Análisis de las características de los diferentes

pigmentos fotosintéticos y accesorios que se

encuentran en los diferentes tipos de vegetales.
 Análisis de las características de los diferentes pigmentos
fotosintéticos y accesorios que se encuentran en los diferentes tipos
de vegetales.

ACOSTA PUSHAINA AILIN

ARIAS MARTINEZ TAIDETH

GOMEZ ARIAS VIAINYS

GUTIERREZ ROMERO SHARON

PARRA RINCONES MIMI

DOC: GUSTAVO ROHENE

UNIVERSIDAD POPULAR DE CESAR

LIC. CIENCIA NATURALES Y EDUCACION AMBIENTAL

VALLEDUPAR- CESAR

2014

INTRODUCCIÓN
La fotosíntesis es un proceso de suma importancia para la biosfera porque convierte la energía de
la radiación solar en energía química que puede ser usada por todas las formas de vida. La
fotosíntesis comprende dos reacciones globales diferenciadas. En la primera se realiza la
transducción de energía, y en la segunda la reducción y fijación del carbono. De acuerdo al primer
concepto en todos los sistemas fotosintetizadores (bacterias, algas verdes unicelulares y plantas)
los pigmentos que absorben la luz se dividen en dos grupos, los que absorben y transfieren la
energía hacia el centro de reacción y los que conforman este centro que constituyen un tipo
particular de moléculas de clorofila (Chl a P680 y Chl a P700) y que llevan a cabo la reacción
fotoquímica

Los pigmentos fotosintéticos son los únicos que tienen la capacidad de absorber la energía de la
luz solar y hacerla disponible para el aparato fotosintético. Los cloroplastos de las plantas
superiores contienen siempre varios pigmentos, clorofila a, clorofila b, algunas xantofilas y
carotinas. Todos estos pigmentos son insolubles en agua, pero se disuelven fácilmente en
algunos solventes orgánicos. Además de las clorofilas y carotenoides, muchas plantas poseen
otros pigmentos, tales como antocianos, flavonoles, etc. El grupo de los antocianos está formado
por sustancias de constitución química muy parecida, como cianina, pelargonina, delfinina, etc.
Cada una con un color un poco distinto que varía desde azul a morado o rojizo; hay también
compuestos incoloros. Por lo general, una planta contiene varios de estos pigmentos en una
mezcla difícilmente separable.

En este trabajo práctico realizaremos experimentos de extracción de diferentes pigmentos

vegetales, tales como: clorofilas a y b, xantofilas, carotenoides y pigmentos antocianicos. Se
analizaran las características de estos diferentes pigmentos fotosintéticos y accesorios que se
encuentran en los diferentes tipos de vegetales que usaremos. Luego se identificaran los
diferentes pigmentos que se encuentran en las hojas de espinaca, con el uso de un
cromatograma. Se realizara la separación de las xantofilas a partir de un extracto de espinaca. Se
determinaran las características físicas y químicas de las clorofilas y pigmentos antocianicos y por
último se explicara porque hay cambios de coloración en las flores, cuando se someten a
diferentes pH.

Esperamos que con estas aplicaciones podamos lograr los objetivos de esta práctica y conocer
de esta manera los diferentes pigmentos que se encuentran en las frutas hojas y flores de una
planta.
 OBJETIVOS
GENERAL

 Analizar las características de los diferentes pigmentos fotosintéticos y accesorios que se

encuentran en los diferentes tipos de vegetales.

ESPECÍFICOS

 Identificar los diferentes pigmentos que se encuentran en las hojas de espinaca, con el uso
de un cromatograma.
 Realizar la separación de las xantofilas a partir de un extracto de espinaca.
 Determinar las características físicas y químicas de las clorofilas.
 Determinar las características físicas y químicas de los pigmentos antocianicos.
 Explicar porque hay cambios de coloración en las flores, cuando se someten a diferentes
pH
 MARCO TEORICO

Los colores que presentan los vegetales son debidos a unos compuestos químicos llamados
pigmentos. Un pigmento es cualquier sustancia que absorbe luz. El color de un pigmento es el
resultado de la longitud de onda reflejada (no absorbida). El color que presenta un determinado
órgano vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro pigmento o la combinación
de ellos. Además, algunos de los pigmentos que condicionan el color están estrechamente ligados
a las actividades fisiológicas del propio vegetal. El color verde en los vegetales es debido a
la presencia de la clorofila, es el pigmento de todas las células fotosintéticas, absorbe todas las
longitudes de onda, excepto el verde, el cual es reflejado y percibido por nuestros ojos. Se
encuentra prácticamente en todas las plantas con semilla, helechos, musgos y algas. También
aunque aparentemente falten en algunas hojas de color rojo o amarillo, cuando se extraen las
otras sustancias colorantes de estas, puede comprobarse incluso allí la presencia de las clorofilas,
que estaban enmascaradas por los demás pigmentos. La estructura de la moléculas de clorofila
tiene dos partes: un anillo de porfirina (sustituida con pequeños grupos enlazados, sustituyentes)
y una cadena larga llamada fitol. El anillo de porfirina es un tetrapirrol, con cuatro anillos
pentagonales de pirrol enlazados para formar un anillo mayor que es la porfirina. La hemoglobina
de la sangre y otras proteínas contienen también una porfirina, que en ese otro caso constituye lo
principal de un grupo 'hemo'; y también se encuentra porfirina en la estructura de la vitamina B12.
El grupo hemo contiene un átomo de hierro (Fe); la porfirina de la clorofila lleva en lugar
equivalente un átomo de magnesio (Mg2+). La absorción de determinados picos del espectro de
radiación (ver gráfica más abajo) es una propiedad de aquellas moléculas orgánicas que
contienen dobles enlaces conjugados (dobles enlaces alternando con enlaces simples); puede
verse en las fórmulas desarrolladas contiguas que el anillo porfirínico es rico en tales enlaces.

Asociados con las clorofilas, existen también en los cloroplastos dos clases de pigmentos
amarillos y amarillo-anaranjados que son las xantofilas y carotenos. Los carotenoides son
compuestos lipídicos, aunque existen algunas excepciones, por lo que son insolubles en agua y
solubles en disolventes orgánicos como acetona, metanol, éter dietílico, hexano, cloroformo y
piridina, entre muchos otros. Debido a su carácter hidrofóbico se encuentran normalmente en
ambientes lipófilos, como en membranas, si bien su asociación con proteínas o reacciones de
glicosilación les permiten también estar presentes en medios acuosos. En relación con el papel de
los pigmentos carotenoides en membranas de distinta naturaleza, cabe señalar que los carotenos
permanecen en el interior de las mismas, mientras que las xantofilas pueden encontrarse en otras
localizaciones en las que interaccionan a través de sus grupos hidroxílicos con moléculas de
fosfolípidos. Las xantofilas son los compuestos químicos pertenecientes al grupo de
los carotenoides que poseen uno o más átomos de oxígeno en su estructura. Las xantofilas se
encuentran también de forma natural en muchas plantas, son compuestos pigmentados y
presentan también acción fotosintética. Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que
las clorofilas, proporcionan sus tonos amarillentos y parduzcos a las hojas secas.
Flavonoide: (del latín flavus, "amarillo") es el término genérico con que se identifica a una serie
de metabolitos secundarios de las plantas. Los flavonoides se clasifican, según las
isomerizaciones y los grupos funcionales que les son adicionados, en 6 clases principales: las
chalconas, las flavonas, los flavonoles, los flavandioles, las antocianinas, y los taninos
condensados. Muchas veces los flavonoides son la respuesta adaptativa de las plantas a la
intensa radiación ultravioleta. Estos componentes protegen y protegerían a las plantas de los
nocivos efectos de estos rayos solares. Otras veces estos componentes presentan unos sabores
desagradables por lo que constituirían una ventaja de las plantas sobre los animales herbívoros.

