UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA, Managua

UNAN-MANAGUA
FACULTAD DE MEDICINA Y CIENCIAS MEDICAS
Tema:
Ciclo de Kreps
Autor:
 José Omar Morales Arévalo 13072875

 Alisson Martínez Pilarte 18032637

 Jose Rodolfo Paz Noguera 18032065

 Yodir Abisai Pérez Arriola 18033210

 Sara Isabel Pineda Acevedo 18032076

 Kathya Carolina Pérez Gallegos 18031262

 Litzy Souling Pérez Salvador 16207130

 Alizon Dayana Morales 18033242

 Mirza Odalys Obando López 18032472

 Nathaly Yolieth Munguia Gonzales 18031669

 Ivania Esther Portobanco Obando 18032648

 Jendry Magdaly Machado Contreras 18031284

 Danilo Jose Sandino Mejía 18033726

 Daniela Fabiola Ruiz Reyes 18031691

Tutor:
Lic. Gloria Navarrete

Managua, 21 de junio del 2019

 Introducción

La vía de la pentosa fosfato es una ruta alternativa para el metabolismo de la

glucosa. La deficiencia genética de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, la primera
enzima de la vía de la pentosa fosfato, es una causa importante de lisis aguda de
eritrocitos, lo que origina anemia hemolítica.

La Descarboxilación oxidativa del ácido pirúvico (DOP) A este proceso de

descarboxilación lo acompaña un proceso de deshidrogenación (oxidación),
mediante el cual el resto de la molécula de piruvato termina conformando el grupo
acetilo (de dos átomos de carbono) del acetil-CoA.

El ciclo de Krebs consta de varias rutas metabólicas o catabólicas, en donde han de

intervenir gran cantidad de sustancias por la síntesis de glúcidos, grasas y
proteínas, que hacen el proceso de oxidación hasta formar dióxido de carbono o
CO2.

Gran parte de la energía de estos procesos de oxidación se retiene por la acción de

los transportadores de electrolitos FADH2, y también NADH, que se producen
durante el metabolismo aerobio. Luego estos electrones se transportan al oxígeno,
al tiempo que la energía se reserva en forma de ATP, por lo tanto, este ciclo, en
esta parte, tiene como fin producir energía en forma de ATP y GTP.

Por otra parte, el acetil-CoA se introduce al ciclo dentro de las mitocondrias, y el

citosol bacteriano en el momento en que la sintasa cataliza y se condensa, formando
oxalacetato, que finalmente se transforma en citratos; este es otra ruta que se lleva
a cabo en el ciclo de Krebs de los citratos.

A partir del citrato, se producen las reacciones del ácido cítrico, reacciones de las
células que son siete y secuenciales. Éstas pueden incluir dos decarboxililaciones,
ocurre una transformación del citrato en oxalacetato por cada uno consumido.

Por otro lado, la sustancia Acetil CoA o coenzima A, que es oxidado en el ciclo, su
totalidad energética genera tres moléculas: una de NADH y otra de FADH2, y un
GTP. Al igual que el Aceltil CoA, cualquier otro compuesto de este ciclo puede
oxidarse con cuatro o cinco moléculas. El ciclo de Krebs realiza tanto reacciones
catabólicas como anabólicas.
Preguntas

1. Diga cómo penetra el Piruvato en la mitocondria para la DOP.

La descarboxilación oxidativa del piruvato es una ruta irreversible mediante la cual

el piruvato es oxidativo, con liberación de dióxido de carbono CO2 para formar Acetil

CoA y NADH,H.

A nivel celular el piruvato resultante de la glucolisis es introducido a la mitocondria

por acción de la enzima piruvato-translocasa. Por ende, todas las reacciones de la

descarboxilación oxidativa del piruvato se dan en la mitocondria

2. Escriba la ecuación global de la DOP.

Piruvato + NAD+ + CoA Acetil CoA + NADH, H + H+ + CO2

3. Describa los componentes del Complejo PDH.

1. Descarboxilación del piruvato.

La enzima que cataliza esta reacción es el piruvato- DH que usa como coenzima

el pirofosfato de tiamina (TPP), una vez unido es descarboxilado. Como producto

se obtiene Hidroxietil TPP y se libera CO2.

2. Deshidrogenación del hidroxietil- TPP.

En esta etapa el hidroxietil TPP es deshidrogenizado. La enzima dihidrolipoil-

transcetilasa cataliza esta reacción. El grupo acetilo resultante es transferido al

átomo de azufre situado en el carbono 6 del acido lipoico oxidado (coenzima de

la DHL-T), como producto se obtiene ácido lipoico en forma reducida.

