Вы находитесь на странице: 1из 92

Министерство образования и науки Российской Федерации

Федеральное агентство по образованию


Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования
«Северо-Кавказский Государственный Технический Университет»

Лекции по курсу: «Биохимия»

Ставрополь, 2006.
Оглавление.

ОГЛАВЛЕНИЕ.............................................................................................................................2

ВВЕДЕНИЕ..................................................................................................................................6

АМИНОКИСЛОТЫ......................................................................................................................7
Структура белков......................................................................................................................................................................8

Конформация белков................................................................................................................................................................8

ТЕМА: ПЕПТИДЫ, БЕЛКИ: ИХ СТРОЕНИЕ, СВОЙСТВА, ЗНАЧЕНИЕ В ОРГАНИЗМЕ,


МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БЕЛКОВ..................10
Пептиды....................................................................................................................................................................................10

Белки..........................................................................................................................................................................................11

Роль белков в организме человека.......................................................................................................................................11

Методы разделения белков и пептидов:.............................................................................................................................12

Признаки коллоидного состояния.......................................................................................................................................12

Сходство растворов ВМС и коллоидных растворов.........................................................................................................12

Отличие растворов ВМС от коллоидных растворов........................................................................................................13

Сходство растворов ВМС с ионно-молекулярными растворами..................................................................................13

Специфические свойства растворов ВМС.........................................................................................................................13

Анализ мембранного равновесия Доннана........................................................................................................................14

ФЕРМЕНТЫ..............................................................................................................................14
Общие черты ферментов и неорганических катализаторов...........................................................................................15

Отличие ферментов от неорганических катализаторов..................................................................................................15

Строение ферментов...............................................................................................................................................................16

Активный центр ферментов.................................................................................................................................................16

Механизм действия ферментов.............................................................................................................................................17

Специфичность........................................................................................................................................................................18

Кинетика ферментативных реакций...................................................................................................................................18

Ингибиторы..............................................................................................................................................................................20

Определение активности фермента.....................................................................................................................................21

Классификация ферментов...................................................................................................................................................22
ТЕМА: ФЕРМЕНТЫ, КАК БИОЛОГИЧЕСКИЕ КАТАЛИЗАТОРЫ........................................26
Классификация ферментов...................................................................................................................................................26

Свойства ферментов...............................................................................................................................................................28

Специфичность действия ферментов..................................................................................................................................28

Активирование и ингибирование ферментов....................................................................................................................29

Регуляция путём ковалентной модификации....................................................................................................................29

Путь нековалентной модификации.....................................................................................................................................31

Типы ингибирования..............................................................................................................................................................32
Конкурентное ингибирование.............................................................................................................................................32
Неконкурентное ингибирование.........................................................................................................................................32
Регуляция путем изменения биосинтеза ферментов.........................................................................................................33
Компартментализация (отделение, отсек) в клетке...........................................................................................................33

Изоферменты............................................................................................................................................................................33

Анализ уравнения Михаэлиса—Ментен:...........................................................................................................................35

Количественная характеристика активности фермента.................................................................................................37

Количественная характеристика активности ферментов в биологических жидкостях...........................................37

Энзимодиагностика.................................................................................................................................................................37

Наследственные нарушения (энзимопатии)......................................................................................................................38

Энзимотерапия.........................................................................................................................................................................38

ЛИПИДЫ...................................................................................................................................39
Классификация липидов. Характеристика фосфолипидов и восков............................................................................39

Воска..........................................................................................................................................................................................40

Фосфолипиды...........................................................................................................................................................................40

Фосфатидилхолины (лецитины)..........................................................................................................................................40

Фосфатидилэтаноламины......................................................................................................................................................41

Обмен липидов.........................................................................................................................................................................41

Ресинтез жирных кислот в стенке кишечника..................................................................................................................45

Транспорт липидов.................................................................................................................................................................45

ЦИКЛ ТРИКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ (ЦИКЛ КРЕБСА)..........................................................47


Первая реакция.......................................................................................................................................................................47

Вторая реакция........................................................................................................................................................................47

Третья реакция........................................................................................................................................................................47
Четвертая реакция..................................................................................................................................................................48

Пятая реакция.........................................................................................................................................................................48

Шестая реакция.......................................................................................................................................................................48

Седьмая реакция.....................................................................................................................................................................49

ТЕМА УГЛЕВОДЫ.................................................................................................................49
КЛАССИФИКАЦИЯ УГЛЕВОДОВ....................................................................................................................................50

МОНОСАХАРИДЫ................................................................................................................................................................50

Стериоизомерия моносахаридов..........................................................................................................................................50

Циклические (полуацетальные) формы моносахаридов................................................................................................51

Основные реакции моносахаридов......................................................................................................................................53

ОЛИГОСАХАРИДЫ...............................................................................................................................................................54

ПОЛИСАХАРИДЫ.................................................................................................................................................................55

ГЕТЕРОПОЛИСАХАРИДЫ.................................................................................................................................................57

Промежуточный обмен углеводов в организме.................................................................................................................58

ВИТАМИНЫ..............................................................................................................................60
Классификация витаминов...................................................................................................................................................62

Витамин.....................................................................................................................................................................................62

Активная форма......................................................................................................................................................................62

Источники.................................................................................................................................................................................63

Жирорастворимые витамины..............................................................................................................................................65
Витамины группы А (ретинол, антиксерофтальмический)..............................................................................................65
Витамины группы К (филлохиноны, менахиноны,антигеморрагический)....................................................................67
Витамины группы Е (токоферол, антистерильный. Витамин размножения).................................................................68

Водорастворимые витамины................................................................................................................................................68
Витамин В1 (тиамин, антиневрический)...........................................................................................................................68
Витамин В2 (рибофлавин, витамин роста)........................................................................................................................69
Витамин В6 (пиридоксин, антидермический)...................................................................................................................70
Витамин В12 (кобаламин,антианемический)....................................................................................................................72
Витамин С (аскорбиновая кислота, антискорбутный витамин).......................................................................................72
Витамин Р (рутин, цитрин, витамин проницаемости)......................................................................................................73
Витамин РР (никотиновая кислота, никотинамид, ниацин, антипеллагрический)........................................................74

ХИМИЯ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ.........................................................................................74


Общая характеристика нуклеиновых кислот...................................................................................................................74

Химическое строение РНК и ДНК.......................................................................................................................................74

Структура нуклеиновых кислот...........................................................................................................................................78


Вторичная структура ДНК характеризуется правилом Э. Чаргаффа (закономерность количественного
содержания азотистых оснований):.....................................................................................................................................79

ТЕМА: ОБМЕН НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ И НУКЛЕОТИДОВ В ОРГАНИЗМЕ


ЧЕЛОВЕКА................................................................................................................................84
Этапы репликации:................................................................................................................................................................85

Транскрипция..........................................................................................................................................................................86

Этапы транскрипции:............................................................................................................................................................86

Биосинтез белка.......................................................................................................................................................................86

Регуляция транскрипции. Теория Оперона.......................................................................................................................87

ТЕМА: ЭНЕРГЕТИЧЕСКИЙ ОБМЕН. ЦИКЛ ЛИМОННОЙ КИСЛОТЫ - ЦИКЛ


ТРИКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ (ЦТК), ЦИКЛ КРЕБСА - КОНЕЧНЫЙ ОБЩИЙ ПУТЬ
ОКИСЛЕНИЯ БЕЛКОВ, ЛИПИДОВ, УГЛЕВОДОВ.ЦТК - АМФИБОЛИЧЕСКИЙ ЦИКЛ.. . .87
Цикл лимонной кислоты — ЦТК — цикл Кребса............................................................................................................88

Энергетическая роль ЦТК.....................................................................................................................................................88

Регуляция цикла Кребса........................................................................................................................................................88

БИОЭНЕРГЕТИКА. БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОКИСЛЕНИЕ.........................................................89


Роль кислорода в метаболизме.............................................................................................................................................89

Токсичность кислорода..........................................................................................................................................................89

Макроэргические молекулы.................................................................................................................................................90

Нуклеозидтрифосфаты.............................................................................................................................................................90
Введение.
Электронная версия лекций свободно распространяется среди студентов и
аспирантов Сев-КавГТУ, и используется в образовательном процессе. Может быть
полезна в научных работах, т.к. достаточно полно охватывает предмет биохимии.
Текст проверен на орфографию в редакторе Word.
Внимание! Следует соблюдать осторожность при изменении шрифтов,
отступов, стилей и других параметров, способных вызвать смещение текста. В нем
находится множество схем, таблиц и рисунков которые при сдвиге распадаются на
составляющие разного рода (например, графика – текс, таблица – текст и др.).
Аминокислоты.
Классификация аминокислот разработана на основе химического строения
радикалов. Различают циклические и алифатические (ациклические)
аминокислоты. По числу аминных и карбоксильных групп аминокислоты
разделяют на:
1 – моноаминомонокарбоновые (глицин, аланин, лейцин и др.);
2 – диаминомонокарбоновые (лизин, аргинин);
3 - моноаминодикарбоновые (аспарагиновая и глутаминовая кислоты);
4- диаминодикарбоновые (цистин).

По характеру заряженности боковых радикалов, их полярности аминокислоты


классифицируют на:
1 – неполярные, гидрофобные (глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин,
пролин, фенилаланин, триптофан, тирозин);
2 – полярные, незаряженные (серин, треонин, метионин, аспарагин, глутамин,
цистеин);
3 - полярные, отрицательно заряженные (аспарагиновая и глутаминовая
кислоты,);
4 – полярные, положительно заряженные (лизин, аргинин, гистидин).

В α-аминокислотах можно выделить:


Анионные группы: -СОО- ;
Катионные группы : -NH3+; =NH+ ; -NH-C=NH+2;
NH2
Полярные незаряженные группы: -ОН; -СОNH2; -SH;
Неполярные группы: -СН3, алифатические цепи, ароматические циклы
(фенилаланин, тирозин и триптофан содержат ароматические циклы).
Пролин в отличие от других 19 аминокислот не аминокислота, а иминокислота,
радикал в пролине связан как с α-углеродным атомом, так и с аминогруппой:
α
NH – CH – COOH

H2C CH2

CH2

Аминокислоты различают по их растворимости в воде. Это связано со


способностью радикалов взаимодействовать с водой (гидрироваться).
К гидрофильным относят радикалы, содержащие анионные, катионные и
полярные незаряженные функциональные группы.
К гидрофобным относят радикалы, содержащие метильные группы,
алифатические цепи или циклы.
Пептидные связи соединяют аминокислоты в пептиды. α-карбоксильная
группа одной аминокислоты реагирует с α-аминогруппой другой аминокислоты с
образованием пептидной связи.

NH2-CH-COOH + NH2-CH-COOH NH2-CH-CO- NH-CH-COOH


R1 R2 R1 R2
N-конец пептидная связь С-конец

Полипептидные цепи белков представляют собой полипептиды, т.н. линейные


полимеры α-аминокислот, соединенных пептидной связью. Мономеры
аминокислот, входящих в состав полипептидов, называются аминокислотными
остатками. Цепь повторяющихся групп –NH-CH-CO- называется пептидным
остовом. Аминокислотный остаток, имеющий свободную α-аминогруппу,
называется N-концевым, а имеющий свободную α-карбоксильную группу – С-
концевым.
Пептиды пишутся и читаются с N-конца!
Пептидные связи очень прочные, и для их химического неферментативного
гидролиза требуются жесткие условия: высокие температуры и давление, кислая
среда и длительное время.
В живой клетке, где нет таких условий, пептидные связи могут разрываться с
помощью протеолитических ферментов, называемых протеазами или
пептидгидролазами.
Наличие пептидных связей в белке можно определить с помощью биуретовой
реакции.
Свободное вращение в пептидном остове возможно между атомом азота
пептидной группы и соседним α-углеродным атомом, а также между α-углеродным
атомом и углеродом карбонильной группы. Благодаря этому линейная структура
может приобретать более сложную пространственную конформацию.
Структура белков
Первичная структура. Представляет собой линейную цепь аминокислот,
расположенных в определенной последовательности и соединенных между собой
пептидными связями. Первичная структура каждого индивидуального белка
закодирована в молекуле ДНК (участке, называемом геном) и реализуется в ходе
транскрипции (переписывании информации на м-РНК) и трансляции (синтез
пептидной цепи).
Конформация белков
Линейные полипептидные цепи индивидуальных белков за счет
взаимодействия функциональных групп аминокислот приобретают определенную
пространственную трехмерную структуру, или конформацию. В глобулярных
белках различают два основных типа конформации пептидных цепей: вторичную и
третичную структуру.
Вторичная структура белка – это пространственная структура, образующаяся в
результате взаимодействий между функциональными группами аминокислот,
входящих в состав белка. При этом пептидная цепь может приобретать регулярные
структуры двух типов: - спираль и - структуры. Спирализация полипептидной
цепи обеспечивается водородными связями, возникающими между амино-
карбоксильными группами, пептидной связью, расположенной на
противоположных витках спирали, а также гидроксильными группами тирозина и
серина.
Наиболее распространенной формой вторичной структуры является - спираль
(полипептидная цепь как бы накручена на воображаемый цилиндр по часовой
стрелке, что обусловлено L-аминокислотным составом природных белков).
Благодаря исследованиям Л. Полинга в структуре - спиралей открыт ряд
закономерностей (за это открытие Л. Полинг удостоен Нобелевской премии). На
каждый виток (шаг) спирали приходится 3,6 аминокислотных остатка, шаг спирали
0,54 нм на виток, а на один аминокислотный остаток приходится 0,15 нм. Угол
подъема спирали 260 , через 5 витков спирали (18 аминокислотных остатка или
2,7нм) структурная конфигурация полипептидной цепи повторяется. Не все
глобулярные белки спирализованы на всем протяжении полипептидной цепи. В
молекуле белка - спиральные участки чередуются с линейными. В частности, если
- и - цепи гемоглобина спирализованы, например, на 75%, то лизоцима – на 42%,
а пепсина – всего на 30%.

Другой тип конфигурации полипептидных цепей, обнаруженный в белках


волос, шелка, мышц и в других фибриллярных белках, получил название -
структуры. В этом случае две или более линейные полипептидные цепи,
расположенные параллельно или, чаще, антипараллельно, прочно связываются
межцепочечными водородными связями между NH- и СО-группами соседних
цепей, образуя структуру типа складчатого слоя (плоская форма и похожа на меха
гармошки).
В природе существуют белки, строение которых, однако, не соответствует ни
- , ни - структуре («колагеновая спираль»).Типичным примером таких белков
является коллаген – фибриллярный белок, составляющий основу массы
соединительной ткани в организме человека и животных.
Третичная структура белка – это пространственная ориентация полипептидной
спирали или способ укладки полипептидной цепи в определенный объем. В
стабилизации пространственной структуры белков, помимо ковалентных связей
(пептидные и дисульфидные), основную роль играют так называемые
нековалентные связи (водородные, электростатического взаимодействия
заряженных групп – т.н. солевой мостик, межмолекулярных ван-дер-ваальсовых
сил, гидрофобные взаимодействия).
Третичная структура белка после завершения его синтеза в рибосомах
формируется автоматически, самопроизвольно и полностью предопределяется
первичной структурой. Основной движущей силой в возникновении трехмерной
структуры является взаимодействие радикалов аминокислот с молекулами воды.
При этом неполярные гидрофобные радикалы аминокислот как бы погружаются
внутрь белковой молекулы, образуя там «сухие зоны», в то время как полярные
радикалы оказываются ориентированными в сторону воды.
Т.о. третичная структура определяет форму белковой молекулы:
- глобулярные белки (форма клубка с неровной поверхностью);
- фибриллярные белки (форма вытянутых нитей, они выполняют опорные
функции).
Свои биологические функции белки проявляют на уровне третичной и
четвертичной структуры.
Четвертичная структура белка – это способ укладки в пространстве
нескольких полипептидных цепей, имеющих первичную, вторичную и третичную
структуры. Многие функциональные белки состоят из нескольких полипептидных
цепей, соединенных нековалентными связями. Каждая отдельно взятая
полипептидная цепь, получившая название протомера, мономера или субъединицы,
чаще всего не обладает биологической активностью. Эту способность белок
приобретает при определенном способе пространственного объединения входящих
в его состав протомеров, т.е. возникает новое качество, не свойственное
мономерному белку. Образовавшуюся молекулу принято называть олигомером (или
мультимером). Олигомерные белки чаще построены из четного числа протомеров
(от 2 до 4, реже от 6 до 8) с одинаковыми или разными молекулярными массами.

Тема: ПЕПТИДЫ, БЕЛКИ: ИХ СТРОЕНИЕ, СВОЙСТВА, ЗНАЧЕНИЕ В


ОРГАНИЗМЕ, МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
БЕЛКОВ.

Пептиды
Пептиды — органические молекулы, в состав которых входит несколько остатков
аминокислот, связанных пептидной связью. В зависимости от количества остатков аминокислот и
молекулярной массы различают:
1. Низкомолекулярные пептиды, содержащие в своем составе от двух до десяти остатков
аминокислот. Например, ди-, три-, тетра-, пента-пептиды и т. д.
2. Пептиды со средней молекулярной массой — от 500 до 5000 Д, так называемые «средние
молекулы».
3. Высокомолекулярные пептиды с молекулярной массой от 5000 до 16000 Д.
Биологическое значение пептидов. Пептиды обладают значительной биологической
активностью, являясь регуляторами ряда процессов жизнедеятельности. В зависимости от
характера действия и происхождения пептиды делят на несколько групп:
1. Пептиды-гормоны: например, вазопрессин, окситоцин, глюкагон, кальцитонин, рилизинг-
факторы и др.;
2. Пептиды, участвующие в регуляции пищеварения: гастрин, секретин, панкреатический
полипептид (ПП), вазоактивный интестинальный полипептид (ВИП) и др.;
3. Пептиды крови: глутатион, ангиотензин, брадикинин, каллидин и др.;
4. Нейропептиды: пептиды памяти, пептиды сна, эндорфины, энкефалины и др.;
5. Пептиды, участвующие в сокращении мышц: анзерин, карнозин;
6. Пептиды «средние молекулы» — внутренние эндотоксины , образующиеся в организме в
результате различных патологических процессов, обусловливающих тяжесть протекания
заболевания.

Белки
Белки — полимеры 22 природных аминокислот со специфической структурой.
Первичная структура — последовательность аминокислотных остатков в полипептидной
цепи, образуется за счет пептидных связей, возникающих за счет альфа-карбоксильной группы
одной аминокислоты и альфа-аминогруппы последующей аминокислоты.
Вторичная структура — способ укладки полипептидной цепи в альфа-спираль или  -
структуру за счет менее прочных водородных связей (Н+ …О-).
Третичная структура — пространственная укладка  - спирали или
полипептидной цепи в определенную конформацию за счет четырех видов связей:
1. водородных: Н+ …О-,
O
2. ионных (солеобразующих): —NH3 + . . . C ,
O
3. дисульфидных: —S—S—;
4. гидрофобных (сил Ван-дер-Ваальса).
Третичная структура — субъединица.
Четвертичная структура— «комплекс субъединиц способных к диссоциации,
(Джон Бернал), или объединение в определенном порядке двух и большего
количества субъединиц в молекулу олигомерного белка.
Например, молекула гемоглобина состоит из четырех субъединиц (по 17000 Д каждая).

Роль белков в организме человека


1. Ферментативная — в клетке участвуют в биохимических реакциях 2000 различных
ферментов, и все они по химической природе — белки (простые или сложные).
2. Гормональная — в организме человека 50% всех гормонов имеют белковую природу.
3. Рецепторная — избирательное связывание различных регуляторов — гормонов,
биогенных аминов, простагландинов, медиаторов, циклических мононуклеотидов,
протекает с помощью белков-рецепторов.
4. Структурная (пластическая) — мембраны всех клеток и субклеточных единиц
представляют собой бислой: белки и фосфолипиды, т. е. белки играют роль в
формировании всех клеточных структур.
5. Иммунологическая — гуморальный иммунитет организма человека связан с наличием -
глобулинов (антител).
6. Гомеостатическая — свертывание крови связано с наличием в крови белков свертывания
крови (факторов).
7. Противосвертывающая — антитромбиновая, антитромбопластиковая и
фибринолитическая системы связаны с наличием в крови соответствующих белков.
8. Геннорегуляторная — белки-гистоны, кислые белки играют роль в регуляции процесса
трансляции.
9. Транспортная — перенос О2, ВЖК, липидов, стероидов, витаминов, лекарственных
веществ осуществляют различные фракции белков крови.
10. Сократительная — в работе мышц участвуют белки: актин, миозин, тропонин и
тропомиозин.
11. Обезвреживающая — при отравлениях солями тяжелых металлов (свинец, медь, цинк и
др.) и алкалоидами противоядием являются белки (особенно молочных продуктов).
12. Опорная (механическая) — прочность соединительной, хрящевой и костной ткани за счет
белков — коллагена, эластина, фибронектина.
13. Создание биопотенциалов мембран и клеток и внутренней мембраны митохондрий.
14. Энергетическая — 1 г. белка, окисляясь до конечных продуктов — мочевины, углекислого
газа и воды, дает 4,1 ккал энергий.

Методы разделения белков и пептидов:


1. Электрофоретические — основаны на разделении белков в постоянном электрическом
поле в зависимости от величины заряда белковой молекулы.
2. Ультрацентрифугирование — основано на различной скорости седиментации отдельных
белков в зависимости от их молекулярной массы.
3. Хроматографические: а) ионообменная хроматография — основана на различной
способности отдельных белков к обмену с ионами ионообменных смол; б) на
молекулярных ситах (гель-фильтрация) — на сефадексах — белки разделяются в
зависимости от величины молекулы; в) аффинная хроматография — белки делятся на
индивидуальные в зависимости от средства к аффинату (наполнителю колонок).
4. Высаливание — чаще с помощью сернокислого аммония — основано на снятии заряда и
водной оболочки различными концентрациями солей. Это старый метод разделения
белков.
5. Аминокислотный состав белков и пептидов после гидролиза определяют в
аминокислотном анализаторе.

Дисперсные системы в зависимости от раздробленности частиц могут быть:


1) грубодисперсными взвесями (частицы больше 100 нм),
2) коллоидными растворами (частицы от 1 до 100 нм),
3) ионно-молекулярными растворами (частицы меньше 1 нм).
Растворы ВМС в организме человека по своим свойствам приближаются к коллоидным
растворам — их называют «молекулярные коллоиды».

Признаки коллоидного состояния:


1. Наличие двух фаз — дисперсной фазы и дисперсионной среды;
2. Гетерогенность системы — наличие поверхности раздела между дисперсной фазой и
дисперсионной средой;
3. Определенная степень раздробленности частиц (от 1 до 100 нм);
4. Определенная степень устойчивости, обусловленная двумя факторами — зарядом и
водной оболочкой.
Особенность растворов ВМС
(растворов белков)

двойственность

по существу: по свойствам:
истинные молекулярные растворы, так как коллоидные растворы, так как обладают
частица ВМС — отдельная молекула свойствами коллоидных растворов

Сходство растворов ВМС и коллоидных растворов:


1. Величина частиц (от 1 до 100 нм);
2. Наличие двух факторов устойчивости: заряда и водной оболочки;
3. Явление опалесценции;
4. Способность к коагуляции;
5. Способность к диализу;
6. Медленная диффузия;
7. Способность к седиментации;
8. Низкое осмотическое давление.