Las antocianinas son pigmentos hidrosolubles que se hallan en las vacuolas de las células
vegetales y que otorgan el color rojo, púrpura o azul a las hojas, flores y frutos. Desde el punto de
vista químico, las antocianinas pertenecen al grupo de los flavonoides y son glicósidos de las
antocianinas, es decir, están constituidas por una molécula de antocianina, que es la aglicona, a
la que se le une un azúcar por medio de un enlace glucosídico. Sus funciones en las plantas son
múltiples, desde la de protección de la radiación ultravioleta hasta la de atracción de insectos
polinizadores. La estabilidad de las antocianinas está determinada por el grado de oxidación, la
temperatura, la fuerza iónica, la acidez y la interacción con otros radicales y moléculas complejas.
moléculas en las que se produce el efecto batocrómico, que consiste en que al cambiar la acidez,
es decir el pH, se pasa del rojo anaranjado en condiciones ácidas, como el de la pelargonidina, al
rojo intenso-violeta de la cianidina en condiciones neutras, y al rojo púrpura-azul de la delfinidina,
en condiciones alcalinas. El pH tiene efecto en la estructura y la estabilidad de las antocianinas.
La acidez tiene un efecto protector sobre la molécula. En soluciones acuosas a valores de pH
inferiores a 2, básicamente la totalidad del pigmento se encuentra en su forma más estable de ion
oxonio o catión flavilio de color rojo intenso. A valores de pH más altos ocurre una pérdida del
protón y adición de agua en la posición 2, dando lugar a un equilibrio entre la pseudobase carbinol
o hemicetal y la forma chalcona, o de cadena abierta. Tanto el hemicetal como la chalcona, son
formas incoloras y bastante inestables. A valores de pH superiores a 7 se presentan las formas
quinoidales de color púrpura que se degradan rápidamente por oxidación con el aire.8 7
Los incrementos de la temperatura dan como resultado la pérdida del azúcar glicosilante en la
posición 3 de la molécula y la apertura de anillo con la consecuente producción de chalconas
incoloras.
Estructura

La delfinidina es una antocianidina, uno de los principales pigmentos de las plantas y también un
antioxidante. La delfinidina brinda colores azules a las flores, como el caso de las violetas (Viola) y
el delfinium (Delphinium). Además provee el color azul-rojo de las uvas de la variedad Cabernet
Sauvignon.3 La delfinidina, como casi todas las demás antocianidinas, es sensible a la acidez
(pH) del medio, y cambia de color desde el azul en medios básicos a rojo en soluciones ácidas.
La Peonidina es una antocanidina y en primer lugar un pigmento de las plantas. La Peonidina
prove a las flores el color purpura-roja. Como la mayoría de las antocianidinas, es sensible al pH y
cambia su color de rojo al azul cuando su valor de pH sube. Esto se debe a que las antocianidinas
son unos cromóforos altamente conjugados. Cuando el pH cambia se ve alterado el grado de la
extensión de la conjugación (casi el doble), que también altera la longitud de la onda de la energía
luminosa absorbida por la molécula. (Las antocianidinas naturales son más estables en un
medioambiente de pH bajo; a pH 8.0 la mayoría se convierte incoloro.) A un pH 2.0, la peonidina
posee un color rojo cereza; a un pH 3.0 rosa amarillento; a un pH 5.0 un morado-rojo como la uva
y a un pH 8.0 un azul profundo; a diferencia de muchos anthocyanidinas, la peonidina sin
embargo es más estable con un pH alto.
Las Antoxantinas son un tipo de pigmentos Flavonoide, característicos de las plantas. Son
pigmentos solubles en agua con un rango de color que va desde el blanco o incoloro, hasta el
crema o amarillo, a menudo en los pétalos de las flores. El color de las antoxantinas es
generalmente blanco en medio ácido y amarillo en un medio alcalino. Estos pigmentos son muy
susceptibles a cambios en el color con minerales y iones metálicos, similar a lo que sucede con
las Antocianinas
REACCIONES ANTOCIANINAS

Medio Acido, Básico

Con glucosa

Con agua
Al calor
Cuando se somete a altas temperaturas, en presencia de azucares no hay cambios

Las betalaínas son metabolitos secundarios de las plantas nitrogenados que actúan como
pigmentos rojos y amarillos. Están presentes solamente en el taxón Caryophyllales excepto
Caryophyllaceae y Molluginaceae En contraste, la mayoría de las demás plantas poseen
pigmentos que son antocianinas (que pertenecen al grupo de los flavonoides). Las betalaínas y
las antocianinas son mutuamente excluyentes, por lo que cuando se encuentran betalaínas en
una planta, estarán ausentes las antocianinas, y viceversa. Uno de los problemas mayores que
tienen los colorantes naturales que se encontraron hasta el momento es su baja estabilidad. Por
ejemplo, en el caso de pigmentos hidrosolubles, las antocianinas han demostrado ser muy lábiles
en medio ácido, hidrolizándose rápidamente. En el caso de las betalaínas, al ser ionizables en
medio ácido, sufren cambios de color tanto a un pH por debajo de 3.5 pero no se hidrolizan por lo
cual se pueden utilizar para alimentos ácidos. Su máxima estabilidad está entre pH 5 y 6.
La Betanina también llamada betacianina, rojo remolacha ó colorante es una sustancia que
consiste en el extracto acuoso de la raíz de la remolacha roja Beta vulgaris. Se extrae
generalmente tras la cocción en agua, y presenta un color rosado. Este extracto es una mezcla
muy compleja de la que aún no se conocen todos sus componentes. El color de betanina depende
del pH; entre cuatro y cinco es brillante de color rojo azulado, convirtiéndose en azul-violeta
medida que aumenta el pH. Una vez que el pH alcanza niveles alcalinos la betanina se degrada
por hidrólisis, lo que resulta en un color amarillo-marrón. Los pigmentos presentes se conocen
colectivamente como betalaínas y se puede dividir en dos clases, los betacianinas rojas y
amarillas betaxantinas, ambos son muy solubles en agua.