3. Transferencia del grupo acetilo

La enzima que participa es la dihidrolipoil-transacetilasa que transfiere el grupo

acetilo desde ácido dihidrolipoico hacia la coenzima A, produciendo acetil CoA

que abandona el complejo en forma libre y acido lipoico en forma reducida

4. Oxido reducción del ácido lipoico reducido (Lipoamino)

La enzima que participa es la dihidrolipoil-deshidrogenasa que utiliza como

cofactor al FAD+ para oxidar el lipoamido. En esta reacción se obtiene FADH2

que permanece unido a la enzima.

5. Oxidorreducción de la Dihidrolipoil-DH-FADH2

En esta reacción el FADH2 que permanece unido a la enzima DHL-DH es

reoxidado por el NAD+, que se convierte en el aceptor final de hidrogeno, con lo

que se obtiene NADH, H.

4. Esquematice la regulación del complejo PDH.

El piruvato deshidrogenasa (PDH), es la principal enzima reguladora de la

descarboxilación oxidativa del piruvato. Está regulada por las enzimas PDH-
Fosfatasa que la activa y la PDH-quinasa que la inactiva por desfosforilación y
fosforilación respectivamente
 5. Cuando hay deficiencia de la PDH se presenta un aumento del Lactato

y Alanina, así como serios daños neurológicos. ¿Justifique por qué?

Partiendo de que el PDH o la descarboxilación oxidativa del piruvato forma uno de

los principales sustratos del ciclo de kreps (Acetil CoA), al presentarse una

deficiencia de este, significaría que no se podría iniciar el ciclo de kreps asi mismo

significaría que no se puede oxidar el piruvato de manera aeróbica, lo que se ve

reflejado al aumentarse la presencia de lactato en sangre, orina y sistema nervioso

central en una manera anormal.

Sabiendo que solo se producirá energía anaeróbicamente, por lo tanto, abra menos

cantidad de ATP, insuficiente para los requerimientos básicos del cuerpo asi mismo

la acumulación de lactato, provocará daños en el organismo, especialmente en el

cerebro quien es el órgano de mayor consumo energético de los seres humanos y

el que menos posee reserva.

Existen tres formas clínicas principales en que se manifiesta la deficiencia de PDH:

 La forma neonatal grave, con acidemia láctica severa y refractaria al

tratamiento. La afectación neurológica es grave y el pronóstico es muy

reservado. Presentan a veces síndrome de Leigh y/o atrofia cerebral.

 La forma moderada muestra un menor retraso psicomotor y una academia

láctica más leve.

 La forma tardía se caracteriza por ataxia o fatigabilidad y/o debilidad

muscular. En ocasiones los pacientes pueden presentar hemiparesia y/o

distonía.

6. ¿Cuál es la explicación del tratamiento con tiamina?

La tiamina se combina con el adenosín-trifosfato (ATP) en el hígado, los riñones y

los leucocitos para formar el difosfato de tiamina. El disfosfato de tiamina actúa

como coenzima en el metabolismo de los carbohidratos, en las reacciones de

transcetolación y en la utilización de las hexosas. Sin unas cantidades adecuadas

de tiamina, el ácido pirúvico es incapaz de convertirse en acetil-CoA y, por tanto, no

puede entrar en el ciclo de Krebs. La acumulación de ácido pirúvico en la sangre y

su conversión a ácido lactico es la responsable de la acidosis láctica que se

desarrolla en la deficiencia de vitamina B1. La deficiencia de vitamina B1 se

manifiesta también como un síndrome inespecífico caracterizado por malestar

general, cefaleas, mialgias y nauseas, así como mafinestaciones cardiológicas

(vasodilatación periférica, edema e insuficiencia ventricular) y neurológicas

(neuropatía, ataxia, amnesio retrógrada, falta de concentración, etc).

 7. La restricción de los carbohidratos de la dieta al 30% de las calorías

alimentarias ha sido bastante eficaz en el alivio de los síntomas de la

acidosis láctica en pacientes con un defecto genético del complejo

PDH. Explique el fundamento de este tratamiento.

Los pacientes con deficiencia hereditaria de piruvato deshidrogenasa, puede ser el

resultado de defectos en uno o más de los componentes del complejo de enzimas,

también presentan acidosis láctica, en particular después de una carga de glucosa.

