Вы находитесь на странице: 1из 48
“ RANDOX ” АНГЛИЯ БИОХИМИЧЕСКИЕ РЕАКТИВЫ ИНСТРУКЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

RANDOX” АНГЛИЯ

БИОХИМИЧЕСКИЕ РЕАКТИВЫ

ИНСТРУКЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА А LT (GPT) opt.   ПРОЦЕДУРА Методика

АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА АLT (GPT) opt.

 

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

Кинетика по фактору - 1746 37 °C 340 нм 405 нм 60 сек. 180 сек. бланк по воздуху Е/л до 696 Е/л

 

Фактор:

Кат № :

 

Температура:

AL 1205

R1a. Буфер/Субстрат

1 х 105 мл 10 x 10 мл

Основной фильтр:

10

х 10 мл

R1b. Энзим/Коэнзим/ -оксиглютарат

Диф. фильтр:

   

Время задержки:

 

Время измерения:

Бланк:

УФ МЕТОД

 

Единицы изм.:

Предлагаемый метод является оптимизированной стандартной методикой, рекомендованной IFCC.

Линейность:

 

ПРИНЦИП МЕТОДА

ALT -oxoglutarate + L-alanine ------->L-glutamate + pyruvate

LD pyruvate + NADH + H + ----------> L-lactate + NAD +

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка, гепаринизированная (или с ЭДТА) плазма.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Концентр.

раствора

R1a. Буфер/субстрат Трис буфер L-аланин R1b. Энзим/коэнзим/- оксиглютарат -оксиглютарат LD NADH

100 ммоль/л, pH

7.5

0.6 моль/л

15 ммоль/л

>1.2 Е/мл

0.18 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ Для приготовления рабочего реагента нужно

растворить содержимое флакона Сухого/Энзима R1b в

10 мл Буфера/Субстрата R1a.

Стабилен - 14 дней при +2 - +8 о С или 24 часа при +15 - +25 о С.

Внести в кювету:

Макрометод Микрометод (мкл) (мкл) Проба 100 20 Рабочий реагент 1000
Макрометод
Микрометод
(мкл)
(мкл)
Проба
100
20
Рабочий реагент
1000
200

Смешать, инкубировать 1 мин Измерить начальную абсорбцию. Повторить измерение через 1, 2 и 3 мин.

Имейте ввиду, если изменение оптической плотности за минуту – между:

0.11

и 0.16 при 340 нм/Hg 334 нм

0.06

и 0.08 при Hg 365 нм

используйте для вычисления только величины с начала измерения и за 2 минуты.

ВЫЧИСЛЕНИЯ Расчитать AST активность по формуле:

Процедура 1

Е/л= 1746 х А 340 нм/мин

ALT 100/ 500 test

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

25

o C

30 o C

37 o C

Мужчины

до 22 Е/л

до 29 Е/л

до 40 Е/л

Женщины

до 17 Е/л

до 22 Е/л

до 31 Е/л

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). Используйте значения для метода Tris buffer no P5P IFCC/SFBC 37°C.

ЛИНЕЙНОСТЬ Если прирост концентрации за мин превышает 0.16 (или 696 Е/Л) при 340 нм/Hg 334 нм 0.08 при Hg 365 нм добавить к 0.1 мл аликвоты пробы 0.9 мл 0.9%-ного NaCl и повторить анализ. Полученный результат умножить на 10.

ПРИМЕЧАНИЯ Избегайте гемолиза, мешающего анализу.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетировать ртом. Соблюдайте обычные меры предосторожности, принятые в лаборатории. Раствор R1a содержит Азид натрия. Избегайте попадания реактива в рот, контакта с кожей и слизистыми. В противном случае промойте пораженные участки большим количеством воды. При попадании в глаза или проглатывании - обратитесь к врачу. Азид натрия реагирует со свинцом и медью с образованием потенциально взрывчатых веществ. Для уничтожения таких образований используйте большие количества воды. Наружные металлические поверхности должны быть обработаны 10% раствором гидроокиси натрия.

АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА А LT (GPT) opt. Кат № : AL 2360 R1a .

АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА АLT (GPT) opt.

Кат № :

AL 2360

R1a. Буфер/Субстрат

5

х 100 мл

5 x 100 мл

R1b. Энзим/Коэнзим/ -оксиглютарат

5

х 100 мл

УФ МЕТОД Предлагаемый метод является оптимизированной стандартной методикой, рекомендованной IFCC.

ПРИНЦИП МЕТОДА

ALT -oxoglutarate + L-alanine ------->L-glutamate + pyruvate

LD pyruvate + NADH + H + ----------> L-lactate + NAD +

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка, гепаринизированная (или с ЭДТА) плазма.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Концентр.

раствора

R1a. Буфер/субстрат Трис буфер L-аланин R1b. Энзим/коэнзим/- оксиглютарат -оксиглютарат LD NADH

100 ммоль/л, pH

7.5

0.6 моль/л

15 ммоль/л

>1.2 Е/мл

0.18 ммоль/л

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

Кинетика по фактору - 1746 37 °C 340 нм 405 нм 60 сек. 180 сек. бланк по воздуху Е/л до 696 Е/л

Фактор:

Температура:

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Время задержки:

Время измерения:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

Внести в кювету:

Макрометод Микрометод (мкл) (мкл) Проба 100 20 Рабочий реагент 1000
Макрометод
Микрометод
(мкл)
(мкл)
Проба
100
20
Рабочий реагент
1000
200

Смешать, инкубировать 1 мин Измерить начальную абсорбцию. Повторить измерение через 1, 2 и 3 мин.

Имейте ввиду, если изменение оптической плотности за минуту – между:

0.11

и 0.16 при 340 нм/Hg 334 нм

0.06

и 0.08 при Hg 365 нм

используйте для вычисления только величины с начала

измерения и за 2 минуты.

ВЫЧИСЛЕНИЯ Расчитать AST активность по формуле:

Процедура 1

Е/л= 1746 х А 340 нм/мин

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ Для приготовления рабочего реагента нужно растворить содержимое флакона Сухого/Энзима R1b в 100 мл Буфера/Субстрата R1a. Стабилен - 14 дней при +2 - +8 о С.

ALT

500/2500 test

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

25

o C

30 o C

37 o C

Мужчины

до 22 Е/л

до 29 Е/л

до 40 Е/л

Женщины

до 17 Е/л

до 22 Е/л

до 31 Е/л

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). Используйте значения для метода Tris buffer no P5P IFCC/SFBC 37°C.

ЛИНЕЙНОСТЬ Если прирост концентрации за мин превышает 0.16 (или 696 Е/Л) при 340 нм/Hg 334 нм 0.08 при Hg 365 нм добавить к 0.1 мл аликвоты пробы 0.9 мл 0.9%-ного NaCl и повторить анализ. Полученный результат умножить на 10.

ПРИМЕЧАНИЯ Избегайте гемолиза, мешающего анализу.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетировать ртом. Соблюдайте обычные меры предосторожности, принятые в лаборатории. Раствор R1a содержит Азид натрия. Избегайте попадания реактива в рот, контакта с кожей и слизистыми. В противном случае промойте пораженные участки большим количеством воды. При попадании в глаза или проглатывании - обратитесь к врачу. Азид натрия реагирует со свинцом и медью с образованием потенциально взрывчатых веществ. Для уничтожения таких образований используйте большие количества воды. Наружные металлические поверхности должны быть обработаны 10% раствором гидроокиси натрия.