Efecto batocrómico: En Física, se denomina efecto batocrómico o desplazamiento batocrómico

al fenómeno que se verifica cuando la longitud de onda de absorción de una sustancia se
desplaza hacia longitudes de onda más grandes o de menor energía por efecto del solvente o por
sustituyentes; también se conoce como corrimiento hacia el rojo.1 Un ejemplo de efecto
batocrómico, descrito por primera vez por el científico alemán Richard Willstätter (1872-1942) lo
ofrecen las antocianinas. Estos pigmentos vegetales cambian de color de acuerdo a la acidez (al
pH) de la solución en la que se encuentran. Así, el color rojo anaranjado de la pelargonidina en
condiciones ácidas vira al rojo intenso-violeta de la cianidina en condiciones neutras y al rojo
púrpura-azul de la delfinidina en condiciones alcalinas

TÉCNICAS DE SEPARACIÓN DE PIGMENTOS

Separación de pigmentos vegetales por separación simple

En el método de separación simple, se utiliza como extractante el alcohol etílico y como separador
el tetracloruro de carbono. Estos dos solventes orgánicos responden en forma diferente a los
pigmentos clorofílicos como así también a sus diferencias físicas que hacen que sean dos líquidos
no miscibles y con diferente densidad.

clorofila a + clorofila b + Tetracloruro de carbono

xantofilas y carotenoides + Alcohol etílico

Separación de pigmentos vegetales por cromatografía sobre papel.

La cromatografía en papel es un método usado principalmente para la separación de los

componentes de una muestra, en el cual los componentes son distribuidos entre dos fases, una
de las cuales es estacionaria o fija, mientras que la otra es móvil.
La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel de filtro. La muestra se
deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la solución y evaporando el disolvente.
Luego el disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad. Esto es, se
coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra del lado de abajo dentro de un recipiente
que contiene fase móvil en el fondo. Se utiliza como extractante la acetona y como separador el
éter de petróleo.
Después de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al extremo se retira
el papel y seca. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se
verán las manchas de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el
papel se somete a procesos de revelado.
Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografía, vemos cuatro bandas o zonas que
corresponden a los distintos pigmentos fotosintéticos presentes en las hojas. Según su grado de
solubilidad con el éter de petróleo se reconocen estas bandas y en este orden de abajo hacia
arriba: clorofila b, clorofila a, xantofila, carotenos.
Cromatografía: La cromatografía es un método físico que se utiliza para separar e identificar
compuestos. El fundamento de esta técnica consiste en que cualquier sustancia, al ser disuelta en
dos disolventes distintos no miscibles, se reparte entre ambos atendiendo a su solubilidad. La
relación entre las solubilidades de dicha sustancia en cada uno de los disolventes se
denomina Coeficiente de Reparto.
Si uno de los disolventes se mantiene fijo (Fase Estacionaria) se puede hacer desplazar el otro
disolvente (Fase Móvil) sobre el primero. Las sustancias a cromatografiar se verán sometidas a
una distribución entre las fases estacionaria y móvil de modo que las más solubles en la fase
móvil avanzarán más que las que sean retenidas por la fase estacionaria.
De acuerdo con el mecanismo que produce la separación, se puede hablar de distintos tipos de
cromatografía: cromatografía de reparto y cromatografía de adsorción.

CARACTERIZACION DE LOS ÁCIDOS Y LAS BASES

La importancia de los ácidos y las bases no es exclusivamente teórica. Ambas sustancias tienen
una función esencial en la industria química y en casi todo proceso biológico, lo mismo en la
célula que en el organismo.Arrhenius define a los ácidos y las bases así:
Los ácidos son sustancias que en disolución acuosa producen iones hidronio (H 3O+), y las bases
a su vez producirán iones hidroxilo (OH–).
Propiedades y características de los ácidos
 El ion hidronio (H3O+) es constituyente especial de todos ellos.
 Poseen un sabor agrio (como muchos productos químicos son venenosos, nunca debe
utilizarse el sabor para identificar a las sustancias).
 Reaccionan con algunos metales desprendiendo hidrógeno (como el Zn).
 Cambian de color ciertas sustancias llamadas indicadores; por ejemplo: el anaranjado de
metilo se torna rojo; en una disolución de azul de tornasol se colorean de rojo, y con la
fenolftaleína no producen coloración alguna.
 Conducen la electricidad en disolución acuosa (son electrólitos).
 Generalmente son corrosivos (reaccionan con los metales).
 Reaccionan con las bases produciendo sales y agua (reacción de neutralización).
Los ácidos se dividen en dos grandes grupos:
 No contienen oxígeno en su molécula Contienen oxígeno en su molécula
HF (ácido fluorhídrico) H2SO4 (ácido sulfúrico)
HCI (ácido clorhídrico) H2PO4 (ácido fosfórico)
HBr (ácido bromhídrico) HNO3 (ácido nítrico)
HI (ácido yodrhídrico) HCIO3 (ácido clórico)

Propiedades y características de las bases

 El ion hidroxilo (OH–) las caracteriza ya que se encuentra presente este ion.
 Presentan sabor a lejía (amargo como el jabón).
 Son resbaladizas al tacto.
 Con el indicador anaranjado de metilo aparece coloración amarilla, la fenolftaleína presenta
coloración roja intensa y con el tornasol cambia a color azul.
 Conducen la corriente eléctrica en disolución acuosa (son electrólitos).
 Generalmente son corrosivas.
 Poseen propiedades jabonosas.
 Disuelven los aceites y el azufre en agua.
 Reaccionan con los ácidos para producir sales y agua (reacción de neutralización).
Ejemplos de bases o álcalis son:

NaOH hidróxido de sodio (sosa cáustica) KOH hidróxido de potasio (potasa)

Ca(OH)2 hidróxido de calcio (cal apagada) Mg(OH)2 hidróxido de magnesio
Algunos ejemplos de ácidos y bases que se encuentran en nuestro entorno o nuestro cuerpo son:
las bebidas refrescantes y el jabón para ropa.

Fuerza de los ácidos y las bases

No siempre los ácidos y las bases se ionizan por completo en una disolución acuosa. Un ácido,
como el sulfúrico, que se disocia completamente en iones positivos (H 3O+) y iones negativos
(SO4–2), es un ácido fuerte. Una base como el hidróxido de sodio o sosa cáustica que se disocia
completamente en iones positivos (Na+) y negativos (OH–) es una base fuerte.
Existen ácidos y bases que sólo se disocian ligeramente en una disolución acuosa; tal es el caso
del hidróxido de amonio (base) que se ioniza de forma parcial en iones amonio (NH 4+) y iones
hidroxilo (OH–), la mayor parte de las moléculas de hidróxido de amonio permanecen sin
disociarse; por lo tanto, es una base débil. El ácido acético sólo se ioniza ligera o parcialmente en
una disolución, razón por la cual es un ácido débil.
Un ácido o base débil es aquella sustancia que no está totalmente disociada en una disolución
acuosa. Algunos ejemplos de ácidos y bases, fuertes y débiles son:
 Ácidos fuertes Ácidos débiles
HCIO4 ácido perclorico H2C O3 ácido carbónico
HCI ácido clorhídrico H2S ácido fsulfhídrico
H2SO4 ácido sulfúrico HC3–COOH ácido acético (compuesto orgánico)
HNO3 ácido nítrico HBrO ácido hipobromoso

Bases fuertes Bases débiles

NaOH hidróxido de sodio (sosa cáustica) NH4OH hidróxido de amonio
KOH hidróxido de potasio (potasa) NH2OH hidroxilamina
LiOH hidróxido de litio Ca(OH)2 hidróxido de calcio (cal apagada)

