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Evaluation of physicochemical and physical for two dairy products (yogurt and cheese)
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Universidad de las Américas Puebla; Correo: esantillan@uap.edu.mx; México
Santillán E., Revista
Vélez J.Colombiana de Investigaciones
(2019). Evaluación Agroindustriales.
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Yogurt and cheese are two dairy products with high consumption. Due to their
characteristics, they are excellent structures for nutrients incorporation, a liquid
food and a solid food. The objective of this research was to fortify a set yogurt
and a Panela cheese, with nanoparticles of iron, zinc and calcium, to study and
compare the effect of nanoparticles and conventional (micro) minerals on the
physicochemical and rheological properties, through 28 days of storage. Yogurt
pH decreased, acidity increased during storage, whereas density and moisture
did not show differences between samples and either with storage. Color varied
in yogurt with iron, and the net change of color augmented with storage for all
Abstract samples. Syneresis increased significantly in yogurt with micro-minerals and was
lower in yogurt nano-fortified, also it increased through storage time. Herschel
and Bulkley model did the best fitting for the non-Newtonian behavior of yogurt.
Yogurt with nanoparticles of Ca and Zn increased their consistency and firmness,
both parameters decreased with time; yield stress and flow index were stable during
storage, without significant change. In cheese, pH, acidity and moisture were stable
and did not change with storage. Color parameters showed variations in cheese with
iron (nano and micro), cheese with calcium and zinc did not exhibit differences
and the net change of color augmented through storage for all samples. Texture
of cheese with high level of Ca had higher hardness and lower adhesivity; during
storage a significant increase in hardness and a decrease in adhesivity was observed
for all cheeses. In general, the fortification with nanoparticles exhibited advantages
in comparison with conventional fortification.
Sin embargo el calcio, el hierro y el zinc Rojas, 2015), las nanopartículas están
pueden interactuar químicamente con diversos recubiertas con inulina. La inulina contribuye
ingredientes alimentarios, que pueden causar a que estos minerales sean más solubles y
cambios en las propiedades fisicoquímicas biodisponibles, reduciendo al mismo tiempo
importantes para la calidad. La calidad de los su reactividad. Por lo tanto, el objetivo de este
productos lácteos fortificados depende de la estudio fue determinar el efecto de la adición
fuente mineral seleccionada, la concentración de nanopartículas de fosfato de calcio, óxido de
y los efectos potenciales sobre las propiedades hierro y óxido de zinc recubiertas con inulina en
fisicoquímicas y funcionales (Fayed, 2015). un yogur de tipo asentado y en un queso fresco
Los minerales como el calcio, el hierro y tipo Panela, evaluando los posibles cambios
el zinc tienen especial importancia, ya que en las propiedades fisicoquímicas, reológicas,
cada uno de ellos se relaciona con un aspecto texturales y sensoriales inmediatamente después
concreto del crecimiento y mantenimiento de de su elaboración y durante el almacenamiento
la salud en ser humano, el calcio se relaciona en refrigeración, comparando los resultados de
con el crecimiento de la masa ósea, el hierro la adición de estos minerales en su forma directa
con el desarrollo de glóbulos rojos y tejidos o micro y con un producto control.
