Evaluación de la sustancia inhibitoria generada por una bacteria del genero Basillus sp.

En otras cepas de bacterias patógenas

Restrepo. I1 y Rivero. A2

1. Justificación

Este proyecto buscará identificar y evaluar la antibiosis generada por la bacteria obtenida
mediante una muestra de suelo tomada cerca al tronco en la superficie de la palma Phoenix
canariensis. Al hacer el primer sembrado de dicha muestra se hizo disolviendo un cúmulo de tierra
al caldo nutritivo con el asa redonda y después esta misma se transporta la preparación ya inoculada
en Agar Nutritivo en un tiempo de incubación de 20°C por 48 horas, y fue mantenida en
refrigeración durante 5 días.La bacteria inhibidora tiene una morfología microscópica de bacilos
gram negativos, las características de una única colonia encontrada de forma circular, elevación
umbonada y un margen ondulado contra una bacteria que presenta una morfología con una aureola
alrededor de (+-) 0,5 cm. La bacteria inhibida microscópicamente es una gram positiva alargada
de forma rizoide, sin elevación y margen filamentoso.

“La antibiosis es la relación interespecífica en la que un microorganismo produce, libera o

genera una sustancia, producto o elemento que inhibe la vida de otros organismos” (Romero, 2007,
pág. 7), un ejemplo de esto puede ser el género Penicillium sp. el cual produce penicilina y mata a
distintos tipos de bacterias. “La resistencia a los antibióticos es hoy una de las mayores amenazas
para la salud mundial, la seguridad alimentaria y el desarrollo” (OMS, 2018). En los últimos años
la Organización Mundial de la Salud ha emitido comunicados en dónde se publican listados sobre
bacterias que son cada vez más resistentes a los antibióticos usados, entre esos la penicilina, esto
se debe gracias a mutaciones y modificaciones nuevas en el ADN de estas bacterias según Ansede
(2017).

Se apuesta a saber si el microorganismo produce un antibiótico que destruye a otro

(bactericida), o como ya se observó ser un inhibidor de microorganismo bacteriostático (Romero,
2007, págs. 49,50), como también puede ser el microorganismo un productor de bacteriocinas o
también llamadas colicinas en caso de la morfología Gram negativa;

“la diferencia radica en que la relación de las bacterias está muy limitada y solo afecta a
microorganismos muy relacionados con los productores. Estructuralmente son péptidos o
proteínas de bajo peso molecular… Debido a que su espectro de acción es muy restringido,
los microbiólogos le han prestado menos atención que a los antibióticos" (Atlas & Bartha,
2002, pág. 84).

Según los resultados de esta investigación buscamos que sirva como base para aplicar
biotecnológicamente más adelante como fungida agrícolamente o ayuda al problema de salud
pública de las mutaciones de las bacterias que poco a poco han neutralizado la relación amensal
volviéndola coexistente (Atlas & Bartha, 2002, pág. 83)

1
Ingrid Lorena Restrepo Capera, ingrid9731lorena@gmail.com. Estudiante de Tecnología en Saneamiento
Ambiental de la Universidad Distrital Francisco José de Caldas. Bogotá, Colombia COD: 20171085057
2
Angela Daniela Rivero León, angel_rivero.leon@hotmail.com. Estudiante de Tecnología en Saneamiento
Ambiental de la Universidad Distrital Francisco José de Caldas. Bogotá, Colombia COD: 20171085057
 2. Objetivos

2.1. Objetivo General

 Evaluar si la bacteria encontrada en el suelo es viable para un uso alternativo a las

sustancias fungicidas o antibióticas.

2.2. Objetivos Específicos

 Identificar el organismo que fue inhibido por la bacteria que genera la antibiosis.

 Inducir el crecimiento de la bacteria y generación de la sustancia antibiótica.

 Trasferir la sustancia inhibidora en prueba antibiograma de distintas cepas bacterianas

de distintas morfologías microscópicas
 3.Metodologia

Antes del proyecto:

 2 cepas diferentes con morfología similar a las inhibidas (gram negativas). Estas serán
facilitadas por compañeros de clase
 2 cepas diferentes (patógenas)
 4 Cajas de Petri para sembrar por el método de rejilla las cepas facilitadas por los
compañeros y/o el laboratorio
 Incubadora.
 Microscopio.

Semana 1:
Aislamiento de la bacteria inhibidora que se extrajo previamente en la muestra de
suelo, realizar una tinción de gram para confirmar su morfología microscópica y
hacer una descripción detallada de su morfología.
 Se hará un sembrado en agar MacConkey este medio es selectivo y
diferencial utilizado para la recuperación de enterobacterias y bacilos Gram
negativos. Contiene sales biliares y cristal violeta que inhiben el desarrollo
de bacterias Gram positivas y de algunas Gram negativas exigentes.
 Se va a incubar a 20o C

Semana 2: Tras completar la identificación de la bacteria que inhibió el

crecimiento de las otras, se hará la caracterización y la tinción gram de la otra
bacteria la cual fue inhibida.
 Agar STS: Para aislar bacterias del genero Clostridium sp. en especial
Clostridium perfringes y Clostridium botulinum,si este género suele ser
estrictamente anaerobio algunas son especies aerotolerantes por eso puede
haber posibilidad de estar . Incubaremos a 35 °C por 48 horas
 Agar EYA: Para aislar Bacillus anthracis se va a incubar a 35° C. en se
presentasta haciendo actividad lecitinasa, catalasa y nitratasa positivas, es
inmóvil, hidroliza caseína. gelatina y almidón, pero no la arginina. Utiliza
carbohidratos como trehalosa y glicógeno con producción de ácido, pero sin
generar gas
 Agar Sangre: Para aislar Bacillus antrharacis ESTE AGAR
 Agar Bacillus Cerius: para Bacillus Cerius a 35 C°

Todas estas bacterias tienen en común la formación de esporas

Semana 3 y 4: En el laboratorio se pedirán 2 cepas que se encuentren disponibles y

2 se pedirán otras a los compañeros de estudio.
  Se va incubar de acuerdo a la temperatura adecuada.

Semana 5 y 6: A este punto del proyecto se empezará con el proceso de antibiosis.

Se usará uno de los siguientes métodos: de antibiograma este extrayendo la
sustancia inhibitoria con para probarlo en otras cepas, por el método de difusión en
gradiente o dilución en medio liquido .Necesitando así 5 cajas de Petri (gradiente)
o 12 tubos de ensayo (disolución).

1. Metodología de Evaluación de la Antibiosis

.
 Lista de Referencias

 Ansede, M. (27 de febrero de 2017). El País. Obtenido de La OMS anuncia las 12 nuevas
familias de bacterias más peligrosas para el ser humano:
https://elpais.com/elpais/2017/02/27/ciencia/1488207618_921542.html
 Atlas, R., & Bartha, R. (2002). Ecología microbiana y Microbiología ambiental. Madrid
(España): PEARSON EDUCACIÓN S.A.
 OMS. (5 de Febrero de 2018). Resistencia a los antibióticos. Obtenido de Organizacion Mundial
de la Salus: https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/resistencia-a-los-
antibi%C3%B3ticos
 Romero, R. (2007). Microbiología, Virología y Parasitología ( Bases Etiológicas de
Enfermedades Infecciosas) (3ra ed.). México, México: Editorial Medica Panamericana. Obtenido
de
https://books.google.com.co/books?id=Wv026CUhR6YC&pg=PA7&lpg=PA7&dq=a+antibiosis
+es+la+relaci%C3%B3n+interespec%C3%ADfica+en+la+que+un+microorganismo+produce,+li
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