Hidrolisis acido base

En la hidrólisis ácido-base el agua se divide en el ion hidroxilo OH- y un ion H+ (el cual es
inmediatamente hidratado para formar el ion hidronio H3O+). Esta reacción sucede
espontáneamente en agua pura, y en el equilibrio la concentración de iones hidronio en agua es
[H3O+] = 1 × 10–7 M. Esta es también la concentración de iones hidroxilo puesto que cada
molécula de agua que se divide genera un hidroxilo y un hidronio. Dicho equilibrio se denomina
autoprotólisis:

pH

El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolución. El pH indica la concentración de

iones hidronio [H3O+] presentes en determinadas sustancias. La sigla significa ‘potencial
hidrógeno’, ‘potencial de hidrógeno’ o ‘potencial de hidrogeniones. En disolución acuosa, la escala
de pH varía, típicamente, de 0 a 14. Son ácidas las disoluciones con pH menores que 7 (el valor
del exponente de la concentración es mayor, porque hay más iones en la disolución) y alcalinas
las de pH superiores a 7. Si el disolvente es agua, el pH = 7 indica neutralidad de la disolución. El
valor del pH se puede medir de forma precisa mediante un potenciómetro, también conocido
como pH-metro o también se puede medir también de manera aproximada empleando
indicadores: ácidos o bases débiles que presentan diferente color según el pH. Generalmente se
emplea papel indicador, que consiste en papel impregnado con una mezcla de indicadores
cualitativos para la determinación del pH. El indicador más conocido es el papel de litmus o papel
tornasol.
La determinación del pH es uno de los procedimientos analíticos más importantes y más usados
en ciencias tales como química, bioquímica y química de suelos. El pH determina muchas
características notables de la estructura y de la actividad de las biomacromoléculas y, por tanto,
del comportamiento de células y organismos.
pKa
Es la fuerza que tienen las moléculas de disociarse (es el logaritmo negativo de la constante de
disociación ácida de un ácido débil).

Una forma conveniente de expresar la relativa fortaleza de un ácido es mediante el valor de su

pKa, que permite ver de una manera sencilla en cambios pequeños de pK a los cambios asociados
a variaciones grandes de Ka. Valores pequeños de pKa equivalen a valores grandes de
Ka (constante de disociación) y, a medida que el pKa decrece, la fortaleza del ácido aumenta.
Un ácido será más fuerte cuanto menor es su pKa y en una base ocurre al revés, que es más
fuerte cuanto mayor es su pKa.
Esas constantes de disociación no son fijas, dependen de otras variables. Por ejemplo, la
constante de disociación cambia a temperaturas diferentes. Sin embargo, mantiene su valor a la
misma temperatura, ante cambios de la concentración de alguna de las especies o incluso ante la
acción de un catalizador.
Ka
Una constante de disociación ácida, Ka, (también conocida como constante de acidez, o
constante de ionización ácida) es una medida cuantitativa de la fuerza de un ácido en solución. Es
la constante de equilibrio de una reacción conocida como disociación en el contexto de las
reacciones ácido-base. El equilibrio puede escribirse simbólicamente como:
HA A- + H+
Donde HA es un ácido genérico que se disocia dividiéndose en A-, conocida como base
conjugada del ácido, y el ion hidrógeno o protón, H+, que, en el caso de soluciones acuosas,
existe como un ion hidronio solvatado. En el ejemplo que se muestra en la figura, HA representa
el ácido acético, y A- el ion acetato. Las especies químicas HA, A- y H+ se dice que están en
equilibrio cuando sus concentraciones no cambian con el paso del tiempo.

Teoría de brönsted-lowry.

• ÁCIDO: “Sustancia que en disolución cede H”.

• BASE: “Sustancia que en disolución acepta H+”.

Par Ácido/base conjugado

Siempre que una sustancia se comporta como ácido (cede H+) hay otra que se comporta como
base (captura dichos H+).
Cuando un ácido pierde H+ se convierte en su “base conjugada” y cuando una base captura H+
se convierte en su “ácido conjugado”.

Ejemplo de disociación de un ácido:

• HCl (g) + H2O (l) → H3O+(ac) + Cl– (ac)

En este caso el H2O actúa como base y el HCl como ácido, que al perder el H+ se transforma en
Cl– (base conjugada).

Ácido acético

El ácido acético, ácido metilencarboxílico o ácido etanoico, se puede encontrar en forma

de ion acetato. Éste es un ácidoque se encuentra en el vinagre, siendo el principal responsable de
su sabor y olor agrios. Su fórmula es CH3-COOH (C2H4O2). De acuerdo con la IUPAC se
denomina sistemáticamente ácido etanoico. En disolución acuosa, el ácido acético puede perder
el protón del grupo carboxilo para dar su base conjugada, el acetato. Su pKa es de 4,8 a 25 °C, lo
cual significa, que al pH moderadamente ácido de 4,8, la mitad de sus moléculas se habrán
desprendido del protón. Esto hace que sea un ácido débil y que, en concentraciones adecuadas,
pueda formar disoluciones tampón con su base conjugada.

Ácido clorhídrico

También llamado ácido muriático, espíritu de sal, ácido marino, ácido de sal, entre otros. Es una
disolución acuosa del gas cloruro de hidrógeno (HCl). Es muy corrosivo y ácido. Se emplea
comúnmente como reactivo químico y se trata de un ácido fuerte que se disocia completamente
en disolución acuosa. Una disolución concentrada de ácido clorhídrico tiene un pH inferior a 1;
una disolución de HCl 0,1 M da un pH de 1. El cloruro de hidrógeno es un ácido monoprótico, lo
que significa que sólo puede liberar un ion H+ (un protón). En soluciones acuosas, este ion se une
a una molécula de agua para dar un ion oxonio, H 3O+. Los ácidos monopróticos tienen una
constante de disociación ácida, Ka, que indica el nivel de disociación en agua.

Hidróxido de amonio

El hidróxido de amonio o agua de amoniaco es una solución de amoníaco en agua.

Técnicamente, el término "hidróxido de amonio" es incorrecto debido a que dicho compuesto no
es aislable (solo lo encontramos como ion amonio e ion oxidrilo, es decir ya disociado) En
soluciones acuosas, el amoníaco desprotona una pequeña fracción del agua para dar iones de
amonio e hidróxido según el siguiente equilibrio químico

El amoniaco forma el ion amonio, al reaccionar con agua.

La formación del ion amonio NH4 explica las propiedades básicas del amoniaco. La reacción del
amoniaco con el agua produce iones hidróxido, los cuales, explican el sabor y demás propiedades
de las soluciones alcalinas. La reacción directa entre una molécula de amoniaco y un proton para
dar el ion amonio muestra como el amoniaco puede destruir las propiedades acidas de cualquier
solución que contiene iones hidrogeno.

