Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

Pruebas Generales Para Lípidos

Sebastián Guerrero Coral, Andrés Osejo Báez
sebastiangc@unicauca.edu.co
andresos@unicauca.edu.co

*Laboratorio de Bioquímica General, Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación, Universidad del
Cauca, Popayán-Colombia.

RESUMEN: En esta practica llamada Pruebas generales para lípidos se realizo una serie
de pruebas con el fin de determinar la solubilidad de diferentes tipos de lípidos frente a
varios solventes de distinta polaridad , como también comprobar la solubilidad de varios
productos grasos los cuales se utilizaron en la practica .Para la prueba de solubilidad de
lípidos se trabajo con aceite vegetal donde se observó la relación hidrófoba que tiene con
el agua y la lecitina , ya que esta sustancia es apolar . Se pudo observar la relación
soluble e insoluble que tienes esta sustancia (aceite de oliva) con cada uno de los
solventes que se trabajó y así comprender que sustancias son polares y apolares (agua,
acetona) y (aceite, glicerina , éter) correspondientemente. También se procedió a realizar
prueba de hidrolisis de un aceite vegetal(aceite de oliva) ,con la finalidad de conocer el
numero de equivalentes de KOH que se consumió en la reacción donde al momento de
realizar la titulación se necesito de 14.5 ml de HCl para que hubiese un cambio de color
de fucsia a transparente/blanco, y finalmente por medio de una prueba de instauración
de grasas utilizando 3 muestras y finalmente para comparar se realizo con un muestra
de agua de la cual dio un color naranja muy fuerte y en ninguna de las 3 muestras
anteriores se presentó la misma coloración por ende las tres sustancias son solubles.

1. INTRODUCCIÓN
Los lípidos son moléculas insolubles en
agua y solubles en solventes orgánicos
(como el éter). Tienen tres funciones
biológicas esenciales:
– Almacenamiento de energía.
– Función estructural: forman parte de las
membranas celulares, de las vainas que
recubren los nervios, de la envuelta de
los órganos interno (Alberto Morán,
2015) 1
Es importante conocer el ácido graso, la
cual se trata de una molécula de
naturaleza lipídica formada por una larga
cadena de carbonos e hidrógenos unida
por un extremo a un grupo ácido
(carboxilo, -COOH). Se dice que
un ácido graso es saturado cuando
todos los carbonos de su cadena se unen
por enlaces simples. La fórmula básica
de una molécula completamente
saturada es CH3–(CH2)n–COOH.(Alberto
Moran, 2015).
A demás es importante conocer que los
lípidos como un conjunto muy
heterogéneo de biomoléculas cuya
característica distintiva aunque no
exclusiva ni general es la insolubilidad en
agua, siendo por el contrario, solubles en
disolventes orgánicos (benceno,
cloroformo, éter, hexano, etc.). A demás
de una de su característica básica de los
lípidos, y de la que derivan sus
principales propiedades biológicas es la
hidrofobicidad. La baja solubilidad de los
lípidos se debe a que su estructura