musculares, el zinc con el desarrollo de la masa
ósea y muscular, también está relacionado con Materiales y Métodos
crecimiento del cabello y uñas (Heaney, Rafferty,
Dowell y Bierman, 2005). Éstos minerales son Para la fortificación se utilizaron nanopartículas
absorbidos en la mucosa intestinal, lo cual está de CaHPO4, Fe2O3 y ZnO recubiertas con
fuertemente influenciado por la solubilidad inulina (Fructagave SP750, Monterrey, México)
y la biodisponibilidad de los minerales. Por y micro minerales comercialmente disponibles
lo tanto, la adición de minerales en forma de de CaHPO4, Fe2O3 y ZnO (Sigma-Aldrich,
nanopartículas puede facilitar la absorción, México). Se utilizó leche comercial líquida
permitiendo la liberación de los minerales, pasteurizada (Alpura®, México) y leche en polvo
como una opción alternativa para la fortificación desnatada (Svelty®, México) para la elaboración
en la industria alimentaria (Santillán-Urquiza, de las diferentes formulaciones de ambos
Ruiz-Urquiza, Angulo-Molina, Vélez-Ruiz productos lácteos. Microorganismos liofilizados
y Méndez-Rojas, 2017; Mehar-Afroz et Choozit® (Danisco, México) que contienen:
al., 2012). El uso de nanomateriales en la Lactobacillus delbrueckii spp. bulgaricus y
fortificación de alimentos ha experimentado un Streptococcus salivarius spp. thermophilus. Se
crecimiento significativo en los últimos años y empleó cuajo líquido estandarizado (enzimas
es muy prometedor (Santillán-Urquiza, et al., coagulantes microbianas) marca Cuamix
2017). Esta tendencia ha sido impulsada por (CuamexM.R., México). Y para el análisis de
la capacidad de estas estructuras para mejorar la digestión se utilizaron las enzimas pepsina
la biodisponibilidad y la solubilidad de los (Golden Bell, México) y pancreatina (Sigma-
ingredientes activos debido a su gran relación Aldrich, México).
superficie-volumen.
Las nanoestructuras tipo núcleo-coraza Preparación de yogur
utilizadas para la fortificación del yogur y del Para la preparación de yogur, se estandarizó
queso Panela, han sido previamente diseñadas, la leche añadiendo 6 g de leche en polvo por
preparadas y evaluadas (Santillán-Urquiza, 100 mL de leche pasteurizada. A continuación,
Arteaga-Cardona, Hernández-Herman, se aplicó un tratamiento térmico elevando la
Pacheco-García, González-Rodríguez, Coffer, temperatura de la leche a 90°C durante 20 min
Mendoza-Álvarez, Vélez-Ruiz, y Méndez- y luego enfriando hasta 40-45°C. Después de
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cinco muestras de yogur con un panel de (ANOVA). La prueba de Tukey se aplicó para
25 individuos no entrenados. La evaluación comparaciones múltiples de los valores medios.
sensorial se basó en la misma escala Análogamente, los quesos se elaboraron
hedónica de nueve puntos, de 1 a 9 (Singh y incorporando los tres minerales, de las mismas
Muthukumarappan, 2008; Dello-Staffolo dos fuentes micro y nano minerales. Las
et al., 2004). Los panelistas evaluaron las cantidades añadidas fueron 7.50 mg de Zn
muestras de queso en el séptimo día para los para micro minerales, mientras que para los
mismos atributos, color, olor, sabor, textura y nano minerales se utilizaron 120 y 240 mg de
aceptabilidad general. Utilizando en este caso Ca, 3.75 y 7.50 mg de Fe, y 3.75 y 7.50 mg
cinco formulaciones: el queso control y cuatro de Zn en 100 g de queso (Tabla 1), además del
quesos fortificados, tres con nanopartículas queso control. Todas las muestras de queso se
(Ca30N, FZ50N y Zn50N) y uno con micro analizaron el día 1, 8, 15, 22 y 29. Las variables
minerales (Zn50M). de respuesta identificadas como propiedades
fisicoquímicas, texturales y sensoriales se
Diseño experimental examinaron estadísticamente con el software
El yogur fortificado se hizo con tres Minitab (v.16, Minitab Inc., Pennsylvania,
minerales: calcio, hierro y zinc de dos fuentes EU.). El análisis estadístico se realizó mediante
diferentes: micro-minerales (convencional) y análisis de varianza (ANOVA). Y la prueba de
nanominerales (nanopartículas). Las cantidades Tukey se aplicó para comparaciones múltiples
adicionadas fueron 240 mg de Ca, 7.50 mg de Fe de los valores medios.