АЛЬБУМИН Бромкрезол - зелёный метод (BCG) Кат № : AB 362 R1. БКЗ

АЛЬБУМИН Бромкрезол-зелёный метод (BCG)

Кат № :

AB 362

R1. БКЗ Концентрат

6х13,5 мл

6 x 100мл

CAL. Стандарт

1х5,5 мл

ПРИНЦИП МЕТОДА Альбумин в присутствии бромкрезолового зеленого в слегка кислой среде (рН 4,2) вызывает изменение окраски индикатора от желто-зеленой до зелено-синей. Интенсивность окраски прямо пропорционально концентрации альбумина в сыворотке

ПРОБА Сыворотка, гепаринизированная или (с EDTA) плазма крови.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Исходная концентрация

Сукцетатный буфер Бромкрезол зелёный Бридж (Brij) 35 Стабилизатор Стандарт

75 ммол/л., рН 4.2 0.15 ммол/л.

см. вложение

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ

Разведите концентрат одной бутылочки R1 13,5 мл с 87 мл дистиллированной воды.

При малом количестве тестов 1мл концентрата БКЗ Реагента смешать с 6,4мл дистиллированной воды .

Раствор стабилен в течение 3-х месяцев при +15 - +25 о С.

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

по Стандарту смотрите вложение 37 °C 630 нм 700 нм бланк по реагенту г/л до 60 г/л

Концентрация стандарта:

Температура:

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

Внести в пробирку:

Макрометод Микрометод

Макрометод

Микрометод

Бланк

Проба/

Бланк

Проба/

(мкл)

Станд.

(мкл)

Станд.

(мкл)

(мкл)

Проба/Стандарт

--

5

--

2

БКЗ Реактив R1

1000

1000

280

280

Перемешайте и инкубируйте в течении 5 минут при температуре 37 о С. Измерьте поглощение пробы (Апробы) и стандарта (Астандарта) относительно чистого реактива.

ВЫЧИСЛЕНИЯ

Концентрация альбумина в сыворотке может быть вычислена по следующей формуле:

Апробы Конц.(г/л или г/дл)= ---------------- х Конц. стандарта Астандарта

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ В СЫВОРОТКЕ

Взрослые

Новорожденные

3.8

- 4.4 г/дл (38 - 44 г/л)

3.8

- 4.2 г/дл (38 - 42 г/л)

ALBUMIN

600/2000 test

КАЛИБРОВКА И КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Выполнение калибровки можно провести либо при помощи стандарта, входящего в состав набора AB 362, либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 2 (CAL 2350) или уровень 3 (CAL 2351). Используйте значения для метода Bromocresol Green. Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо RANDOX жидкие контроли специфических белков уровень 1 (PS 2682), уровень 2 (PS 2683) и уровень 3 (PS 2684), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558).

ЛИНЕЙНОСТЬ

Этот метод линеен вплоть до 6 г/дл (60 г/л). Если концентрация альбумина в сыворотке превышает эту величину, разведите пробу в пропорции 1+1 с 0.9% - ным раствором NaCl и повторить анализ В этом случае необходимо умножить полученный результат на 2.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетируйте ртом. Соблюдайте обычные при лабораторных процедурах меры предосторожности.

Реагент R1 содержит Азид натрия. Избегайте попадания реактива в рот, контакта с кожей и слизистыми. В противном случае промойте пораженные участки большим количеством воды. При попадании в глаза или проглатывании - обратитесь к врачу.

Азид натрия реагирует со свинцом и медью с

образованием потенциально взрывчатых веществ. Для

уничтожения таких образований используйте большие количества воды. Наружные металлические поверхности должны быть обработаны 10% раствором гидроокиси натрия.

АМИЛАЗА Этилиден - блокированный -pNPG 7 Кат № : AY 1580 R1a .Буфер 1 х

АМИЛАЗА Этилиден-блокированный-pNPG 7

Кат № :

AY 1580

R1a.Буфер

1 х 105 мл

20 x 5 мл

R1b.Субстрат

20 х 5 мл

КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД В данном методе в качестве субстрата используют этилиден блокированный с р-нитрофенил- мальтогептаозидом, а также индикаторный фермент - глюкозидазу для освобождения р-нитрофенола. Терминальная глюкоза субстрата химически защищена от расщепления индикаторных ферментов.

-amylase

ethylidene-G 7 -pNP-------------->ethylidene-Gx + Gx-pNP

Gx-pNP

pNP- glucoside

-glucosidase

--------------> glucose + pNP-glucoside

-glucosidase

-------------> glucose + рNP

ПРОБА Сыворотка, гепаринизированная плазма или моча. Мочу развести 0,9%-ным NaCL в соотношении 1:2. Полученный результат умножить на 3.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Исходная концентрация раствора

R1a. Буфер Пипес буфер Хлорид кальция Хлорид натрия R1b. Субстрат Пипес буфер Этилиден-G 7 рNP -Глюкозидаза

50 ммоль/л, pH 7.0

5.0 ммоль/л

50 ммоль/л

12.5 ммоль/л, рН 7.0

1.0 ммоль/л

> 12 Е/мл

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РЕАКТИВА Растворить содержимое флакона Реагента R1b в 5 мл Буфера R1a. Рабочий реактив стабильный - 21 день при +2 - +8 о С.

ПРОЦЕДУРА

Методика теста: Кинетика по фактору Фактор: 4712 Температура:
Методика теста:
Кинетика по фактору
Фактор:
4712
Температура:
Основной фильтр:
Диф. фильтр:
Время задержки:
Время измерения:
Бланк:
Единицы изм.:
Линейность:
37 °C
405 нм
630 нм
60 сек.
180 сек.
бланк по воздуху
Е/л
до 1300 Е/л
Внести в кювету:
Макрометод
Микрометод
(мкл)
(мкл)
Проба
20
4
Рабочий реагент
1000
200

Смешать, измерить начальную абсорбцию через 60 сек, затем повторно через 1, 2.и 3 мин.

ВЫЧИСЛЕНИЯ Расчитать амилазную активность по формуле:

Е/л = 4712 х A 405 нм/мин

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

Сыворотка:

Моча:

до 95 Е/л (37 о С) Свежая - до 490 мкл (37 о С) 24 ч - до 450 мкл/24 ч (37 о С)

AMYLASE

200/500 test

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). Используйте значения для метода Randox - Ethylidene pNPG7 37°C.

ЛИНЕЙНОСТЬ Линейность измерения сохраняется вплоть до 1300 Е/л. При более высоких концентрациях образец разводят 1 + 9 с 09% NaCl и анализ повторяют. В этом случае полученный результат умножают на 10.

ПРИМЕЧАНИЯ Гемолизированная сыворотка занижает результаты. Избегайте загрязнения реагентов, образцов и посуды слюной или испарениями, т.к это может завышать результаты анализа. Не пипетировать ртом.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетировать ртом.

Раствор R1a содержит Азид натрия. Избегайте попадания реактива в рот, контакта с кожей и слизистыми. В противном случае промойте пораженные участки большим количеством воды. При попадании в глаза или проглатывании - обратитесь к врачу.

Азид натрия реагирует со свинцом и медью с образованием потенциально взрывчатых веществ. Для уничтожения таких образований используйте большие количества воды. Наружные металлические поверхности должны быть обработаны 10% раствором гидроокиси натрия.

АСПАРТАТ АМИНОТРАНСФЕРАЗА АST (GOT) opt.   ПРОЦЕДУРА Методика

АСПАРТАТ АМИНОТРАНСФЕРАЗА АST (GOT) opt.

 

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

Кинетика по фактору - 1746 37 °C 340 нм 405 нм 60 сек. 180 сек. бланк по воздуху Е/л до 562 Е/л

 

Фактор:

Кат № :

 

Температура:

AS 1204

R1a. Буфер/Субстрат

1 х 105 мл 10 x 10 мл

Основной фильтр:

10

х 10 мл

R1b. Энзим/Коэнзим/ -оксиглютарат

Диф. фильтр:

   

Время задержки:

 

Время измерения:

Бланк:

УФ МЕТОД

 

Единицы изм.:

Предлагаемый метод является оптимизированной стандартной методикой, рекомендованной IFCC.