1
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General
química es fundamentalmente
hidrocarbonada (alifática, alicíclica o
aromática), con gran cantidad de enlaces
C-H y C-C. (Juan Gonzales, 2000)2 .
Además de realizar una prueba de
hidrolisis de un aceite vegetal
(saponificación) y la reacción consiste en
la hidrólisis en medio básico de las
grasas o lípidos, que se descomponen en
sales de potasio o sodio (jabones) y
glicerina, como se muestra a Para esta prueba se comenzó pesando
continuación:
También se tiene en cuenta el índice de
saponificación lo que relaciona la
cantidad de KOH expresado en
miligramos necesarios para saponificar
un gramo de aceite o grasa, donde
utilizamos la ecuación:
𝑒𝑞𝑢𝑖𝑣 𝐾𝑂𝐻 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜𝑠∗56
Is=
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑒𝑛 𝑔𝑟𝑎𝑚𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
Teniendo en cuenta las características
de estos se realiza pruebas con el fin de
determinar la solubilidad de diferentes
tipos de lípidos frente a varios solventes.
2. METODOLOGÍA
2.1 PARA LA PRUEBA DE
SOLUBILIDAD DE LÍPIDOS.
Se utilizó 2 ml de aceite vegetal en tres
tubos de ensayo para cada prueba y se
le adiciono 2m de éter etílico, acetona y
glicerol a cada uno de los tubos de
ensayo y se procedió a realizar
observaciones.
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Grupo 7
Luego utilizando dos tubos de ensayo
con 3ml de agua cada uno, se les
adicionó 3 gotas de aceite a cada tubo y
luego a uno de ellos se agrego dos gotas
de lecitina y así se realizaron las
correspondientes observaciones.
2.2 HIDROLISIS DE UN ACEITE
VEGETAL
0.5 gramos de grasa y luego se llevó a un
balón de 100ml.Luego se procedió a
añadir 10 ml de solución de KOH y luego
calentar sumergiendo el balón en un
vaso de precipitado previamente puesto
sobre la plancha de calentamiento.
Luego de dejar que se reduzca la grasa
se espera uno minutos y se observa la
turbidez de la solución. Luego se enfría y
se titula exceso de KOH con HCL y en
presencia de Fenolftaleína.
Para la prueba en blanco no se tuvo la
oportunidad de realizar uno para poder
comparar los datos que se obtuvieron.
2.3 PRUEBA DE INSATURACION DE
GRASAS
Como primer paso se toma dos gotas de
(Aceite vegetal, ácido oleico y colesterol)
y se las lleva a un tubo de ensayo.
Luego se agrega 1ml de cloroformo a
cada uno de los tubos con la muestra y
luego adicionar 4 gotas de agua de
bromuro y se observa y se anota los
resultados.
Luego se toma un tubo y se agrega agua
mas azul de bromuro y se observa la
coloración que toma y se realiza
observaciones para poder compararlos.
2
Informe de Laboratorio de Bioquímica General
3. RESULTADO DE DATOS Y ANALISIS
1.PRUEBA
. sustancias sean miscibles, es necesario
ACEITE: Para el aceite podemos
observar que fue soluble con dos
soluciones, pero sabemos que no es
soluble con el agua ya que el aceite es
una sustancia no polar y tiene una
densidad más pequeña. El agua y el
aceite son dos líquidos inmiscibles entre
sí, es decir que no pueden mezclarse .
La polaridad determina si una sustancia
es soluble en agua. Una sustancia polar
es una substancia que tiene dos clases
de polos, como un imán. Cuando otra
sustancia es también polar los dos polos
de las sustancias se atraen y
consecuentemente las sustancias se
mezclan. Una sustancia que se disuelve
en agua. Las sustancias que no
contienen ningún polo se llaman
substancias no polares. El aceite por
ejemplo es una sustancia no polar, por
eso el aceite no se disuelve en agua (y
por eso no se mezclan), pero para los
caso de éter y acetona se pudo observar
claramente que hubo solubilidad.
COLESTEROL: Este alcohol que se
caracteriza como esteroide y este es una
molécula de lípido se observa poca
solubilidad con el éter, e insoluble con la
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Grupo 7
glicerina y esto se da porque en la
molécula de colesterol podemos hacer
referencia a una cabeza polar, formada
por un grupo hidroxilo y una cola de tipo
apolar que se encuentra formada por un
ciclo de carbono con núcleos
condensados y sustituyentes de tipos
alifáticos. De esta manera, podemos
decir que el colesterol es una molécula
hidrofóbica, y bastante soluble en
disolventes de tipo apolar.
LECITINA: Este es un lipido de los
grupos de los saponificables y se
observo que con éter y glicerina son
solubles , pero con la acetona es
insoluble y la razón es que para que dos
que ambas sean polares o apolares, ,
esto se debe a que ambas son apolares,
, en el caso de la lecitina (apolar) y la
acetona (polar) es difícil que se mezclen
porque son diferentes y darán una
mezcla heterogénea (dos fases), para
poder mezclarlas y que den una sola
fase, es necesario el uso de una tercera
sustancia, que sea anfipática (polar y al
mismo tiempo apolar).
ACIDO OLEOICO: Esta sustancia es un
ácido graso monoinsaturado, es decir,
que tiene sólo un doble enlace en su
estructura química y en la tabla se puede
observar que con un éter y acetona se
pudo solubilizar, pero con glicerina no se
da ya que es insoluble en agua, pero
soluble en benceno, alcohol, éter y otros
disolventes orgánicos.
ACIDO PALMICO: Este compuesto
orgánico presenta solubilidad en agua y
en la acetona por lo tanto se puede decir
que es una sustancia que es polar.
Del procedimiento de agua + aceite, y del
procedimiento para agua´+ aceite +
lecitina se pudo observar.
3
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

Se necesito 14.5 ml de HCL para que haya

un cambio de color asi:

El tubo de ensayo de la derecha muestra

una coloración blanca que se presenta
muy insoluble ya que hay una gran
diferencia de las densidades entre el
agua>lecitina > aceite. Esta sustancia
heterogénea en la que se observa dos
sustancias no polares y una sustancia
polar. Estas sustancias apolares donde
sus moléculas que se producen por la
unión entre átomos que poseen igual
electronegatividad, por lo que las fuerzas V=14.5 ml HCL 5 N=5 M
con las que los átomos que conforman la
molécula atraen los electrones del enlace
que son iguales y una molécula polar
cuando uno de sus extremos está
cargado positivamente, y el otro de
manera negativa.