Hidróxido de sodio
El hidróxido de sodio (NaOH) o hidróxido sódico, también conocido como soda cáustica o sosa
cáustica, es un hidróxido cáustico usado en la industria (principalmente como una base química).
A temperatura ambiente, el hidróxido de sodio es un sólido blanco cristalino sin olor que absorbe
la humedad del aire (higroscópico). Es una sustancia manufacturada. Cuando se disuelve en agua
o se neutraliza con un ácido libera una gran cantidad de calor que puede ser suficiente como para
encender materiales combustibles. El hidróxido de sodio es muy corrosivo. Generalmente se usa
en forma sólida o como una solución de 50%. Entre sus varias aplicaciones se encuentra como
agente de ajuste del pH. Para ajustar (titular) el pH de una disolución se emplea hidróxido sódico
concentrado, para subirlo (alcalinizar la disolución).

Sulfato de cobre
El sulfato de cobre (II), también llamado sulfato cúprico (CuSO4), vitriolo azul, piedra azul,
caparrosa azul, vitriolo romano o calcantita es un compuesto químico derivado del cobre que
forma cristales azules, solubles en agua y metanol y ligeramente solubles en alcohol y glicerina.
es especialmente elaborado para suplir funciones principales del Cobre en la planta, en el campo
de las enzimas: Oxidazas del ácido ascórbico, polifenol, citocromo, etc. También forma parte de la
plastocianina contenida en los cloroplastos y que participa en la cadena de transferencia de
electrones de la fotosíntesis. Su absorción se realiza mediante un proceso activo
metabólicamente. Prácticamente, no es afectado por la competencia de otros cationes. Por el
contrario, afecta a los demás cationes.
 DESARROLLO METODOLOGICO

1. ENSAYO Nº 1 PIGMENTOS VEGETALES

1.1. RECURSOS-TÉCNICOS

1.1.1. MATERIALES
 Papel absorbente.
 Papel filtro
 Mortero de porcelana.
 Embudo
 Beaker
 Caja de Petri
 Tubos de ensayo.

1.1.2. MATERIAL BIOLÓGICO

 hojas frescas de espinacas o frijol.
 Arena de cuarzo.

1.1.3. REACTIVOS.
 Alcohol al 95 %.
 NaOH al 5 %.
 Ácido acético glacial.
 CuSO4
 Carbonato de calcio.

1.1.4. EQUIPOS:
 Grapadora
 Lámpara

1.2. RECURSOS HUMANOS

Vianys Gomez Arias, Sharon Gutiérrez, Mimí Parra, Taideth Arias y Ailin Acosta. Con la
asesoría del docente Gustavo Rohenes Gale, licenciado en biología de la universidad
industrial de Santander (UIS).

1.3. RECURSOS ECONÓMICOS:

 Hojas de espinacas
 Papel absorbente.
 Papel filtro
 Ensayo 1.1
PIGMENTOS VEGETALES

Con una balanza pesar Descantamos y filtramos

Adicionamos alcohol al
5-8 gramos de hojas de la disolucion de
95% y seguimos
espinacas. pigmentos con un papel
triturando.
filtro.

En un beaker adicionar En un mortero de Agregamos 50 ml

agua y sumergir las porcelna trituramos. de alcohol al
hojas de espinacas. macerado.

Agregamos carbonato
de calcio. Colocamos a con papel absorbente
hervir durante 2 secamos las hojas.
minutos.

Fluorescencia

En un frasco con lados Con la ayuda de la lampara

planos y paralelo vertimos iluminamos con luz fuerte
el extracto por medio de un haz.
Ensayo 1.2
 DESARROLLO METODOLOGICO

ENSAYO Nº 2: pigmentos antocianicos.

1.1 . RECURSOS-TÉCNICOS
1.3.1. MATERIALES
 Papel filtro.
 Frascos pequeños.
 Tubos de ensayo.
 Cajas de Petri.

1.3.2. MATERIAL BIOLÓGICO

 Remolacha
 Flores azules, rojas y blancas.

1.3.3. REACTIVOS.
 NaOH al 0.1 N.
 Ácido acético 0,2 N.
 HCl concentrado
 Hidróxido de amonio concentrado.

1.4. RECURSOS HUMANOS

Vianys Gomez Arias, Sharon Gutiérrez, Mimí Parra, Taideth Arias y Ailin Acosta. Con la
asesoría del docente Gustavo Rohenes Gale, licenciado en biología de la universidad
industrial de Santander (UIS).

1.5. RECURSOS ECONÓMICOS:

 Papel filtro
 Remolacha
 Flores azules, rojas y blancas.
 Ensayo N° 2.1 pigmentos antocianicos

PIGMENTOS ANTOCIANICOS REMOLACHA

I.

Adicionamos en un
Tomamos una
beacker que contiene Colocamos a hervir
remolacha cortamos en
100 ml de agua durante 20-30 minutos.
tajadas bien delgadas.
destilada.

Despues gota a gota Al observar los Luego que este

agregamos cambios de color ebfriado el extracto
disolucion de acido determinar su PH con procedemos hacer el
acetico al 0,2 N. el peachimetro. filtrado.

Con el peachimetro En un tubo de ensayo Continuamos

determina su PH agregamos 5 ml del adicionando acido;
nuevamente. extracto. para ver si ocurre
cambios. determinar
su PH.

Repetimos el
Anotamos los cambios
procedimiento; pero
dados y los PH
con una disolucion de
producidos.
NaOH al 0,1 N.
 Ensayo 2.2
PIGMENTOS ANTOCIANICOS FLORES

Colocamos el frasco en una capsula

En un frasco pequeño con de petri de mayor tamaño que la base
agua; agregamos flores del frasco.
blancas, azules y rojas.

Tapamos con un frasco

invertido. para crear una Vertir en la capsula un poco
atmosfera de vapor al rededor de hidroxido de amonio
de las flores. concentrdo.

Anotar el cambio de color

Repetir el procedimiento con en las flores en cada
HCl concentrado. procedimiento.
 ENSAYO Nº 3 DEMOSTRACIÓN. OBTENCIÓN DE CLOROFILA Y SEPARACIÓN DE
PIGMENTOS.

1.2 . RECURSOS-TÉCNICOS
1.5.1. MATERIALES
 Vaso de precipitado
 Embudo
 Mortero
 Tubos de ensayo
 Probeta
 Gradilla
 Papel de filtro
1.5.2. MATERIAL BIOLÓGICO
 Hojas verdes de plantas

1.5.3. REACTIVOS.
 Alcohol de 700
 Gasolina

1.6. RECURSOS HUMANOS

Vianys Gomez Arias, Sharon Gutiérrez, Mimí Parra, Taideth Arias y Ailin Acosta. Con la
asesoría del docente Gustavo Rohenes Gale, licenciado en biología de la universidad
industrial de Santander (UIS).

1.7. RECURSOS ECONÓMICOS:

• Papel filtro.
 Gasolina
 Ensayo 3.1

SEPARACION DE XANTOFILAS

Tapar con un
En una balanza pesar Adicione un volumen corcho y gire el
20 gr de hojas de adicional ala tubo invirtiendolo
espinaca (spinacea gasolina. suavemente varias
oleracea) veces.

Elimine las Vierta 5 ml del

nervaduras de las filtrado en un tubo de Observe la
hojas. ensayo. separacion de la
xantofila del
extracto de la
clorofila.

Colocar pedazos Filtre el extracto

de hojas en un hasta obtener una
mortero. disolucion de
clorofila pura.