Отличие растворов ВМС от коллоидных растворов:


1. В растворах ВМС частицы — молекулы ВМС, а не мицеллы.
2. У частиц ВМС в растворах иной механизм возникновения заряда: диссоциация
собственных ионогенных групп, а не адсорбция из растворов потенциалоопределяюших
ионов, добавленных в избытке.
3. У частиц гидрофильных ВМС иной механизм образования водной оболочки: наряду с
зарядом частицы водная оболочка образуется за счет гидрофильных групп,
расположенных на поверхности частицы.
4. Растворы ВМС термодинамически более устойчивы (G<0).
5. Растворы ВМС образуются самопроизвольно, (не нужен «стабилизатор»).
6. Растворы ВМС обратимы.

Сходство растворов ВМС с ионно-молекулярными растворами:


1. В растворе ВМС находятся в виде молекул.
2. Термодинамически устойчивы (G<0).
3. Образуют гомогенные системы.
4. Образуются самопроизвольно, не требуют «стабилизатора».

Специфические свойства растворов ВМС:


1. Способность к набуханию.
2. Способность к желатинированию.
3. Наличие аномальной вязкости.
4. Свободное вращение отдельных звеньев полимеров с изменением конформации.

Мембранное равновесие Доннана показывает, как распределяется электролит по обе


стороны полупроницаемой мембраны клеток, если в клетке содержится ВМС (белки).

1. До начала распределения —
в клетке: вне клетки:
R — Na — (соль белка) NaCl — электролит
[R-] = С1 [Na+] = С2
[Na+] = С1 [Сl-] = С2

Ионов хлора совсем нет в клетке, поэтому они переводят в клетку из внеклеточного
пространства, а вместе с ними в клетку переходит часть ионов натрия.

2. Обозначим количество веществ, перешедших в клетку X, тогда после перераспределения


электролита:
в клетке: вне клетки:
[R-] = С1 [Na+] = С2 — X
[Na+] = С1 + Х
[Сl-] = X [Сl-] = С2 — X

Переход ионов электролита осуществляется до тех пор пока установится ионное


равновесие, т.е. произведения концентраций ионов по обе стороны мембраны должны быть
равны:
[Na+] кл.  [Сl-] кл. = [Na+] вне кл.  [Сl-] вне кл.
(C1 + Х)  Х = (С2 — X)  (С2 — X),

C 22
откуда X  — уравнение мембранного равновесия Доннана.
C1  2C2

Анализ мембранного равновесия Доннана


C2
1. Если в клетке нет белка и его соли, то С1 = 0, тогда X  , т. е. при отсутствии в клетке
2
ВМС электролит распределяется поровну по обе стороны мембраны.
2. Если в клетке концентрация белка (и его соли) равна концентрации электролита вне
C2
клетки, т. е. С1 = С2, тогда X  , т. е. в клетку из внеклеточной жидкости перейдет 1/3
3
часть электролита.
3. Если в клетке большая концентрация белка (и его соли), т. е. С1 >> С2, то все равно
величина X — положительная, так как С22 и в клетку перейдет небольшое количество
электролита из внеклеточной жидкости.
4. Если концентрация белка (и его соли) в клетке невелика, а концентрация электролита вне
клетки большая, т. е. если С2>С1, то С22 — величина очень большая и X — величина
большая. В клетку в этом случае перейдет большая часть электролита.

Вывод. В клетке при наличии ВМС концентрация электролита всегда больше, чем во
внеклеточной жидкости, что обусловливает повышенное осмотическое давление в
клетке, тургор клеток и тканей.
ФЕРМЕНТЫ

Ферменты (энзимы) – биологические катализаторы, ускоряющие химические реакции


обмена веществ в организме.
Катализ – это процесс изменения скорости химической реакции под действием различных
веществ – катализаторов, участвующих в химическом процессе, но к концу реакции остающихся
химически неизменными.
Механизм действия катализаторов заключается в следующем.
Молекулы вступают между собой в реакцию, если они находятся в т.н. «активном» или
«возбужденном» состоянии, т.е. имеют определенный запас потенциальной энергии, которой
достаточно для преодоления сил отталкивания или сцепления между ними, т.е. для преодоления
«энергетического барьера».
Скорость химической реакции можно увеличить 2-мя путями:
- увеличить число активных молекул, сообщив определенное дополнительное
количество энергии, которое называют «энергия активации». Активировать молекулы
можно путем нагревания, повышения давления, облучения и т.д.;
- уменьшить высоту энергетического барьера..
Сущность катализа заключается в том, что катализаторы снижают энергетический барьер,
т.е. снижают уровень энергии активации реакции. Это справедливо как для неорганических
катализаторов, так и для ферментов.
Происходит это следующим образом.
При наличии катализатора взаимодействие молекул происходит в несколько этапов.
Энергетический барьер промежуточных реакций значительно ниже энергетического барьера
исходной реакции.

Е0
Е1
F1 F
Е2
F2

А+ В АВ Для этой некатализируемой реакции энергетический барьер F, энергия


активации Е0.
При введении катализатора:
А+К АК Энергетический барьер F1, энергия активации Е1.
F1 < F; Е1 < Е0
АК + В АВ + К Энергетический барьер F2< F, энергия активации Е2 < Е0.
Более того, F1 + F2 < F и Е1 + Е2 < Е0, т.е. с энергетической точки зрения катализируемая
реакция более выгодна, чем некатализируемая, т.к. снижается энергия активации, следовательно
химическая реакция пойдет быстрее.
Так, энергия активации разложения Н2О2 без катализатора составляет 75,6 кДж/моль, в
присутствии неорганического катализатора (коллоидной платины) – 48,14 кДж/моль и скорость ее
увеличивается в 2*104 раз.
Рассмотренные закономерности неферментативного катализа справедливы и для действия
ферментов. Однако, ферментативный катализ гораздо более интенсивен. Так, в присутствии
фермента каталазы энергия активации разложения Н2О2 снижается до 23,1 кДж, а скорость
реакции увеличивается в 2*1011 раз.

Общие черты ферментов и неорганических катализаторов:


1. Участвуют в реакции и остаются неизменными после завершения реакции (хотя в
последние годы получены данные, что некоторые ферменты после реакции
подвергаются модификации и даже распаду);
2. Действуют в малых количествах (например, 1 молекула фермента реннина в желудке
теленка створаживает 106 молекул казеина за 10 мин.);
3. Не сдвигают химическое равновесие реакции и не влияют на величину свободной
энергии.
Отличие ферментов от неорганических катализаторов
1. Ферменты имеют более высокую каталитическую активность (выше в млн.раз);
2. Каталитическая активность проявляется в очень мягких условиях (умеренные
температуры 37-40ºС, нормальное давление, близкие к нейтральным значения рН среды
6,0÷8,0). Например, гидролиз белка в присутствии неорганических кислот и щелочей
протекает при 100ºС и выше в течение нескольких десятков часов. При участии
ферментов этот процесс протекает за десятки минут при 30÷40ºС;
3. Ферменты обладают высокой специфичностью действия, т.е. каждый фермент
катализирует в основном только строго определенную химическую реакцию (например,
платина катализирует несколько десятков химических реакций);
4. Активность ферментов в клетках строго контролируется и регулируется;
5. Не вызывают каких-либо побочных реакций;
6. Различия связанные с белковой природой ферментов (термолабильность, зависимость от
рН среды, наличие активаторов и ингибиторов и др.).

Строение ферментов
До последнего времени считалось, что абсолютно все ферменты являются веществами
белковой природы. Но в 80-е годы была обнаружена каталитическая активность у некоторых
низкомолекулярных РНК. Эти ферменты назвали рибозимами. Остальные, свыше 2000 известных
в настоящее время ферментов, имеют белковую природу и характеризуются всеми свойствами
белков.
По строению ферменты делятся на:
- простые или однокомпонентные;
- сложные или двухкомпонентные (холоферменты).
Простые ферменты представляют собой простые белки и при гидролизе распадаются только
на аминокислоты. К числу простых ферментов относятся гидролитические ферменты (пепсин,
трипсин, уреаза и др.).
Сложные белки являются сложными белками и, помимо, полипептидных цепей содержат
небелковый компонент (кофактор). К сложным белкам относится большинство ферментов.
Белковая часть двухкомпонентного фермента называется апоферментом.
Кофакторы могут иметь различную прочность связи с апоферментом.
Если кофактор прочно связан с полипептидной цепью, он называется простетической
группой. Между простетической группой и апоферментом – ковалентная связь.
Если кофактор легко отделяется от апофермента и способен к самостоятельному
существованию, то такой кофактор называется коферментом.
Между апоферментом и коферментом связи слабые – водородные, электростатические и др.

Химическая природа кофакторов крайне разнообразна. Роль кофакторов в


двухкомпонентных ферментах играют:
1 – большинство витаминов (Е, К, Q, С, Н, В1, В2, В6, В12 и др.);
2- соединения нуклеотидной природы (НАД,НАДФ, АТФ, КоА, ФАД, ФМН), а также целый
ряд др. соединений;
3 – липолевая кислота;
4 – многие двухвалентные металлы (Мg2+, Mn2+,Ca2+и др.).

Активный центр ферментов.


Ферменты – высокомолекулярные вещества, молекулярный вес которых достигает
нескольких млн. Молекулы субстратов, взаимодействующих с ферментами обычно имеют
гораздо меньший размер. Поэтому естественно предположить, что с субстратом взаимодействует
не вся молекула фермента в целом, а только какая-то ее часть – так называемый “активный центр”
фермента.
Активный центр фермента – это часть его молекулы, непосредственно
взаимодействующая с субстратами участвующая в акте катализа.
Активный центр фермента формируется на уровне третичной структуры. Поэтому при
денатурации, когда третичная структура нарушается, фермент теряет свою каталитическую
активность !
Активный центр в свою очередь состоит из:
- каталитического центра, который осуществляет химическое превращение субстрата;
- субстратного центра (“якорной” или контактной площадки), которая обеспечивает
присоединение субстрата к ферменту, формирование фермент-субстратного
комплекса.
Четкую грань между каталитическим и субстратным центром провести можно не всегда – у
некоторых ферментов они совпадают или перекрываются.
Помимо активного центра, в молекуле фермента существует т.н. аллостерический центр.
Это участок молекулы фермента, в результате присоединения к которому определенного
низкомолекулярного вещества (эффектора), изменяется третичная структура фермента. Это
приводит к изменению конфигурации активного центра и, следовательно, к изменению
активности фермента. Это явление аллостерической регуляции активности фермента.
Многие ферменты являются мультимерами (или олигомерами), т.е. состоят из двух и более
субъединиц- протомеров (аналогично четвертичной структуре белка).
Связи между субъединицами, в основном, не ковалентные. Максимальную каталитическую
активность фермент проявляет именно в виде мультимера. Диссоциация на протомеры резко
снижает активность фермента.
Ферменты – мультимеры содержат обычно четкое число субъединиц (2-4), т.е. являются ди-
и тетрамерами. Хотя известны гекса- и октамеры (6-8) и чрезвычайно редко встречаются
тримеры и пентамеры (3-5).
Ферменты-мультимеры могут быть построены как из одинаковых, так и из разных
субъединиц.
Если ферменты-мультимеры образованы из субъединиц различных типов, они могут
существовать в виде нескольких изомеров. Множественные формы фермента называют
изоферментами (изоэнзимами или изозимами).
Например, фермент состоит из 4 субъединиц типов А и Б. Он может образовать 5 изомеров:
АААА, АААБ, ААББ, АБББ, ББББ. Эти изомерные ферменты являются изоферментами.
Изоферменты катализируют одну и ту же химическую реакцию, обычно воздействуют на
один и тот же субстрат, но отличаются по некоторым физико-химическим свойствам
(молекулярной массе, аминокислотному составу, электрофоретической подвижности и др.), по
локализации в органах и тканях.
Особую группу ферментов составляют т.н. мультимерные комплексы. Это системы
ферментов, катализирующих последовательные стадии превращения какого-либо субстрат. Такие
системы характеризуются прочностью связи и строгой пространственной организацией
ферментов, обеспечивающей минимальный путь прохождения субстрата и максимальную
скорость его превращения.
Примером может служить мультиферментный комплекс, осуществляющий окислительное
декарбоксилирование пировиноградной кислоты. Комплекс состоит из 3-х видов ферментов (М.в.
= 4 500 000).

Механизм действия ферментов


Механизм действия ферментов заключается в следующем. При соединении субстрат с
ферментом образуется нестойкий фермент субстратный комплекс. В нем происходит активация
молекулы субстрата за счет:
1. поляризации химических связей в молекуле субстрат и перераспределение
электронной плотности;
2. деформации связей, вовлекаемых в реакцию;
3. сближения и необходимой взаимной ориентации молекул субстрата (S).
Молекула субстрат фиксируется в активном центре фермента в напряженной конфигурации,
в деформированном состоянии, что приводит к ослаблению прочности химических связей и
снижает уровень энергетического барьера, т.е. субстрат активизируется.

В процессе ферментативной реакции различают 4 этапа:


1 – присоединение молекулы субстрат к ферменту и образование фермент-субстратного
комплекса;
2 – изменение субстрата под действием фермента, делающее его доступным для химической
реакции, т.е. активизация субстрата;
3 – химическая реакция;
4 – отделение продуктов реакции от фермента.
Это можно записать в виде схемы:
1 2 3 4
E+S ES ES* EP E+P
где: Е – фермент, S – субстрат, S* - активизированный субстрат, Р – продукт реакции.
На 1-ом этапе к субстратному центру присоединяется с помощью слабых взаимодействий та
часть молекулы субстрата, которая не подвергается химическим превращениям.
Для образования фермент-субстратного комплекса (ES) необходимо соблюдение трех
условий, которые и определяют высокую специфичность действия фермента.
Условия образования фермент-субстратного комплекса:
1 - структурное соответствие между субстратом и активным центром фермента. По
выражению Фишера они должны подходить друг к другу, «как ключ к замку». Это
подобие обеспечивается на уровне третичной структуры фермента, т.е.
пространственного расположения функциональных групп активного центра.
2 Электростатическое соответствие активного центра фермента и субстрата,
которое обусловлено взаимодействием противоположно заряженных групп.
3 Гибкость третичной структуры фермента – «индуцированное соответствие».
Согласно теории вынужденного или индуцированного соответствия каталитически
активная конфигурация молекулы фермента может возникать лишь в момент
присоединения субстрата в результате его деформирующего воздействия по
принципу «рука-перчатка».

Механизм действия однокомпонентных и двухкомпонентных ферментов аналогичен.


В образовании фермент-субстратного комплекса у сложных ферментов принимают участие
и апофермент и кофермент. При этом субстратный центр располагается обычно на апоферменте, а
кофермент принимает участие непосредственно в акте химического превращения субстрата. На
последнем этапе реакции апофермент и кофермент выделяются в неизменном виде.
На 2 и 3 этапе превращение молекулы субстрата связано с разрывом и замыканием
ковалентных связей.
После осуществления химических реакций фермент переходит в исходное состояние и
происходит отделение продуктов реакции.

Специфичность
Способность фермента катализировать определенный тип реакции называют
специфичностью.
Специфичность бывает трех видов:
1. - относительная или групповая специфичность – фермент действует на
определенный вид химической связи (например, фермент пепсин расщепляет
пептидную связь);
2. – абсолютная специфичность - фермент действует только на один строго
определенный субстрат (например, фермент уреаза расщепляет амидную связь
только в мочевине);
3. – стехиометрическая специфичность – фермент действует только на один из
стереоизомеров (например, фермент глюкозидаза сбраживает только D-глюкозу, но не
действует на L-глюкозу).
Специфичность фермента обеспечивает упорядоченность протекания реакций обмена
веществ.

Кинетика ферментативных реакций

Скорость ферментативных реакций зависит от следующих основных факторов:


1. концентрации фермента;
2. концентрации субстрата;
3. температуры;
4. рН среды;
5. присутствия активаторов;
6. присутствия ингибиторов.
Концентрация фермента
Между скоростью ферментативной реакции и концентрацией фермента имеется
прямопропорциональная связь.
υ

[E]
2. Концентрация субстрата
Для ферментативных реакций характерно явление насыщения фермента субстратом.
Заключается оно в том, что при увеличении концентрации S скорость сначала увеличивается,
достигает максимального значения при некоторой концентрации субстрата а и остается
постоянной. Происходит это потому, что при концентрации а весь фермент связан в фермент-
субстратный комплекс.
Зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата может быть
описана уравнением:

υ = υmax/(1+ Kм/[S]),
где: Км – константа Михаэлиса, которая соответствует концентрации субстрата, при которой
скорость реакции равна 1/2 υmax.
υ

υmax

1/2 υmax

Км [S]
3. Температура. Зависимость скорости ферментативной реакции от температуры имеет
следующий вид:

υ
t опт.

20 40 60 80
tº, С
В интервале температур от 0 до 45-50ºС зависимость скорости реакции подчиняется
правилу Вант-Гоффа (при увеличении температуры на каждые 10ºС скорость реакции
увеличивается в 2-4 раза). При температуре выше 50ºС фермент начинает денатурировать, и
скорость реакции снижается. При температуре выше 80ºС фермент теряет активность и при 100ºС
полностью инактивируется. При температур около 0ºС фермент обычно не разрушается, но
активность их падает до нуля.
Температура при которой фермент наиболее активен, называют оптимумом действия
фермента. Температурный оптимум действия большинства ферментов теплокровных животных –
37-40ºС, растительных ферментов – 50-60ºС.

4. рН среды

Влияние изменения рН среды на молекулу фермента заключается в ионизации кислотных и


основных групп активного центра, что сказывается на электростатическом соответствии между
ферментом и субстратом и их способностью формировать фермент-субстратный комплекс.
Значение рН при котором фермент имеет наибольшую активность называют рН оптимумом
действия фермента. Для некоторых ферментов он резко выражен, для других граница рН более
широкая. рН оптимум действия большинства ферментов лежит в области физиологических
значений ( 6,0-8,0).
υ

рНопт рН

5. Активирование ферментов
Активаторы – увеличивают скорость ферментативных реакций.
Активаторами могут быть вещества различной химической природы. Например, пепсин
активируется НС1 панкреатическая липаза – желчными кислотами, амилаза слюны – NaCl1/
Наиболее часто активаторами ферментов являются ионы двухвалентных и иногда
одновалентных металлов.
Механизм активирующего действия может быть различным:
1. способствует присоединению субстрата к активному центру фермента и образованию
ES-комплекса;
2. обеспечивают присоединение кофермента к апоферменту;
3. аллостерические активаторы – способствуют образованию более выгодной
пространственной конфигурации активного центра;
4. активация частичным протеолизом и др.

6. Ингибирование.
Ингибиторы – вещества, замедляющие химическую реакцию Ингибиторы ферментов
также имеют различную природу и различный механизм действия.
Основные виды ингибиторов:
1 – антиферменты – вещества белковой природы, образуют труднодиссоциируемые
комплексы с ферментами (например, ингибиторы протеаз в растительном сырье);
2 – неспецифические ингибиторы – группа ингибиторов, вызывающих денатурацию
белковой молекулы фермента (кислоты, щелочи, соли тяжелых металлов). К этому виду
ингибирования можно отнести также нагревание, воздействия излучения и прочие физические
факторы, вызывающие инактивацию ферментов. Это неспецифическое ингибирование.
3 – ингибиторы, способные специфически связывать ту или иную функциональную группу
в молекуле фермента, снижая ее активность;
4 – аллостерическое ингибирование.

Типы ингибирования
Различают обратимое и необратимое ингибирование.
Необратимым называют ингибирование, которое вызывает стойкие изменения фермента
(например, денатурация).
При обратимом ингибировании фермент способен восстановить свою активность.
Обратимое ингибирование делится на конкурентное и неконкурентное.
Конкурентное ингибирование вызывают вещества, имеющие структурное подобие с
субстратом. Т.о. ингибитор в результате структурного соответствия с субстратом реагирует с
активным центром фермента, образуя фермент-ингибиторный комплекс (EI). Это ингибирование
обратимое. Неактивный EI-комплекс способен к диссоциации. Субстрат и ингибитор
конкурируют за связывание активного центра фермента. При высокой концентрации субстрата он
оттесняет ингибитор и степень торможения реакции уменьшается.
На конкурентном ингибировании связано лечение бактериальных инфекций с помощью
сульфаниламидных препаратов. Они имеют структурное сходство с р-аминобензойной кислотой,
которая используется бактериями для синтеза фолевой кислоты – фактора их роста. Т.о.
торможение синтеза фолевой кислоты в присутствии сульфаниламидов обусловливает
бактериостатический эффект последних.
Неконкурентное ингибирование вызывают вещества не имеющие структурного сходства с
субстратом. Они могут присоединяться к различным частям молекулы фермента, вызывая
блокирование отдельных функциональных групп или ионов металла в молекуле фермента,
препятствуя образованию ES-комплекса.
Разновидностью неконкурентного ингибирования является аллостерическое ингибирование.
В этом случае ингибитор соединяется с аллостерическим центром фермента, изменяя структуру
его активного центра. Аллостерическое ингибирование обратимо.

Определение активности фермента


Определить количественное содержание фермента в биологических объектах очень трудно,
т.к. он присутствует в тканях в ничтожно малых концентрациях. Поэтому о количестве фермента
судят по скорости катализируемой им реакции в стандартных условиях (t=25ºС, рН оптимальная,
при полном насыщении фермента субстратом), и выражают в условных единицах.
За единицу активности фермента (Е- рус./нем. или U- англ./исп.) принимают такое
количество фермента, которое в стандартных условиях катализирует превращение 1 мкмоль
субстрата в минуту (1 мкмоль/мин). Это стандартная международная единица выражения
количества фермента и его активности введена в 1962 г. Международным биохимическим
союзом.
В международной системе единиц Си (1972 г.) предложена, вместо старой безымянной
единицы ферментативной активности (Е или U), новая единица ферментативной активности –
катал. 1 катал – это количество фермента, обеспечивающее превращение 1 моля субстрата в 1
секунду в стандартных условиях. Т.к. реакции идут гораздо с меньшей скоростью, то активность
выражают в микро-, нано- и пикокаталах. 1Е = 16,67 нкат.
Для характеристики активности ферментов на практике часто используют следующие
понятия:
1. Удельная активность – это число единиц ферментативной активности в 1 мг
фермента, т.е. число мкмолей субстрата, превращаемое в 1 мин 1 мг фермента. Уд.
активность выражается также числом каталов на 1 кг фермента (кат/кг);
2. Молярная активность – выражается в каталах на 1 моль фермента;
3. Молекулярная активность – это число молекул субстрата, превращенное в 1 мин 1
молекулой фермента. Например, молекулярная активность каталазы = 5 мин;
4. Концентрация фермента – выражается в единицах ферментативной активности Е
на 1 мл раствора.

Классификация ферментов
Современная классификация ферментов разработана в 1961 г. Комиссией по ферментам
Международного биохимического союза. В основу классификации положен тип катализируемой
реакции, которая является специфичным для каждого фермента.
Согласно этой классификации все ферменты делят на 6 главных классов:
1. Оксидоредуктазы – катализируют окислительно-восстановительные реакции;
2. Трансферазы – катализируют реакции межмолекулярного переноса групп атомов и
радикалов;
3. гидролазы– катализируют реакции расщепления при участии воды;
4. лиазы – катализируют реакции внутримолекулярного негидролитического
расщепления, с образованием двойной связи или присоединения по двойной связи;
5. изомеразы – катализируют реакции изомеризации;
6. лигазы (синтетазы) – катализируют реакции синтеза с затратой энергии.