Линейность:

Внести в кювету:

ПРИНЦИП МЕТОДА

AST -oxoglutarate + L-aspartate --->L-glutamate +oxaloacetate

MOH oxaloacetate + NADH + H + ----> L-malate + NAD +

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка, гепаринизированная (или с ЭДТА) плазма.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Концентр.

раствора

R1a. Буфер/субстрат Трис буфер L-аспартат R1b. Энзим/коэнзим/- оксиглютарат -оксиглютарат MDH LD NADH

80 ммоль/л, pH

7.5

240 ммоль/л

12 ммоль/л

>420 Е/мл

>600 Е/мл

0.18 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ Для приготовления рабочего реагента нужно

растворить содержимое флакона Сухого/Энзима R1b в

10 мл Буфера/Субстрата R1a.

Стабилен - 14 дней при +2 - +8 о С.

Макрометод Микрометод (мкл) (мкл) Проба 100 20 Рабочий реагент 1000
Макрометод
Микрометод
(мкл)
(мкл)
Проба
100
20
Рабочий реагент
1000
200

Смешать, инкубировать 1 мин. Измерить начальную абсорбцию. Повторить измерение через 1, 2 и 3 мин.

Имейтеь в виду, если изменение оптической плотности за минуту - между

0.11

и 0.16 при 340 нм/Hg 334 нм

0.06

и 0.08 при Hg 365 нм

используйте для вычисления только величины с начала измерения и за 2 минуты.

ВЫЧИСЛЕНИЯ Расчитать AST активность по формуле:

Процедура 1

Е/л= - 1746 х А 340 нм/мин

AST 100/ 500 test

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

25

o C

30 o C

37 o C

Мужчины

до 18 Е/л

до 25 Е/л

до 37 Е/л

Женщины

до 15 Е/л

до 21 Е/л

до 31 Е/л

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). Используйте значения для метода Tris buffer no P5P IFCC/SFBC 37°C.

ЛИНЕЙНОСТЬ Если прирост концентрации за мин превышает 0.16 (или 562 Е/л) при 340 нм/Hg 334 нм 0.08 при Hg 365 нм добавить к 0.1 мл аликвоты пробы 0.9 мл 0.9%-ного NaCl и повторить анализ. Полученный результат умножить на 10.

ПРИМЕЧАНИЯ Избегайте гемолиза, мешающего анализу.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетировать ртом. Соблюдайте обычные меры предосторожности, принятые в лаборатории.

Раствор 1 содержит Азид натрия. Избегайте попадания реактива в рот, контакта с кожей и слизистыми. В противном случае промойте пораженные участки большим количеством воды. При попадании в глаза или проглатывании - обратитесь к врачу.

Азид натрия реагирует со свинцом и медью с образованием потенциально взрывчатых веществ. Для уничтожения таких образований используйте большие количества воды. Наружные металлические поверхности должны быть обработаны 10% раствором гидроокиси натрия.

АСПАРТАТ АМИНОТРАНСФЕРАЗА АST (GOT) opt.   ПРОЦЕДУРА Методика

АСПАРТАТ АМИНОТРАНСФЕРАЗА АST (GOT) opt.

 

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

Кинетика по фактору - 1746 37 °C 340 нм 405 нм 60 сек. 180 сек. бланк по воздуху Е/л до 562 Е/л

 

Фактор:

Кат № :

Температура:

AS 2359 5 х 100 мл

R1a. Буфер/Субстрат R1b. Энзим/Коэнзим/ -оксиглютарат

5

х 100 мл

Основной фильтр:

5

x 100 мл

Диф. фильтр:

   

Время задержки:

 

Время измерения:

Бланк:

УФ МЕТОД

Единицы изм.:

Предлагаемый метод является оптимизированной стандартной методикой, рекомендованной IFCC.

Линейность:

Внести в кювету:

ПРИНЦИП МЕТОДА

AST -oxoglutarate + L-aspartate --->L-glutamate +oxaloacetate

MOH oxaloacetate + NADH + H + ----> L-malate + NAD +

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка, гепаринизированная (или с ЭДТА) плазма.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Концентр.

раствора

R1a. Буфер/субстрат Трис буфер L-аспартат R1b. Энзим/коэнзим/- оксиглютарат -оксиглютарат MDH LD NADH

80 ммоль/л, pH

7.5

240 ммоль/л

12 ммоль/л

>420 Е/мл

>600 Е/мл

0.18 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ Для приготовления рабочего реагента нужно растворить содержимое флакона Сухого/Энзима R1b в 100 мл Буфера/Субстрата R1a. Стабилен - 14 дней при +2 - +8 о С.

Макрометод Микрометод (мкл) (мкл) Проба 100 20 Рабочий реагент 1000
Макрометод
Микрометод
(мкл)
(мкл)
Проба
100
20
Рабочий реагент
1000
200

Смешать, инкубировать 1 мин. Измерить начальную абсорбцию. Повторить измерение через 1, 2 и 3 мин.

Имейтеь в виду, если изменение оптической плотности за минуту - между

0.11

и 0.16 при 340 нм/Hg 334 нм

0.06

и 0.08 при Hg 365 нм

используйте для вычисления только величины с начала измерения и за 2 минуты.

ВЫЧИСЛЕНИЯ Расчитать AST активность по формуле:

Процедура 1

Е/л= - 1746 х А 340 нм/мин

AST 100/ 500 test

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

25

o C

30 o C

37 o C

Мужчины

до 18 Е/л

до 25 Е/л

до 37 Е/л

Женщины

до 15 Е/л

до 21 Е/л

до 31 Е/л

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). Используйте значения для метода Tris buffer no P5P IFCC/SFBC 37°C.

ЛИНЕЙНОСТЬ Если прирост концентрации за мин превышает 0.16 (или 562 Е/л) при 340 нм/Hg 334 нм 0.08 при Hg 365 нм добавить к 0.1 мл аликвоты пробы 0.9 мл 0.9%-ного NaCl и повторить анализ. Полученный результат умножить на 10.

ПРИМЕЧАНИЯ Избегайте гемолиза, мешающего анализу.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетировать ртом. Соблюдайте обычные меры предосторожности, принятые в лаборатории.

Раствор 1 содержит Азид натрия. Избегайте попадания реактива в рот, контакта с кожей и слизистыми. В противном случае промойте пораженные участки большим количеством воды. При попадании в глаза или проглатывании - обратитесь к врачу.

Азид натрия реагирует со свинцом и медью с образованием потенциально взрывчатых веществ. Для уничтожения таких образований используйте большие количества воды. Наружные металлические поверхности должны быть обработаны 10% раствором гидроокиси натрия.

L- γ - ГЛЮТАМИЛТРАНСФЕРАЗА (ГГТ) Кинетический колориметрический

L-γ-ГЛЮТАМИЛТРАНСФЕРАЗА (ГГТ) Кинетический колориметрический метод

Кат № :

GT523

R1a. Буфер

1 х 105 мл

10 х 10мл

R1b. Субстрат

10 х 10 мл

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Гамма-глутамилтрансфераза (ГГT) – это клеточный фермент, широко представленный в тканях организма, преимущественно в почках, поджелудочной железе, печени и простате. Измерение активности ГГT исполь- зуется в диагностике и лечении гепатобилиарных за- болеваний, таких как билиарная обструкция, цирроз или опухоли печени. Клинический диагноз не может быть поставлен по результату одного теста, он должен определяться по совокупности клинических и других лабораторных данных.

КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД (ПРИНЦИП)

γGT

L-γ-glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide + glycylglycine>

L- γ -glutamylglycylglvcine + 5-amino-2-nitro-benzoate

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка или с ЭДТА плазма.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Конц. раствора

 

100

ммоль/л, рН 8.25

100

ммоль/л

R1a .Буфер/ Глицилглицин Трис буфер Глицилглицин R1b. Субстрат L - γ -глютамнл-З-карбокси-4- ннтроанилид

2.9 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ Добавить 10 мл буфера R1a во флакон с субстратом R1b. Аккуратно перемешать рабочий раствор. Рабочий раствор стабилен 21 дней при + 2 - 8 о С или 5 дней при + 15 - 25 о С.

ПРОЦЕДУРА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Методика теста:

кинетика по фактору

Фактор:

1158

Температура:

37 °C 405 нм 630 нм 3 сек 180 сек по воздуху Е/л до 651 Е/л

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Время задержки:

Время измерения:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

Внести в пробирку:

Макрометод Микрометод

Макрометод

Микрометод

(мкл)

(мкл)

Проба

100

20

Рабочий реагент

1000

200

Перемешать и измерить начальную абсорбцию. По- вторить измерение через 1, 2 и 3 мин.

ВЫЧИСЛЕНИЯ Рассчитать активность - γ -GT по формуле:

Е/л = 1158 х ΔА 405 нм/мин

γ-Glutamyltransferase 100/500 test

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ В СЫВОРОТКЕ

 

25°С Е/л

30°С Е/л

37°С Е/л

Мужчины

6-28

8-38

11-50

Женщины

4-18

5-25

7-32

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

контроля качества

рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN

Для

проведения

ежедневного

1557) и уровень 3 (UE 1558). Используйте значения для метода Randox 37°C.

ЛИНЕЙНОСТЬ Тест линеен до 651 Е/л. Если прирост концентрации за мин превышает 0.2 добавьте к 0.1 мл аликвоты пробы 0.9 мл 0.9%-ного NaCl и повторите анализ.Полученный результат необходимо умно- жить на 6.

ПРИМЕЧАНИЯ Гемолиз может мешать анализу.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

in

vitro. He пипетировать ртом. Соблюдай обычные

меры предосторожности, принятые в лаборатории. Раствор 1 содержит Азид натрия. Избегай попада- ния реактива в рот, контакта с кожей слизистыми. В противном случае промой пораженные участки большим количестве воды. В случае попадания в глаза w проглатывания - обратитесь к врачу. Азид натрия реагирует со свинцом и медью образо- ванием потенциально взрывчатых веществ. Для уничтожения таких образований используйте

воды. Наружные металличе-

большие количества

только

Набор

предназначен

для

диагностики

ские поверхности должны быть обработаны 10%

раствором гидроокиси натрия.

ГЛИКОГЕМОГЛОБИН HbA1 с Турбидиметрический метод определения

ГЛИКОГЕМОГЛОБИН HbA1с

Турбидиметрический метод определения гликозилированного гемоглобина

ПРЕДПОЛАГАЕМОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ Данный иммунологический метод направлен на количественное определение in vitro гемоглобина A 1c (HbA 1c ) в крови. Определение HbA 1c используется при долгосрочном мониторинге сахарного диабета. Этот метод не должен быть использован для диагностики сахарного диабета или ежедневного мониторинга глюкозы. В некоторых методах причиной ошибочного определения процента HbA 1c может быть подвижная фракция гликированного гемоглобина. Данный метод не чувствителен к присутствию подвижного HbA 1c так как использованные антитела специфичны к HbA 1c .

Агглютинатор, состоящий из синтетического полимера содержащего множественные копии иммунореактивного сегмента HbA 1c , вызывает агглютинацию латексных частиц, покрытых HbA 1c специфичными моноклональными антителами мыши. При отсутствии HbA 1c в образце, агглютинатор в HbA 1c R2 реактиве и микрочастицы покрытые антителами в HbA 1c R1 реактиве будут агглютинировать, вызывая увеличение абсорбции. В присутствии HbA 1c в пробе, уровень агглютинации будет уменьшаться, так как молекулы HbA 1c будут конкурировать с агглютинатором за сайты связывания на латексных частицах.

Кат. номер

Таким образом, увеличение абсорбции обратно пропорционально концентрации HbA 1c в пробе.

HA 3830

Увеличение абсорбции, вызванное агглютинацией, измеряют при длине волны 700 нм. Уровень агглютинации используется

R1: Латексный реагент HbA 1c R2: Агглютинирующий реагент HbA 1c R3: Денатурирующий реактив Hb R1: Реактив общего гемоглобинаHb

3 x 14 ml 3 x 14 ml 3 x 50 ml 3 x 28 ml

для подсчета концентрации HbA 1c по калибровочной кривой. Процентное содержание HbA 1c затем подсчитывается из полученных значений для общего гемоглобина и HbA 1c выраженных в гр/дл.

Дополнительный набор HA 3450 Гемоглобин Денатурирующий реактив

2 x 50 ml

Сбор и хранение образцов В этом методе может быть использована и венозная и

КЛИНИЧЕСКАЯ ВАЖНОСТЬ Сахарный диабет – это болезнь сопровождающаяся слабым гликемическим контролем. Многие клинические исследования показали, что осложнения, связанные с диабетом, можно уменьшить путем долгосрочного мониторинга и жесткого

капиллярная кровь. В качестве антикоагулянтов рекомендовано использование ЭДТА или гепарина. Кровь стаблизированная ЭДТА или гепарином стабильна 6 месяцев при -70°С, 2 недели при +5°С или 1 неделю при +25°С Замороженные пробы должны быть разморожены при комнатной

контроля уровня глюкозы в крови. У пациентов-диабетиков, уровень глюкозы которых анормально завышен, уровень HbA 1c также завышен, по причине неферментативного гликирования N-конца β-цепи гемоглобина

температуре, перемешаны перед использованием и не должны быть перезаморожены. Внимание. Все пробы крови должны быть перемешаны непосредственно перед измерением.

А

о . Уровень HbA 1c

пропорционален уровню глюкозы в крови и

Стабильность подготовленных проб Подготовленные пробы могут храниться до 8 часов при комнатной температуре или до 48 часов при +2-8°С в закрытом контейнере. При хранение лизированные пробы могут выпасть в осадок. Рекомендуется перемешивать все пробы непосредственно перед анализом. Если требуется оставить пробы на ночь, рекомендовано оставлять их при +2-8°С

Состав реактивов

широко применяется как индикатор значения ежедневной концентрации глюкозы в промежутках времени больших чем 6-8 недель. По этой причине это долгосрочный индикатор при контроле диабета, тогда как измерение глюкозы в крови – краткосрочный показатель.

ПРИНЦИП МЕТОДА Измеряются концентрации HbA 1c гемоглобина и общего гемоглобина в крови. Результат – процентное содержание HbA 1c гемоглобина от общего гемоглобина крови. Значения полученные для HbA 1c гемоглобина и общего гемоглобина при использовании этого метода используются для определения отношения HbA 1c гемоглобин/общий гемоглобин (%HbA 1c ) и не должны быть использованы по отдельности для диагностических целей

(a)

Hb денатурирующий реактив R3 Свиной пепсин Буфер Консервант pH 2.4 Реактив общего гемогловина R4 Натрия гидроксид Тритон Оскилфеноксиполиэтоксиетанол pH 13 HbA 1c R1 : Анттела Частицы покрытые HbA 1c антителами (мышь) Бычий сывороточный альбумин Буфер Неионные ПАВ Проклин 150 pH 8.1 HbA 1c R2 : Агглютинатор HbA 1c гаптен ковалентно пришитый к полимеру Бычий сывороточный альбумин Буфер Проклин 150 Неионные ПАВ pH 2.0

 

(b)

Пробоподготовка Первый шаг включает в себя обработку образца крови. Производится лизис эритроцитов и гидролиз гемоглобина под действием протеаз, входящих в «Гемоглобин денатурирующий реактив».