y 7.50 mg de Zn para microminerales, mientras
que para los nanominerales se utilizaron 240 y Discusión
120 mg de Ca, 7.50 y 3.75 mg de Fe, y 7.50 y
3.75 mg de Zn en 100 mL de yogur (Tabla 1), Caracterización de Nanopartículas
además del yogur control. Todas las muestras Las nanopartículas con el núcleo inorgánico
de yogur control y fortificado se analizaron al de Ca, Fe o Zn tuvieron un tamaño medio en el
día 0, 7, 14, 21 y 28 días de almacenamiento. rango de 50 a 80 nm y resultaron solubles en
Las cantidades del mineral adicionado fueron agua. La inulina se seleccionó como material de
calculadas en base a proporcionar una cantidad recubrimiento debido a su biocompatibilidad,
del IDR (Ingesta Diaria Recomendada) que se biodegradabilidad y bioactividad como un
consideró adecuada (15-80%). compuesto prebiótico bien conocido. Una
Las variables de respuesta identificadas imagen de las nanopartículas, obtenida por
como propiedades fisicoquímicas, reológicas microscopía electrónica de transmisión (MET),
y texturales se examinaron estadísticamente se presenta en la Figura 1. La caracterización
con el software Minitab (v.16, Minitab Inc., completa de las nanopartículas fue reportada
Pennsylvania, EU.). El análisis estadístico previamente por Santillán-Urquiza et al. (2015).
se realizó mediante análisis de varianza
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Figura 1: Micrografías obtenidas por MET: (a) CaHPO4, (b) CaHPO4 recubiertas con inulina, (c)
Fe2O3, (d) Fe2O3 recubiertas con inulina, (e) ZnO, (f) ZnO recubiertas con inulina. Elaboración
propia
Yogur Asentado comportamiento que el yogur control. Los
valores de pH mostraron una tendencia
Determinaciones fisicoquímicas en yogures significativa a disminuir (P <0.05) durante
fortificados el almacenamiento de todas las muestras. La
pH y acidez disminución del pH durante el almacenamiento
se debe a la producción de ácido láctico por
En los alimentos y particularmente en productos las bacterias presentes en el yogur. El mismo
lácteos, la determinación de acidez es muy comportamiento de disminución del pH durante
importante para expresar la influencia tanto de el almacenamiento fue reportado por El-Kholy,
los componentes y sus reacciones bioquímicas, Osman, Gouda y Ghareeb. (2011) en un yogur
como de los cambios durante su procesamiento, fortificado con hierro y leche de búfala durante
además de que permite inferir sobre la calidad diez días de almacenamiento. Los valores de
de los mismos. Los resultados de pH y acidez acidez incrementaron significativamente a lo
para yogur se incluyen en la Tabla 3, mismas que largo de 28 días de almacenamiento en todas las
no mostraron diferencias significativas entre las muestras (Tabla 3). Los valores obtenidos son
formulaciones frescas tanto con nanopartículas consistentes, pero inferiores con los observados
como con micro-minerales y no se observaron por Drago y Valencia, (2000) que reportaron
diferencias con respecto al control. No se valores de 0.80 a 1.80 g/100 mL de ácido láctico
encontraron diferencias significativas porque en productos lácteos fortificados con hierro y
los yogures fortificados tienen el mismo zinc.
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no-newtoniano en yogur adicionado con los valores más bajos de error (< 0.4) en
diferentes ingredientes. De acuerdo con los comparación con el modelo de Ley de Potencia
valores RMSE, el modelo que mejor se ajustó (> 1.0).
fue el modelo de Herschel y Bulkley, mostrando
Figura 2. Reogramas de yogur fortificado: FZ50N (●), FZ25N (▲), FZ50M (▼), Ca15N (◄),
Ca15N (►), Ca30M (♦), Zn50N (□), Zn25N (+), Zn50M (*) y control (■), (a) Día 0 (a) y (b) Día
28. Elaboración propia.
Los resultados del índice de flujo fueron de Aportela-Palacios, Sosa-Morale, y Vélez-Ruiz,
0.20 a 0.30 para el modelo de Ley de Potencia (2005) en los cuales n varió de 0.35 a 0.45 para
y de 0.22 a 0.33 para el modelo de Herschel- el yogur fortificado con calcio.