1. Оксидоредуктазы – делятся на подклассы в зависимости от типа реакции окисления:


а). Дегидрогеназы – отнимают от субстрата 2 атома водорода в виде двух протонов и двух
электронов. Делятся на аэробные и анаэробные дегидрогеназы.
- аэробные дегидрогеназы (оксидазы) передают отнятый водород на кислород с
образованием воды или перекиси водорода:
H
S + 1/2O2 S + H2O
H

CH2OH CH2OH
O ОH O2 H2O2 H O
OH H Глюкозо O
OH H
OH H OH
оксидаза
H OH H OH
Глюкоза глюколактон
- анаэробные дегидрогеназы (редуктазы) катализируют перенос атомарного водорода
на промежуточный субстрат. В общем виде:
H H
S + S1 S + S1
H H
Все оксидоредуктазы – сложные ферменты. Непосредственными переносчиками водорода
от субстрата являются коферменты дегидрогеназ. Большинство дегидрогеназ в качестве
коферментов содержат НАД, НАДФ.
НАД НАДН2
СН3 – СН - СООН СН3 – СН - СООН
Лактатде-
ОН гидрогеназа
О
Молочная кислота ПВК (пировиноградная кислота)
в). оксигеназы – катализируют реакции, в ходе которых кислород включается в состав
окисляемого субстрата.
Делятся на моно- и диоксигеназы:
- монооксигеназы (гидроксилазы) – включают в состав субстрата один атом молекулы
кислорода, а второй восстанавливается до Н 2О. Донором Н2 обычно является
НАДФН2.

НАДФН2 НАДФ
S-H + O2 S –OH + H2O
- диоксигеназы – присоединяют к субстрату оба атома O2

S + O2 SO2
г). пероксидаза и каталаза – гемсодержащие ферменты. Катализирующие реакции с
участием Н2O2.
Простетическая группа имеет одно и тоже строение, содержит трехвалентное железо.
Пероксидаза окисляет органические соединения в организме с помощью O2 или
разлагает ее с выделением активного кислорода:
H
S + Н2O2 S + 2 H2O
H
Н2O2 H2O + O
Каталаза разлагает Н2O2 на H2O и молекулярный кислород:
2 Н2O2 2 H2O + O2
д). цитохромы – система ферментов, катализирующих перенос электронов на
молекулярный кислород:
O2 + 4e 2О2-
Цитохромы являются гемопротеинами и завершают все окислительные процессы в клетках.

2. Трансферазы
Делятся на подклассы в зависимости от характера переносимых группировок:
а). метилтрансферазы –переносят метильную группу:

R-CH3 + R1-H R-H + R1- CH3


б). аминотрансферазы (трансаминазы) – переносят аминогруппу в реакциях
переаминирования с кетокислотами:
R1 R2 R2
СН-NH2 + C=O R1 - CO-COOH + CH-NH2
COOH COOH COOH
в). фосфотрансферазы – переносят остаток фосфорной кислоты:
OH OH
R – P=O + R1 -H R- H + R1 -P=O
OH OH
Если донором фосфорного остатка является АТФ, то фосфотрансферазы еще называют
киназами!!!
CH2OH CH2O-РО3Н2
O
O
ОН ОН ОН ОН
Н ОН Н ОН
глюкоза глюкозо-6-фосфат
г). гликозилтрансферазы – переносят остаток моносахарида - гликозил;
д). ацилтрансферазы – переносят кислотный остаток R-C=O и др.
3. Гидролазы
Делятся на подклассы в зависимости от характера субстрата. Основными из них являются:
а). эстеразы - ускоряют гидролиз сложных эфиров спиртов с органическими и
неорганическими кислотами.
Важнейшие подподклассы эстераз:
- гидролазы эфиров карбоновых кислот (представитель – липаза).
Липаза ускоряет гидролиз внешних сложноэфирных связей в молекуле триглицеридов

СН2-О-СО-R СН2-ОH
CH –O-CO-R + 2H2O CH – O-CO – R + 2R-COOH
СН2-О-СО-R СН2-ОH
- фосфатазы – гидролизуют фосфорные эфиры. Например, глюкозо-6-фосфатаза:
CH2O- РО3Н2 CH2OH
O O
+ 2H2O + Н3РО4
ОН ОН ОН ОН
ОН ОН
Глюкозо-6-фосфат глюкоза
б). гликозидазы – расщепляют гликозидные связи в молекулах углеводов. Представители:
сахараза, мальтаза,амилаза и др.
CH2OH CH2OH CH2OH
O O O
Н2О 2
O
ОН ОН ОН ОН
ОН ОН ОН
Мальтоза глюкоза
в). пептидгидролаза – ускоряют гидролиз пептидных связей в белках и пептидах.
Пептидгидролазы делятся на подподклассы:
1. Протеиназы или пептидил-пептидгидролазы или эндопептидазы. Они расщепляют
пептидные связи внутри белковой молекулы, разлагая ее до пептидов. К ним
относятся пепсин, трипсин, химитрипсин и др. ферменты. Их важная особенность –
селективный характер действия. Они гидролизуют пептидные связи, образованные
только определенными аминокислотами.
2. Пептидазы или экзопептидазы, отщепляющие концевые аминокислоты. К ним
относятся:
- аминопептидазы (отщепляют N-концевые аминокислоты);
- карбоксипептидазы (отцепляют С - концевые аминокислоты).
г). амидазы – гидролизуют амиды кислот. Представители: уреаза, аспарагиназа и др.
NH2-CO - NH2 + H2 O 2 NH3 + CO2
Мочевина уреаза
4. Лиазы
Систематические названия ферментов этого класса образуют из названия субстрата,затем
указывают отщепляемую группу и затем добавляют слово лиаза. Делятся на подклассы в
зависимости от действия на связи:
а). С – С – лигазы. К ним относятся ферменты декарбоксилазы.
Например:

CН3
СО CН3 – С=О + CO2
СООН пируват- Н
ПВК декарбоксилаза

б). С-О- лигазы (гидролиазы). К ним относятся гидратазы


+ Н2О
СООН-СН=СН-СООН ОН-СН-СООН
фумаровая к-та - Н2О СН2 – СООН (яблочная к-та)
фумаратгидратаза
в). С-N-лиазы и др. Например, аспартат-аммиак-лиаза, катализирующая расщепление
аспартата до фумарата и аммиака.

5. Изомеразы
Систематическое название ферментов этого класса образуют по схеме: субстрат-тит реакции
изомеризации-изомераза. При внутримолекулярном переносе групп ферменты имеют
тривиальные названия мутызы.Катализируют различные реакции изомеризации (90 ферментов).
Например превращение глюкозы-6-фосфат во фруктозу –6-фосфат.
CH2O- РО3Н2 CH2O- РО3Н2
O
O ОН

ОН ОН глюкозофосфат- ОН CH2OН
ОН изомераза
ОН
α-глюкоза-6-фосфат β-фруктоза-6-фосфат
CH2O- РО3Н2 CH2OН

O
ОН ОН фосфоглюкомутаза
ОН O- РО3Н2
ОН ОН
Глюкоза-6-фосфат глюкоза-1-фосфат

Мутаротаза осуществляет взаимные превращения α- и β- изомеров.

6. Лигазы (синтетазы)

Систематическое название образуется по схеме: А : В лигаза (образующая АДФ), где А и В


– соединяющиеся молекулы, в скобках указывается продукт расщепления нуклеозидтрифосфата,
который использовался в данной реакции. Делятся на подклассы, ускоряющие реакции синтеза
различных связей.

а). С-С-лигазы. Представителями лиаз, образующих С-С-связи, являются карбоксилазы,


вызывающие удлинение углеродных цепей.
Например, пируваткарбоксилаза:

CН3 СООН
СО + CO2 + АТФ СН2 + АДФ + Фн
СООН С= О
СООН
ПВК оксилоацетат

б). С-О-лигазы. Такой тип связи возникает при действии аминоацил-тРНК-синтетаз,


активирующих аминокислоты и передающих их на т-РНК:
АТФ АМФ + ФФн
R-CH-COOH + тРНК R-CH-CO~тРНК
NH2 NH2

в). С-N-лиазы.Эти ферменты участвуют, например, в синтезе различных амидов. К ним


относится аспарагинсинтетаза.
NH2
СООН С=О
CH2 NH3 АТФ АДФ + Фн CH2
СН-NH2 СН-NH2
COOH COOH
Асп. Асн.
Тема: ФЕРМЕНТЫ, КАК БИОЛОГИЧЕСКИЕ КАТАЛИЗАТОРЫ
Ферменты – биологические катализаторы белковой природы. Синтезируются клетками

организма. Некоторые клетки могут содержать до 1000 различных ферментов. За последние 50

лет из всех типов организмов удалось выделить 2500 ферментов. Из них удалось получить в
кристаллическом виде, а для 50 ферментов с помощью рентгено-структурного анализа

определена трехмерная пространственная структура.

Классификация ферментов
Международным биохимическим союзом были введены номенклатуры: систематическая и
тривиальная. Основные черты систематической номенклатуры состоят в следующем:
1. Ферменты по типу реакций, которые они катализируют, подразделяются на шесть
классов в каждом из которых имеется несколько подклассов (от 4 до 13);
2. Название ферментов состоит из 2 частей: названия субстрата + типа катализируемой
реакции + окончания "аза".
Каждый фермент имеет шифр, состоящий из 4 чисел, разделенных точками. Первое число
определяет главный класс, второе - указывает подкласс, третье - подподкласс, четвертое - номер
фермента в пределах подподкласса. Например, фермент лактатдегидрогеназа обозначается
шифром КФ.1.1.1.27 - это значит, что данный фермент отнесен к 1-му главному классу, 1-му
подклассу, 1-му подподклассу и занимает в нем порядковый номер 27.
Однако поскольку многие из этих систематических названий оказались очень длинными,
каждому ферменту было присвоено тривиальное (рабочее) название, предназначенное для
повседневного употребления. Рабочее название состоит из названия субстрата, на который
действует данный фермент, указания на тип реакции и окончания "аза".
1-й класс: оксидоредуктазы - катализируют окислительно-восстановительные реакции.
Процессы окисления могут протекать:
1) с участием кислорода-реакции катализируют ферменты:
оксидазы (кислород не внедряется в субстрат);
SH2 + 1/2O2 = S + H2O
монооксигеназы (гидроксилазы) – внедряется в субстрат один атом кислорода:
HSH + 1/2O2 = HS–OH
диоксегеназы – внедряется в субстрат два атома кислорода:
HSH+O2 = HO–S–OH
2) без участия кислорода
дегидрогеназы катализируют дегидрирование (удаление водорода) субстрата:
SH2 = S + 2H
редуктазы катализируют присоединение водорода к субстрату:
S + 2H = SH2
цитохромы осуществляют перенос электронов:

a3(Cu2+) + e- = a3(Cu1+)
2-й класс: трансферазы – катализируют реакции переноса химических групп. Название
ферментов данного класса складываются из названий: субстрата-донора + переносимой группы +
"аза". Например, если переносится метильная группа, то к названию субстрата добавляется
метилтрансфераза; аминогруппа – добавляется аминотрансфераза; ацильная группа –
ацилтрансфераза. Но если переносится остаток фосфорной кислоты от нуклеозидтрифосфатов, то
фермент называют - киназа. Например, глюкоза + АТФ = глюкозо-6-фосфат + АДФ. Катализирует
данную реакцию фермент глюкокиназа.
3-й класс: гидролазы – катализируют гидролиз сложных соединений с присоединением по кон-

цам расщепленной связи остатков воды. Название фермента часто складывается из названия

связи, которая гидролизуется и окончания "аза". Например: гидролиз пептидной связи

осуществляют пептидазы, гликозидной – гликозидазы, сложные эфиры гидролизуются под


действием эстераз. Когда гидролизу подвергаются эфиры фосфорной кислоты: монофосфаты и

дифосфаты, то ферменты называют фосфатазы и дифосфатазы соответственно. Например:

глюкозо-6-фосфат + Н2О = глюкоза + Н3РО4; фермент: глюкозо-6-фосфатфосфатаза;


фруктозо-1,6-дифосфат + Н2О = фруктозо-6-фосфат + Н3РО4; фермент: фруктозо-1,6-
дифосфатдифосфатаза.
Для некоторых ферментов сохранились тривиальные названия: гидролиз крахмала
осуществляет амилаза, липидов – липаза.
4-й класс: лиазы – катализируют все реакции негидролитического расщепления веществ и
образование новых связей без участия энергии, выделяющейся при гидролизе АТФ. Например,
если при разрыве связей выделяется углекислый газ, то фермент – декарбоксилаза (при удалении
веществ добавляется приставка "де"), удаляется вода - дегидратаза.
RСООН = RН + СО2; (декарбоксилаза);
RCHOHCHCOOH = RCH = CH – СООН + Н2О (дегидратаза).
А если происходит присоединение этих веществ, то ферменты карбоксилаза и гидратаза
соответственно.
5-й класс: изомеразы - катализируют реакции взаимопревращения изомеров. Например:
глюкозо-6-фосфат = фруктозо-6-фосфат; реакция осуществляется под действием фермента:
глюкозо-6-фосфатизомераза.
6-й класс: лигазы - катализируют соединение более простых молекул в сложные, сопряженное

с распадом АТФ. Для того, чтобы назвать фермент, необходимо к названию продукта реакции

добавить - синтетаза. Например: аминокислота+тРНК+АТФ = аминокислота-тРНК+АДФ;

фермент: аминокислота - тРНКсинтетаза.

Свойства ферментов
1. Все ферменты - белковой природы (простые и сложные).
2. Все ферменты – термолабильны, т.е. оптимум действия 0-45 градусов Цельсия.
3. Ферменты специфичны; различают абсолютную и относительную специфичность.
4. Ферменты для своего действия требуют строго определённого значения рН среды.
5. Ферменты обладают высокой каталитической активностью (например, холинэстераза за 1
сек. расщепляет 300000 молекул ацетилхолина).
Специфичность действия ферментов
По специфичности действия ферменты делят на 2 группы: обладающие абсолютной специфич-

ностью и относительной специфичностью.

Относительная (групповая) специфичность наблюдается, когда фермент катализирует реакции

одного типа с более чем одним структуроподобным субстратом.

Например, пепсин расщепляет белки животного происхождения, хотя они могут различаться

друг от друга как по химическому строению, так и по свойствам. Однако он не расщепляет

углеводы, так как местом действия пепсина является пептидная связь.


Действие этих ферментов распространяется на большое число субстратов, что позволяет

организму обойтись небольшим числом пищеварительных ферментов - иначе их потребова-

лось бы намного больше.

Абсолютная специфичность проявляется тогда, когда фермент действует лишь на одно –

единственное вещество и катализирует лишь определенное превращение данного вещества.

Например: фермент уреаза катализирует гидролиз мочевины; сахараза - катализирует

превращение только сахарозы.

Стереоспецифичность - фермент катализирует превращение только одного из возможных

стереоизомеров субстрата.

Активирование и ингибирование ферментов


Основу регуляции каталитической активности ферментов составляет их конформационная

лабильность. Различают 5 основных путей регуляции каталитической активности ферментов:

1. путь ковалентной модификации


2. путь нековалентной модификации
3. ингибирование ферментов
4. репрессия или индукция генов: изменение биосинтеза ферментов
5. компартментализация

Регуляция путём ковалентной модификации


К этому пути относятся:

1) частичный протеолиз
2) ассоциация – диссоциация
3) фосфорилирование - дефосфорилирование.
1)Частичный протеолиз.
Некоторые ферменты первоначально синтезируются в клетке в неактивной форме и, будучи

секретированными из клетки, переходят в активную форму. Неактивный предшественник

фермента называется проферментом, или зимогеном. Проферменты неактивны, так как в них

не сформирован активный центр: аминокислотные остатки, его образующие, присутствуют, но

они не расположены должным образом.


Активация профермента заключается в формировании активного центра фермента, которое

происходит в результате отщепления участка полипептидной цепи, что приводит к изменению

первичной структуры белка с одновременным изменением его трехмерной структуры:

профермент (активный центр не сформирован)  активная форма фермента + пептид.


Синтез в форме неактивных проферментов является характерным свойством пищеварительных

ферментов, а также ферментов системы свертывания крови и фибринолиза.

2)Ассоциация — диссоциация.
Некоторые ферменты-олигомеры могут изменять свою активность за счет ассоциации —

диссоциации протомеров, входящих в их состав.

Например, фермент протеинкиназа является олигомером, состоящим из 4 протомеров двух

типов: каталитического и регуляторного. В одном протомере находится активный центр, а в

другом — регуляторный, который может связываться с цАМФ. В ассоциированном виде фер-

мент неактивен, так как его активный центр закрыт регуляторной субъединицей, а в

диссоциированном активный центр открывается и может реагировать с субстратом. Когда в

клетке образуется цАМФ, то происходит его связывание с регуляторным центром, фермент

диссоциирует на субъединицы, что приводит к его активации. При уменьшении концентрации

цАМФ он покидает регуляторный центр, что вызывает объединение субъединиц (ассоциацию)

и инактивацию фермента.

3)Фосфорилирование — дефосфорилирование.
Данный способ регулирования активности (принцип «включено — выключено») основан на

изменении структуры фермента. Некоторые ферменты, присоединяя (процесс

фосфорилирования) или отщепляя (процесс дефосфорилирования) остаток фосфорной

кислоты, могут изменять свою активность. Фосфорилирование ферментов в клетке происходит

под действием фермента протеинкиназы, когда он находится в активном состоянии. Остаток

фосфорной кислоты чаще всего связывается с боковой группой остатков серина или треонина:

фермент — СН2ОН + АТФ  фермент — СН2ОРО3Н2 + АДФ;


дефосфорилированная фосфорилированная форма
Если в клетке активна фосфатаза, то протекает противоположный процесс

(дефосфорилирование):

фермент — СН2РО3Н2 + Н2О  фермент — СН2ОН + Н3РО4;


фосфорилированная дефосфорилированная форма
В зависимости от природы фермента фосфорилирование может его активизировать или,

наоборот, инактивировать.

Например, активность ферментов гликогенсинтазы (регуляторный фермент биосинтеза

гликогена) и гликогенфосфорилазы (регуляторный фермент распада гликогена) регулируется

путем фосфорилирования — дефосфорилирования. Природа данных ферментов такова, что

фосфорилированная форма гликогенфосфорилазы активна («а»), а гликогенсинтазы —

неактивна («b»). При дефосфорилировании их активность меняется на противоположную.

Биологический смысл заключается в том, что когда происходит биосинтез гликогена, его

распад ингибируется, и наоборот.

Путь нековалентной модификации


Регуляция по типу обратной связи.

В состав ферментов кроме активного центра может входить иной центр — аллостерический, к

которому могут присоединяться низкомолекулярные вещества и изменять активность

ферментов. Аллостерический (или регуляторный) центр — участок молекулы фермента, с

которым связываются низкомолекулярные вещества-эффекторы (активаторы или ингибиторы).

Их структура отлична от структуры субстрата. Присоединяясь к аллостерическому центру, эти

вещества (эффекторы) могут изменять третичную или четвертичную структуры молекулы

фермента и соответственно структуру активного центра, вызывая увеличение или уменьшение

его активности. Таким образом, связывание фермента с эффектором в одном участке белка

вызывает изменение структуры и, следовательно, активности — в другом.

Активаторы увеличивают активность ферментов, а ингибиторы уменьшают. Часто

биохимический процесс состоит из нескольких стадий, которые катализируются своими

ферментами. В таких системах есть хотя бы один фермент — регуляторный, который


определяет скорость всей последовательности реакций. Регуляторные ферменты под

действием эффекторов способны включать и выключать целые цепи реакций метаболизма.

Соединения, действующие как ингибиторы этих ферментов, обычно являются конечными

продуктами всей цепи реакций. Систему регуляции этого типа, когда избыток продукта одной

из последовательных реакций биохимического пути ингибирует активность фермента одной из

ранних стадий, блокируя эту и все последующие стадии, называют ингибированием по типу

обратной связи. Таким образом, накопление избытка продукта ведет к торможению его

биосинтеза.

Типы ингибирования
Различают обратимое и необратимое ингибирование ферментов. Ингибирование является

необратимым, если ингибитор необратимо связывается с ферментом (образованный комплекс

субстрат-ингибитор не распадается). Многие ингибиторы необратимо связываются с фермен-

тами, изменяя их структуру. Этим объясняется токсичное действие ионов металлов: Hg2+, Zn2+.

Е — SH + Ag+  Е — S — Ag + H+;
в противном случае наблюдается обратимое ингибирование. Обратимое ингибирование, может
быть конкурентное и неконкурентное.

Конкурентное ингибирование
Конкурентное ингибирование наблюдается, когда ингибитор и субстрат имеют сходные

структуры и конкурируют за связывание с активным центром фермента. Если к ферменту Е

добавить конкурентный ингибитор I и субстрат S, то одновременно образуется два комплекса:

фермент-ингибитор (EI) и фермент-субстратный (ES). Образование комплекса EI не приводит

к образованию продуктов реакции.

Е + S  ES  P + Е;
Е + I  EI  не образуются продукты реакции
Скорость реакции уменьшается, потому что при присоединении ингибитора к активному центру
субстрата уменьшается число активных центров фермента, способных взаимодействовать с
природным субстратом. Поскольку конкурентный ингибитор связывается обратимо, с ферментом,
то уменьшить его действие можно, увеличивая концентрацию субстрата, так как при этом
увеличивается вероятность связывания фермента с субстратом.
Неконкурентное ингибирование
Неконкурентное ингибирование наблюдается, когда ингибитор и фермент не сходны по

структуре и ингибитор присоединяется к регуляторному центру фермента. При этом

образуется тройной комплекс: фермент-ингибитор-субстрат, который не приводит к

образованию продуктов реакции. В данном типе ингибирования влияние ингибитора не может

быть преодолено повышением концентрации субстрата.

Регуляция путем изменения биосинтеза ферментов


Рассмотренные ранее способы изменения скорости протекания реакций направлены на

изменение активности уже имеющихся ферментов. Существует другой способ регуляции —

изменение содержания ферментов. В организме имеются вещества, которые, присоединяясь к

белку — регулятору оперона, могут изменять скорость биосинтеза белков-ферментов:

наблюдается либо усиление биосинтеза ферментов (индукция генов), либо замедление

(репрессия генов).

Компартментализация (отделение, отсек) в клетке


Этот способ регуляции характерен только для высших форм живых организмов и позволяет

осуществить наиболее тонкую регуляцию метаболизма. Он направлен на снижение скорости

процесса за счет разъединения субстрата с ферментами с помощью мембраны. Перенос групп

атомов и субстратов осуществляется за счет челночных механизмов, переводящих субстрат в

форму, которая способна проникать через мембрану. Затем по другую сторону мембраны

происходит обратное их превращение в первоначальную форму.

Изоферменты
Изоферменты — это ферменты, катализирующие одну и ту же реакцию, но отличающиеся

друг от друга по АК-составу, порядку связывания АК, электрофоретической подвижности, Км,

локализации в клетке и органе. Изоферменты выполняют одинаковые биологические функции,

но с различной эффективностью.