Определение общего гемоглобина (10) Реактив общего гемоглобина используется для определения концентрации общего гемоглобина. Метод включает в себя превращение всех производных гемоглобина в гематин в щелочной среде неионного детергента (Wolf et al (1984)). Реакция инициируется добавлением подготовленного образца к Общему реактиву гемоглобина. Результатом является позеленение раствора. Превращение различных видов гемоглобина в щелочной гематин с одним определенным спектром абсорбции позволяет проводить измерение концентрации общего гемоглобина по конечной точке при длине волны 600 нм.

0.4% w/v

2.5% w/v

2.5% w/v

<0.1% w/v

0.6% w/v

0.1% w/v

0.1% w/v

(c)

Определение HbA 1c Определение HbA 1c основано на методе латексного торможения агглютинации.

0.2% w/v

Меры предосторожности Только для in vitro диагностики. Не пипетировать ртом. Соблюдайте обычные меры предосторожности, принятые в лаборатории. Реактив общего гемоглобина содержит гидроксид натрия, который является едким веществом. В случае попадения на открытые участки кожи промыть пораженные участки кожи большим количеством воды и обратиться за квалифицированной медицинской помощью. Реактивы должны быть использованы только квалифицированным лабораторным персоналом при соблюдении условий техники безопасности.

Процедура определения общего гемоглобина

 

Длина волны:

600нм

Кювета:

световой путь - 1 cm

температура:

37C

Измерение:

против реактивного бланка

 

Пипетировать в пробирки для теста:

 
 

Макрометод

Микрометод

 

Стандарт

Реактив

Стандарт

Реактив

Стабильность и приготовление реактивов Все реактивы стабильны до истечения срока годности в поставляемом виде при +2-8°С. Хранить в защищенном от света месте и избегать резких перегревов и переохлаждений. Реактивы должны быть перемешаны и доведены до температуры анализатора примерно за ½ часа до измерения. Реактивы стабильны в течении 30 дней на борту анализатора при +10°С

или проба

Бланк

или проба

Бланк

Стандарт 1

или проба

80 μl

---

20 μl

---

Реактив

1000 μl

1000 μl

250 μl

250 μl

Перемешать

и

инкубировать

5

мин при 37C.

Затем снять

измерение A.

Определение общего гемоглобина Реактив R4 = Реактив общего гемоглобина

Определение HbA 1c гемоглобина Реактив R1 = HbA 1c R1 : Латексный реагент Реактив R2 = HbA 1c R2 : Агглютинирующий реагент

ПРОЦЕДУРА ТЕСТА

Пробоподготовка Смешать 10 μl крови с 400 μl гемоглобин денатурирующего реактива (разведение 1:41) Избегайте вспенивания. Инкубируйте 5 минут при комнатной температуре перед измерением. Подготовленные пробы могут храниться до 8 часов при комнатной температуре или до 48 часов при +2-8ºС в закрытом контейнере.

Процедура определения HbA1c гемоглобина

Подсчет результатов

Общий

гемоглобин (гр/дл) =

А пробы

Х

A стандарта

концентрация станд.

КАЛИБРОВКА HbA 1c гемоглобин Мы рекомендуем использовать набор калибраторов HA3444, уровни 1 – 6, для калибровки этого метода. Для получения калибровочной кривой воспользуйтесь значениями концентраций калибраторов.

Общий гемоглобин Мы рекомендуем использовать 0.9% NaCl в качестве бланка и калибратор 1 уровня, с набора HA3444 для калибровки этого метода. Внимание!!! Калибраторы не требуют пробоподготовки. Калибраторы готовы к использованию, перед использованием несколькоо раз перемешать. Калибраторы не подлежат заморозке, хранятся при температуре 2-8 ºС

Длина волны:

600нм

Кювета:

световой путь - 1 cm

Калибраторы проверены с помощью метода ВЭЖХ для HbA 1c и

температура:

37C

методом Драбкина для общего гемоглобина.

Измерение:

против воздуха

Пипетировать в пробирки для теста:

Макрометод

Микрометод

Стандарт

или проба

20 μl

5 μl

Реактив 1

500 μl

125 μl

Перемешать и инкубировать 5 мин при 37C. Затем добавить:

Макрометод

Микрометод

Реактив 2

500 μl

125 μl

Перемешать и инкубировать точно 5 секунд при 37C, произвести первое чтение A 1 . Инкубировать 120 секунд и снять второе чтение A 2 .

Стандартная кривая и обсчет результатов

A стандарт/проба = A 2 - A 1 (стандарта/пробы)

График A стандарт против концентрации HbA 1c , приведен во вкладыше к Калибратору, используя полулогарифмическую бумагу для графиков. Концентрация пробы снимается с калибровочной кривой. Не экстраполировать за пределы диапазона значений стандартов.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Мы рекомендуем использовать набор контролей HA5072, уровни 1 и 2, рекомендованы для ежедневного контроля качества. Оба уровня контроля должны проводиться как минимум раз в день. Полученные результаты должны попадать в заданный диапазон. В случае если значения не попадают в диапазон и подобная ошибка возникает не однократно, следующие шаги должны быть предприняты:

1.

Проверьте настройки анализатора и источник света.

2.

Проверьте чистоту используемого оборудования.

3.

Проверьте воду на предмет загрязнений (рост бактерий и т.д.)

4.

Проверьте температуру реакции.

5.Проверьте сроки годности реактивов, калибраторов и

контрольных материалов. 6. Обратитесь в отдел технической поддержки Randox Laboratories, Northern Ireland (028) 94422413

Внимание!!! Контрольные материалы требуют пробоподготовки после разведения (разведение 1:41). Контроли не подлежат заморозке, хранятся при температуре 2-8 ºС.

РАСЧЁТ Подсчет концентрации гемоглобина A 1c производится с использованием следующего отношения:

Процентное содержание гликогемоглобина %HbA1c:

% HbA 1c =

HbA 1c (гр/дл) Общ. Hb (гр/дл)

x 100

ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

В отсутствие диабета:

в пределах 4 – 6 %

Контролируемый диабет:

в пределах 6 – 8 %

Неконтролируемый диабет:

20 %

Каждая лаборатория должна составить свои таблицы нормальных значений в зависимости от возраста, пола и национальности пациентов. 1024 практически здоровых мужчин и женщин попадающих под категорию «Норма» были тестированы на гемоглобин А 1С этим методом. Ожидаемые значения лежат в диапазоне от 4.5% до

6.2%.

ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА

1. Предел линейности:

Общий гемоглобин: 7 – 23 г/дл (70 – 230 г/л) для описанных выше условий.

HbA1с: примерно от 0,3 до 2,06 г/дл (3 – 20,6 г/л) для описанных выше условий. Эти значения зависят от используемой партии калибраторов с определенными значениями.