Macerar poco a poco

adicionando siga macerando
pequeñas de hojas y hasta obtener una
de alcohol etilico al pasta suave.
90%.
 Ensayo 3.2

SEPARACIÓN POR CROMATOGRAFIA

 RESULTADOS Y ANALISIS

Ensayo N 1 EXTRACCIÓN DE LOS PIGMENTOS VEGETALES

1.1. Cuando una solución de clorofila es iluminada con luz blanca o azul se produce un fenómeno
de excitación molecular. La luz emitida por fluorescencia es siempre de mayor longitud de onda y
de menor energía que la luz incidente, pues siempre algo de esa energía se disipa en forma de
calor.
Esta emisión de luz por parte de la clorofila, demuestra que es capaz de realizar reacciones
fotoquímicas.
Las clorofilas son poco estables in vitro, especialmente bajo iluminación intensa. El átomo central
de magnesio es fácilmente reemplazado por hidrógeno, dando lugar a las feofitinas respectivas,
pigmentos de color pardo oliva.
Los pigmentos migran a distintas velocidades de acuerdo a su solubilidad. De este modo se
puede efectuar una separación entre ellos y cada compuesto puede ser definido por una magnitud
específica denominada Rf (relación de frente), que tiene valores entre 0 y 1.
1.2

5 ml del extracto + 1 5 ml del extracto + 1 5 ml del extracto + 1 5 ml del extracto + 1

ml de H20. ml de NaOH ml de ácido acético. ml de CuSO4 al 5 %.
 Se presenta un color más claro en la disolución
no se observa un cambio significativo con
5 ml del extracto + 1 ml de agua
respecto a la muestra.
(control)

5 ml del extracto + 1 ml de NaOH al 5 % Se presenta un color verde biche en la

disolución.

5 ml del extracto + 1 ml de ácido acético Se presenta un color naranjado, a comparación

glacial de los demás tubos este fue el que tuvo un gran
cambio.

5 ml del extracto + 1 ml de CuSO4 al 5 % Se presenta una coloración más verde.

Al igual que la clorofila en la estructura, las feofitinas son en realidad productos de

descomposición. Están "gastando" clorofila que ha perdido un ion pero que permanece en la hoja
y continúa brindando a la hoja su color. El ion perdido proviene del componente de magnesio.

La clorofila puede sufrir distintos tipos de alteraciones. La más frecuente, es la pérdida del átomo
de magnesio, formando la llamada feofitina, de un color verde oliva con tonos marrones, en lugar
del verde brillante de la clorofila. Esta pérdida del magnesio se produce por sustitución por dos
iones H+, y consecuentemente se ve favorecida por el medio ácido.

La pérdida es irreversible en medio acuoso, por lo que el cambio de color de los vegetales verdes
es un fenómeno habitual en procesos de cocinado, enlatado, etc. La clorofila b es algo más
estable que la clorofila a. Hay que tener en cuenta que los vegetales son siempre ácidos, y que en
el tratamiento térmico se liberan generalmente ácidos presentes en vacuolas en las células, y que
hacen descender el pH del medio.

En la clorofila puede hidrolizarse el enlace éster que mantiene unido el grupo fitol. Esta hidrólisis
está catalizada por el enzima clorofilasa, presente en los vegetales verdes. La estructura que
queda al eliminarse el fitol recibe el nombre de clorofilida. Su color es semejante al de la clorofila,
y consecuentemente su formación no representa un problema desde ese punto de vista, e incluso
son algo más estables que las propias clorofilas frente a la pérdida del magnesio

La feofitina es capaz de unir eficientemente iones de Zn o de Cu en el lugar que ocupaba el

magnesio, formando pigmentos estables y de color verde atractivo. La toxicidad del cobre limita su
uso, pero los complejos cúpricos de clorofilas o clorofilidas están autorizados en la Unión Europea
como colorantes alimentarios en algunos productos.

Ensayo N 2 PIGMENTOS ANTOCIANICOS

2.1

Pigmento Reactivo Observación Imagen

Al introducir las
tajaditas de
remolacha al
beaker con agua
destilada
Extracto de hirviendo, a
remolacha medida que fue
aumentando la
temperatura estas
fueron
presentando
decoloración. para
medir el pH se
utilizó el
peachimetro y el
pH de esta
solución fue de
5.90

Luego de
Extracto de Ácido acético agregarle el ácido
remolacha acético se observa
una coloración
amarilla
Y también se le
tomó el pH que fue
de 2.83, lo cual
indica que el pH
es acido.
Extracto de Hidróxido de Se observa una
remolacha sodio coloración purpura
y su pH fue de
11.33, lo cual
indica que el pH
es básico.

Extracto de
remolacha con
ácido acético

Lo que obtuvimos de la extracción fue la Betanina, un pigmento que se conocen colectivamente

como betalaínas. La betanina es una sustancia que consiste en el extracto acuoso de la raíz de la
remolacha roja Beta vulgaris. Se extrae generalmente tras la cocción en agua, y presenta un color
rosado. Las betalaínas y las antocianinas son mutuamente excluyentes, por lo que cuando se
encuentran betalaínas en una planta, estarán ausentes las antocianinas, y viceversa.
El pH obtenido del extracto inicial, fue de 5.90, un valor adecuado, ya que el pH normal de las
verduras se encuentra entre 4.6 y 6.4, lo que hace que se prolongue la conservación de las
verduras e inhiba la reproducción de microorganismos.
Luego al añadir las gotas de ácido acético la solución cambio a un color amarillo, debido al
descenso de su pH a 2,83, lo que indica que se acidifico aún más. Este cambio ocurrió porque el
ácido acético tiene la capacidad de ceder protones (H+). En disolución acuosa, el ácido acético
puede perder el protón del grupo carboxilo para dar su base conjugada, el acetato. Su pKa es de
4,8 a 25 °C, lo cual significa, que al pH moderadamente ácido de 4,8, la mitad de sus moléculas
se habrán desprendido del protón. Esto hace que sea un ácido débil.
En el caso de las betalaínas, al ser ionizables en medio ácido, sufren cambios de color tanto a un
pH por debajo de 3.5 pero no se hidrolizan por lo cual se pueden utilizar para alimentos ácidos. Su
máxima estabilidad está entre pH 5 y 6.
Con el NaOH su pH aumento convirtiéndose en una solución alcalina, pero manteniendo
prácticamente el color original.