Debido a la dependencia del cerebro de la glucosa como un combustible, estos

defectos metabólicos por lo general causan alteraciones neurológicas.

El piruvato deshidrogenasa y, por ende, la glucólisis, son inhibidas cuando se

dispone de ATP adecuado (y coenzimas reducidas para la formación de ATP), y

también cuando los ácidos grasos se están oxidando. En el ayuno, cuando

aumentan las concentraciones de ácido graso libre no esterificado, hay un

decremento de la proporción de la enzima en la forma activa, lo que lleva a una

preservación de carbohidrato. En el tejido adiposo, donde la glucosa proporciona

acetil-CoA para lipogénesis, la enzima se activa en respuesta a insulina.

 8. Importancia biológica del ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs (conocida también como ciclo de los ácidos tricarboxilicos o ciclo

del ácido cítrico) es un ácido metabólico de importancia fundamental en todas las

células que utilizan oxígeno durante el proceso de respiración celular. En estos

organismos aeróbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjunción de las rutas

metabólicas responsables de la degradación y desasimilación de los carbohidratos,

las grasas y las preteínasen anhídrido carbónico y agua con la formación de energía

química.
 9. Describa las reaciones del Ciclo de Krebs.

Reacción 1: Citrato sintasa (De oxalacetato a citrato)

El sitio activo de la enzima, activa el acetil-CoA para hacerlo afín a un centro

carbonoso del oxalacetato. Como consecuencia de la unión entre las dos moléculas,

el grupo tioéster (CoA) se hidroliza, formando así la molécula de citrato.

Reacción 2: Aconitasa (De citrato a isocitrato)

La Aconitasa cataliza la isomerización del citrato a isocitrato, por la formación de

cis-aconitato. La enzima cataliza también la reacción inversa, pero en el ciclo de

Krebs tal reacción es unidireccional a causa de la ley de acción de masa: las

concentraciones (en condiciones estándar) de citrato (91%), del intermediario cis-

aconitato (3%) y de isocitrato (6%), empujan decididamente la reacción hacia la

producción de isocitrato.

Reacción 3: Isocitrato deshidrogenasa (De isocitrato a oxoglutarato)

El isocitrato deshidrogenasa mitocondrial es una enzima dependiente de la

presencia de NAD+ y de Mn2+ o Mg2+. Inicialmente, la enzima cataliza la oxidación

del isocitrato a oxalsuccinato, lo que genera una molécula de NADH a partir de

NAD+. Sucesivamente, la presencia de un ión bivalente, que forma un complejo con

los oxígenos del grupo carboxilo en posición alfa, aumenta la electronegatividad de

esa región molecular. Esto genera una reorganización de los electrones en la

molécula, con la consiguiente rotura de la unión entre el carbono en posición gamma

y el grupo carboxilo adyacente.

Reacción 4: a-cetoglutarato deshidrogenasa (De oxoglutarato a Succinil-CoA)

Después de la conversión del isocitrato en a-cetoglutarato se produce una segunda

reacción de descarboxilación oxidativa, que lleva a la formación de Succinil CoA. La

descarboxilación oxidativa del a-chetoglutarato es muy parecida a la del piruvato,

otro a-cetoácido.

Ambas reacciones incluyen la descarboxilación de un a-cetoácido y la consiguiente

producción de una unión tioéster a alta energía con la coenzima A. Los complejos

que catalizan tales reacciones son parecidos entre ellos.

La a-cetoglutarato deshidrogenasa (o, más correctamente, oxoglutarato

deshidrogenasa), está compuesta de tres enzimas diferentes:

1. Subunidad E1: las dos cetoglutarato deshidrogenasas.

2. Subunidad E2: la transuccinilasa.

3. (La subunidad E1 y E2 presentan una gran homología con las de la piruvato

deshidrogenasa.)

4. Subunidad E3: la dihidrolipoamida deshidrogenasa, que es el mismo

polipéptido presente en el otro complejo enzimático.

Reacción 5: Succinil-CoA sintetasa (De Succinil-CoA a succinato)

El Succinil-CoA es un tioéster a alta energía (su ?G°' de hidrólisis está en unos -

33.5 kJ mol-1, parecido al del ATP que es de -30.5 kJ mol-1). La citrato sintasa se

sirve de un intermediario con tal unión a alta energía para llevar a cabo la fusión

entre una molécula con dos átomos de carbono (acetil-CoA) y una con cuatro
(oxalacetato). La enzima Succinil-CoA sintetasa se sirve de tal energía para

fosforilar un nucleósido difosfato purinico como el GDP.