2. PARA LA SEGUNDA PRUEBA

KOH+HCL KCL+H2O

Muestra grasa=0.5 g Ahora restamos lo que nos dio en la

10ml KOH 1M saponificación menos lo que esta sin
Para calcular KOH inicial reaccionar.

4060mgKOH-56mg KOH=4004mg KOH

AHORA IMPLEMENTANDO LA ECUACION

DE INDICE DE SAPONIFICACION

Luego al hacer la titulación del exceso de 𝑒𝑞𝑢𝑖𝑣 𝐾𝑂𝐻 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜𝑠∗56

Is=
KOH con KCL 5N=5M 𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑒𝑛 𝑔𝑟𝑎𝑚𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

4
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

4004𝑚𝑔 𝐾𝑂𝐻 8008𝑚𝑔

IS= = 𝐾𝑂𝐻
0.5𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑔

El índice de saponificación de 8000mg/g

KOH que se han necesitado para saponificar
cada gramo de grasa.

Podemos observar que es un valor muy

grande ya que se necesita 80000 mg por
cada gramo de grasa que haya presente en
la muestra.

4. PRUEBA
En la prueba de insaturación de grasas
los datos obtenidos fueron. PRUEBA DE AGUA
MAS CUATRO GOTAS DE AZUL DE
BROMO

La prueba da positivo para todos ya que

ninguna de las otras muestras dio el mismo
color que la muestra que se realizo con la de
agua.

A=ACIDO OLEICO
B=ACEITE
C=COLESTEROL 5. CONCLUSIONES

 La naturaleza apolar de los lípidos se

debe a la presencia de residuos de
A B C ácidos grasos que contienen largas
cadenas hidrocarbonadas alifáticas
que se disolverán solo con solventes
de la misma naturaleza.
 Gracias a esta práctica entendimos
las características principales de un
lípido y como consecuencia, la forma
en que reaccionan.
 La baja solubilidad de los lípidos se
debe a que su estructura química es
fundamentalmente hidrocarbonada
(alifática, alicíclica o aromática), con
gran cantidad de enlaces C-H y C-,

6. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

5
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

A. ¿Escribir las reacciones de hidrolisis D. ¿Qué alternativas producen el

de triglicéridos en medio a) acido b) enranciamiento de un alimento?
alcalino c) enzimático R/: Las grasas y los aceites son
susceptibles a diferentes
reacciones de deterioro que
generan compuestos volátiles que
producen olores y sabores
característicos, a veces algo
desagradables, y que también
pueden reducir el valor nutritivo de
esos alimentos. Las reacciones
pueden ser de dos tipos: por un
R/:
lado, el enlace de los
triacilgliceroles puede sufrir
hidrólisis química o enzimática y,
Enzimática acido graso. por otro, los ácidos grasos
insaturados pueden sufrir
procesos oxidativos.

7. REFERENCIAS

[1](Alberto Morán, 2015). Nutrición lípidos,

recuperado de
B. ¿En qué consiste el proceso de http://www.dciencia.es/nutricion-lipidos/
saponificación? ¿cuáles son los 17 septiembre de 2018
productos de este proceso?
R/: Hidrolizar supone provocar una hidrólisis: [2] (Juan Gonzales, 2000). Biomoléculas,
es decir, desdoblar una molécula por recuperado de
intermedio del agua. Un éster, por su parte, es http://www.ehu.eus/biomoleculas/lipidos/lipi
el compuesto resultante del reemplazo, en un d1.htm
ácido, de un átomo de hidrógeno por un radical
17 de septiembre de 2018
alcohólico.
En los casos en los que para la obtención del
jabón se utiliza un glicérido o grasa neutra, se
obtiene como subproducto el alcohol llamado
glicerina, que puede dar mayor beneficio
económico que el producto principal.

C. ¿Qué factores influencian el

índice de saponificación de una
grasa?
R/: Los factores que influencian el
índice de saponificación de una grasa
es el contacto que se tiene entre la
solución y el aire ya que la solución
alcalina absorbe CO2 .

6
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos