UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROINDUSTRIALES

PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS

LABORATORIO BIOQUIMICA

INFORME DE LABORATORIO N°7 DETECCIÓN DE INTERMEDIARIOS EN LA FERMENTACIÓN

ALCOHOLICA POR LEVADURAS

John Alexander Caicedo

Yerlin Caicedo
Mariana Corredor

Resultados

Tabla1. Detección del piruvato con la prueba del nitroprusiato de sodio

Tubos Resultado
N1 Positivo, tuvo un anillo
verde en la interface más
intenso gracias a la sal del
potasio
K1 Positivo, presencia de anillo
verde en la interface con una
tonalidad verde menos
intensa

Imagen 1. Resultados de la prueba del nitropusiato de sodio

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Tabla 2. Detección de piruvato con la prueba de 2,4-dinitrofenilhidracina

Tubos Resultado
N2 Positivo, tomó un color rojizo pero
en menor intensidad
K2 Positivo, tomó una tonalidad rojiza
muy intensa

Imagen 2. Resultados de la prueba de 2,4-dinitrofenilhidracina

Discusión

La fermentación alcohólica es un proceso biológico de fermentación en carencia de oxigeno originado por la actividad
de algunos microorganismos que procesan los hidratos de carbono en este caso la glucosa, para obtener como producto
final el alcohol en forma de etanol, dióxido de carbono (CO2) en forma de gas y moléculas de ATP, esta fermentación
tiene como finalidad proporcionar energía anaeróbica a los microorganismos unicelulares (levaduras) en ausencia de
oxígeno.
Para la detección de piruvato se partió desde poner la glucosa y suspensión de levadura en dos medios ácido y alcalino
gracias a KH2PO4 (fosfato monopotásico) y Na2HPO4 (fosfato sódico), para poder llegar a fermentación alcohólica
primero se debe pasar por la glucolisis que nos da como resultado dos moléculas de piruvato, 2 moléculas de ATP y 2
moléculas de NADH, en la glucolisis se produce una cantidad de piruvato que puede tomar dos rutas metabólicas
anaerobias, en este caso se presentó un proceso de fermentación en el cual el reactivo inicial es la glucosa y se obtienen
como productos una cierta cantidad de piruvato y otra de etanol que se deriva de la reacción del ácido pirúvico
reducido a acetaldehído que es el que finalmente produce el alcohol, el contenido de las soluciones de los dos tubos de
ensayo se repartieron en 4 tubos de ensayo (N1, N2, K1, K2) para determinar si realmente se produjo piruvato en estas
soluciones se realizó 2 pruebas, la del nitropusiato de sodio y la 2,4-dihidrofenilhidracina; para la prueba del
nitroprusiato de sodio se utilizó los tubos N1 Y K1 tomando para las pruebas un tubo en medio alcalino y el otro en
medio ácido, se observó la presencia de un anillo color verde en la interface en ambos tubos de ensayo lo que da
positivo a la presencia de piruvato pero dando una coloración verde más intensa en el tubo N1 ya que la levadura
fermenta cuando llega a piruvato e inhibe la enzima con el ácido. Para la prueba de la 2,4-dihidrofenilhidracina se
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utilizaron los tubos N2 y K2 esta prueba nos indica que hay presencia de piruvato cuando da una coloración rojiza, en
esta prueba ambos tubos dieron positivo tomando la tonalidad rojiza, pero en el tubo K2 fue más notable esta
coloración debido a que es una reacción de adición-eliminación una adición nucleofílica del grupo –NH2 al grupo
carbonilo C=O seguida de una remoción de una molécula de H2O y la pirúvico-descarboxilasa no es activa en
soluciones ligeramente alcalinas, los intermediarios metabólicos como el piruvato están presente en bajas
concentraciones por ende para demostrar su existencia como intermediario en las rutas metabólicas es necesario que se
impida que sea transformado en otros compuestos.

La detección del acetaldehído no pudo ser realizada ya que no había el reactivo de schiff en la práctica de laboratorio,
pero básicamente para que la prueba diera positivo para la presencia de acetaldehído cambiaría su tonalidad a verde y
tomaría el olor característico del acetaldehído.

CONCLUSIONES

- El piruvato es un intermediario en las rutas metabólicas

- Mientras mayor sean las condiciones anaerobias mejor será el proceso de fermentación
- La fermentación alcohólica es un proceso necesario para la obtención de etanol
- El piruvato tiene grupos carbonilos y estos son los que reaccionan ante las pruebas que realizamos para su
detección

BIBLIOGRAFIA

-2003. Raisman J. El rol del NAD recuperado de:

http://www.biblioteca.org.ar/libros/hipertextos%20de%20biologia/met4.htm

-2006. H.J Vázquez y O. Dacosta. Fermentación alcohólica recuperado de:

http://www.ejournal.unam.mx/ict/vol0804/ICT000800404.pdf

- 1995. P. Santamaria etal. Influencia de la temperatura en la fermentación alcohólica, recuperado de:

file:///C:/Users/Mari-ana%20Corredor%20P/Downloads/Dialnet-
InfluenciaDeLaTemperaturaEnLaFermentacionAlcoholic-110328.pdf
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