Bulkley, no mostraron diferencias significativas Los valores del coeficiente de consistencia
para ninguna de las muestras fortificadas con obtenidos con el modelo de Herschel-Bulkley al
microminerales y nanopartículas, con respecto al día 0 oscilaron entre 5.0 y 7.6 Pa sn; las muestras
control (Tabla 5). Todos los sistemas mostraron fortificadas con nanopartículas Ca30N y Zn50N
un comportamiento de reducción de corte, con mostraron una diferencia significativa (P <
índices de flujo inferiores a uno. Estos valores 0.05) y tuvieron los valores más altos de KHB
de n fueron comparables con los reportados por en comparación con las otras concentraciones y
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con el control (Tabla 6). Esto indica una mayor zinc, el aumento significativo de la consistencia
interacción, misma que puede estar asociada puede estar asociado con la interacción del zinc
con el tamaño de las nanopartículas. Puede mediante la unión a micelas de caseína y más
considerarse que el calcio Ca30N favorece específicamente al fosfato de calcio coloidal;
la interacción de nanopartículas de fosfato de lo que mejora la consistencia del yogur en
calcio con la caseína y la presencia de inulina presencia de zinc (Drago y Valencia, 2002).
promueve el aumento de la consistencia del Estas interacciones no ocurren en presencia
yogur (Sfakianakis y Tzia, 2014; Heaney et de hierro, ya que no mostró una influencia
al., 2005). En el caso del yogur fortificado con significativa (Tabla 5).
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Este coeficiente de consistencia tuvo una atribuirse a la interacción de estos minerales con
disminución significativa en todas las muestras la matriz proteica del yogur, haciéndose más
durante el almacenamiento. Esta reducción de la fuertes que las otras formulaciones y el yogur
consistencia del yogur se debe principalmente control. Los valores obtenidos en este estudio
a cambios estructurales en el gel, de acuerdo son comparables a los resultados de firmeza de
con la pérdida de firmeza o rigidez de la matriz 0.65 a 0.97 N para yogur fortificado con calcio,
proteica (Lee y Lucey, 2010). Esta tendencia reportados por Damin et al. (2009).
de KHB a través de almacenamiento también En un producto semi-sólido como el yogur,
fue reportada por Diaz-Jimenez et al. (2004) la cohesividad representa la resistencia
y Basak y Ramaswamy (1994) para un yogur del producto a una segunda deformación
bajo en grasa con fibra añadida y enriquecido con respecto a su respuesta en la primera
con pectina y concentrados de frutas, deformación. El valor de cohesividad fue mayor
respectivamente. en casi todas las muestras fortificadas con calcio,
Los resultados del índice de flujo y el el valor más alto fue para la muestra Ca30N con
esfuerzo de cedencia, durante el período de - 0.65, lo que se puede atribuir a la adición de
almacenamiento, no mostraron diferencias nanopartículas en mayor concentración. Ambos
significativas para todas las muestras. Esto parámetros texturales del yogur fortificado se
sugiere que ambos parámetros de flujo, no se determinaron durante el almacenamiento (Tabla
ven afectados por la adición de minerales ni 6). Se observó una disminución significativa en
por la presencia de inulina en las formulaciones los parámetros de firmeza y cohesividad para
analizadas. Los resultados son comparables a todas las muestras, relacionados con cambios
los reportados por Peng, Serra, Horne y Lucet en consistencia durante el almacenamiento.
(2009).
Solubilidad y evaluación sensorial
Análisis de textura Los resultados de solubilidad a través de la
Las propiedades físicas de los productos prueba de digestibilidad mostraron que las
lácteos coagulados se ven afectadas por sus nanopartículas de calcio, hierro y zinc fueron
componentes estructurales. Según Walia et más solubles que los microminerales.
al. (2009), la disposición de la red estructural Por otro lado, los resultados de las pruebas
determina tanto las características reológicas sensoriales indican que las muestras fortificadas
como las texturales de yogur y queso, y está con nanopartículas mostraron diferencia
influenciada por factores como la composición significativa, en comparación con los yogures
y los procesos de fabricación. fortificados con micro-minerales en todos los
Los resultados de la firmeza y cohesividad atributos evaluados. Y de acuerdo a lo observado
se resumen en la Tabla 6; en la cual la firmeza en la evaluación, se puede concluir que los
se determinó como la fuerza necesaria para niveles de calcio y zinc pueden ser incorporados
alcanzar una deformación dada, que es un en las muestras de yogur sin causar cambios
parámetro comúnmente evaluado para expresar significativos en la aceptación del consumidor.