Например, лактатдегидрогеназа (ЛДГ) — олигомер, состоящий из 4 протомеров одного или

двух типов, обозначаемых: Н (сердце) и М (мышцы). ЛДГ существует в 5 формах, легко


различающихся с помощью электрофореза. Пять изоферментов ЛДГ имеют следующий

полипептидный состав: ЛДГ1 — (Н4); ЛДГ2 — (Н3М); ЛДГ3 —(Н2М2); ЛДГ4 — (НМ3); ЛДГ5 —

(М4). Различные ткани человека имеют свои характерные изоферментные спектры. В сер-

дечной мышце и почках наиболее высокой активностью обладают изоферменты ЛДГ1 и ЛДГ2.

В печени и скелетной мускулатуре максимальны ЛДГ5. В селезенке, поджелудочной железе,

щитовидной железе, надпочечниках - ЛДГ3.

Лактатдегидрогеназа катализирует обратимое восстановление пировиноградной кислоты

(ПВК) в молочную (лактат), в котором в роли восстановителя выступает НАДН + Н+.

пируват + НАДН + Н+  лактат + НАД+.

В тканях, в которых преобладает аэробный распад глюкозы, присутствуют обычно ЛДГ1 и

ЛДГ2, для которых характерно низкое сродство к пирувату, и поэтому они не могут эффективно

конкурировать за пировиноградную кислоту с пируватдегидрогеназным комплексом. В

результате пировиноградная кислота подвергается преимущественно окислительному

декарбоксилированию и образующийся в этой реакции ацетил-КоА «сгорает» в цикле

трикарбоновых кислот. В тканях, где доминирует анаэробный гликолиз, присутствуют

изоферменты с высоким сродством к пирувату: ЛДГ4 и ЛДГ5. В этих тканях пируват

расходуется преимущественно в лактатдегидрогеназной реакции.

Механизм биохимической ферментативной реакции можно представить упрощенно в общем

виде:

K 1 K 2
K -1  K  2
E+S ES P+E ................................. K m 
K 1 K 1

где Е — фермент;

S — субстрат;

ES — фермент-субстратный комплекс;

Р — продукты реакции;
К+1, К-1, К+2 — константы скоростей прямых и обратной реакций.

Константа Михаэлиса—Ментен (Km) характеризует константу диссоциации фермент-

субстратного комплекса и численно равна концентрации субстрата (в моль/л), при которой

скорость данной реакции составляет 1/2 от максимальной. Она характерна для каждой пары

фермент-субстратного комплекса.

Уравнение Михаэлиса—Ментен выражает зависимость скорости биохимической

ферментативной реакции от концентрации субстрата:

[S]
Vбиохим.р.  Vmax
K m  [S]

где Vбиохим.р.— скорость данной биохимической реакции,

Vmax — максимальная скорость биохимической реакции,

S — субстрат,

Кm — константа Михаэлиса—Ментен.

Анализ уравнения Михаэлиса—Ментен:


1) Если концентрация субстрата в реакции низка, т.е. [S] << Кm, то уравнение приобретает вид:
[S]
Vбиохим.р.  Vmax
Km
Таким образом, при низких концентрациях субстрата скорость биохимической реакции прямо

пропорциональна концентрации субстрата и описывается уравнением I порядка.

2) При высоких концентрациях субстрата, т. е. [S] >> Кm, величиной Кm можно пренебречь, тогда
[S]
Vбиохим.р.  Vmax , Vбиохим.р.  Vmax
[S]
Таким образом, при высоких концентрациях субстрата скорость биохимической реакции

становится максимальной и описывается уравнением нулевого порядка.

График зависимости скорости биохимической ферментативной реакции от концентрации

субстрата
Количественная характеристика активности фермента
За единицу ферментативной активности (Е) принимают количество фермента,

катализирующее превращение 1 мкмоль субстрата за 1 мин:

мкмоль превращенного субстрата


E
время инкубации в минутах
Удельную активность фермента определяют путем деления числа единиц ферментативной

активности на массу белка (или ткани), г или мг.

Молярную активность фермента определяют путем деления числа единиц ферментативной

активности в образце на массу фермента, выраженную в микромолях (для очищенных

ферментов):

E
E удельн.  ,
масса белка (ткани), г или мг
E
E молярная 
масса фермента, мкмоль
Количественная характеристика активности ферментов в биологических
жидкостях
Активность ферментов крови: -амилаза — г/ (ч • л) .

АсАТ, АлАТ, ЛДГ, ХЭ, КФК, щелочной фосфатазы — в ммоль/(ч • л).

трипсина — мкмоль/ (мл • ч)

Энзимодиагностика
В нормальных условиях активность ферментов в сыворотке крови относительно невелика по

сравнению с их активностью в тканях. При поражении ряда органов и тканей, что связано с

нарушением проницаемости мембран клеток и выходом из них ферментов в кровяное русло,

происходит увеличение их активности.

Количественно определяя нефункциональные ферменты плазмы (индикаторные ферменты),

можно диагностировать заболевание. Например, при инфаркте миокарда повышается

активность ферментов: аспартатаминотрансферазы, креатинфосфаткиназы; при заболеваниях

костей — щелочной фосфатазы; при заболеваниях печени — аланинаминотрансферазы.


Наследственные нарушения (энзимопатии)
Энзимопатии — заболевания, характеризующиеся нарушением содержания того или иного

фермента в организме. Они классифицируются:

1. Наследственные, связанные с полным нарушением биосинтеза какого-либо фермента;


2. Токсические, связанные с избирательным угнетением активности отдельных ферментов;
3. Алиментарные, вызванные дефицитом витаминов, белка, микроэлементов,
разбалансированностью питания;
4. Энзимопатии, вызванные – нарушением нейрогуморальной регуляции, связанные с
нарушением внутриклеточной организации ферментативных процессов.
В основе фенилкетонурии лежит врожденный дефект фермента фенилаланингидроксилазы:

нарушено образование тирозина из фенилаланина. Превращение фенилаланина идет по

другому пути — с образованием фенилпировиноградной, фенилмолочной и фенилуксусной

кислот, которые в большом количестве выделяются с мочой. Дефицит тирозина тормозит

биосинтез его производных — норадреналина — медиатора в нервной системе, что приводит к

дальнейшему поражению головного мозга и слабоумию.

При недостатке витаминов могут возникать нарушения, так как если тот или другой витамин

не поступает с пищей, кофермент не образуется и фермент остается неактивным.

Энзимотерапия
Использование ферментов с терапевтической целью применяется давно. Еще в прошлом веке,

после открытия пепсина, его стали применять при лечении диспепсии (нарушение

пищеварения) и труднозаживающих язв.

Фибринолизин применяют при лечении незаживающих ран, пролежней, для рассасывания

тромбов у больных тромбозами.

Фермент лидаза используется после операций для предотвращения образования грубых

рубцов. Кроме того, данный фермент вызывает деполимеризацию мукополисахаридов, что

приводит к увеличению проницаемости тканей и сосудистых стенок. Его используют для

облегчения проникновения лекарств через, межклеточную субстанцию при лечении

процессов, связанных с разрастанием соединительной ткани.


Среди ингибиторов ферментов используется трасилол — препарат, получаемый из околоушной

железы крупного рогатого скота. Так, при остром панкреатите непосредственно в протоках

поджелудочной железы наблюдается преждевременное превращение трипсиногена в трипсин,

который воздействует на ткань и в большом количестве поступает в кровь. Трасилол, будучи

ингибитором протеолитических ферментов, эффективен при лечении острых панкреатитов. В

настоящее время все большее распространение получает препарат вобэнзим, который ре-

комендуют при воспалительных процессах. Он представляет собой комплекс гидролитических

ферментов животного и растительного происхождения: трипсин, химотрипсин, амилазу,

урокиназу. Природные энзимы, содержащиеся в этом препарате, действуют в широком спектре

заболеваний. Они способствуют устранению функциональных нарушений кровоснабжения,

предупреждают появление атеросклероза. Полагают, что при перегрузках, заболеваниях

организму недостаточно того количества ферментов, которые он вырабатывает. Принимая

вобэнзим, больной компенсирует этот недостаток ферментов, помогает организму.

Липиды.
Классификация липидов. Характеристика фосфолипидов и восков.
Существует несколько классификаций липидов. Наибольшее распространение получила
классификация, основанная на структурных особенностях липидов. По этой классификации
различают следующие основные классы липидов:
1. Простые липиды: сложные эфиры жирных кислот с различными спиртами:
- Глицериды (ацилглицерины, или ацилглицеролы - по международной номенклатуре)
представляют собой сложные эфиры трехатомного спирта глицерина и высших жирных кислот.
- Воска: сложные эфиры высших жирных кислот и одноатомных или двухатомных спиртов.
2. Сложные липиды: сложные эфиры жирных кислот со спиртами, дополнительно
содержащие и другие группы.
- Фосфолипиды: липиды, содержащие, помимо жирных кислот и спирта, остаток
фосфорной кислоты. В их состав часто входят азотистые основания и другие компоненты:
глицерофосфолипиды (в роли спирта выступает глицерол); сфинголипиды (в роли спирта -
сфингозин).
- Гликолипиды (гликосфинголипиды).
- Стероиды.
- Другие сложные липиды: сульфолипиды, аминолипиды. К этому классу можно отнести и
липопротеины.
3. Предшественники и производные липидов: жирные кислоты, глицерол, стеролы и прочие

спирты (помимо глицерола и стеролов), альдегиды жирных кислот, углеводороды,

жирорастворимые витамины и гормоны.


Воска- сложные эфиры высших жирных кислот и высших одноатомных или двухатомных
спиртов с числом углеродных атомов от 16 до 22. Общие формулы можно представить так:

В этих формулах R, R' и R"-возможные радикалы.


Воска могут входить в состав жира, покрывающего кожу, шерсть, перья. У растений 80% от всех
липидов, образующих пленку на поверхности листьев и плодов, составляют воска. Известно
также, что воска являются нормальными метаболитами некоторых микроорганизмов.
Природные воска (например, пчелиный воск, спермацет, ланолин) обычно содержат, кроме
указанных сложных эфиров, некоторое количество свободных жирных кислот, спиртов и
углеводородов с числом углеродных атомов 21-35.

Фосфолипиды представляют собой сложные эфиры многоатомных спиртов: глицерина


или сфингозина с высшими жирными кислотами и фосфорной кислотой. В состав фосфолипидов
входят также азотсодержащие соединения: холин, этаноламин или серин. В зависимости от
того, какой многоатомный спирт участвует в образовании фосфолипида (глицерин или
сфингозин), последние делят на 2 группы: глицерофосфолипиды и сфинг: фосфолипиды.
Необходимо отметить, что в глицерофосфолипидах либо холин, либо этаноламин или серии
соединены эфирной связью с остатка фосфорной кислоты; в составе сфинголипидов обнаружен
только холин. Наиболее распространенными в тканях животных являются глицерофосфо-
липиды.
Фосфолипиды (глицерофосфолипиды). Глицерофосфолипиды являются производными
фосфатидной кислоты. В их состав входят глицерин, жирные кислоты, фосфорная кислота и
обычно азотсодержащие соединения. Общая формула глицерофосфолипидов:

В этих формулах R1 и R2- радикалы высших жирных кислот, а R3- чаще радикал азотистого
соединения. Для всех глицерофосфолипидов характерно, что одна часть их молекул (радикалы R1
и R2-) обнаруживает резко сраженную гидрофобность, тогда как другая часть гидрофильна
благодаря отрицательному заряду фосфорной кислоты и положительному заряду радикала R3.
Из всех липидов глицерофосфолипиды обладают наиболее выраженными полярными
свойствами. Существует несколько групп (подклассов) глицерофосфолипидов. В зависимости от
характера азотистого основания, присоединенного к фосфорной кислоте, глицерофосфо-
гликолипиды подразделяют на фосфатидилхолины (лецитины), фосфатидилэтаноламины
(кефалины) и фосфатидилсерины. В состав некоторых глицерофосфолипидов вместо
азотсодержащих соединений входит не содержащий азота шестиуглеродный циклический спирт
инозит, называемый также инозитолом. Эти липиды называются фосфатидилинозитолами.
Фосфатидилхолины (лецитины). В отличие от триглицеридов в молекуле

фосфатидилхолина одна из трех гидроксильных групп глицерина связана не с жирной, а с

фосфорной кислотой. Кроме того, фосфорная кислота в свою очередь соединена эфирной
связью с азотистым основанием - холином [НО — СН2 — СН2 — Na+(СН3)3]. Таким образом, в

молекуле фосфатидилхолина соединены глицерин, высшие жирные кислоты, фосфорная

кислота и холин:

Фосфатидилэтаноламины. Основное различие между фосфатидилхолинами и


фосфатидилэтаноламинами - наличие в составе последних азотистого основания этаноламина
(НО — СН2 — СН2 — N +Н3).

Обмен липидов
Превращения липидов в процессе пищеварения и всасывание. Липиды — важная составная
часть пищи. Взрослому человеку требуется от 70 до 145г жира в сутки в зависимости от
трудовой деятельности, пола, климатических условий. Причем необходимы как животные, так
и растительные жиры. Липиды являются высокими энергетическими веществами, поэтому за
их счет удовлетворяется до 25—30% потребности человеческого организма в энергетическом
материале. Кроме того, в составе животных жиров в организм поступают жирорастворимые
витамины А, В, К и Е, растительные жиры богаты непредельными жирными кислотами,
являющимися предшественниками простагландинов, исходным материалом для синтеза
организмом фосфолипидов и других веществ.
Переваривание жира начинается в желудке, где находится малоактивный фермент
желудочная липаза, однако ее роль в гидролизе пищевых триглицеридов у взрослых людей
невелика. Во-первых, в желудочном соке взрослого человека и других млекопитающих
содержание липазы крайне низкое. Во-вторых, рН желудочного сока далек от оптимума действия
этого фермента (оптимальное значение рН для желудочной липазы 5,5-7,5). В-третьих, в желудке
отсутствуют условия для эмульгирования триглицеридов, а липаза может активно действовать
только на триглицериды, находящиеся в форме эмульсии. Поэтому у взрослых людей не
эмульгированные триглицериды составляющие основную массу пищевого жира, проходят через
желудок без особых изменений. Вместе с тем расщепление триглицеридов в желудке играет
важную роль в пищеварении у детей, особенно грудного возраста. Слизистая оболочка корня
языка и примыкающей к нему области глотки ребенка грудного возраста секретирует
собственную липазу в ответ на сосательные и глотательные движения. Эта липаза получила
название лингвальной. Активность лингвальной липазы не успевает проявиться в ротовой
полости,основным местом ее действия является желудок. Оптимум рН лингвальной липазы в
пределах 4,0-4,5; он близок к величине рН желудочного сока у грудных детей.
Расщепление триглицеридов в желудке взрослого человека невелико, но оно в определенной
степени облегчает последующее переваривание в кишечнике. Даже незначительное по объему
расщепление триглицеридов в желудке приводит к появлению свободных жирных кислот,
которые подвергаясь всасыванию в желудке, поступают в кишечник и способствуют там
эмульгированию жиров, облегчая таким образом воздействие на них липазы панкреатического
сока.
После того как химус попадает в двенадцатиперстную кишку, прежде всего происходит
нейтрализация попавшей в кишечник с пищей соляной кислоты желудочного сока бикарбонатами,
содержащимися в панкреатическом и кишечном соках. Выделяющиеся при разложении бикарбонатов
пузырьки углекислого газа способствуют хорошему перемешиванию пищевой кашицы с
пищеварительными соками. Одновременно начинается эмульгирование жира. Наиболее мощное
эмульгирующее действие на жиры оказывают соли желчных кислот, попадающие в
двенадцатиперстную кишку с желчью в виде натриевых солей. Большая часть желчных кислот
конъюгирована с глицином или таурином. По химической природе желчные кислоты являются
производными холановой кислоты:

В желчи в основном содержится холевая, дезоксихолевая и хенодезоксихолевая кислоты:

дезоксихолевая

хенодезоксихолевая

Желчные кислота присутствуют в желчи в конъюгированной форме, т.е. в виде


гликохолевой, гликодезоксихолевой, гликохенодезоксихолевой (около 2/3-4/5 всех желчных
кислот) или таурохолевой, тауродезоксихолевой и таурохенодексихолевой (около 1/5-1/3 всех
желчных кислот). Эти соединения иногда еще называют парными желчными кислотами, т.к. они
состоят из двух компонентов – желчной кислоты и глицина или таурина:
гликохолевая

таурохолевая

холевая

Считают, что только комбинация соль желчной кислоты + ненасыщенная жирная кислота +
моноглицерид придает необходимую степень эмульгирования жира. Соли желчных кислот резко
уменьшают поверхностное натяжение на поверхности раздела жир/вода, благодаря чему они не
только облегчают эмульгирование, но и стабилизируют уже образовавшуюся эмульсию.

Основное расщепление липидов происходит в кишечнике, в первую очередь в


двенадцатиперстной кишке. В этот отдел кишечника поступает сок поджелудочной железы,
содержащий очень активную липазу. Сюда же поступает из желчного пузыря желчь, составные
компоненты которой (желчные кислоты) необходимы для переваривания липидов. Это связано с
тем, что желчные кислоты—холевая (преобладает в желчи человека), дезоксихолевая,
литохолевая, хенодезоксихолевая, таурохолевая и гликохолевая —• представляют собой
поверхностно-активные вещества, способствующие эмульгированию жиров, что является
важнейшим условием их последующего ферментативного расщепления.
Пройдя через барьер слизистой оболочки кишечника, желчные кислоты в связанном
состоянии с липидами отделяются от последних и по венам кишечника через портальный
кровоток возвращаются в печень, а затем с желчью в двенадцатиперстную кишку.
Образование эмульсии жиров в кишечнике может происходить и под влиянием мелких
пузырьков СО2, выделяющегося при нейтрализации соляной кислоты пищевой кашицы
бикарбонатами поджелудочного и кишечного сока. Способствуют эмульгированию и соли
жирных кислот (мыла), возникающие при гидролизе липидов. Но основная роль в
эмульгировании жиров принадлежит желчным кислотам.
В результате описанных процессов образуется очень тонкая жировая эмульсия, диаметр
частиц которой не превышает 0,5 мкм. Такие эмульгированные жиры способны самостоятельно
проходить через стенку кишечника и попадать в лимфатическую систему. Однако большая часть
эмульгированного жира всасывается после гидролитического расщепления его панкреатическими
липазами. Последние образуются в поджелудочной железе в виде неактивных проферментов,
которые переходят в активную форму при участии мыльных кислот.
Основная масса липидов пищи представлена триацилглицеринами, меньше фосфолипидами
и стероидами. Гидролиз триацилглицеринов идет постепенно. Сначала расщепляются эфирные
связи в I м и 3-м положениях, т.е. внешние сложноэфирные связи:

Эти реакции осуществляют липазы, специфичные в отношении 1,3-эфирных связей


триацилглицерина. Связи во 2-м положении гидролизуют другие липазы:

Связи 1 и 3 гидролизуются быстро, а потом идет медленный гидролиз 2-моноглицерида. 2-


Моноглицерид может всасываться стенкой кишечника и использоваться на ресинтез
триацилглицеринов, специфичных для данного вида организмов, уже в самой слизистой, тонкого
кишечника.
Кроме липаз в соке поджелудочной железы присутствуют эстеразы, гидролизующие
преимущественно эфиры жирных кислот с короткой цепью и эфиры холестерина. Эти эстеразы
тоже активны только в присутствии желчных кислот.
Пищеварительные липазы кроме человека и млекопитающих животных обнаружены и
исследованы у рыб, некоторых беспозвоночных. Однако, как правило, у большинства видов
беспозвоночных и костистых рыб липолитическая активность в пищеварительных соках
примерно в 1000 раз ниже, чем в панкреатическом соке млекопитающих. Не следует забывать,
что жиры могут усваиваться также путем фагоцитоза и сохраняться без предварительного
гидролиза до тех пор, пока не прогидролизуются внутриклеточными липазами и, таким образом,
примут участие в синтезе липидов в процессах образования энергии.
Расщепление фосфолипидов происходит при участии ряда ферментов: фосфолипаз А1, А2, С,
D и лизофосфолипазы.
Фосфолипаза А1 гидролизует связь в 1-м положении. Фосфолипаза А2, образующаяся в
поджелудочной железе, поступает в полость тонкого кишечника в неактивной форме и только под
действием трипсина активируется. Под действием фосфорилапазы А2 отщепляется жирная
кислота во 2-м положении. В результате ее действия образуются лизофосфолипиды, которые
вызывают разрушение триглицеридов крови. Кроме панкреатического сока фосфолипаза А2
содержится в яд рептилий, беспозвоночных (особенно членистоногих — пчел, скорпионов,
муравьев), а также у кишечнополостных. Известны так| же внутриклеточные фосфолипазы А 2 (в
лизосомах, микросомах, митохондриях).
В организме ее действие компенсируется фосфорилазой А 1, которая отщепляет второй
кислотный остаток. Затем отщепляется азотистое основание под действием фосфорилазы D и
фосфорная кислота – фосфорилазой С.
Конечными продуктами распада фосфолипидов являются жирные кислоты, глицерин,
азотистое основание и фосфорная кислота.
Стериды, подвергаясь действию гидролитических ферментов типа холестераз,
расщепляются в кишечнике с образованием спирта холестерола или эргостерола и
соответствующей жирной кислоты. Холестеразы продуцируются поджелудочной железой и
активны только в присутствии солей желчных кислот.
Таким образом, образующаяся в результате гидролиза липидов смесь содержит анионы
жирных кислот, моно-, ди- и триацилглицерины, хорошо эмульгированные солями жирных
кислот и мылами, глицерин, холин, этаноламин и другие полярные компоненты липидов.
Исследования с мечеными триацилглицеринами показали, что около 40% жиров пищи
гидролизуется полностью до глицерина и жирных кислот, 3—10% всасываются без гидролиза в
форме триацилглицеринов, а остальные гидролизуются частично, главным образом до 2-
моноацилглицеринов. Глицерин водорастворим и вместе с жирными кислотами, имеющими
короткие углеродные цепи (С<10), всасывается свободно через стенку кишечника и через
портальную систему кровообращения поступает в печень.
Для всасывания жирных кислот с длинной цепью (С >10), моноглицеридов и холестерина
необходимы желчные кислоты. Соединяясь с вышеперечисленными соединениями, желчные
кислоты образуют растворимые комплексы или мицеллы— холеиновые комплексы, которые легко
всасываются в эпителий кишечника. Так как рН в тонком кишечнике слабощелочная, желчные
кислоты функционируют здесь в форме своих солей. Особую роль при этом играют такие
желчные кислоты, как таурохолевая и гликохолевая. Лучше перевариваются и всасываются
липиды, находящиеся в жидком состоянии, при температуре тела. Липиды, у которых точка
плавления существенно выше температуры тела, плохо перевариваются и всасываются.
Фосфорная кислота, образующаяся при гидролизе фосфолипидов, всасывается в виде
натриевых и калиевых солей, а азотистые основания — холин, этаноламин и серин —
всасываются при участии нуклеотидов (ЦДФ-производных). Некоторая избирательность
проявляется слизистой оболочкой кишечника в отношении стероидов, особенно растительного
происхождения. Среди основных стероидов пищи только холестерин легко проникает через
стенки кишечника. С такой же легкостью всасываются витамин D и некоторые стероидные
гормоны, введенные перорально.
Преобладающими липидами лимфы являются триацилглицериды, даже тогда, когда жирные
кислоты находятся в составе сложных эфиров других спиртов.
Желчные кислоты выполняют в организме 3 основных функции:
- эмульгируют жиры;
- активируют липазу;
- обеспечивают всасывание высших жирных кислот, моноглицеридов и холестерина.