2.2 FLORES TRATADAS CON HIDRÓXIDO DE AMONIO AL 25 % (NH3OH).

COLOR INICIAL DE LAS FLORES

ROJAS AZULES BLANCAS

COLOR FINAL DE LAS FLORES

VIOLETA CON AZUL AMARRILLAS AMARRILLAS

Las antocianinas identificadas fueron La delfinidina la cual brinda colores azules a las flores,
como el caso de las violetas. Como casi todas las demás antocianidinas, es sensible a la acidez
(pH) del medio, y cambia de color desde el azul en medios básicos a rojo en soluciones ácidas.
La Peonidina provee a las flores el color purpura-roja. Como la mayoría de las antocianidinas, es
sensible al pH y cambia su color de rojo al azul cuando su valor de pH sube. Esto se debe a que
las antocianidinas son unos cromóforos altamente conjugados. Cuando el pH cambia se ve
alterado el grado de la extensión de la conjugación (casi el doble), que también altera la longitud
de la onda de la energía luminosa absorbida por la molécula. (Las antocianidinas naturales son
más estables en un medioambiente de pH bajo; a pH 8.0 la mayoría se convierte incoloro.) A un
pH 2.0, la peonidina posee un color rojo cereza; a un pH 3.0 rosa amarillento; a un pH 5.0 un
morado-rojo como la uva y a un pH 8.0 un azul profundo; a diferencia de muchos anthocyanidinas,
Las Antoxantinas son un tipo de pigmentos Flavonoide, característicos de las plantas. Son
pigmentos solubles en agua con un rango de color que va desde el blanco o incoloro, hasta el
crema o amarillo, a menudo en los pétalos de las flores. El color de las antoxantinas es
generalmente blanco en medio ácido y amarillo en un medio alcalino. Estos pigmentos son muy
susceptibles a cambios en el color con minerales y iones metálicos, similar a lo que sucede con
las Antocianinas. Los pétalos blancos de la flor se pusieron amarillos en presencia de vapores de
amoniaco, por su contenido de flavonas y/o flavonoides.
La reacción del amoniaco con el agua produce iones hidróxido, los cuales, explican el sabor y
demás propiedades de las soluciones alcalinas.

FLORES TRATADAS CON ÁCIDO CLORHÍDRICO (HCL) CONCENTRADO.

COLOR INICIAL DE LAS FLORES

ROJAS AZULES BLANCAS

COLOR FINAL DE LAS FLORES

VIOLETA AZULES AMARRILLAS

Las antocianinas son las responsables de la coloración, rojo azul y violeta. Su estabilidad está
determinada por el grado de oxidación, la temperatura, la fuerza iónica, la acidez y la interacción
con otros radicales y moléculas complejas. moléculas en las que se produce el efecto
batocrómico, que consiste en que al cambiar la acidez, es decir el pH, se pasa del rojo anaranjado
en condiciones ácidas, como el de la pelargonidina, al rojo intenso-violeta de la cianidina en
condiciones neutras, y al rojo púrpura-azul de la delfinidina, en condiciones alcalinas. El pH tiene
efecto en la estructura y la estabilidad de las antocianinas. La acidez tiene un efecto protector
sobre la molécula. En soluciones acuosas a valores de pH inferiores a 2, básicamente la totalidad
del pigmento se encuentra en su forma más estable de ion oxonio o catión flavilio de color rojo
intenso. El ion flavilio es susceptible al ataque nucleofilico por parte del agua. Este es deficiente
en electrones y por lo tanto muy reactivo, lo que lo hace muy sensible a cambos de pH.
Las antocianinas tienen su máxima expresión de color a PH ácidos, y su forma incolora se
produce a pH neutros o alcalinos.

Los cambios de pH son factores muy importantes en determinación de antocianinas ya que éstas
son más estables en un medio ácido que en un medio neutro o alcalino.

Una de las propiedades más singulares de las antocianinas es su capacidad para cambiar de
color en función del pH, mostrando una amplia gama de tonos, desde el rojo, pasando por el
púrpura o el azul, hasta el amarillo (al aumentar el pH), de modo que actúan como indicadores
naturales del pH. Esto es debido a que su estructura experimenta una amplia variedad de
transformaciones moleculares en función de la concentración de protones.

Ensayo N 3 SEPARACION DE XANTOFILAS

3.1

RESULTADO OBSERVACIONES
Al añadir gasolina a la disolución de clorofila
bruta en alcohol que preparamos, la gasolina
arrastra la clorofila hacia arriba, quedando la
Tipos de clorofila a y b xantofila y el alcohol en la parte inferior. Su
coloración, más o menos es verde-amarillento
esto también dependerá del tipo de hojas
empleadas.
Se presentan dos clases de clorofila a y
clorofila b
 Esto corresponde a los distintos pigmentos
fotosintéticos presentes en las hojas de espinaca.
Según su grado de solubilidad con el alcohol y el
tetracloruro de carbono se reconocen estas
zonas heterogéneas y no miscibles en este
orden:

1. clorofila a + b + Tetracloruro de C.
2. xantofilas y carotenoides + Alcohol

El alcohol tiene la propiedad de extraer algunas características de los compuestos con los cuales
es mezclado, por esta razón permite la separación de la xantofila en la disolución.

Al momento de añadirse la gasolina que a su vez permite el arrastre y separación de clorofila. Ya

que este tiene afinidad por algunos pigmentos como lo es con la clorofila y es llamado
separador.

3.2 cromatografía papel filtro

IMÁGENES DEL PROCEDIMIENTO. OBSERVACIONES

Si observas el papel de filtro notarás que en el
borde de la parte manchada aparece la
separación de pigmentos. En tono amarillento de
la xantofila que colorea el alcohol que queda en
la parte inferior.

También la clorofila cristalizada la podemos

obtener dejando evaporar de una disolución
alcohólica. Los pigmentos ascienden por
capilaridad.
 Al observar el papel, vemos cuatro bandas o
zonas, que corresponden a los distintos
pigmentos fotosintéticos presentes en las hojas
de espinaca. Según su grado de solubilidad con
el Alcohol se reconocen estas bandas y en este
orden:

 clorofila b
 clorofila a
 xantofila
 carotenos

CUESTIONARIO

1. Que analogía existen entre los antocianos y los indicadores químicos?

Rta/ El descubrimiento de los indicadores químicos se debe gracias a las anticionaninas

encontradas en el reconocimiento de ácidos y bases a través de los cambios de color de
extractos de plantas. A partir de Boyle (The Experimental History of Colours) una de las formas
de indicar la presencia de un ácido fue utilizar como indicador el cambio de color del jarabe de
violetas y a partir de ese momento nacen los indicadores químicos.

2. ¿Cuáles son los factores internos que regulan la producción de antocianinas en los
vegetales?
Rta/ La producción de antocianinas se encuentra ligada a las condiciones lumínicas en que las
plantas se desarrollan in vitro (Toguri et al., 1993). Se ha observado que los genes que codifican
para las enzimas claves en la síntesis de antocianinas en Stellarialongipes requieren estímulo
lumínico para su expresión (Alokam et al., 2002). Estudios in vitro con Ceratoniasiliqua revelaron
que en condiciones de baja luminosidad, e incluso en oscuridad, se dió la síntesis de antocianinas
(Vinterhalter et al., 2007).

Además de la intensidad lumínica, la calidad de la luz juega también un papel importante en la

producción de antocianinas. Estudios in vitro con corolas de Petunia hybrida demostraron que
distintas longitudes de onda (rojo, verde, azul, rojo lejano) tienen efectos diferentes sobre la
producción de estos pigmentos en flores, siendo más efectiva la azul (Weiss y Halevy, 1991).
Irradiando plantas de Brassica rapa con luz de distintas longitudes de onda (rojo lejano, rojo, azul,
UV-A, UV-B bajo, UV-B alto, UVA + rojo lejano, UV-A + rojo, UV-A + azul) se pudo monitorear el
comportamiento de las mismas ante este tipo de estímulo. Las plantas que estuvieron por 24
horas en presencia de luz UV-A fueron las que presentaron la mayor concentración de
antocianinas en sus tejidos, cuatro veces más que plantas mantenidas en oscuridad. La
combinación de otros tipos de luz con UV-A estimuló en menor grado la producción de pigmentos
o no presentó diferencias significativas que cuando se utilizó sólo luz UV-A.