% HbA1с = 14,7% соответствует 2,06 г/дл в 14 г/дл общего

гемоглобина. Пробы со значениями HbA1с выше 14,7% должны разводиться, и результаты должны выдаваться как % HbA1с > 14,7% Диапазон линейности и измерительный диапазон зависят от соотношения пробы и реагента. Он будет повышаться при уменьшении доли пробы, чувствительность теста при этом пропорционально снижается. Метод дает точные и аккуратные результаты по общему гемоглобину в диапазоне от 7 до 23 гр/дл. Пациенты с тяжелыми анемиями (общий гемоглобин < 7гр/дл) и с политемией (общий гемоглобин > 23гр/дл) не должны обследоваться с применением этого метода. Любые случаи уменьшения время жизни эритроцитов, такие как гемолитическая анемия, другие гемолитические болезни, беременность и т.д. ведут к уменьшению % гликированного гемоглобина.

2.

Предел определения:

 

%

HbA1с:

значения

меньше

0.3

г/дл

(3

г/л)

дают

невоспроизводимые результаты.

Общий гемоглобин: значения меньше 1,38 г/дл (13,8 г/л) дают невоспроизводимые результаты.

На практике: чувствительность для общего гемоглобина – 7 г/дл (70 г/л), при заболеваниях, ведущих к снижению общего

гемоглобина ниже 70 г/л, изменяется уровень HbA1с, что ведет к неточным результатам.

% HbA1с = 2,57% соответствует 0,3 г/дл HbA1с в 11,667 г/дл

общего гемоглобина.

Влияющая вещество

Концентрация до которой влияние на обнаружено.

Билирубин

:

513 μmol/l (30 mg/dl)

Триглицериды

:

18 mmol/l (1600 mg/dl)

Ревматоидный фактор

:

2000 IU/ml

Ацетилсалициловая к-та

:

60 mg/dl

Натрия цианат

:

50 mg/dl

Мочевина

:

83 mmol/l (500 mg/dl)

Подвижная фракция гликированного гемоглобина не оказывает влияния, так как используемые антитела являются специфичными к стабильному кетамину.

ГЛЮКОЗА Глюкозооксидазный метод GOD/PAP Кат № : G L 2 6 1 4 R1 .

ГЛЮКОЗА Глюкозооксидазный метод GOD/PAP

Кат № :

GL 2614

R1. Глюкоза реагент Стандарт

2 х 500 мл 1 х 5 мл

ПРИНЦИП МЕТОДА Глюкоза определяется после энзиматической оксидации в присутствии глюкозы оксидазы. Образовавшаяся перекись водорода взаимодействует с фенолом и 4- аминафеназоном под каталитическим воздействием пероксидазы и образует красно-фиолетовый квинонеймин дай, как показатель.

ПРИНЦИП РЕАКЦИИ ГОД Глюкоза + О 2 + Н 2 О------> глюконовая кислота + H 2 O 2 ПОД 2H 2 O 2 + 4-аминафеназон+фенол -------> квинонеймин + 4 H 2 O

ПРОБЫ Кровь, сыворотка, гепаринизированная, ЕДТА плазма. Глюкоза стабильна в течении 24 часов при температуре хранения от +2 до + 8 о С, если сыворотка или плазма приготовлена в течении 30 минут после сбора.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Конц. раствора

R1. Глюкоза реагент Фосфатный Буфер Фенол

4-аминафеназон

Глюкоза оксидаза

Пероксидаза

Стандарт

Глюкоза

0,1 ммоль/л, pH 7.0 11 ммоль/л 0,77 ммоль/л 1.5 кЕд/л 1.5 кЕд/л

смотр. вложение

 

GLUCOSE

1000/4000 test

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ 1. Глюкоза реагент Готов для использования. Стабилен в течение срока, указанного на этикетке при +2 - +8 о С.

НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ

 

ммоль/л

мг/дл

Сыворотка, плазма (натощак)

4.2-6.4

75-115

 

2. Стандарт Готов для использования. Стабилен в течение срока, указанного на этикетке при +2 - +8 о С.

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

по Стандарту смотрите вложение 37 °C 505 нм 630 нм бланк по реагенту ммоль/л до 22 ммоль/л

Концентрация стандарта:

Температура:

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

Внести в пробирки:

Макрометод Микрометод

Макрометод

Микрометод

Бланк

Проба/

Бланк

Проба/

(мкл)

Стандарт

(мкл)

Стандарт

(мкл)

(мкл)

Проба/

 

10

 

2,5

Стандарт

Реагент

1000

1000

250

250

Смешать, инкубировать 25 мин при 15-25 о С или 10 мин при 37 о С. Затем не позже чем через 60 мин измерить абсорбцию А пробы и А стандарта против Реагент/Бланка.

ВЫЧИСЛЕНИЯ

А пробы Конц. глюкозы (мг/дл) = --------------- х Конц. станд. А станд.

ЛИНЕЙНОСТЬ Линейность сохраняется до концентраций глюкозы 400 мг/дл или 22 ммоль/л. Пробы с большей концентрацией нужно разбавить дистиллированной водой в соотношении 1 + 2 и результат умножить на 3.

КАЛИБРОВКА И КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Выполнение калибровки можно провести либо при помощи стандарта, входящего в состав наборов GL 2614 и GL 2623, либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 2 (CAL 2350) или уровень 3 (CAL 2351), либо с использованием мультикалибратора RANDOX (MC

1382).

Используйте значения для метода Glucose oxidase.

Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558), либо RANDOX мультиконтроль уровень 1 (MC 1379), уровень 2 (MC 1380), уровень 3 (MC 1381). Для контроля мочи рекомендуется использовать либо RANDOX контрольную мочу уровень 2 (AU 2352) и уровень 3 (AU 2353), либо RANDOX контрольную мочу на воспроизводимость уровень 2 (UC 1502) и уровень 3 (UC 1503).

ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ На этот тест не влияют мочевая кислота, аскорбиновая кислота, глютатион, антикоагулянты и креатинин в физиологической концентрации.

Апр Конц. глюкозы (ммоль/л) = --------- х Конц. станд. Аст

ЖЕЛЕЗО СЫВОРОТКИ (Fe) Колориметрический метод Кат. № SI 257 R

ЖЕЛЕЗО СЫВОРОТКИ (Fe) Колориметрический метод

Кат. № SI 257

R1.Хромоген

1

х 10 мл

2 х 100 мл

R2.Редуктант

1

х 15 мл

R3.Буфер

2 х 100 мл

CAL. Стандарт

1

х 10 мл

ПРИНЦИП МЕТОДА Окисленный ион железа освобождаясь в кислой среде от своего белкового носителя трансферина полуколичественно восстанавливается в молекулярную форму. Затем восстановленное железо образует комплексное соединение с чувствительным индигатором железа - хромогеном, в результате чего получается голубой хромофор, который имеет максимальную абсорбцию при 595 нм.

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка. РЕАГЕНТЫ

Состав

Исходная концентр.

R1. Хромоген Феррин R2. Редуктант Аскорбиновая к-та R3. Буфер Ацетатный буфер Диметилсульфоксид Сурфактант CAL. Стандарт

22.2 ммоль/л

1.3 моль/л

0.87 моль/л, рН 4.65

36.03 мкмоль/л (201 мкг/дл)

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ R2. Редуктант Растворить содержимое флакона R2 Редуктантa в 15 мл деионизированной воды без ионов железа. Готовый раствор редуктанта стабилен 3 месяца при +4 - +8 о С.

Остальные реактивы готовы для использования в течение срока, указанного на этикетке при + 15 - +25 о С.

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

по стандарту смотрите вложение 25/37 °C 600 нм 700 нм бланк по реагенту мкмоль/л до 152 мкмоль/л

Концентрация стандарта:

Температура:

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

Внести в пробирки:

Макрометод Микрометод

Макрометод

Микрометод

Бланк

Проба/

Бланк

Проба/

(мкл)

Станд.

(мкл)

Станд.