la textura del yogur. La firmeza del yogur Singh y Muthukumarappan (2008) observaron
aumenta en aquellas muestras con mayor resultados similares en su estudio de yogur
concentración de minerales y principalmente fortificado con calcio.
en yogures fortificados con nanopartículas,
reflejando una estructura de gel más fuerte. Los
valores más altos de firmeza con 0.93 y 0.72 N,
correspondieron a las muestras con Ca30N y
Zn50N, respectivamente; resultados que pueden
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de 29 días en ninguna de las muestras fortificadas al reportado por Torres-Vitela et al. (2012) con
con nano y micro minerales y el queso control, 0.612 % de ácido láctico, también en queso
la acidez fue prácticamente constante (0.61 Panela.
g/100g). Este valor de acidez es comparable
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Parámetros de color
Los parámetros de color basados en la escala
de Hunter para todos los quesos se incluyen
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Analisis de perfil de textura (TPA) Zn50N) tuvieron los valores más bajos de -1.2
La evolución de las propiedades de textura a -1.3 y de -1.1 a -1.7 N-mm, respectivamente
analizadas por parámetros de TPA se muestra (Tabla 9). Los resultados obtenidos sugieren
en la Tabla 9. Los resultados para la prueba de que los quesos con nanopartículas mostraron
dureza como fuerza necesaria para alcanzar una una ventaja, ya que se considera un atributo
deformación (Castro et al., 2014) mostraron positivo que la muestra no se adhiera a los
que los quesos fortificados con nano y micro dientes y al paladar, este efecto puede ser debido
minerales de calcio con las concentraciones a que los nanominerales son más solubles en
más altas del mineral (Ca30N y Ca30M) y la comparación con los minerales micro, logrando
muestra control obtuvieron los valores más mayor estabilidad en la estructura proteica
altos de dureza de 10.6 a 16.0 N para la muestra (Santillán-Urquiza et al., 2017; Osorio-Tobón
Ca30N y de 10.2 a 17.7 N para las muestras et al., 2005).
fortificadas con micro calcio Ca30M y de 8.8 La cohesividad representa el punto límite
a 15.6 N para el control, mostrando diferencias hasta el cual puede deformarse el material antes
significativas (P < 0.05) con respecto a las de romperse (Osorio-Tobón et al., 2005). Los
muestras fortificadas con hierro y zinc (nano y resultados muestran que no hubo diferencias
micro). Esto indica que el calcio interactúa con significativas (P < 0.05) entre las muestras
la estructura proteica de caseína haciendo el fortificadas con calcio, hierro y zinc (nano y
queso más firme (Ginee et al., 2002; Ramírez- micro), ni con respecto al control (Tabla 9).
López y Vélez-Ruiz, 2012). Este comportamiento puede deberse a que los
Por otro lado, la adhesividad se considera quesos frescos no llevan a cabo un proceso
como la medida del trabajo necesario para de maduración, por lo tanto, los resultados de
vencer las fuerzas de atracción entre la superficie cohesividad para todas las muestras fortificadas
del alimento y la superficie de otros materiales y el queso control, no mostraron diferencia entre
(Castro, Novoa, Algecira y Buitrago, 2014) por las muestras frescas al día 1 y a los 29 días de
ejemplo durante la masticación la adhesividad almacenamiento con valores obtenidos de 23 a
corresponde a la fuerza requerida para retirar 26. Los resultados observados concuerdan con
el material que se adhiere al paladar durante los valores de dureza, adhesividad y cohesividad,
el consumo de alimentos. Los resultados para queso Panela también reportados por
de adhesividad mostraron que los valores Lobato-Calleros, Lozano-Castañeda y Vernon-
observados para la muestra fortificada con hierro Carter (2009) y Guerra- Martínez et al. (2012).
micro (FZ50M) fueron significativamente más Durante el almacenamiento hubo un incremento
altos (P < 0.05) en comparación con la muestra significativo de dureza de todas las muestras, lo
control, en el rango de -0.6 a -0.7 N-mm. que sugiere un reordenamiento en la estructura
Contrariamente, las muestras fortificadas con de la caseína.
