1 ¿En qué momento se realiza la precipitación de las proteínas y por qué?
Una proteína es una cadena de aminoácidos cuya secuencia es específica. Se forman en los ribosomas por lectura de los genes que llevan la información de la secuencia concreta de aminoácidos que da lugar a una determinada proteína. Esta cadena de aminoácidos agrega otros átomos o moléculas como cobre, zinc, hierro, etc, para dar lugar a la proteína final que comienza a plegarse sobre sí misma para adoptar la conformación espacial necesaria para realizar correctamente su función biológica. La pérdida de esta conformación espacial hace que la proteína no pueda cumplir con su función biológica en el organismo y es lo que se conoce como desnaturalización de proteínas. Por ejemplo, un enzima pierde su función catalítica. La precipitación se realiza cuando se pone a reposar en baño maría por 10 minutos a 60 - 80 grados centígrados. La desnaturalización de proteínas es consecuencia de algún factor externo como acidez del medio, temperatura, etc. Es importante saber que la desnaturalización de una proteína no afecta a lo que se conoce como estructura primaria, esto es, la secuencia de aminoácidos base de la proteína.
2. ¿Cuál es el papel del oxalato de amonio?
El Oxalato de Amonio se emplea en el recuento de plaquetas presentes en una muestra de sangre. Este resultado es importante ya que desempeña un papel vital de la homeostasis.
3. ¿Cuál es el fundamento del método de Somogyi – Nelson? Explique si se
produce una reacción de oxidación. El método de Nelson-Somogyi se fundamenta en la oxidación de la glucosa por acción de un reactivo cuproalcalino y posterior formación de un complejo coloreado azul verdoso por acción del ácido molíbdico y arsenioso . la intensidad de coloración de este complejo es proporcional al contenido de glucosa en la muestra. esta coloración es leída a 540 nm. Sí se da la reacción de oxidación.
4. En el método de Folin para determinación de azúcar en sangre, se añade
a 0.1 mL de sangre, 10 mL de ácido túngstico a fin de eliminar las proteínas. Una alícuota de 2 mL del filtrado exento de proteínas se coloca en tubo para producir la reacción de color, cuyo volumen final es 25 mL. La intensidad de color se compara con la que produce 4 mL de estándar de glucosa de Concentración 1 mg %. Al ser procesado con los mismos reactivos, este estándar produce un color 1.05 veces más intenso que el producido por la sangre filtrada. ¿Cuál es la concentración de azúcar en esta muestra de sangre? Para la muestra: 0.1 mL sangre + 10 mL de ác. Túngstico = 10.1 mL total 0.1 mL sangre -> 10.1 mL x -> 2 mL x = 0.0198 mL
0.0198 mL sangre -> 2 mL filtrado -> 25 mL
y -> 1 mL y = 0.000792 mL sangre Para el estándar: 1 mL glucosa -> 100 mL x -> 4 mL x = 0.04 mL 0.04 mL glucosa -> 2 mL filtrado -> 25 mL y -> 1 mL y = 0.0016 mg glucosa A ST = 1.05 A MP 5. El coeficiente de extinción molar de una sustancia es de 3257 cm -1 .mol -1 en una celda de 1 cm y en una longitud de onda de 280 nm ¿Cuál será la concentración en mg o en g si se obtuvo una absorbancia de 0.215, sabiendo que el peso molecular es 328? A = a x b x c. 0.215 = 3257 x 1 cm x c c= 6.6 x 10 -5 mol 1 mol -> 328 g 6.6 x 10 -5 mol -> x x = 0.02165 g x = 21.648 mL