(мкл)

(мкл)

Буфер R3

1000

1000

200

200

Редуктант

50

50

10

10

R2

Проба/

 

250

 

50

Стандарт

---

---

Смешать, измерить начальную абсорбцию (А1) пробы и стандарта против Реагент-бланка, затем добавить:

Хромоген

50

50

10

10

R1

Смешать, инкубировать в течение 15 мин при 20 -25 о С или 7 мин при 37 о С. Измерить финальную абсорбцию (А2) против Реагент-Бланка. Вычесть начальную А1 абсорбцию из А2, чтобы получить А для Пробы и Стандарта.

ВЫЧИСЛЕНИЯ АПробы Концентрация = ------------- АСтандарта

х

конц.стандарта

IRON (Fe)

200/1000 test

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ В СЫВОРОТКЕ

Мужчины:

10.6 - 28.3 мкмоль/л (59 - 158 мкг/дл)

Женщины:

6.6 - 26.0 мкмоль/л (37 - 145 мкг/дл)

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Выполнение калибровки рекомендуется проводить либо с использованием стандарта, входящего в состав данного набора, либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 2 (CAL 2350) или уровень 3 (CAL 2351). Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). Используйте значения для метода Colorimetric without ppt.

ЛИНЕЙНОСТЬ Линейность сохраняется до концентраций глицерина 152 мкмоль/л (854 мкг/дл). Пробы с более высоким содержанием должны быть разведены 1 + 2 водой без ионов железа и после повторного анализа результат необходимо умножить на 3.

ПРИМЕЧАНИЯ Необходимо, чтобы оборудование для сбора образцов и проведения анализа были свободны от присутствия даже следовых количеств иона железа.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетировать ртом. Раствор 1 содержит Азид натрия. Избегайте попадания реактива в рот, контакта с кожей и слизистыми. В противном случае промойте пораженные участки большим количеством воды. В случае попадания в глаза или проглатывания - обратитесь к врачу. Азид натрия реагирует со свинцом и медью с образованием потенциально взрывчатых веществ.

ОЖСС (TIBS) Набор для пробоподготовки Кат. № TI 1010 1 х 100 мл R1.

ОЖСС (TIBS) Набор для пробоподготовки

Кат. № TI 1010 1 х 100 мл

R1. Раствор железа R2. Магния карбонат

1 х 100 мл 2 х 10 г

ПРИНЦИП МЕТОДА Избыток железа добавлят в сыворотку, чтобы создать насыщенные условия для его белкового носителя трансферина. Несвязанное железо осаждают основным карбонатом магния. После центрифугирования определяют общее содержание железа в супернатанте, что и соответствует общей железосвязывающей способности.

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка. РЕАГЕНТЫ

Состав

Исходная концентр.

R1. Раствор железа Железо R2. Магния карбонат основной

89,5 мкмоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ R1. Раствор железа. Содержимое флакона готово к использованию и стабильно до окончания срока годности при температуре хранения +15 +25°C

R2. Магния карбонат основной. Содержимое флакона готово к использованию и стабильно до окончания срока годности при температуре хранения +15 +25°C.

МЕТОДИКА ПОДГОТОВКИ ПРОБЫ

Внести в центрифужные 10 мл пробирки:

Проба

500 мкл

R1. Раствор железа

1 мл

Перемешать и выдержать при комнатной температуре 5 – 30 минут. Затем добавить полный шпатель (180 мг) магния карбоната основного R2. Выдержать при комнатной температуре 30 – 60 минут периодически перемешивая. Далее отцентрифугировать в течение 10 минут при 3000 об/мин. Супернатант может храниться до 1 ч.

Супернатант должен быть абсолютно чистым. Если он таковым не является, то необходимо его отобрать и повторно центрифугировать. Используйте для анализа 500 мкл супернатанта в наборах (Кат.№ SI 257 и Кат.№ SI 255).

ВЫЧИСЛЕНИЯ ОБЩЕЙ ЖЕЛЕЗО- СВЯЗЫВАЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ (TIBC). Используя стандарт из набора SI 257.

А пробы TIBC (мкмоль/л) = --------------- А стандарта

х

TIBC (мг/дл)

0,003

А пробы

=

----------------

А стандарта

конц. станд. х 3

х

конц. станд. х

Для того чтобы расчитать ненасыщенную связывающую активность (UIBC) необходимо вычесть концентрацию железа в сыворотке из TIBC.

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

Сыворотка:

46.4 - 69.5 мкмоль/л

(0.259 -0.388 мг/л)

TIBS

100 test

КАЛИБРОВКА И КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Выполнение калибровки можно проводить с использованием водного раствора стандарта, входящего в состав набора Si 257. Пробоподготовку стандарта при этом проводить не надо. Проведение ежедневного контроля качества можно выполнять с использованием либо контрольной мультисыворотки RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо с использованием контрольной сыворотки на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). Пробоподготовку контрольной сыворотки проводить не надо. При получении результата анализа контроля ориентируйтесь на значение концентрации железа, а не ОЖСС. Используйте значения для метода Colorimetric without ppt.

Для более точной калибровки используйте калибровочную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (CAL 2350) или уровень 3 (CAL 2351). При этом выполните ее пробоподготовку, как и с образцами пациентов. Используйте значения ОЖСС для метода Removal of excess free iron. Для проведения более точного ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558). При этом выполните ее пробоподготовку, как и с образцами пациентов. Используйте значения ОЖСС для метода Removal of excess free iron.

UIBC = TIBC - конц.Fe в сыворотке

ПРИМЕЧАНИЯ Супернатант должен быть абсолтно чистым; если нет, то необходимо декантировать и центрифугировать снова, при этом рекомендуется использовать бакет, а не угловые ротора.

POTASSIUM (K) 50/100 test КАЛИЙ Колориметрический метод с осаждением .

POTASSIUM (K)

50/100 test

КАЛИЙ Колориметрический метод с осаждением.

ПРОЦЕДУРА

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

1.Осаждение

Сыворотка:

3.5 - 5.1 ммол/л 4.0 - 4.8 ммол/л

 

Внести в центрифужные пробирки:

Плазма:

Кат № :

PT 1600

R1. Преципитирующий реа-т

100 мл

R2а. Na-Тетрафенилборат R2b. NaOH CAL Стандарт

Макро

Микро

(мкл)

(мкл)

100

50

1000

500

Смешать, после чего центрифугировать при высоких скоростях (10000-12000 об/мин) в течение 10 мин. Отберите необходимое количество надосадка и используйте для анализа

2. Определения Калия

Методика теста:

Температура:

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

по стандарту 20 - 25°C 578 нм 700 нм против бланка-реагента ммоль/л 5.67 ммоль/л

1 х 100 мл

1 Проба

х 50 мл

1 Преципитирующий реагент R1

х 50 мл

1 x 5.5 мл

ПРИНЦИП МЕТОДА В свободной от белка щелочной среде Тетрафенилборат-Na вступает в реакцию с ионом калия образуя мутную суспензию Тетрафенилбората-К. Степень мутности раствора пропорциональна концентрации калия.

МАТЕРИАЛ ПРОБ Cыворотка или плазма с литием-гепарином.

РЕАГЕНТЫ

Состав

Концентрация р-ра

R1.Преципитирующий Реагент Трихлоруксусная кислота R2a. Nа-Тетрафенилборат R2b. Na-Гидроксид Стандарт

мол/л

мол/л

мол/л

см. вложение

0.3

0.2

2.0

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧИХ РАСТВОРОВ Все растворы использeуют неразведенными. Стабильны в течение срока, указанного на этикетке при +15 - +25 о С. Смешать равные объемы растворов R2a и R2b в количестве, достаточном для работы с заданным числом образцов. Рабочий раствор стабилен в течение 30 дней при +15 - +25 о С и 60 дней при +2 - +8 о С.