Ресинтез жирных кислот в стенке кишечника.


Из всосавшихся продуктов гидролиза в стенке кишечника происходит ресинтез
специфичных для данного организма. Триглицеридов и фосфоглицеридов. При этом происходит
последовательное присоединение к моноглицеридам активированных жирных кислот.
При синтезе фосфолипидов глицерин фосфорилируется фосфатглицеролкиназой,
превращается в глицерол-3-фосфат, который затем взаимодействует с активированными жирными
кислотами, образуя фосфатидную кислоту.
Транспорт липидов
Ресинтезированные триацилглицерины, фосфолипиды, холестерин и его эфиры в
эпителиальных клетках кишечника соединяются |с небольшим количеством белка и образуют
хиломикроны (ХМ- частицы диаметром d=0,1-5 мкм). ХМ поступают в лимфотическую систему, а
оттуда – через грудной проток в кровь. Из-за большого размера хиломикроны не могут сразу
всосаться в кровеносные капилляры. В хиломикронах белки и полярные части фосфолипидов
расположены снаружи, а триглицериды и холестерин внутри.
По крови хиломикроны транспортируются к печени и жировой ткани. На поверхности
клеток под действием фермента липопротеиназа происходит их гидролиз с образованием
глицерина и жирных кислот. Часть жирных кислот поступает в клетки жировой ткани и там
откладываются в виде триглицеридов, а часть образует комплексы с альбуминами сыворотки
крови и оком крови разносится к тканям. В клетках тканей комплекс распадается и жирные
кислоты подвергаются биологическому окислению, обеспечивая клетку энергией, либо
используется для синтеза триглицеридов жировой ткани, а также липопротеинов, фосфолипидов,
стеридов и др. соединений.
Жирные кислоты, как и глюкоза, является основным энергетическим материалом в
организме. При повышенных энергозатратах происходит мобилизация жирных кислот из
жировых депо. При этом триглицериды резервного жира последовательно расщепляются под
действием фермента триглицеридлипаза (активизируется адреналином и др. гормонами), ди- и
моноглицеридлипазами с образованием глицерина и жирных кислот, которые в виде комплексов с
альбуминами кровью переносятся к тканям где подвергаются процессам распада или биосинтеза.

Тема: ОРГАНИЧЕСКИЕ КИСЛОТЫ.

Органические кислоты широко распространены в растительном мире. Они содержатся во


всех растениях и часто накапливаются в больших количествах в семенах, стеблях, листьях,
корнях или плодах. Органические кислоты образуются в результате многих процессов обмена
веществ в растениях, среди которых основным следует считать дыхание.
Органические кислоты участвуют в построении молекул ряда сложных веществ — жиров,
производных сахаров, витаминов и других биологически активных соединений. В растениях
кислоты находятся в свободном состоянии, а также в виде кислых и нейтральных солей. Во
многих плодах и ягодах большая часть приходится на свободные кислоты и лишь незначительное
количество представлено солями. В некоторых растениях (например, щавеле, бегонии,
суккулентах) много свободных кислот содержится и в листьях. В связанном состоянии
органические кислоты обнаружены в больших количествах в листьях бобовых растений, где на
их долю может приходиться до 25% сухого вещества.
При определениях содержания органических кислот или их солей следует различать: 1)
общую кислотность, или общее содержание кислоты, понимая под этим общее количество
анионов и недиссоциированных молекул кислоты; 2) концентрацию водородных ионов, часто
обозначаемую «истинная кислотность»; 3) титруемую кислотность; под этим часто понимают
концентрацию «свободной» кислоты. Однако это справедливо только для одноосновных кислот.
У двуосновных кислот часть общей кислотности, которую можно титровать щелочью, состоит из
двух фракций: недиссоциированной кислоты и одновалентных кислотных ионов.
При анализах органические кислоты можно экстрагировать из свежих, замороженных или
высушенных растительных тканей. Однако следует иметь в виду, что при высушивании в
условиях повышенной температуры могут происходить изменения в содержании органических
кислот (потери летучих кислот или их эфиров, взаимные превращения кислот, взаимодействие их
с углеводами и т. д.), поэтому для определения органических кислот сушить материал лучше при
комнатной температуре в вакууме или применять высушивание лиофилизацией.
Для экстракции кислот можно использовать воду или органические растворители, из
которых чаще всего — эфир. Однако эфир растворяет свободные кислоты, но не соли
органических кислот, поэтому для экстракции солей экстрагируемый материал надо
предварительно подкислять минеральной кислотой.
При экстракции водой из растительного материала, кроме кислот, извлекается много
сопутствующих веществ— сахаров, пектиновых веществ, аминокислот, белков, которые перед
количественным определением необходимо тщательно удалять из раствора. Удаляют эти ве-
щества или экстракцией и осаждением, или при помощи катионо- и анионообменных смол. Эфир
не извлекает углеводов, аминокислот и белков, но растворяет жиры и липоиды.

Цикл трикарбоновых кислот (цикл Кребса)


Первая реакция катализируется ферментом, цитратсинтазой, при этом ацетильная группа
ацетил-КоА конденсируется с оксалатом, в результате образуется лимонная кислота:

Вторая реакция. Образовавшаяся лимонная кислота подвергается дегидрированию с


образованием цис-аконитовой кислота, которая присоединяя молекулу воды, переходит в
изолимонную кислоту (изоцитрат):

Третья реакция лимитирует скорость цикла Кребса. Изолимонная кислота дегидируется в


присутствии НАД-зависимой изоцитратдегидрогеназы:
В ходе изоцитратдегидрогеназной реакции изолимонная кислота одновременно
декарбоксилируется. Фермент для проявления своей активности нуждается в ионах Мg2+ или
Мn2+.
Четвертая реакция. Происходит окислительное декарбоксилирование α-кетоглутаровой
кислоты с образованием высокоэнергетического соединения сукцинил-КоА. Механизм этой
реакции сходен с окислительного декарбоксилирования пирувата до ацетил-КоА. В реакции
принимают участие 5 коферментов: ТПФ, амид липоевой кислоты, НS-КоА, ФАД и НАД+.

Пятая реакция катализируется ферментом сукцинил-КоА-синтетаза. В ходе этой реакции


сукцинил-КоА при участии ГТФ и неорганического фосфата превращается в янтарную кислоту
(сукцинат). Одновременно происходит образование высокоэргической фосфатной связи ГТФ за
счет высокоэргической тиоэфирной связи сукцинил-КоА:

Шестая реакция. Сукцинат дегидрируется в фумаровую кислоту. Окисление сукцината


катализируется сукцинатдегидрогеназой, в молекуле которой с белком прочно (ковалентно)
связан кофермент ФАД, а сам фермент прочно связан с внутренней митохондриальной
мембраной:
Седьмая реакция. Фумаровая кислота под действием фермента фумаратгидратазы (фумаразы)
гидратируется и получается L-яблочная кислота (малат)

Восьмая реакция. Происходит окисление L-малата в оксалоацетат под действием


митохондриальной НАД-зависимой малатдегидрогеназы:

Таким образом, за один оборот цикла состоящего из 8 ферментативных реакций, происходит


полное окисление одной молекулы ацетил-КоА с образованием 12 молекул АТФ.
Энергетика ЦТК:
Образуется 3 НАДН2, 1 ФАДН2 и ГТФ.
Каждая молекула НАДН2 дает в системе тканевого дыхания 3 молекулы АТФ, ФАДН 2 – 2
молекулы АТФ и ГТФ – 1 молекулу АТФ.
3*3АТФ + 2АТФ + 1АТФ = 12АТФ
Тема УГЛЕВОДЫ

Термин «Углеводы», предложенный в Х1Х столетии, был основан на предположении, что


все углеводы содержат 2 компонента – углерод и воду, и их элементарный состав можно выразить
общей формулой Сm(H2O)n. Хотя из этого правила есть исключения и оно не абсолютно точно,
тем не менее указанное определение позволяет наиболее просто охарактеризовать класс
углеводов в целом.
Углеводы можно разделить на 3 основные группы в зависимости от количества
составляющих их мономеров: моносахариды, олигосахариды и полисахариды.

КЛАССИФИКАЦИЯ УГЛЕВОДОВ
УГЛЕВОДЫ

Моносахариды Олигосахариды Полисахариды


(дисахариды,
трисахариды и т.д.)
Альдозы Кетозы
Гомополи Гетерополи
сахариды сахариды

Глицери Диоксиацетон Дисахариды:


новый Эритрулоза Сахароза Крахмал Гиалуроно
альдегид Рибулоза Лактоза Гликоген вая
Эритроза Фруктоза Глюкоза Клетчатка кислота
Рибоза Трисахариды: (целлюлоза) Гепарин
Глюкоза Раффиноза Хондроити
нсерные
кислоты
МОНОСАХАРИДЫ.
Моносахариды – производные многоатомных спиртов, содержащие карбоксильную группу.
В зависимости от положения в молекуле карбоксильной группы моносахариды подразделяют на
альдозы и кетозы.
Альдозы содержат функциональную альдегидную группу –НС=О, тогда как кетозы
содержат кетонную группу >С=О. Название моносахарида зависит от числа составляющих его
углеводных атомов, например альдотриозы, кетотриозы, альдогексозы, кетогексозы и т.д.
Моносахариды по строению можно отнести к простым углеводам, т.к. они не гидролизуются
при переваривании, в отличие от сложных, которые при гидролизе распадаются с образованием
простых углеводов.
Простейшие представители моносахаридов – триозы: глицеральдегид и
диоксиацетонфосфат:
H CH2OH
C
O

CHOH C O

CH2OH CH2OH
глицеральдегид диоксиацетон
(альдотриоза) (кетотриоза)
Они являются промежуточными продуктами распада глюкозы и участвуют в синтезе жиров.
При удлинении углеродной цепи триоз путем последовательного добавления атомов
углерода получают соответственно тетрозы (эритроза), пентозы (рибоза и дезоксирибоза),
гексозы (глюкоза, фруктоза, галактоза), гептозы и октозы.

Стериоизомерия моносахаридов.
Все моносахариды содержат ассиметричные (хиральные) атомы углерода. Все изомеры
моносахаридов подразделяют на D- и L-формы по сходству расположения групп атомов у
последнего центра ассиметрии с расположением групп у D- и L-глицеральдегида:
Природные гексозы: глюкоза, фруктоза, манноза и галактоза – принадлежат к соединениями
D-ряда.
Природные моносахариды обладают оптической активностью – способностью вращать
плоскость поляризованного луча света – одна из важнейших особенностей веществ (в т.ч.
моносахаридов), молекулы которых имеют ассиметричный атом углерода. Свойство вращать
плоскость поляризованного луча вправо – обозначают знаком (+), а в противоположную сторону
– (-). Так, D-глицеральдегид вращает плоскость поляризованного луча вправо, т.е. D-
глицеральдегид является D (+)-альдотриозой. Однако направление угла вращения
поляризованного луча заранее непредсказуемо. Моносахариды, относящиеся к D-ряду, могут
быть как право- так и левовращающимися. Например, глюкоза, встречающаяся в природе –
правовращающаяся, а обычная форма фруктозы – левовращающаяся.

Эквимолярная смесь стереоизомеров (энантиомеров или L- и D-форм) называется


рацемической смесью или рацематом и не обладает оптической активностью. Если сравнивать
стереоизомеры моносахаридов, не являющихся энантиомерами, различия в структуре между
ними достаточны для того, чтобы у этих моносахаридов были разные химические свойства, а
также температура плавления и кипения, растворимость и т. д. Такие пары стереоизомеров
называют диастереомерами. Например, D-манноза является энантиомером по отношению к L-
маннозе и диастереомером по отношению к 14 другим гексозам (D- и L-формы галактозы,
глюкозы и т.д.).
Диастереомеры, отличающиеся по конфигурации только при одном из нескольких
хиральных центров, называются эпимерами. В природе особенно часто встречаются такие
эпимеры: глюкоза и галактоза (различия по конфигурации только С-4), глюкоза и манноза
(различия по С-2).

Циклические (полуацетальные) формы моносахаридов.


Любой моносахарид с конкретными физическими свойствами (температура плавления,
растворимость и т.д.) характеризуется специфической величиной удельного вращения [α]20D,
которая при растворении любого моносахарида постепенно меняется и лишь при длительном
стоянии раствора достигает вполне определенного значения. Изменение величины удельного
вращения при стоянии (во времени) растворов моносахаридов называется мутаротацией
(трансформацией ее структуры в растворе). Явление мутаротации объясняется тем, что
альдегиды и кетоны обратимо реагируют с эквимолярным количеством спирта с образованием
полуацеталей.

Реакция образования полуацетали возможна и в пределах одной молекулы.


Внутримолекулярное взаимодействие спиртовой и карбоксильной групп наиболее

благоприятно, если оно приводит к образованию пяти- или шестичленных циклов.

Шестичленные кольца сахаров называют пиранозами, а пятичленные – фуранозами.

Московский профессор М. А. Колли (1870) для объяснения явления мутаротации впервые

высказал предположение о существовании циклического строения молекулы углеводов.

При написании структурных формул расположение полуацетального гидроксила у

моносахаридов D-ряда в α-форма должно быть ниже плоскости кольца, а при написании β-

формы - выше.

В настоящее время твердо установлено, что в природе только небольшая часть молекул
пентоз и гексоз содержит открытую цепь. Большинство молекул находится в виде циклических
структур. При замыкании молекулы моносахарида в цикл происходит внутримолекулярная
реакция образования полуацетали и полукетали.
В зависимости от того, гидроксильная группа какого из углеродных атомов принимает
участие в образовании полуацетали и полукетали, могут получаться пятичленные циклы (из
четырех атомов С и одного атома О) или шестичленные (из пяти атомов С и одного атома О). Эти
структуры называются, соответственно фуранозными или пиранозными, по аналогии с
известными органическими соединениями –фураном и пираном.

Для моносахаридов ряда пентоз обычно характерен фуранозный цикл, в то время как
большинство гексоз находится в пиранозной форме.
Основные реакции моносахаридов.
1. Реакции полуацетального гидроксила.
Моносахариды, как в кристаллическом состоянии, так и в растворе в основном существуют в

полуацетальных формах. Полуацетальный гидроксил отличается большой реакционной

способностью и может замещаться другими группировками в реакциях со спиртами,

карбоновыми кислотами, фенолами и т.д. Продукт реакции называют гликозидом.

Соответственно, α – и β-изомерам моносахаридов существуют α – и β-глюкозиды.

Важным классом гликозидов являются N-гликозиды, в которых гликозидная связь


осуществляется через азот, а не через кислород.

2. Этерификация. Это реакция образования эфирной связи между ОН-группами


моносахаридов и различными кислотами. В метаболизме углеводов важную роль играют
фосфоэфиры – эфиры моносахаридов и фосфорной кислоты (глюкозо-1- фосфат или глюкозо-6-
фосфат). Физиологическое значение фосфоэфиров моносахаридов заключается в том, что они
представляют собой метаболически активные структуры, кроме того, клеточная мембрана мало
проницаема для этих соединений, т.е. клетка удерживает моносахариды благодаря тому, что они
находятся в фосфорилированной форме.

3. Реакции с участием карбонильной группы.


- окисление моносахаров.
Обработка альдоз слабыми окислителями приводит к превращению альдегидной группы в
положении атома С-1 в карбоксильную группу с образованием так называемых альдоновых
кислот (D-глюконовая кислота, образуемая при окислении альдегидной группы D-глюкозы или D-
галактоновая кислота – продукт окисления альдегидной группы D-галактозы):
АЛЬДОНОВЫЕ КИСЛОТЫ

В уроновых кислотах окислена первичная спиртовая группа (с образованием карбоксильной


группы), а альдегидная остается не окисленной:

УРОНОВЫЕ КИСЛОТЫ

Если окисляются обе концевые группы в глюкозе, то образуется сахарная кислота,


содержащая 2 карбоксильные группы.
Восстановление первого углеродного атома глюкозы приводит к образованию сахароспирта
– сорбитола.

ОЛИГОСАХАРИДЫ
Олигосахариды – углеводы, молекулы которых содержат от 2 до 10 остатков моносахаридов,
соединенных гликозидными связями. В соответствии с этим различают дисахариды, трисахариды
и т.д.
Дисахариды – наиболее широко известна мальтоза, лактоза и сахароза.
Мальтоза образуется как промежуточный продукт при действии амилаз на крахмал или
гликоген, содержит 2 остатка α-D-глюкозы.

Изомальтоза – промежуточный продукт,образующийся при расщеплении крахмала в


кишечнике. Состоит из двух остатков D-глюкозы, но соединены эти моносахариды α 1→4-
гликозидной связью.
Сахароза. Одним из наиболее распространенных дисахаридов является обычный пищевой
сахар. Молекула сахарозы состоит из одного остатка D-глюкозы и одного остатка D-фруктозы. В
отличие от большинства дисахаридов сахароза не имеет свободного полуацетального гидроксила
и не обладает восстанавливающими свойствами. Гидролиз сахарозы приводит к образованию
смеси, которую называют инвертным сахаром. В этой смеси преобладает сильно
левовращающаяся фруктоза, которая инвертирует (меняет на обратный) знак вращения
правовращающегося раствора исходной сахарозы.
Лактоза. Дисахарид лактоза содержится только в молоке и состоит из D-галактозы и D-
глюкоза. Благодаря наличию в молекуле свободного полуацетального гидроксила (в остатке
глюкозы) лактоза относится к редуцирующим сахаридам.
ПОЛИСАХАРИДЫ
Полисахариды – высокомолекулярные продукты поликонденсации моносахаридов,
связанных друг с другом гликозидными связями и образующие линейные или разветвленные
цепи. Наиболее часто встречающимся моносахаридным звеном полисахаридов является D-
глюкоза. В качестве компонентов полисахаридов могут быть также D-манноза, D- и L- галактоза,
D-ксилоза и L-арабиноза, D-галактуроновая и D-маннуроновая кислоты, D- глюкозамин, D-
галактозамин и др. Каждый моносахарид, входящий в состав полимерной молекулы, может
находиться в пиранозной или фуранозной форме. Полисахариды можно разделить на 2 группы:
гомополисахариды и гетерополисахариды.
Гомополисахариды состоят из моносахаридных единиц только одного типа.
Гетерополисахариды содержат два и более типов мономерных звеньев.

Гомополисахариды. По своему функциональному назначению гомополисахариды могут


быть разделены на 2 группы: структурные (гликоген и крахмал) и резервные (целлюлоза)
полисахариды.
Крахмал. Это высокомолекулярное соединение, включающее сотни тысяч остатков
глюкозы. Он является главным резервным полисахаридом растений.
Крахмал представляет собой смесь двух гомополисахаридов: линейного – амилозы и
разветвленного – амилопектина. Общая формула крахмала (С6Н10О5)n. Как правило, содержание
амилозы в крахмале составляет 10-30%, амилопектина – 70-90%. Полисахариды крахмала
построены из остатков D-глюкозы, соединенных в амилозе и линейных цепях амилопектина α-
1→4-связями, а в точках ветвления амилопектина – межцепочечными α-1→6-связями.

Рис. Структура крахмала. а - амилоза с характерной для нее спиральной структурой, б –


амилопектин.
В молекуле амилозы линейно связаны 200-300 остатков глюкозы. Благодаря α-конфигурации
глюкозного остатка, полисахаридная цепь амилозы имеет конфигурацию спирали. В воде амилоза
не дает истинные растворы, в растворе при добавлении йода амилоза окрашивается в синий цвет.
Амилопектин имеет разветвленную структуру. Отдельные линейные участки молекулы
амилопектина содержат 20-30 остатков глюкозы. При этом формируется древовидная структура.
Амилопектин окрашивается йодом в красно-фиолетовый цвет.
Крахмал имеет молекулярную массу 105-108 Да. При частичном кислотном гидролизе
крахмала образуются полисахариды меньшей степени полимеризации – декстрины, при полном
идолизе – глюкоза.

Гликоген. Это главный резервный полисахарид высших животных и человека, построенный


из остатков D-глюкозы. Общая формула гликогена как и у крахмала (С 6Н10О5)n. Он содержится
почти во всех органах и тканях животных и человека, но наибольшее количество гликогена
обнаружено в печени и мышцах. Молекулярная масса гликогена 10 5-108 Да и более. Его молекула
построена из ветвящихся полиглюкозидных цепей, в которых остатки глюкозы соединены α-1→4-
гликозидными связями. В точках ветвления - α-1→6-связями. Гликоген характеризуется более
разветвленной структурой, чем амилопектин; линейные отрезки в молекуле гликогены включают
11-18 остатковГликоген
α-D-глюкозы.
При гидролизе гликоген, подобно крахмалу, расщепляется с образованием сначала

декстринов, затем мальтозы и глюкозы.


Инулин – полисахарид, содержащийся в клубнях и корнях артишоков, георгина и
одуванчиков. Состоит из остатков D-фруктозы (в фуранозной форме), связанных между собой
2→1-связями.

Степень полимеризации инулина равна примерно 35 моносахаридных остатков. Этот


полисахарид в отличие от картофельного крахмала легко растворяется в теплой воде.
Хитин – важный структурный полисахарид беспозвоночных животных (членистоногих). Из
него построен наружный скелет ракообразных и насекомых. Структуру хитина составляют N-
ацетил-D-глюкозаминовые звенья, соединенные β-(1→4)-гликозидными связями.
Целлюлоза (клетчатка) – наиболее широко распространенный структурный полисахарид
растительного мира. Он состоит из β-глюкопиранозных мономерных (D-глюкозы), соединенных
между собой β-(1→4)-связями. При частичном гидролизе целлюлозы образуются
целлодекстрины, дисахарид целлобиоза, а при полном гидролизе D-глюкоза. Молекулярная масса
целлюлозы порядка 106 Да. Клетчатка не переваривается ферментами пищеварительного тракта,
т.к. набор этих ферментов у человека не содержит гидролаз, расщепляющих β-связи.

Целлюлоза выполняет в организме функцию пищевых волокон.