También se observó un aumento en la expresión de varios de los genes involucrados en la

síntesis de antocianinas (fenilalanina amonio liasa, chalcona sintasa, flavanona 3hidroxilasa,
dihidroflavonol 4-reductasa y antocianidina sintasa) al someter plantas a este tipo de radiación
(Zhou et al., 2007).

La temperatura es otra de las condiciones de cultivo que afecta la producción de antocianinas.

Shvarts et al., 1997, determinaron que condiciones de temperatura moderadamente baja podían
aumentar la síntesis de antocianinas en petunia, incrementando la expresión de genes que
codifican para las enzimas que participan en su síntesis. De igual manera, en un estudio con
híbridos de Aster, se observó la misma tendencia, ya que las corolas de las flores de estas
plantas presentaban la mitad de la concentración normal de antocianinas a temperatura promedio
de 13 °C que al ser cultivadas a temperaturas mayores (en promedio 25 °C). Sin embargo, se
encontró que aumentando los niveles de magnesio en estas plantas era posible evitar el efecto de
la temperatura sobre la síntesis de antocianinas, aumentando la concentración de las mismas en
las flores (Shaked-Sachray et al., 2002). En rosa cultivada en invernadero se ha encontrado que
los efectos de temperaturas elevadas se observan principalmente en los nuevos brotes, cuando
son expuestos a las mismas desde etapas tempranas de su desarrollo. Incluso, se pudo constatar
que la proporción en la que se encuentran distintas antocianinas en la planta cambia
drásticamente al ser cultivadas a altas temperaturas (Dela et al., 2003). Un efecto combinado de
luz, temperatura y diversos componentes del medio de cultivo en la producción de antocianinas
fue observado en callos de Cleome rosea, una planta ornamental brasileña. En este caso,
Simões et al., 2009, encontraron que la producción de antocianinas fue mayor al reducir la
temperatura y aumentar la radiación lumínica.
3. ¿Qué es fluorescencia?

Rta/ La fluorescencia es un tipo particular de luminiscencia, que caracteriza a las sustancias que
son capaces de absorber energía en forma de radiaciones electromagnéticas y luego emitir parte
de esa energía en forma de radiación electromagnética de longitud de onda diferente.

La energía total emitida en forma de luz es siempre menor a la energía total absorbida y la
diferencia entre ambas es disipada en forma de calor. En la mayoría de los casos la longitud de
onda emitida es mayor -y por lo tanto de menor energía- que la absorbida, sin embargo, si la
radiación de excitación es intensa, es posible para un electrón absorber dos fotones; en esta
absorción bifotónica, la longitud de onda emitida es más corta que la absorbida, sin embargo en
ambos casos la energía total emitida es menor que la energía total absorbida.

En general las sustancias fluorescentes absorben energía en forma de radiación electromagnética

de onda corta (p ej radiación gamma, rayos x, UV, luz azul, etc), y luego la emiten nuevamente a
una longitud de onda más larga, por ejemplo dentro del espectro visible; los ejemplos más
notables de fluorescencia ocurren cuando la luz absorbida se encuentra dentro del
rango ultravioleta del espectro -invisible al ojo humano- y la luz emitida se encuentra en la región
visible.

El mecanismo de fluorescencia típico implica tres pasos secuenciales, llamados respectivamente

absorción (1), disipación no radiactiva (2) y emisión (3).

4. ¿En qué se basa la cromatografía de papel?

Rta/La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar
unos análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica muy potente no requiere de ningún tipo
de equipamiento.

La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel filtro. La muestra se
deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la solución y evaporando el disolvente.
Luego el disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad. Esto es, se
coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra del lado de abajo dentro de un recipiente
que contiene fase móvil en el fondo.

Después de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al extremo se retira
el papel y seca. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se
verán las manchas de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el
papel se somete a procesos de revelado.

Hay varios factores de los cuales depende una cromatografía eficaz: la elección del disolvente y la
del papel de filtro.
 CONCLUSIONES

 En esta práctica se cumplieron con los objetivos propuestos, identificamos los diferentes
pigmentos que hay en una hoja de espinaca. La clorofila es el principal pigmento
presente y está formada por una gran cantidad de pigmentos como lo son los carotenos,
la xantofila, la clorofila a y la clorofila b; la xantofila le proporciona a las hojas tonos
amarillentos y parduscos a las hojas secas y a su vez se encuentra en mascarada en la
clorofila.

 Se realizó la separación de las xantofilas a partir de un extracto de espinaca adicionando

sustancias como la gasolina que permite el arrastre de la clorofila y el alcohol toma las
propiedades de la xantofila permitiendo su separación y logrando su visibilidad.

 Se determinaron las características físicas y químicas de las clorofilas y antocianinas La

estructura de la moléculas de clorofila tiene dos partes: un anillo de porfirina (sustituida
con pequeños grupos enlazados, sustituyentes) y una cadena larga llamada fitol. El anillo
de porfirina es un tetrapirrol, con cuatro anillos pentagonales de pirrol enlazados para
formar un anillo mayor que es la porfirina, el color verde en los vegetales es debido a
la presencia de estos pigmentos llamados clorofila a y clorofila b. Las antocianinas
pertenecen al grupo de los flavonoides y son glucósidos de las antocianidinas, es decir,
están constituidas por una molécula de antocianidina, que es la aglicona, a la que se le
une un azúcar por medio de un enlace glucosídico, son responsables de una gama muy
amplia de colores, desde el incoloro hasta el púrpura.

 Las antocianinas tienen la capacidad para cambiar de color en función del pH, mostrando
una amplia gama de tonos, desde el rojo, pasando por el púrpura o el azul, hasta el
amarillo (al aumentar el pH), de modo que actúan como indicadores naturales del pH.
Esto es debido a que su estructura experimenta una amplia variedad de
transformaciones moleculares en función de la concentración de protones. En medio
acido las flores, mantuvieron su color ya que las antocianinas son más estables en
medios ácidos que en medios alcalinos. En el medio alcalino perdieron su color.

 Se encontraron otros pigmentos llamados betalaínas estos son metabolitos secundarios

de las plantas nitrogenados que actúan como pigmentos rojos y amarillos. Las betalaínas
y las antocianinas son mutuamente excluyentes, por lo que cuando se encuentran
betalaínas en una planta, estarán ausentes las antocianinas, y viceversa. A este grupo
pertenece la betanina, responsable del color de la remolacha.
 BIBLIOGRAFIA

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RECUPERADO DE http://ubuscientia.blogspot.com/2014/01/antocianinas-los-otros-pigmentos-
del.html
IMAGEN RECUPERADA DE http://www.slideshare.net/fdesasouza/trabajo-practico-voluntario-
pigmentos