Внести в пробирку:

Макро Микро

Макро

Микро

 

Проба/

 

Проба/

Бланк

(мкл)

Станд.

(мкл)

Бланк

(мкл)

Станд.

(мкл)

Рабочий

       

Реагент

2000

2000

1000

1000

Стандарт/

 

200

 

100

Надосадок

---

---

Стандарт и прозрачный супернатант (надосадок) для получения равномерного помутнения раствора необходимо вносить в центр поверхности рабочего реагента. Осторожно смешать и дать постоять по крайней мере 5 мин. Измерить абсорбцию стандарта и образца против реагента-бланка (А).

Калий (ммол/л) =

Апробы ---------------------- х конц. С Астандарта

ЛИНЕЙНОСТЬ Линейность сохраняется при концентрациях Калия до 10 ммол/л. Пробы с более высокими значениями разводят 1 + 2 0.9%-ным NaCL, а результат умножают на 3.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Выполнение калибровки рекомендуется проводить с использованием либо калибратора, входящего в состав данного набора, либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 3 (CAL 2351) или уровень 2 (CAL 2350).! При использовании в качестве калибратора мультисыворотки выполните процедуру пропоподготовки, как и с образцами пациентов. Для калибровки используйте супернатант. Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), С контрольными сыворотками выполните процедуру пробоподготовки, как и с образцами пациентов. Используйте значения для метода Enzymatic.

ИСКАЖЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ. Гемолиз мешает корректному анализу из-за высокого содержания калия в эритроцитах, поэтому образцы должны быть отделены от сгустков после взятия. Рекомендуется использовать одноразовые пластиковые принадлежности, так как стеклянная посуда может являться источником калия и как следствие - значительных погрешностей. Избегайте загрязнения детергентами.

POTASSIUM 350 test КАЛИЙ Прямой метод (УФ метод )   ПРИГОТОВЛЕНИЕ

POTASSIUM

350 test

КАЛИЙ Прямой метод (УФ метод)

 

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ R1 Реагент Развести содержимое флакона Энзим/Субстрата R1а в небольшой порции Буфера R1b, после чего перенести

НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

Сыворотка:

3.50 – 5.10 ммоль/л (13,7 – 19,9 мг/дл)

Кат.№

ЛИНЕЙНОСТЬ Линейность сохраняется при концентрациях Калия от 2 до 10 ммол/л (7.8 - 39.0 мг/дл).

PT 3852

R1a. Буфер R1b. Энзим/Субстрат R2a. Разбавитель R2b. Энзим Электролит CAL1,2

3

х 20 мл

этот раствор во флакон Буфера R1b, несколько раз

3

х 20 мл

ополоснув флакон R1а. Стабилен в течение 30 дней при

3

х 9 мл

+2 - +8 о С.

3

х 9 мл

КАЛИБРОВКА И КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА. Выполнение калибровки рекомендуется проводить с использованием либо калибраторов, входящих в состав данного набора, либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 3 (CAL 2351). Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную

2

х 2 мл

R2 Реагент Развести содержимое одного флакона R2а в небольшой порции Разбавителя R2b, перенеся полученный раствор во флакон Разбавителя R2b, несколько раз ополоснув флакон R2а. Стабилен в течение 30 дней при +2 - +8 о С.

ПРОЦЕДУРА

ПРИНЦИП МЕТОДА Калий определяется ферментативно по активности калий-зависимой пируваткиназы (PK) с использо- ванием фосфоенолпирувата (PEP) как субстрата. Образующийся пируват реагирует с NADH в при- сутствии ЛДГ с образованием лактата и NAD. Соответствующее снижение оптической плотности при 340 нм пропорционально концентрации калия.

Методика теста:

кинетика по фикс. времени по стандарту смотрите вложение 37 °C 340 нм 630 нм 120 сек. 240 сек. бланк по реагенту ммол/л до 10 ммол/л

мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) или уровень 3 (HE 1532). Используйте значения для метода Enzymatic.

Концентрация стандарта:

 

Температура:

ПОМЕХИ На результатах анализа не сказываются концентрация аммония до 500 мкмол/л и триглицеридов - до 8 ммол/л.

ПРОБА Сыворотка или литий-гепаринизированная плазма крови. Повышение уровня калия в сыворотке/плазме может произойти из-за возможных побочных эффектов при подготовке пробы. Поэтому образцы крови следует держать при комнатной температуре и немедленно центрифугировать. Не рекомендуется повторное центрифугирование.

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Время задержки:

 

Время измерения:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

Внести в пробирки:

РЕАГЕНТЫ

Состав

Исходная конц. растворов

R1.Буфер/Энзим/

Субстрат Трис Буфер Сryptand PEP ADP -оксиглутарат NADH GLDH PK R2. Разбавитель Энзима LDH

250 ммол/л, pH 8.2 12 ммол/л

> 3.3 ммол/л

> 3.15 ммол/л

> 1.2 ммол/л

> 0.35 ммол/л

> 11 E/мл

> 1.2 Е/мл

> 65 Е/мл

 

Бланк

Стандарт

Проба

(мкл)

(мкл)

(мкл)

Стандарт

---

5

---

Проба

--

---

5

R1 Реагент

180

180

180

R2 Реагент

70

70

70

Перемешать, измерить абсорбцию стандарта и проб

через 120 с (A1) и через 240 с (A2).

РАСЧЕТ Расчитайте ΔA = A2 – A1 для проб и стандарта.

ΔA пробы --------------- = x (C стандарта) = ммоль/л Калия в пробе

ΔA STD

КАЛЬЦИЙ Колориметрический метод Арсеназо III Кат № : C A 2 3 9 0

КАЛЬЦИЙ Колориметрический метод Арсеназо III

Кат № :

CA 2390

R1.Арсеназо-реагент

6 х 100 мл

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ Кальций наиболее распространенный в человеческом организме химический элемент. Около 99% его в виде гидроксилаппатита входит в состав костей. Остальной Са распределен в других тканях и жидкостях. Кальций играет существенную роль в процессах свертывания крови, нервно-мышечном состоянии, участвуя в возбуждении скелетной и сердечной мускулатуры и активации ферментов.

ПРИНЦИП МЕТОДА Арсеназо III специфически связывает кальций, формируя при этом окрашенное соединение:

Са ++ + Arsenazo III ------->coloured complex

Количество кальция, присутствующего в пробе прямо пропорционально интенсивности окрашивания образованного комплекса.

ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка/Плазма: Ни в коем случае не использовать в качестве антикоагулянтов оксалат натрия, ЭДТА или фтористый натрия так как они могут искажать получаемые результаты. Сыворотка стабильна в течение 8 ч при комнатной температуре или 24 ч при +2 - +8 о С. Моча: Рекомендуется, чтобы моча была измерена в течение двух часов после отбора.

РЕАГЕНТЫ

Состав

концентрация р-ра

R1. Арсеназо III-реагент Ацетат натрия Арсеназо

90 ммоль/л, рН 5.9 348 мкмоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧИХ РАСТВОРОВ Все реагенты готовы для использования и стабильны в течение срока, указанного на этикетке при +15 - +25 о С.

ПРОЦЕДУРА

Методика теста:

по Стандарту смотрите вложение 37 °C 630 нм 700 нм бланк по реагенту ммоль/л до 4.25 ммоль/л

Концентрация стандарта:

Температура:

Основной фильтр:

Диф. фильтр:

Бланк:

Единицы изм.:

Линейность:

Внести в пробирку:

Макрометод Микрометод

Макрометод

Микрометод

Бланк

Проба/

Бланк

Проба/

(мкл)

Станд.

(мкл)

Станд.