ГЕТЕРОПОЛИСАХАРИДЫ.
Важнейшие представители гетерополисахаридов в органах и тканях животных и человека –
гликозаминогликаны (мукополисахариды). Они состоят из цепей сложных углеводов, содержащих
аминосахара и уроновые кислоты. Каждый из гликозаминогликанов содержит характерную для
него повторяющуюся дисахаридную единицу.
Мукополисахариды представляют собой желеподобные, липкие вещества. Они выполняют
различные функции, в т.ч. структурную,защитную, регуляторную и др. Мукополисахариды,
например, составляют основную массу межклеточного вещества тканей, входят в состав кожи,
хрящей, стекловидного тела глаза. В организме они встречаются в комплексе с белками
(протеогликаны и гликопротеиды) и жирами (гликолипиды), в которых на долю полисахаридов
приходится основная часть молекулы (до 90% и более).
Для организма имеют значение следующие из них.
Гиалуроновая кислота—основная часть межклеточного вещества, своего рода
«биологический цемент», который соединяет клетки, заполняя все межклеточное пространство.
Она также выполняет роль биологического фильтра, который задерживает микробы и
препятствует их проникновению в клетку, участвует в обмене воды в организме.
Хондроитинсульфаты — хондроитинсерные кислоты, служат структурными
компонентами хрящей, связок, клапанов сердца и др. Они способствуют отложению кальция в
костях.
Гепарин образуется в тучных клетках, которые встречаются в легких, печени и других
органах, и выделяется ими в кровь и межклеточную среду. В крови он связывается с белками и
препятствует свертыванию крови, выполняя функцию антикоагулянта. Кроме того, гепарин
обладает противовоспалительным действием, влияет на обмен калия и натрия, выполняет
антигипоксическую функцию.
Особую группу гликозаминогликанов представляют соединения, имеющие в своем составе
нейраминовые кислоты и производные углеводов. Соединения нейраминовой кислоты с уксусной
называются сиаловыми кислотами. Они обнаружены в клеточных оболочках, слюне и других
биологических жидкостях.
Промежуточный обмен углеводов в организме
В промежуточном обмене углеводов в организме можно выделить следующие процессы:
1. Поступление глюкозы в клетки тканей.
2. Биосинтез гликогена в печени и мышцах.
3. Распад гликогена в печени и мышцах.
4. Дихотомический путь распада глюкозы – гликолиз.
5. Апотомический путь распада глюкозы – пентозофосфатный путь (ПФП).
6. Биосинтез глюкозы из не углеводных компонентов – глюконеогенез.
7. Цикл трикарбоновых кислот (ЦТК_.
8. Окислительное фосфорилирование (ЦПЭ).
1-6 пути – это специфические пути обмена глюкозы, а 7-8 – общий путь терминального
окисления.
ВИТАМИНЫ

Витамины - это низкомолекулярные органические соединения, которые, присутствуя в


пище в небольших количествах, являются незаменимыми ее компонентами, обеспечивают
нормальное протекание биохимических и физиологических процессов путем участия в регуляции
метаболизма.
Два характерных признака, отличающих витамины от всех других органических
питательных веществ:
- витамины не включаются в структуру тканей человека и животных;
- не используются организмом в качестве источника энергии.
Многие витамины входят в состав простетических групп ферментов. В этом состоит одна
из основных причин необходимости витаминов для нормального протекания обменных
процессов. На связь витаминов с ферментами впервые указал академик Н. Д. Зеленский (1922),
т.е. витамины регулируют обмен веществ не непосредственно, а опосредованно через
ферментные системы, в состав которых они входят.
История путешествий и мореплаваний, наблюдения врачей указывают на существование
особых болезней, развитие которых непосредственно связано с неполноценным питанием, хотя
оно как будто содержало известные к тому времени питательные вещества. Некоторые болезни
носили даже эпидемический характер. Так широкое распространение в Х1Х в. получило
заболевание цинга (летальность 70-80%), а в странах Юго-Восточной Азии и Японии – болезнь
бери-бери (30% населения болели этой болезнью).
Голландский врач К. Эйкман, работая на о.Ява, где основным источником питания
являлся полированный рис, заметил, что у кур, получавших тот же полированный рис, развилось
заболевание, аналогичное бери-бери у человека. Когда Эйкман переводил кур на питание
неочищенным рисом, наступало выздоровление.
В 1912 г. польский биохимик К. Функ выделил из экстрактов оболочек риса в
кристаллическом виде вещество, которое предохраняло от развития бери-бери. Это органическое
вещество, которое содержало аминогруппу, Функ предложил назвать витаминами (от лат. vita –
жизнь), т.е. аминами жизни.

Авитаминозы – болезни, возникающие при полном отсутствии в пище или полном


нарушении усвоения какого-либо витамина.
Гиповитаминозы – недостаток поступления витаминов с пищей или неполное их
усвоение. Эта форма заболевания наиболее часто встречается у человека, только в некоторых
регионах Азии, Африки и Южной Америки, где население употребляет однообразную,
преимущественно растительную пищу, иногда встречается полный авитаминоз.
Гипервитаминозы - патологическое состояние, связанное с поступлением чрезмерно
больших количеств витаминов в организм(встречаются реже, хотя описаны гипервитаминозы А,
Д, К и др.).

Причины гипо- и авитаминозов делят на экзо- и эндогенные.


Эндогенные причины:
- недостаточное поступление витаминов с пищей, или полное их отсутствие.

Экзогенные причины:
- повышенная потребность в витамине при некоторых физиологических и
патологических состояниях (тиреотоксикоз, беременность, лактация);
- усиленный распад витаминов в кишечнике вследствие развития в нем
микроорганизмов;
- нарушение процесса всасывания витаминов в результате поражения секреторной и
моторной функции кишечника при заболеваниях пищеварительного тракта;
- болезни печени, поджелудочной железы, вызывающие закупорку общего желчного
протока и сопровождающаяся нарушением всасывания жиров, продуктов их распада
– жирных кислот и следовательно жирорастворимых витаминов.
В последние три десятилетия описано большое количество ранее неизвестных врожденных
заболеваний, клиническая картина которых напоминает типичные авитаминозы. Они развиваются
в раннем детском возрасте независимо от обеспеченности организма всеми известными
витаминами.
Витаминзависимое состояние – болезни удается излечить мегавитаминной терапией, т.е.
введением витамина в количестве 50-100 раз превышающих физиологические потребности.
Витаминорезистентные состояния – болезни не удается устранить даже путем
применения высоких доз витаминов. Заболевания протекают тяжело и часто приводят к смерти.
Например, витамин-Д-резистентный рахит, витамин-Д-зависимый рахит, пиридоксинзависимый
судорожный синдром и др.
Эти все заболевания вызваны врожденными нарушениями обмена и функции витаминов,
которые уже описаны для тиамина (В1), пиродоксина (В6), биотина (Н), фолевой кислоты (Вс),
витаминов А, Д, К, Е и др.
Причина этих заболеваний – генетические дефекты, связанные с нарушениями или
всасывания витаминов в кишечнике, или их транспорта к органам, или нарушением превращения
витаминов в коферменты (или в активные формы, в случае с вит.Д группы).
Антивитамины. К этой группе относят вещества, различными способами нарушающие
использование витаминов живой клеткой и таким путем вызывающие состояние витаминной
недостаточности.
По механизму действия все антивитамины можно разделить на две группы:
1. Вещества, вступающие с витамином в прямое взаимодействие, в результате которого
последний утрачивает свою биологическую активность. Примером может служить
авидин – белок яиц, который связывается с биотином, образуя нерастворимый
авидин-биотиновый комплекс, не всасывающийся в кишечнике. При этом развивается
авитаминоз Н.
2. Структурные аналоги витаминов, в которых та или иная функциональная группа
замещена, что приводит к потере молекулярной витаминной активности. Это частный
случай типичных антиметаболитов.

Антивитамины обычно блокируют активные центры ферментов, вытесняя из него


соответствующие производные витаминов (кофермент) и вызывает конкурентное ингибирование
ферментов. К антивитаминам относятся вещества, способные вызывать, после введения в
организм, животных классическую картину гипо- и авитаминозов.
В настоящее время антивитамины принято делить на 2 группы:
- антивитамины, имеющие структуру, сходную со структурой нативного витамина, и
оказывающие действие, основанное на конкурентных взаимоотношениях;
- антивитамины, вызывающие модификацию химической структуры витаминов или
затрудняющие их всасывание, транспорт, что сопровождается снижением или потерей
биологического эффекта витаминов

Т.о. термином «антивитамины» обозначают любые вещества, вызывающие независимо от


механизма их действия снижение или полную потерю биологической активности витамина.

Витаминоподобные вещества - разнообразные химические вещества, из которых часть


синтезируется в организме, но обладает витаминными свойствами. К ним относятся холин,
липолевая кислота, убихинон (коэнзим Q), вит.В15 и др.

Классификация витаминов
С 1956 г. принята Международная химическая номенклатура, согласно которой витамины
делятся на: 1). Растворимые в воде; 2). Растворимые в жире; 3). Витаминоподобные соединения.
Несмотря на точное установление химического строения, витамины сохранили названия
в виде букв латинского алфавита, отражающие хронологическую последовательность их
открытия. Помимо буквенного наименования в скобках дается:
1. обозначение основного биологического эффекта, иногда с приставкой «анти»,
указывающей на способность данного витамина предотвращать или устранять
развитие соответствующего заболевания
2. номенклатурное химическое название каждого витамина.

Рекомендуем Биохимическая
ая суточная функция
потребность Активная форма
Витамин для
человека,мг
Жирорастворимые витамины

2,7 Ретиналь Зрительный


А (ретинол,
процесс
антиксерофтальмический)
Д (кальциферол, 0,01-0,025 1,25 диоксихолекальци- Обмен кальция и
антирахитический) ферол фосфора
Е (токоферол, вит. Транспорт
размножения) 5 электронов (защита
- мембранных
липидов)
К (филлохинон, менахинон, 1 Перенос
антигеморрагический) - электронов
(кофактор в
реакциях
карбоксилирования.
Водорастворимые витамины Тиаминпирофосфат Декарбоксилирован
В1 (тиамин, (ТПФ) ие α-кетокислот;
антиневрический) 1,2 перенос активного
альдегида
(транскетолаза)
В2 (рибофлавин, витамин Флавинадениндинуклеоти Дыхание, перенос
роста) 1,7 д (ФАД), водорода
флавинмононуклеотид
(ФМН)
В6 (пиродоксин, Пиридоксальфасфат (ПФ) Трансаминирование
антидермический) 2 и
декарбоксилирован
ие аминокислот
В12 (кобаламин, 0,003 Дезоксиаденозил (или Кофермент ряда
антианемический) метил-) кобаламин метаболических
реакций переноса
алкильных групп;
метилирование
гомоцистеина
Вс (фолиевая кислота, 1-2,2 Тетрагидрофолевая Транспорт
антианемический) кислота одноуглеродных
групп
В3 (пантотеновая кислота, 3-5 Коэнзим А (кофермент А) Транспорт
антидерматитный) ацильных групп
РР (никотинамид, НАД, НАДФ Дыхание, перенос
никотиновая кислота, 18 водорода
антипеллагрический)
Н (биотин, антисеборейный) 0,25 Биоцитин Кофермент реакций
карбоксилирования
(транспорт СО2)
С (аскорбиновая кислота, 75 - Восстанавливающи
антискорбутный) й фактор для ряда
монооксигеназ;
гидроксилирование
прелина;
катаболизм
тирозина
Р (витамин проницаемости,
биофлавоноиды, 50 -
капилляроукрепляющий)
Витаминоподобные вещества Источники
Выделен из капустного Участие в синтезе
U (S-метилметионин,
сока. холина, метионина
противоязвенный фактор)
Обнаружен в сырых и креатина,
овощах, печени, парном бактерии
молоке используют его
также в качестве
донора метильных
групп
В15 (пангамовая кислота, 2,0 Печень, семена растений, Участие в
антианоксический) дрожжи биосинтезе холина,
метионина и
креатина, как
источник
метильных групп
Коэнзим Q (или кофермент Локализован в Обязательный
Q,КоQ, убихинон митохондриях и компонент
мембранных структурах дыхательной цепи,
бактерий участвует в пере-
носе электронов

n-аминобензойная кислота Выделен из экстракта Входит в состав


(ростостимулирующий дрожжей. молекулы фолевой
фактор) Печень, почки, мясо. кислоты.
дрожжи, меньше в
Необходима для
молоке, куриных яйцах,нормального
картофеле, хлебе, моркови
процесса
пигментации волос,
шерсти, перьев и
кожи. Оказывает
активирующее
влияние на
действие
тирозиназы –
ключевого
фермента при
биосинтезе
меланинов кожи,
Печень, мясо, молоко, определяющих ее
Инозит (инозитол) хлеб из муки грубого нормальную
помола, овощи, фрукты окраску.

При отсутствии в
пище этого
водорастворимого
фактора, помимо
остановки роста
отмечается
своеобразная
потеря шерстяного
покрова и жировая
инфильтрация
печени с
отложением
холестерина.
Биологическая роль
связана с обменом
фосфоглицеридов и
образованием
одного из наиболее
активных
Дрожжи, печень вторичных
Липоевая кислота посредников
(фактор роста внутриклеточных
молочнокислых бактерий. сигналов
Выполняет роль кофермента) (инозитол-1,4,5. –
трифосфата)
Участвует в
Печень, почки, мясо, окислительном
Холин рыбные продукты, декарбоксилирован
(синтезируется в организме в капуста ии в тканях -
достаточном количестве и не кетокислот (ПВК и
может быть истинным -кетоглутаровой)
пищевым фактором, однако в
определенных условиях – Структурный
при недостатке белка в пище- компонент
развивается вторичная фосфатидилхолина
холиновая недостаточность). (лецитина).
Является составной
частью
биологически
активного
ацетилхолина –
медиатора нервного
импульса.
Участвует в
биосинтезе
метионина,
пуриновых и
пиримидиновых
нуклеотидов,
фосфолипидов и
т.д.
Исключение холина
из пищи –
ожирение печени.

Жирорастворимые витамины

Витамины группы А (ретинол, антиксерофтальмический)

Известны 3 витамина группы А: А1, А2 и цис-форма витамина А1 (неовитамин А)


Химическая структура – циклический непредельный одноатомный спирт, состоящий из
шестичленного кольца (β-ионон), двух остатков изопрена и первичной спиртовой группы.

CH3 CH3
H3C CH3
CH=CHC=CHCH=CHC=CHCH2OH

CH3
Вит. А1 (ретинол)
Суточная потребность 2,7 мг. Провитамин – каротиноиды.
Витамин А2 отличается от витамина А 1 наличием дополнительной двойной связи в
кольце β-ионона.
При недостаточности вит. А у человека и животных наблюдается торможение роста, общее
истощение организма, специфические поражения кожи, слизистых оболочек и глаз.
Характерно поражение глазного яблока – ксерофтальмия,т.е. развитие сухости роговой
оболочки глаз (от греч. xeros – сухой, ophtalmos –глаз) вследствие закупорки слезного канала,
эпителий которого также подвергается ороговению.
Глазное яблоко не омывается слезной жидкостью, которая обладает бактерицидным
действием. В результате появляется воспаление – конъюнктивит, отек, размягчение роговицы.
К наиболее ранним и специфическим симптомам авитаминоза А (гиповитаминоза А)
относится куриная слепота (или ночная) – потеря способности различать предметы в сумерках.
Гипервитаминоз А наблюдается при употреблении в пищу мяса белого медведя, моржа,
тюленя (в них много вит. А). Характерные проявления гипервитаминоза А – воспаление глаз,
выпадение волос.

Биологическая роль
1. Вит. А участвует в регуляции проницаемости мембран;
2. Участвует в транспорте моносахаридов, необходимых для синтеза гликопротеинов;
3. Оказывает влияние на усвоение белка пищи и его обмен в организме и т.д.;
4. Участвует в окислительно-восстановительных реакциях, т.к. в молекуле вит. А
имеются двойные связи, то он образует пероксиды, повышающие скорость окисления
др. соединений;
5. Участвует в процессах фоторецепции (светоощущения). Фоточувствительный
пигмент, находящийся в сетчатке глаз – родопсин - является хромолипопротеином,
состоящим из липопротеина (опсина) и простетической группы – альдегида вит.А
(ретиналь). Связь между ними осуществляется через альдегидную группу витамина и
свободную NH2-группу белка с образованием шиффова основания. На свету
родопсин расщепляется на белок опсин и ретиналь, который из цис-формы переходит
в трансформу (транс-ретиналь). В результате происходит возбуждение зрительного
нерва. В темноте происходит обратный процесс.

Источники вит. А: печень КРС и свиней, печень морского окуня, трески, яичный желток,
молоко, масло, красномякотные овощи (морковь, томат и т.д.).
Провитамин – каротин (α-, β-, γ-каротины). Более биологически активен β-каротин,
который содержит два β-иононовых кольца и при распаде в организме из него образуются 2
молекулы вит. А).

Витамины группы Д (кальциферол, антирахитичный).

Важнейшие из кальциферолов – вит. Д2 (эргокальциферо),вит. Д3 (холекальциферол),


вит. Д4 (дигидроэкгокальциферол).
Провитамины Д2 и Д3 – соответственно эргостерин и холестерин (7-дегидрохолестерин).
Химическая структура. В основе строения лежит циклогексанпергидрофенантреновое
ядро.
Благодаря наличию холестерина и 7-дегидрохолестерина в составе липидов кожи человека
возможен синтез вит. Д3 при солнечном облучении УФ-лучами.
Недостаток вит. Д приводит к заболеванию рахит, в основе развития которого лежат
изменения фосфорно-кальциевого обмена и нарушения отложения в костной ткани фосфата
кальция. Кости становятся мягкими и под тяжестью тела принимают уродливую Щ- или Х-
образную форму.

Биологическая роль:
1. обеспечивает транспорт Са и Р через биологическую мембрану;
2. перенос ионов Са и Р через эпителиальные клетки слизистой тонкого кишечника в
процессе их всасывания;
3. обуславливает оптимальное содержание Са и Р в плазме крови, необходимое для
минерализации костной ткани и т.д.

Вит.Д выполняет свои биологические функции в организме в форме образующихся из него


активных метаболитов, в частности 1,25-диоксихолекальциферола.

Источники вит.Д – сливочное масло, яичный желток, печень, рыбий жир, подсолнечное
и оливковое масло, дрожжи.
Суточная потребность 10-25 мкг.

Витамины группы К (филлохиноны, менахиноны,антигеморрагический)


К витаминам группы К относятся два типа хинонов (производные 1,4-нафтохинона) в
боковых цепях которых находятся изопреноидные цепи.
Витамины К1 – ряда – филлохиноны;
Витамины К2 – ряда - метахиноны.
Синтетический аналог вит. К – витамин К3 (менадоин), лишен боковой цепи.
При авитаминозе вит.К появляются подкожные и внутримышечные кровоизлияния
(геморрагии), снижается скорость свертывания крови.
Авитаминоз вит.К встречается редко, т.к. смешанная пища богата вит.К (в зеленых
растениях) и кроме того, этот витамин синтезируется кишечной микрофлорой!

Биологическая роль:
1. участвует в окислительном фосфорилировании (в виде коэнзима, кофактора фермента);
2. участвует в биосинтезе факторов свертывания крови;
3. принимает участие в синтезе протромбина в печени через ферментативную систему.
Протромбин, являясь протеолитическим ферментом, расщепляет специфические
пептидные связи растворимого белка крови фибриногена с образованием нерастворимого
фиброина.

Одним из мощных антивитаминов К является природное вещество дикумарол и


синтетическое вещество варфарин, которые действуют как конкурентный ингибитор
тромбообразования т.к. эти вещества снижают свертываемость крови, их используют для лечения
болезней с повышенной свертываемостью крови.
Источники вит. К:
Растения (зеленые листья каштана, крапивы, люцерны), капуста, тыква, ягода рябины. В
животных продуктах только в печени свиньи.
Суточная потребность 1 мг + синтез кишечной микрофлорой.

Витамины группы Е (токоферол, антистерильный. Витамин размножения)


Вит.группы Е являются производными токола и токотриенола. Различные токоферолы
отличаются друг от друга числом и расположением метильных групп в бензольном кольце
(бывают α-, β- , γ-, δ-токоферолы).
С растительными продуктами человек получает достаточное количество вит.Е.
Недостаток вит. Е встречается только в тропических странах, где основной источник пищи
углеводы, а жиры употребляются в недостаточном количестве.
При недостатке вит. Е наблюдаются:
- самопроизвольные аборты;
- нарушения эмбриогенеза и дегенеративные изменения репродуктивных органов, что
приводит к стерилизации;
- мышечная дистрофия;
- дегенерация спинного мозга и т.д.

Биологическая роль:
1. являются активными природными жирорастворимыми антиоксидантами:
разрушают наиболее реактивные формы О2 и соответственно предохраняют от
окисления полиненасыщенные жирные кислоты;
2. участвуют в обмене селена, который обеспечивает защиту мембран от
разрушающего действия пероксидазных радикалов.

Источники вит. Е: растительные масла (подсолнечное, кукурузное,соевое и т.д.),салат,


капуста, семена злаковых, мясо, сливочное масло,яичный желток и т.д.
Вит. Е откладывается в организме в мышцах,жировой ткани, поджелудочной железе,
поэтому развитие авитаминоза и гиповитаминоза Е почти не встречается, даже если этот витамин
не поступает с пищей в течение нескольких месяцев.
Суточная потребность 5 мг.

Водорастворимые витамины
Витамин В1 (тиамин, антиневрический)

Первый кристаллический витамин, выделенный Функом в 1912 г.


Химическая структура: 2 кольца – пиримидиновое и тиазоловое, соединенные
метиленовой связью

CH3
CH2 N
N

CH2-CH2-OH
H3C N NH2 S
Витамин В1

Вит. В1 хорошо растворим в воде. Водные растворы тиамина в кислой среде


выдерживают нагревание до высоких температур без снижения биологичской активности. В
нейтральной и щелочной среде (особенно) вит. В1 быстро разрушается при нагревании.
При окислении В1 образует тиохром, дающий синюю флюоресценцию при УФ-
облучении. На этом свойстве тиамина основано его количественное определение.
Активная форма вит.В1 –тиаминпирофосфат (ТПФ),часто называемый тиаминфосфатом

CH3
CH2 N O O
N

CH2-CH2-O-P-O-P-OH
H3 C N NH2 S
OH OH
Если витамин В1 поступает с пищей в виде ТПФ, то пирофосфатная группа отщепляется
от него под действием кишечных пирофосфатаз.

Биологическая роль
ТПФ декарбоксилирования α-кетокислот;
1. ТПФ участвует в реакциях
2. ТПФ участвует в расщеплении и синтезе α-оксикислот (например, кетосахаров), т.е. в
реакциях синтеза и расщепления углерод-углеродных связей, находящихся в
непосредственной близости к карбонильной группе.

Тиамин-зависимые ферменты – пируватдекарбоксилаза и транскетолаза.

Авитаминоз и гиповитаминоз.
Болезнь бери-бери, нарушения функций пищеварительного тракта, изменения психики,
изменения деятельности сердечно-сосудистой деятельности, развитие отрицательного азотистого
баланса и т.д.
Источники: растительные продукты, мясо, рыба, молоко, бобовые растения – фасоль,
горох, соя и др.
Суточная потребность: 1,2-2,2 мг.

Витамин В2 (рибофлавин, витамин роста)

Кроме самого рибофлавина в природных источниках содержатся его коферментные


производные: флавинмононуклеотид (ФМН) и флавинадениндинуклеотид (ФАД). Эти
коферментные формы витамина В2 количественно преобладают в большинстве животных и
растительных тканей, а также в клетках микроорганизмов.
В зависимости от источника получения витамин В2 называли по разному: лактофлавин (из
молока), гепафлавин (из печени), вердофлавин (из растений), овофлавин (из яичного белка).

Химическая структура: в основе молекулы рибофлавина лежит гетероциклическое


соединение – изоаллоксазин (сочетание бензольного, пиразинового и пиримидинового колец), к
которому в положении 9 присоединен пятиатомный спирт рибитол. Химический синтез
рибофлавина осуществлен в 1935 г. Р.Куном.

