 7 g/l. Los demás nutrientes deben estar en
exceso del 100%. La composición celular y las fuentes recomendadas son
las siguientes:

Elemento Fuente % biomasa

C C6H12O6 50
N NH4Cl 14
S K2SO4 1
Mg MgCl2 0.5
P K2HPO4 2

3. Para realizar el proceso de fermentación en una empresa cervecera, los

fermentadores de un volumen útil de 2.7 m 3 fueron inoculados con 30 L de
inóculo propagado según el siguiente protocolo: Primero se inocularon 700
ml con la levadura seleccionada; luego de 5 h se obtuvo una concentración
celular de 2 g/l. Estos 700 ml fueron adicionados a 29.3 L de medio y luego
de 10 h de fermentación se obtuvo una concentración celular de 4 g/l.

a. Diseñe el medio de cultivo con glucosa, fosfato de potasio, cloruro de

amonio, sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro de potasio, siendo
nitrógeno el limitante para lograr una concentración celular de 5 g/l en el
reactor, si la composición de algunos elementos de la biomasa es la
siguiente:

%C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0.1 0.1 0.01
 4. Determine cuáles serían las necesidades de aire en litros a C.N. para
suministrar el oxígeno a un cultivo bacteriano para hacer crecer la biomasa
en 5 g/l, utilizando glucosa como fuente de carbono y energía. Asuma que
la fuente de nitrógeno es amoniaco y que todo el sustrato es convertido a
biomasa, CO2 y H2O. La composición elemental de la célula es: 50% C,
22% O, 10% H, 14% N, trazas.

5. La producción bacteriana del aminoácido lisina puede representarse por la

siguiente ecuación:

a C6H12O6 + b NH3 + c O2 → d C4.4H7.3N0.86O1.2 + e CO2 + f H2O + C6H14O2N2

(Biomasa) (Lisina)

Sabiendo que el rendimiento global de glucosa en biomasa es 0.19 g/g y el de

glucosa en producto es 0.3 g/g, determine los coeficientes estequiométricos de
la ecuación y el rendimiento máximo posible de glucosa en biomasa (Y XS si
todo el sustrato se convirtiera en biomasa).

Datos: El medio de cultivo contiene inicialmente 45 g de glucosa por litro. Y PS =

0.57 g/g .

6. Considere las siguientes ecuaciones estequiométricas de crecimiento de S.

cerevisiae:

 Crecimiento anaerobio con glucosa como sustrato:

C6H12O6 + 0.12NH3 → 0.59CH1.75O0.45N0.2 + 1.3C2H6O + 0.43C3H8O3 + 1.54CO2

 Crecimiento aerobio con glucosa como sustrato:

C6H12O6 + 3.84O2 + 0.29NH3 → 1.95CH1.72O0.44N0.15 + 4.09CO2 + 4.72H2O

 Crecimiento aerobio con etanol como sustrato:

C2H6O + 1.82O2 + 0.15NH3 → 1.03CH1.72O0.44N0.15 + 0.97CO2 + 2.31H2O

a. Calcular: YXS, YXO, RQ, YXN en cada caso.

b. ¿Cuál proceso es más eficiente con respecto a la producción de proteína
unicelular (biomasa)?
c. ¿Cómo se forma el agua producida en las dos últimas fermentaciones?
 7. Considere la siguiente ecuación que describe el consumo de glucosa y la
formación de biomasa por una bacteria ácido butírica:

2(glucosa) + aNADH2 + bATP → 3C4H4pO4nN4q

Los valores de a y b pueden calcularse usando la información adicional de que la

fracción en peso del carbono en la biomasa, σ x, y el grado de reducción de la
biomasa, γx, son relativamente constantes:

σx = 0.462 ± 0.023
γx = 4.291 ± 0.172

a. El ATP necesario para la síntesis de biomasa puede ser estimado del rendi-
miento en peso de ATP, YATP, el cual es definido como la cantidad de biomasa seca
producida (en gramos) por mol de ATP usado en la biosíntesis. Asumiendo que
YATP es 10.5 g/mol, calcular cuánto ATP se requiere para la síntesis de biomasa
por cada 2 moles de glucosa incorporadas en biomasa.

b. Calcule cuánto NADH2 se necesita por cada 2 moles de glucosa incorporadas

en biomasa para llevar la glucosa al nivel de oxidación de C 4H4pO4nN4q.