nanominerales de hierro y zinc (FZ50N y
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efecto de dureza en las curvas de creep fue a que la estructura de las muestras se conservó
reportado por Osorio-Tobón et al. (2005) en un estable durante este tiempo, este efecto puede
queso Edam. estar relacionado con la estabilidad en los
Por otro lado, los resultados del porcentaje de valores de humedad, pH y acidez reportados,
deformación con respecto al tiempo para todas debido a que variaciones en el pH relacionado
las muestras analizadas de queso fortificado con con la producción de ácido láctico puede
nano y micro minerales y para el control al día desestabilizar las fuerzas iónicas que mantienen
29 fue entre 1.5 y 3 %, sin mostrar diferencias la red de caseínas, generando quesos con mayor
significativas con los valores de las curvas humedad y menos compactos, lo que pudiera
observadas al día 1 (Figura 3a). Lo que sugiere generar una diferencia en el porcentaje de
que el tiempo de almacenamiento no tuvo deformación de los quesos (Ramírez- López y
efecto en el porcentaje de deformación debido Vélez- Ruiz, 2012).
Figura 3. Curvas de creep para las muestras de queso fortificadas con am minerales y un queso
control, ( a) día 1 y (b) 29 días de almacenamiento. Elaboración propia.
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Figura 4. Curvas de relajación para quesos fortificadas con nano y micro minerales y queso
control, (a) día 1, (b) 29 días almacenamiento. Elaboración propia.
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Figura 5. Micrografias de queso Panela, (a) control, (b) fortificado con nanopartículas de calcio,
(c) fortificado con nanopartículas de hierro, (d) fortificado con nanopartículas de zinc, (e)
fortificado con micromienrales de zinc. Elaboración propia.
Figura 6. Resultados de la evaluación sensorial de quesos fortificados con calcio (Ca30N), zinc
(Zn50N y Zn50M) y hierro (FZ50N) y el control, para los atributos de color, olor, sabor, textura
y aceptación general, las muestras con letras diferentes denotan diferencias significativas (P <
0.05). Elaboración propia.
Los resultados sugieren que los quesos nanopartículas y con micro minerales respecto
fortificados con nanopartículas de zinc a una muestra control (sin minerales), se realizó
mostraron buena aceptación, lo que le brinda un el análisis de las propiedades fisicoquímicas y
valor agregado, debido a que el queso Panela es reológicas en ambos productos lácteos, tanto en
un producto con valor nutricional y ampliamente muestras frescas, como almacenadas.
consumido, pero con bajos niveles de zinc. Por El pH, la acidez, la humedad y la densidad no
otro lado, las nanopartículas de calcio y zinc se fueron significativamente diferentes, en ambos
incorporaron en las muestras de queso en niveles productos, los cambios con respecto al tiempo
de IDR de 30% para Ca y de 50% para Zn, sin fueron notables en el yogur y no en el queso.
causar cambios significativos en su aceptación. Los resultados de los parámetros de color
Los resultados de nuestra evaluación sensorial mostraron diferencias significativas sólo para
del queso Panela son similares a los reportados el yogur y el queso fortificados con hierro. La
por Escobar et al. (2012) y Jiménez-Guzmán sinéresis mostró una disminución importante
et al. (2009) para el mismo tipo de queso, aun en algunas de las muestras de yogur fortificadas
utilizando diferentes formulaciones. con nanopartículas, lo que se considera como
un valor añadido. Todos los yogures fortificados
Conclusiones y el control mostraron un comportamiento no
newtoniano, correspondiendo al modelo de
Este trabajo condujo a la preparación Herschel-Bulkley un mejor ajuste Los yogures
de un yogur y un queso fortificados con fortificados con nanopartículas de calcio y
nanopartículas, para consumo humano, que zinc mostraron diferencias significativas en
potencialmente puede contribuir con iones de parámetros como la consistencia y la firmeza
Ca (II), Fe (III) y Zn (II). Para determinar el en comparación con las muestras que contienen
efecto y las diferencias entre la fortificación con hierro y el control.
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