OH OH OH

CH2-CH-CH-CH-CH2OH

H3C N N
O
9 1
2
NH
H 3C N

O
Рибофлавин

Растворы витамина В2 имеют оранжево-желтую окраску и характеризуются желто-зеленой


флюоресценцией.
Желтый цвет присущ окисленной форме препарата. Рибофлавин в восстановленной форме –
бесцветен.
В2 хорошо растворим в воде, устойчив в кислых растворах,легко разрушается в
нейтральных и щелочных растворах. В2 чувствителен к видимому и УФ-излучению, легко
подвергается обратимому восстановлению, присоединяя Н2 по месту двойной связи и
превращаясь в бесцветную лейкоформу. Это свойство витамина В2 легко окисляться и
восстанавливаться лежит в основе его биологического действия в клеточном метаболизме.

Авитаминоз и гиповитаминоз: остановка роста, выпадение волос, воспалительные


процессы слизистой оболочки языка, губ и т.д. Кроме того, общая мышечная слабость и слабость
сердечной мышцы; помутнение хрусталика (катаракта).
Биологическая роль:
1. Входит в состав флавиновых коферментов ФАД, ФМН, которые являются
простетическими группами флавопротеинов;
2. Участвует в составе ферментов при прямом окислении исходного субстрата с
участием О2, т.е. дегидрировании. К коферментам этой группы относятся оксидазы L-
и D-аминокислот;
3. В составе флавопротеинов осуществляют перенос электронов от восстановленных
пиридиновых коферментов.

Источники: дрожжи, хлеб (мука грубого помола), семена злаковых, яйца, молоко, мясо,
свежие овощи, молоко (в свободном состоянии), печень и почки (в составе ФАД и ФМН).
Суточная потребность: 1,7мг.

Витамин В6 (пиридоксин, антидермический)

Открыт в 1934 г. П. Дьерди. Впервые выделен из дрожжей и печени.


Химическая структура. Витамин В6 является производным 3-оксипиридина. Термином
«витамин В6» по рекомендации Международной комиссии по номенклатуре биологической
химии, обозначают все три производных 3-оксипиридина, обладающих одинаковой витаминной
активностью: пиридоксин (пиридоксол), пиридоксаль и пиридоксамин.

CH2-NH2
CH2OH CH=O
HO HO
HO
CH2OH CH2OH
CH2OH

N N H3C N
H3C H3C

пиридоксин пиридоксаль пиридоксамин

В6 хорошо растворим в воде и этаноле. Водные растворы весьма устойчивы по


отношению к кислотам и щелочам, но чувствительны к свету в нейтральной зоне рН.
Авитаминозы гиповитаминоз. У человека недостаточность витамина В6 проявляется в
угнетении выработки эритроцитов, дерматите, воспалительных процессах кожи, замедлении
роста животных, нарушении обмена триптофана.
Биологическая роль. Все три производные 3-оксипиридина наделены витаминными
свойствами, коферментные функции выполняют только фосфорилированные производные
пиридоксаля и пиридоксамина:

CHO CH2-NH2
HO HO
CH2O-PO3H2 CH2O-PO3H2

N H3 C N
H 3C

пиридоксаминфосфат пиридоксальфосфат

Пиридоксаминфосфат как кофермент функционирует в реакциях превращения


карбонильных соединений, например в реакциях образования 3,6-дтдезоксигексоз,входящих в
антигены, локализованные на поверхности бактериальных клеток.
Биохимические функции пиридоксальфосфата:
1. транспортная – участие в процессе активного переноса некоторых аминокислот через
клеточные мембраны;
2. каталитическая – участие в качестве кофермента в широком круге ферментативных
реакций (переаминирование, декарбоксилирование, рацемизация аминокислот и др.);
3. функция регулятора скорости оборота пиридоксалевых ферментов – удлинение
времени полураспада в тканях некоторых пиридоксальных апоферментов при их
насыщении пиридоксальфосфатом,повышающим устойчивость апоферментов к
тепловой денатурации и действию специфических протеиназ.
При недостаточности витамина В6 наблюдаются нарушения метаболизма аминокислот.
Источники: в продуктах растительного и животного происхождения (хлеб, горох, фасоль,
картофель, мясо, печень и т.д.). Он также синтезируется микрофлорой кишечника!
Суточная потребность: около 2 мг.

Витамин В12 (кобаламин,антианемический)

Кобаламины – групповое название соединений, обладающих В12-витаминной активностью.


Химическая структура. Центральной частью молекулы витамина В12 является
циклическая корриновая система, напоминающая по структуре порфирины (отличаются от них
тем, что два пиррольных кольца плотно сконденсированы друг с другом, а не соединены через
метиленовый мостик). Под плоскостью корринового кольца, в центре которого находится Со,
находится присоединенный к кобальту остаток 5-дезоксиаденозина.
Авитаминоз и гиповитаминоз. Недостаток витамина В12 приводит к развитию
злокачественной анемии, нарушению деятельности ЦУНС и резкому снижению кислотности
желудочного сока.
Для активного процесса всасывания витамина В13 в тонком кишечнике обязательным
условием является наличие в желудочном соке внутреннего фактора Касла (особого белка –
гастромукопротеина), который специфически связывает витамин В12 в особый сложный
комплекс и в таком виде всасывается в кишечнике.
Биологическая роль. Выявлены ферментные системы в состав которых в виде
простетической группы входят кобаломидные коферменты
Химические реакции, в которых витамин В12 принимает участие как кофермент, условно
делят на две группы. К первой группе относятся реакции трансметилирования, в которых
метилкобаламин выполняет роль промежуточного переносчика метильной группы (реакции
синтеза метионина и ацетата).
Вторая группа реакций при участии В12-коферментов заключается в переносе водорода в
реакциях изомеризации.
Источники: мясо, говяжья печень, почки, рыба, молоко, яйца. Главным местом
накопления витамина В12 в организме человека является печень, в которой содержится до
нескольких мг витамина.
Витамин В12 является единственным витамином, синтез которого осуществляется
исключительно микроорганизмами.
Синтезируется кишечной микрофлорой!
Суточная потребность 0,003 мг.

Витамин С (аскорбиновая кислота, антискорбутный витамин).

Химическое строение. Витамин С представляет собой лактон кислоты со структурой,


близкой структуре L-глюкозы. Благодаря наличию двух асимметрических атомов углерода в
положениях 4 и 5 аскорбиновая кислота образует четыре оптических изомера и два рацемата.

О=С О=С

НО-С О=С

НО-С О - 2Н О=С О
Н-С + 2Н Н-С
НО-С-Н НО-С-Н
СН2ОН СН2ОН
L-аскорбиновая кислота L-дегидроаскорбиновая кислота
Аскорбиновая кислота – довольно сильная кислота, ее кислый характер обусловлен
наличием двух обратимо диссоциирующих енольных гидроксилов.
Авитаминоз и гиповитаминоз.
Синтез аскорбиновой кислоты может осуществляться у всех видов животных, кроме
человека, обезьян и морских свинок.
Основными симптомы С-витаминной недостаточности: повышенная ломкость
кровеносных капилляров, общая слабость, апатия, утомляемость, снижение аппетита, задержка
роста, повышенная восприимчивость к инфекциям, болезненность десен, их отечность,
кровоточивость при чистке зубов. В далеко зашедших случаях – цинги (скорбута) нарастают
явления гингивита (изъязвление десен, расшатывание зубов).
Биологическая роль. Окислительно-восстановительные превращения витамина С играют
важную роль в биологических реакциях, протекающих с участием транспорта электронов.
Аскорбиновая кислота известна как кофактор реакции гидроксилирования пролина при синтезе
коллагена, превращений кортикостероидов и трансферрина.
Источники: продукты растительного происхождения (овощи, фрукты). Много витамина
С в перце, салате, капусте, картофеле, хрене, укропе, ягодах рябины, черной смородины и
особенно в цитрусовых (лимон). Из непищевых источников богаты витамином С шиповник, хвоя,
листья черной смородины, экстракты из которых могут полностью удовлетворить потребность
организма.
Суточная потребность: 75 мг.

Витамин Р (рутин, цитрин, витамин проницаемости)

Под термином «витамин Р», повышающим резистентность (проницаемость) капилляров,


объединяется группа веществ со сходной биологической активностью: катехины, халконы,
флавины, флавононы, флавонолы и др.
Химическая структура. В основе их структуры лежит дифенилпропановый углеродный
«скелет» флавона. Этим объясняется их общее название - «биофлавоноиды»).

OH O
O-(C12H21O9)

OH

OH O OH

Рутин

Авитаминоз, гиповитаминоз. При недостаточности биофлавоноидов или отсутствии их в


пище повышается проницаемость кровеносных сосудов, сопровождающаяся кровоизлияниями и
кровотечениями; появляется общая слабость, быстрая утомляемость и боли в конечностях.
Биологическая роль. Биофлавоноиды стабилизируют основное вещество соединительной
ткани путем ингибирования гиалуронидазы. Существует тесная функциональная связь витаминов
С и Р в окислительно-восстановительных процессах организма, образующих единую систему. На
этом основан лечебный эффект комплекса витамина С и Р, названный аскорутином.
Источники: те же растительные продукты питания (в частности, овощи и фрукты), в
которых содержится много витамина С.
Суточная потребность: не установлена.

Витамин РР (никотиновая кислота, никотинамид, ниацин,


антипеллагрический)

Химическая структура. Никотиновая кислота представляет собой соединение


пиридинового ряда, содержащее карбоксильную группу (никотинамид отличается наличием
амидной группы).
никотиновая кислота никотинамид
CONH2
COOH

N
N
Авитаминоз и гиповитаминоз
Недостаточность витамина РР вызывает заболевание пеллагрой (шершавая кожа).
Ведущий симптом болезни – дерматит. Кожа краснеет, становится шершавой, покрывается
пузырями, трещинами, на местах лопающихся пузырей остаются изъязвления. Другая группа
симптомов – тяжелый расстройства системы органов пищеварения (диарея), расстройство
нервной системы вплоть до психических заболеваний.
Биологическая роль. Витамин РР входит в состав НАД и НАДФ, являющихся
коферментами большого числа обратимо действующих в окислительно-восстановительных
реакциях дегидрогеназ
Источники: рис, хлеб, картофель, мясо, печень, почки, морковь и др.
Суточная потребность: 18 мг.-
Химия нуклеиновых кислот.

Общая характеристика нуклеиновых кислот

Нуклеиновые кислоты – это высокомолекулярные органические полимеры


(полинуклеотиды),обеспечивающие хранение и передачу генетической информации.
Были открыты в 1870 г. немецким ученым Мишером . Нуклеиновые кислоты были
открыты в ядре клетки в виде соединений с белком, отсюда и термин (от лат. nucleus – ядро).
В зависимости от химического строения и биологических функций нуклеиновые кислоты
делят на 2 большие группы;
- рибонуклеиновые кислоты (РНК);
- дезоксирибонуклеиновые кислоты (ДНК).
В клетке существует 3 основных типа РНК:
- рибосомная РНК – рРНК;
- матричная РНК – мРНК;
- транспортная РНК – тРНК.
Каждая из этих видов РНК выполняет свою специфическую роль в процессе биосинтеза белка.

Химическое строение РНК и ДНК.

Нуклеиновые кислоты состоят из мононуклеотидов. Мононуклеотиды нуклеиновых кислот в

свою очередь состоят из трех компонентов:

Нуклеиновые кислоты

Нуклеотид

Азотистое основание Углеводный компонент Фосфорная кислота

Пуриновые Пиримидиновые Рибоза Дезоксирибоза

Аденин (А) Цитозин (Ц) РНК ДНК


Гуанин (Г) Урацил (У)
Тимин (Т)
1. Углеводный компонент

В состав нуклеиновых кислот входят пентозы: рибоза и дезоксирибоза в β-D-фуранозной

форме:

HOCH2 HOCH2
OH OH
1 1
H H H H
H H H H

OH OH OH H

β-D-рибоза β-D-дезоксирибоза

2. Азотистое основание

В состав РНК и ДНК входят пуриновые и пиримидиновые азотистые основания.

Пиримидиновые азотистые основания являются производными гетероциклического

соединения пиримидина:

В составе нуклеиновых кислот обнаружены следующие основные производные пиримидина:

O
O
NH2
CH3
HN
N HN

O N
О N ОN H
Цитозин (Ц) Урацил (У) Тимин (Т)

Кроме них, в молекулах некоторых нуклеиновых кислот в незначительных количествах

встречаются и др. пиримидиновые основания: 5-метил- и 5-оксиметил цитозин, 2-тиоурацил и

др. Их называют минорными основаниями. Они защищают молекулу РНК от гидролитической

ферментации.

Пуриновые азотистые основания являются производными бициклического гетероцикла

пурина, состоящего из конденсированных пиримидинового и имидазольного колец:

N N

N N
H

Пурин

Главные пуриновые основания в составе нуклеиновых кислот:

O
NH2

N N HN N

N N NH2 N N
H H

Аденин (А) Гуанин (Г)


Найдено большое число минорных пуриновых оснований – метилированных производных

аденина и гуанина.

При соединении азотистого основания с пентозой образуется нуклеозид.

Присоединение углеводов к азотистым основаниям осуществляется через N-гликозидную

связь между первым углеродным атомом пентозы ииазотом в девятом положении у пуринов

или азотом в первом положении у пиримидинов.

При соединении нуклеозидов с фосфорной кислотой образуются нуклеотиды. Остаток

фосфорной кислоты в нуклеотидах присоединяется в третьему или пятому углеродному атому

пентозы сложноэфирной связью (чаще в 5-му).

РНК и ДНК состоят из различных нуклеотидов, отличающихся пентозой и набором азотистых

оснований:

РНК ДНК

Н3РО4 Н3РО4

Рибоза Дезоксирибоза

Азотистые основания (А, Г, Ц, У) ( А, Г, Ц, Т)

В таблице 1 представлены состав и названия нуклеозидов нуклеотидов.

Таблица1. Названия нуклеозидов и нуклеотидов.

Азотистые основания Нуклеозиды Мононуклеотиды Сокращ

енное
(основание + (нуклеозиды + Н3РО4)
обознач
углевод)
ение
Пуриновые: аденин Аденозин Аденозинмонофосфат АМФ

гуанин Гуанозин Гуанозинмонофосфат ГМФ


Пиримидиновые: УМФ

Урацил Уридин Уридинмонофосфат ЦМФ

Цитозин Цитидин Цитидинмонофосфат ТМФ

Тимин Тимидин Тимидинмонофосфат

Структура нуклеиновых кислот.


Имеются 3 уровня структуры.

Первичная структура РНК и ДНК.


Первичная структура у РНК и ДНК одинакова – это линейная полинуклеотидная цепь, в
которой нуклеотиды соединены между собой 3/5/ фосфодиэфирными связями, которые образуют
остатки фосфорной кислоты между 3 / углеродным атомом одного нуклеотида и 5 / углеродным
атомом следующего нуклеотида.
На одном конце полинуклеотидной цепи всегда есть свободный остаток фосфорной
кислоты в 5/ -положении. Этот нуклеотид обозначается как 5/ - концевой и считается началом
молекулы нуклеиновой кислоты. На другом конце цепи содержится нуклеотид со свободной 3/ -
гидроксильной группой. Это 3/ -концевой нуклеотид – конец молекулы. Никаких разветвлений в
молекулах РНК и ДНК не обнаружено.
Геном – полное количество ДНК, несущее всю генетическую информацию для данного
организма.
Вторичная структура ДНК.
Вторичная структура ДНК характеризуется правилом Э. Чаргаффа
(закономерность количественного содержания азотистых оснований):
1. У ДНК молярные доли пуриновых и пиримидиновых оснований равны:
А+ Г = Ц + Т или (А + Г)/(Ц + Т)=1.
2. В ДНК количество оснований с аминогруппами (А +Ц) равно количеству оснований с
кетогруппами (Г + Т):
А +Ц= Г + Т или (А +Ц)/(Г + Т)= 1
3. Правило эквивалентности, т.е. А=Т, Г=Ц; А/Т = 1; Г/Ц=1.
4. Нуклеотидный состав ДНК у организмов различных групп специфичен и
характеризуется коэффициентом специфичности:
(Г+Ц)/(А+Т). У высших растений и животных он меньше 1, колеблется
незначительно: от 0,54 до 0,98 (АТ-тип ДНК), у микроорганизмов он больше 1 (ГЦ-
тип ДНК).

На основании данных рентгеноструктурного анализа и правил Чаргаффа, в 1953 г. Дж.

Уотсоном и Ф.Криком предложена модель вторичной структуры ДНК в виде двойной спирали.

(см. рабочую тетрадь)


Согласно этой модели, молекула ДНК состоит из 2-х цепей, закрученных в

правовращающуюся спираль вокруг одной и той же оси. Азотистые основания находятся

внутри, а фосфорные и углеводные компоненты – снаружи.

Диаметр спирали 1,8 нм. Основания образуют прямой угол с осью спирали, расстояние между

соседними основаниями – о,34 нм. Шаг спирали 3,4 нм и содержит 10 пар оснований.

Полинуклеотидные цепи ориентированы в противоположном направлении (антипараллельны).

На одном конце спирали одна цепь имеет 5/ - конец, другая 3/ -конец.

Азотистые основания в молекуле ДНК расположены строго специфично, по принципу

комплементарности: А взаимодействует только с Т, Г с Ц, т.е. напротив аденина всегда

расположен тимин, напротив гуанина – цитозин. А-Т и Г-Ц называют комплементарными

парами оснований.

Вторичная структура ДНК стабилизируется водородными связями и гидрофобными

взаимодействиями.

Водородные связи возникают между комплементарными основаниями: между А и Т

образуются 2 водородные связи, между Г и Ц – 3 водородные связи (см. рабочую тетрадь с. ).

Водородные связи образуются между амино- и кетогруппами комплементарных оснований, а

также между атомами N и NH в положении 1 и 3 пуриновых и пиримидиновых оснований

соответственно. В этом и состоит комплементарность.

Гидрофобные взаимодействия возникают между соседними основаниями одной и той же цепи,

что способствует своеобразной укладке цепи в виде стопок.

В настоящее время обнаружено более 10 конфигураций двойной спирали ДНК. В зависимости

от степени ее гидратации различают: А-, В-, С-формы, Д-форма и т.д. с различным числом

нуклеотидов на виток и структурой.


В-форма – соответствует модели Уотсона и Крика и наблюдается при влажности 92%. В В-

форме ДНК находится, когда выполняет роль матрицы для синтеза ДНК (процесс репликации).

При относительной влажности 70% В-форма превращается в А-форму. Число оснований

на виток в ней составляет 11, основания наклонены под углом 20˚ к оси спирали, спираль

короче на 25%. В А-форме ДНК находится, когда выполняет роль матрицы при синтезе РНК

(процесс транскрипции).

При влажности 66% ДНК приобретает С-форму. В С-форме ДНК находится в хроматине, в

комплексе с белками. В ней на виток приходится 9,3 нуклеотида.

Д-форма ДНК содержит 12 нуклеотидов на 1 виток в виде левой спирали. выполняет

регуляторную функцию, контролируя экспрессию генов.

Т.о. вторичная структура ДНК динамична и способна к конформационным переходам.

Третичная структура ДНК.

Третичная структура ДНК – это спираль и суперспираль в комплексе с белками. ДНК может

существовать в линейной форме (в хромосомах эукариот) и в кольцевой (у прокариот и в

митохондриях). Спирализация характеризуется для обеих форм.

Стабилизировано сверхскрученное состояние ДНК ионными связями с гистонами.

Сначала образуются нуклеосомы (структурная единица хроматина), затем цепочка нуклеосом,

затем цепочка многократно спирализуется и в результате образуется третичная структура ДНК

(длина ДНК хромосомы человека достигает 8 см, а упаковывается так, что умещается в

хромосоме длиной 5 нм).

Структура и функции РНК.


В отличие от ДНК, молекула РНК состоит из одной полинуклеотидной цепи, которая

спирализована сама на себя, т.е. образует всевозможные «петли» и «шпильки» за счет

взаимодействий комплементарных азотистых оснований (вторичная структура). У некоторых

вирусов встречаются двуцепочечные РНК, которые несут генетическую информацию

аналогично ДНК.

Существуют:

1 – матричные РНК (мРНК);

2 – рибосомные РНК (рРНК);

3 – транспортные РНК (тРНК).

Рибосомные РНК. На долю рРНК приходится 80-90% клеточной РНК. Локализованы в

рибосомах, в комплексе с рибосомными белками. Рибосомы состоят из двух частей и

представляют собой нуклеопротеины, состоящие из рРНК и белка в соотношении 1:1 (для

эукариот) и 2:1 (для прокариот).

Биологическая роль рРНК – являются структурной основой рибосом, взаимодействует с мРНК

и тРНК в процессе биосинтеза белка, принимает участие в процессе сборки полипептидной

цепи.

У эукариот обнаружено 4 типа рРНК с различным коэф. седиментации: 18S(в малой части

рибосомы), а 28S, 5,8S и 5S (сведбергов) – в большой части рибосомы.. Они различаются

молекулярной массой (35 000-1 600 000) и локализацией в рибосомах.

Вторичная структура рРНК характеризуется спирализацией цепи самой на себя, третичная – ее

компактной укладкой.
Матричные РНК. Матричная РНК составляет 2-3% от всей клеточной РНК, синтезируется

мРНК в ядре клетки на матрице ДНК (процесс транскрипции), переписывая с нее

генетическую информацию по принципу комплементарности.

ДНК -А-Т-Г-Ц-

ДНК -Т-А-Ц-Г-

мРНК -А-У-Г-Ц-

Затем мРНК поступают в цитоплазму, соединяются с рибосомой и выполняют роль матрицы

для биосинтеза белка. Каждой аминокислоте соответствует в мРНК определенная тройка

(триплет) нуклеотидов, называемая кодоном этой аминокислоты. Последовательность кодонов

в цепи мРНК определяет последовательность аминокислот в белке. Всего может быть 64

кодона. Из них 61 кодон кодирует аминокислоты, а 3 кодона – кодоны терминаторы

(терминирующие), которые обозначают окончание белкового синтеза. Существуют также

инициирующие кодоны, которые соответствуют первой аминокислоте в белке и чаще всего

соответствуют аминокислоте метионину.

Поскольку мРНК несет наследственную информацию о первичной структуре белка, нередко ее

называют информационной РНК (иРНК). Каждый отдельный белок, синтезируемый в клетке,

кодируется определенной «своей» мРНК или ее участком. мРНК образует несколько

двуспиральных «шпилек», на концах которых располагаются знаки (например, ААУААА)

инициации (начала синтеза белка) и терминации (окончания синтеза белка).

Т.о. информация о строении белка закодирована в ДНК с помощью генетического кода,

который является линейным, непрерывным, триплетным, выражденным. Он является

универсальным.
Молекулярный вес мРНК варьирует в широких пределах от 35 000 до нескольких млн. мРНК

ранее считались короткоживущими РНК. Для микроорганизмов время жизни мРНК несколько

секунд или минут. Но для эукариот – оно может составлять от нескольких часов до нескольких

недель.

Транспортная РНК. Составляют 10-20% клеточной РНК.

Функции тРНК:

1 - связывают аминокислоты и транспортируют их в рибосому, где происходит синтез белка;

2 – кодируют аминокислоты;

3 – Расшифровывают генетический код.

Содержатся в цитоплазме. Молекулярный вес от 22 000 до 27 000. Всего существует свыше 60

тРНК.

Каждая тРНК может переносить только 1 строго определенную аминокислоту.

тРНК именуются по названию аминокислот. Например, аланиновая тРНК. тРНК, связывающие

одну и ту же аминокислоту, называют изоакцепторными и нумеруют: тРНК1вал, тРНК2вал и т.д.

тРНК содержат много минорных нуклеиновых остатков (около 10%). Они обеспечивают

защиту тРНК от действия рибонуклеаз (ферментов), специфичность взаимодействия с

переносимой аминокислотой и т.д.

Вторичная структура всех тРНК имеет форму «клеверного листа». В его составе различают:

1. акцепторный стебель – к нему присоединяется


аминокислота.
2. Псевдоуридиловая петля – используется для связи тРНК с
рибосомой.
3. Дополнительная петля – назначение неизвестно.
4. Антикодоновая петля – содержит антикодон (триплет
нуклеиновых остатков, которые комплементарны кодону
мРНК, с его помощью тРНК соединяется с мРНК);
5. Дигидроуридиновая петля – обеспечивает связывание
тРНК со специфическим ферментом (аминоацил-тРНК-
синтетазой), который соединяет аминокислоту с тРНК .
Стабилизируется вторичная структура водородными связями между комплементарными

основаниями.

Третичная структура тРНК имеет неправильную Г-образную форму. стабилизирована

водородными и др. связями.

Тема: ОБМЕН НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ И НУКЛЕОТИДОВ В ОРГАНИЗМЕ


ЧЕЛОВЕКА.

Обмен нуклеотидов в организме включает процессы анаболизма (биосинтез пуриновых —


основной и резервный путь — и пиримидиновых нуклеотидов) и катаболизма (распад
нуклеиновых кислот (НК), пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов до конечных продуктов).
Переваривание НК протекает в двенадцатиперстной кишке под влиянием ДНК-азы и РНК-азы,
выделяемых поджелудочной железой, и в тонком кишечнике под действием ферментов: 3', 5'-
фосфодиэстеразы, нуклеозидазы, нуклеотидазы, фосфатазы.
Продукты переваривания: пуриновые и пиримидиновые азотистые основания, пентозы и
фосфорная кислота — всасываются в кровь.
В норме 90% продуктов переваривания превращаются в конечные продукты: пуриновые
основания — в мочевую кислоту и мочевину, пиримидиновые основания — в мочевину, -аланин
и -кетомасляную кислоту.
Основной путь биосинтеза пуриновых нуклеотидов «заново» протекает в две стадии через
образование инозиновой кислоты.
Для биосинтеза пуриновых нуклеотидов необходимы: рибозо-5-фосфат. 5 молекул АТФ, 2
молекулы глутамина, 1 молекула глицина, 1 молекула аспартата, N 5, N10-метенил-ТГФК, Mg2+,
СО2, N10-формил-ТГФК.
В молекуле пурина 4-й и 5-й атомы углерода и 7-й атом азота имеют своим источником
глицин, 3-й и 9-й атомы азота происходят из амидной группы глутамина, 1-й атом азота — из
аспарагиновой кислоты, 2-й углеродный атом — из N10-формил-ТГФК, 8-й атом углерода — из
N5, N10-метенил-ТГФК, 6-й атом углерода — из СО2.
Резервный путь регенерации пуриновых нуклеотидов (10 — 20%) идет из свободных
пуриновых оснований: из аденина и 5-фосфорибозил-1-пирофосфата (ФРПФ) (фермент
аденинфосфорибозилтрансфераза) и из гипоксантина, гуанина и ФРПФ — под действием
фермента гипоксантин-гуанин-фосфорибозилтрансферазы (ГГФТ).
Резервный путь усилен при беременности, опухолевом росте, регенерации обширных ран,
при усилении кроветворения. У детей встречается генетический дефект, при котором фермент
ГГФТ отсутствует (синдром Леша—Нихана), что приводит к гиперурикемии, образованию
камней из мочевой кислоты и сопровождается умственной отсталостью, агрессивностью,
нарушением координации движений, судорогами, попытками нанесения себе ран.
Биосинтез пиримидиновых нуклеотидов идет в цитоплазме из NH3 (из ГЛН), СО2 с участием
АТФ через образование карбамоилфосфата под действием карбамоил-фосфатсинтетазы II.
В биосинтезе пиримидиновых нуклеотидов участвуют также 1 молекула АСП, ФРПФ и
ферменты: аспартат-карбамоилтрансфераза, дигидрооротаза, дигидрооротат-дегидрогеназа
(НАД+), оротат-фосфорибозил-трансфераза, декарбоксилаза.
Мочевая кислота относится к небелковым азотистым веществам крови. В норме
концентрация мочевой кислоты в цельной крови 0,2—0,50 ммоль/л (3—4 мг/100 мл), в сыворотке
крови 0,2—0,56 ммоль/л (5 мг/100 мл). В суточном количестве мочи содержание мочевой кислоты
в норме составляет 270—600 мг.
При подагре наблюдается повышение в 2—3 раза содержания мочевой кислоты в сыворотке
крови (гиперурикемия). Причиной повышения биосинтеза мочевой кислоты при подагре является
активация фермента ксантиноксидазы, окисляющего гипоксантин в ксантин и далее в мочевую
кислоту.
Приступы подагрического артрита обусловлены обложением уратов в суставах. Применение
аллопуринола при подагре основано на конкурентном ингибировании ксантиноксидазы.
Повышение уровня мочевой кислоты в крови может наблюдаться при заболеваниях почек,
сердечной декомпенсации, диабетической коме, при лейкозах, гемолитической анемии,
множественной миеломе, сопровождающихся усиленным распадом нуклеотидов («вторичная
подагра»).
Матричные биосинтезы включают:
1. Репликацию (снятие «копии» с ДНК),
2. Репарацию («ремонт» ДНК),
3. Транскрипцию (биосинтез м-РНК, т-РНК, и-РНК),
4. Трансляцию (биосинтез белка).
Основная схема передачи генетической информации
ДНК РНК белок
репликация транскрипция репликация

Репликация (в ядре клетки) — синтез дочерней молекулы ДНК на матрице материнской


молекулы ДНК, основанный на принципе комплементарности азотистых оснований (А=Т, ГЦ),
происходит в S-фазу клеточного цикла.
Механизм репликации — полуконсервативный. В результате репликации образуются 2 новые молекулы ДНК, в каждой из них — 1-я цепь
«материнская», 2-я — «дочерняя».

Этапы репликации:

1) инициация,
2) элонгация,
3) терминация.
Субстратами и источниками энергии, необходимыми для репликации, являются д-АТФ, д-
ГТФ, д-ЦТФ, д-ТТФ, матрицей — двухспиральная молекула ДНК.
Ферментами репликативного комплекса являются ДНК-полимераза, ДНК-лигаза,
эндонуклеаза, ДНК-раскручивающие белки.
Кофакторами служат Mg2+.
Репарация (в ядре клетки) — устранение повреждений молекулы ДНК, вызванных эндогенными и экзогенными факторами. Для репарации
необходима одна неповрежденная цепь ДНК. Этапами репарации являются:

1) узнавание места повреждения и разрыв 3'-5'-фосфодиэфирных связей,


2) удаление поврежденных мононуклеотидов,
3) биосинтез нового фрагмента по принципу комплементарности,
4) связывание нового участка ДНК со старой цепью.
Ферменты репарации: эндонуклеаза, экзонуклеаза, ДНК-полимераза репарирующая, ДНК-
лигаза.
Субстратами и источниками энергии являются д-АТФ, д-ГТФ, д-ТТФ, д-ЦТФ.
Репарация не происходит, если:
1) отсутствуют ферменты репарации или имеются в недостаточном количестве,
2) повреждаются комплементарные азотистые основания во второй цепи ДНК.
При нарушении репарации возникают наследственные заболевания, онкозаболевания,
происходит преждевременное старение клетки.

Транскрипция
Транскрипция — биосинтез молекул РНК на матрице ДНК, локализован в ядре клетки, идет
постоянно, независимо от цикла клетки.
Субстратами и источниками энергии для биосинтеза РНК являются: АТФ, ГТФ, УТФ, ЦТФ.
Ферментом транскрипции является РНК-полимераза ДНК-зависимая.

Кофакторами являются Mg2+.

Этапы транскрипции:

1) инициация,
2) элонгация,
3) терминация.
Транскрипция осуществляется по правилу комплементарности в направлении 5'-3' со
скоростью 40—50 нуклеотидов в 1 сек.
Созревание РНК (процессинг) происходит в ядре вне матрицы под действием РНК-аз, затем
зрелая РНК выходит из ядра с помощью транслоказ.

Биосинтез белка

Биосинтез белка (трансляция) протекает в полисомах и приводит к построению


полипептидной цепи из аминокислот (первичной структуры белка). Для процесса трансляции
необходимы: матрица (м-РНК), субстраты — 20 видов активированных аминокислот, энергия (1
молекула АТФ и 3 молекулы ГТФ для присоединения каждой аминокислоты), ферменты,
факторы инициации, элонгации, терминации, кофакторы Mg2+, K+, адапторные молекулы т-РНК.
Трансляция идет постоянно, усиливаясь во время митоза.
Этапами трансляции являются: инициация, элонгация, терминация.
Предварительный этап — образование активированных аминокислот с участием фермента
аминоацил-т-РНК-синтетазы, 1 молекулы АТФ, Mg2+, 61 вида т-РНК.
Инициация требует наличия инициирующего кодона АУГ, 1 молекулы ГТФ, м-РНК, факторов
инициации (IF1 IF2, IF3), Mg2+, малой и большой субъединиц рибосом, инициаторной аминоацил-
т-РНК (мет-т-РНКмет).
Элонгация требует наличия инициирующего комплекса, 2 молекул ГТФ, активированной а-а-
т-РНК, фактора элонгации (EF1 EF2, EG-транслоказа, EF—Tu, EF—Ts), Mg2+.
Для терминации необходимы терминирующие кодоны (УАА, УГА, УАГ) и рилизинг-факторы
(RF1 RF2, RS).

Регуляция транскрипции. Теория Оперона

Оперон — участок ДНК, кодирующий строение одного вида белков, содержащий


регуляторную зону, контролирующую синтез этих белков.
Регуляция транскрипции м-РНК включает индукцию и репрессию генов.
Оперон состоит из гена-регулятора, гена-промотора, гена-оператора, структурных генов.
Индукция — «включение» процесса транскрипции. Трансляция возможна, если ген-оператор
не связан с белком-регулятором. В этом случае РНК-полимераза присоединяется к гену-
промотору и начинает синтез РНК, комплементарной структурным генам (м-РНК).
Репрессия — «выключение» транскрипции, когда ген-оператор связан с белком-регулятором
и РНК-полимераза не имеет возможности присоединиться к гену-промотору.
Сродство белка-регулятора к гену-оператору может меняться при взаимодействии его с
эффекторами.
Индукторами транскрипции служат субстраты метаболических путей, репрессорами, как
правило, являются конечные продукты метаболических путей.
Роль индукторов и репрессоров могут играть гормоны.

В норме содержание общих НК в сыворотке крови взрослого человека составляет 80—100


мкг/мл. Увеличение концентрации НК в сыворотке крови свидетельствует об усилении процессов
катаболизма в клетках органов и тканей.
Тема: ЭНЕРГЕТИЧЕСКИЙ ОБМЕН. Цикл лимонной кислоты - цикл
трикарбоновых кислот (ЦТК), цикл Кребса - конечный общий путь окисления
белков, липидов, углеводов.ЦТК - амфиболический цикл.

Катаболизм белков, липидов, углеводов осуществляется в 3 этапа:


1. Переваривание и всасывание (1% энергии).
2. Межуточный обмен (специфические пути катаболизма) (29% энергии).
3. Общий конечный путь распада — терминальное окисление (70% энергии).
Специфические пути включают в себя гликолиз, -окисление ВЖК, а также
дезаминирование, переаминирование и декарбоксилирование аминокислот.
Общий конечный путь распада включает окислительное декарбоксилирование ПВК, цикл Кребса и ЦПЭ.

Окислительное декарбоксилирование ПВК протекает аэробно в матриксе митохондрий под


влиянием мультиэнзимного комплекса (3 фермента и 5 коферментов, М = 10 млн.) в 4 стадии.
Пируватдегидрогеназный комплекс присоединен к внутренней мембране митохондрий со
стороны матрикса. Суммарная реакция:

CH3
| пируватдегидрогеназный O
C=O CO2 + CH3 – C ~
SKoA
| комплекс
COOH (ПДК) ацетил - KoA
+ +
НАД НАДН + Н
ПВК

Цикл лимонной кислоты — ЦТК — цикл Кребса

Цикл лимонной кислоты представляет собой серию реакций, протекающих в митохондриях,


в ходе которых осуществляется катаболизм ацетильных групп (до 2СО 2) и образование
восстановленных эквивалентов (НАДН + Н+ и ФАДН2), являющихся субстратами (донорами
электронов) в реакциях дыхательной цепи и тесно связанного с ней аэробного
фосфорилирования.
Биохимические функции цикла Кребса:
5. Интегративная — объединяет 3 пути катаболизма белков, углеводов, липидов.
6. Катаболическая — поставляет субстраты для ЦПЭ; образует 2 молекулы СО2, изоцитрат,
-кетоглутарат, малат, 3НАДН + Н+, ФАДН2.
7. Анаболическая — промежуточные соединения цикла лимонной кислоты включаются в
следующие процессы биосинтеза:
1) глюконеогенез — превращение ПВК и оксалоацетата в глюкозу,
2) синтез ВЖК из ацетил-КоА,
3) синтез заменимых аминокислот реакциями переаминирования -кетокислот (ОАА, -
кетоглутарата, ПВК),
4) синтез пиримидиновых и пуриновых оснований,
5) синтез порфиринов из сукцинил-КоА,
6) синтез изопреноидов из ацетил-КоА,
7) синтез кетоновых тел из ацетил-КоА.
Центральная роль ацетил-КоА в метаболизме определяется тем, что, являясь продуктом
катаболизма углеводов, липидов и аминокислот, он может быть или полностью окислен в цикле
лимонной кислоты и дыхательной цепи до СО 2 и Н2О, или же использован в качестве активного
промежуточного соединения для синтеза.

Энергетическая роль ЦТК

За период каждого цикла образуется 1ГТФ, 3 НАДН + Н+ и ФАДН2, которые генерируют


образование 12 молекул АТФ (ГТФ — в субстратном фосфорилировании, а восстановленные
эквиваленты — в окислительном фосфорилировании). ЦТК — амфиболический цикл, так как он
создает окисляющиеся продукты и продукты для анаболизма.

Регуляция цикла Кребса


Лимитирующая реакция всего цикла Кребса — реакция синтеза цитрата (фермент
цитратсинтаза).
Регуляторные ферменты цикла Кребса:
1. Пируватдегидрогеназа (ингибиторы: АТФ, НАДН + Н+, цитрат, ацетил-КоА; активаторы:
АДФ, НАД+, глюкозо-6-фосфат, Са2+, Mg2+, HS-KoA, фруктозо - 1,6 - дифосфат).
2. Цитратсинтаза (ингибиторы: АТФ, НАДН+ + Н+, ВЖК, сукцинил-КоА; активаторы: НАД+,
АДФ).
3. Изоцитратдегидрогеназа декарбоксилирующая (ингибиторы: АТФ, НАДН + Н+;
активаторы: АДФ, НАД+, Мn2+).
4. -кетоглутаратдегидрогеназный комплекс (ингибиторы: АТФ, НАДН + Н+, активаторы:
АДФ, НАД+).
Пировиноградная кислота является одним из центральных метаболитов углеводного обмена.
Она образуется в процессе распада глюкозы и гликогена в тканях, при окислении молочной
кислоты, а также в результате превращений ряда аминокислот. При окислительном
декарбоксилировании ПВК образуется ацетил-КоА, который вступает в цикл Кребса.
Пировиноградная кислота является одним из основных субстратов глюконеогенеза.

Биоэнергетика. Биологическое окисление

Роль кислорода в метаболизме

Организм человека функционирует в аэробных условиях: 90% энергии он получает при


участии кислорода. Кислород выполняет две важнейшие функции в метаболизме в процессе
жизнедеятельности:
1) является конечным акцептором электронов и протонов при биологическом окислении
(оксидазный путь использования кислорода);
2) выполняет пластическую функцию: кислород встраивается в процессе микросомального
окисления в гидрофобные соединения, переводя их в гидрофильные (оксигеназный путь
использования кислорода).
Известно около 200 ферментов, использующих молекулярный кислород в качестве одного из
субстратов. Все они делятся на два класса в зависимости от того, включается кислород или нет в
другой субстрат в ходе такой реакции:
1) оксидазы: кислород не включается в субстрат, а используется как акцептор электронов.
Существует два типа оксидаз: одни образуют в качестве одного из продуктов воду, а
другие — перекись водорода:
SH2 + 1/2О2 оксидаза
  S + Н2О;
SH2 + О2  S + Н2О;
оксидаза

2) оксигеназы — кислород включается в субстрат. Существует также два типа оксигеназ:


а) монооксигеназы (или гидроксилазы) — включается только один атом кислорода:
SH2 + 1/2О2 гидроксида
  за
 H – S – OH;
б) диоксигеназа — включается два кислорода в субстрат:
SH2 + О2 

HO – S – OH.

Токсичность кислорода

Для организма человека токсичность кислорода обусловлена токсичностью его активных


форм, которые могут образовываться при переносе электронов от окисляемых субстратов на
кислород. К активным формам кислорода относятся: супероксид-ион, гидроксильный радикал,
пероксид-ион, синглетный кислород. Данные частицы представляют собой опасность для жизни
клеток вследствие повреждений, которые они способны причинять всем классам биомолекул,
особенно белкам и липидам, вызывая перекисное окисление.
В живой клетке происходит детоксикация пероксида водорода и супероксид-иона при
участии природных антиоксидантов (аскорбиновой кислоты, витамина Е, глутатиона) и
ферментов (супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы).

Макроэргические молекулы

К макроэргическим относятся соединения, при гидролизе которых выделяется энергия не


менее 7 ккал/моль. Это число — условная единица, означающая всего лишь некий уровень
отсчета, согласно которому АТФ и несколько других соединений отличаются от остальных
природных соединений. Соответственно название «макроэргический» употребляется для
объединения соединений в группу веществ макроэргических и для указания их особой важности
в переносе энергии в живой клетке.

Нуклеозидтрифосфаты

Наиболее распространенными высокоэнергетическими общими промежуточными


продуктами являются нуклеозидтрифосфаты (НТФ), которые могут передавать свою концевую
высокоэнергетическую фосфатную группу любой из многочисленных органических молекул -
акцепторов (чаще всего энергия образуется в виде АТФ). Особенность высокоэнергетических
нуклеотидов состоит в том, что они выступают в качестве универсального источника энергии для
большого числа энергозависимых реакций.
Молекула АТФ состоит из аденилатной группы и трех остатков фосфорной группы.
Значительная часть свободной энергии этой молекулы обусловлена взаимным
электростатическим отталкиванием этих фосфатных остатков аналогично взаимному
отталкиванию одноименно заряженных зарядов. Разрыв связей между остатками фосфорной
кислоты сопровождается освобождением энергии. Соединением, играющим наиболее важную
роль в клеточной энергетике, является АТФ, так как:
1. Химическая энергия запасается путем образования АТФ, сопряженного с катаболическими
реакциями расщепления.
2. Затем химически энергия утилизируется путем расщепления АТФ, сопряженного с
эндэргическими реакциями синтеза в ходе анаболизма и других процессов, требующих
затрат энергии, например активного транспорта и сокращения мышц.
Гидролиз АТФ — термодинамическая движущая сила процессов, которые сами по себе
являются термодинамически невыгодными.
АТФ и другие нуклеозидтрифосфаты ответственны за перенос энергии во многих
сопряженных реакциях. АТФ — постоянный источник энергии для клетки. Он мобилен и может
доставлять химическую энергию в любую часть клетки. Когда клетка нуждается в энергии,
единственное, что потребуется для ее получения, — это гидролиз АТФ. АДФ может быть
рефосфорилирован в АТФ в результате дыхательной активности или за счет другого
высокоэнергетического соединения, например, креатинфосфата, присутствующего в мышечных
клетках. Если весь АДФ мышечной ткани превращается в АТФ, то фосфат от АТФ переносится
на креатин с образованием креатинфосфата. При этом вновь появляется некоторое количество
АДФ, который может, присоединив фосфат, образовать АТФ. При понижении уровня АТФ
происходит обратный процесс: фосфат переносится от креатинфосфата на АДФ, и запасы АТФ
восстанавливаются.
Таким образом, АТФ играет важную метаболическую роль благодаря своему центральному
положению в клеточной активности. Он действует как связующее клеточное звено между
дыханием и процессами, требующими затраты энергии. При этом его высокоэнергетические
фосфатные группы непрерывно отщепляются и замещаются новыми.
Аргининфосфат и креатинфосфат выполняют роль своеобразных аккумуляторов химической
энергии, которые используются для быстрого фосфорилирования АТФ во время энергичного
мышечного сокращения. Их называют фосфагенами.
Ацилфосфаты — макроэргические соединения с ангидридной связью, в которых
карбонильный атом углерода ацильной группы особенно легко участвует в реакции с
нуклеофилами. Значение G = -12,8 ккал/моль.
Например, глицеро-1,3-дифосфат + НОН  глицеро-3-фосфат + Н3РО4.
Тиоэфиры играют очень важную роль в метаболизме в качестве метаболически активной
формы ацильной группы. В природе основными тиолсодержащими соединениями являются:
кофермент А, липоевая кислота, белки с -SH группой:
ацетил-КоА + НОН  ацетат + HSKoA;
G = -7,37 ккал/моль.
Восстановленные формы НАДН + Н+ и НАДФН + Н+, будучи синтезированными в клетке,
затем вновь окисляются, при этом происходит перенос электронов на кислород. Этот способ
используется в качестве основного способа, посредством которого клетка превращает
химическую энергию поступивших извне питательных веществ в утилизируемую
метаболическую энергию.
Стандартная энергия гидролиза некоторых соединений
........................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................... G,
ккал/моль.......................................................................................................................................
Нуклеозидтрифосфаты..........................................................................................................
......................................................................................................................................................... —7,3
1,3-Дифосфоглицерат............................................................................................................
......................................................................................................................................................... —11,8
Фосфоенолпируват................................................................................................................
......................................................................................................................................................... —14,8
Ацилтиоэфиры.......................................................................................................................
.........................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................—7,37
Креатинфосфат......................................................................................................................
.........................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................—10,3
Восстановленные эквиваленты (при окислении):
НАДН + Н+; НАДФН + Н+....................................................................................................
..............................................................................................................................................—52,6

Структура макроэргических соединений

1. НТФ, например ГТФ:


OH

N N

N N OH OH OH
O
C O P O P O P O
H2
O O OH
HO OH

2. 1,3-Дифосфоглицерат:
O OH
O P O
OH OH
OH
O P O
OH
3. Фосфоенолпируват:
O
OH OH
O P O
OH
4. Ацилтиоэфиры:
O
SKoA
5. Восстановленные эквиваленты, например ФМН-Н2:
OH OH OH OH
C O P O
H H2 OH
N N O

NH
N
H
O
6. Креатинфосфат:
OH
P O
NHOH
N
CH2
COOH

Оценить