Reacción 6: Succinato deshidrogenasa (De succinato a fumarato)

La parte final del ciclo consiste en la reorganización de moléculas a cuatro átomos

de carbono hasta la regeneración del oxalacetato. Para que eso sea posible, el

grupo metilo presente en el succinato tiene que convertirse en un carbonilo. Como

ocurre en otras rutas, por ejemplo en la beta oxidación de los ácidos grasos, tal

conversión ocurre mediante tres pasos: una primera oxidación, una hidratación y

una segunda oxidación. Estos tres pasos, además de regenerar oxalacetato,

permiten la extracción ulterior de energía mediante la formación de FADH2 y NADH.

Reacción 7: Fumarasa (De fumarato a L-malato)

La fumarasa cataliza la adición en trans de un protón y un grupo OH- procedentes

de una molécula de agua. La hidratación del fumarato produce L-malato.

Reacción 8: Malato deshidrogenasa (De L-malato a oxalacetato)

La última reacción del ciclo de Krebs consiste en la oxidación del malato a

oxalacetato. La reacción, catalizada por la malato deshidrogenasa, utiliza otra

molécula de NAD+ como aceptor de hidrógeno, produciendo NADH.

La energía libre de Gibbs asociada con esta última reacción es decididamente

positiva, a diferencia de las otras del ciclo. La actividad de la enzima es remolcada

por el consumo de oxalacetato por parte de la citrato sintasa, y de NADH por parte

de la cadena de transporte de electrones.

 10. Explique la regulación del Ciclo de Krebs.

La velocidad del ciclo de Krebs viene continuamente modulada para cumplir con las

necesidades energéticas exactas de la célula. Los sitios primarios de control son

las enzimas alostéricas: el isocitrato deshidrogenasa y la cetoglutarato

deshidrogenasa.

El isocitrato deshidrogenasa es estimulada alostérica mente por la presencia de

ADP, que aumenta la afinidad de la enzima por el sustrato. Las uniones de isocitrato,

de NAD+, de Mg2+, y de ADP, a la enzima son mutuamente cooperativas en sentido

activador. Por contra, el NADH inhibe la enzima por el desplazamiento directo de

NAD+. El mismo ATP tiene efecto inhibitorio.

El segundo sitio del control del ciclo de Krebs está cerca de la α-cetoglutarato

deshidrogenasa.

Algunos aspectos del control de esta enzima son parecidos a los del complejo

enzimático de la piruvato deshidrogenasa, como puede esperarse dada la extrema

homología entre las dos enzimas. La α-cetoglutarato deshidrogenasa es inhibida

por el succinil-CoA y el NADH, es decir, los productos de la reacción que cataliza.

La α-cetoglutarato deshidrogenasa puede ser también inhibida genéricamente por

un alto nivel energético presente en la célula. Esto significa que, en presencia de

altos niveles de ATP, la célula es capaz de reducir la eficiencia del proceso de

producción de energía.

En muchas bacterias, también se controla la entrada en el ciclo de las moléculas

con dos átomos de carbono. En ellos, la síntesis de citrato, oxalacetato y acetil-CoA

es la sede de una importante regulación. EL ATP, en efecto, es un inhibidor

alostérico de la citrato sintasa. El efecto concreto del ATP es aumentar la KM de la

enzima por el acetil CoA. De este modo, cuanto más ATP está presente en la célula

menos Acetil-CoA se introduce en el ciclo.

11. Ilustre las propiedades anfibólicas del ciclo de Krebs.
 12. Represente las reacciones anapleoroticas del ciclo de Krebs?

La reacción anaplerotica más importante es la carboxilación del piruvato para formar

oxalacetato, este proceso es catabolizado por la enzima piruvato carboxilasa.

Piruvato Carboxilasa

Piruvato+ H2O + ATP + CO2 Oxalacetato + ADP + PI

Otra reacción anapleroticas es catabolizada por la enzima málica.

Enzima málica

Piruvato + CO2 + NADP Malato + NADPH, H

Las reacciones de transaminacion pueden originar intermediarios del ciclo a partir

de los aminoácidos aspartato y glutamato. Estas reacciones son catalizadas por la

alanina transaminasa y la aspartato transaminasa.

ALAT/ GPT

Glutamato + Piruvato α- cetoglutarato + Alanina

AST/ GOT

Aspartato + Piruvato Oxalacetato + Alanina

Tanto la α- cetoglutarato como el oxalacetato pueden incorporarse al ciclo.

13. Elabore un esquema detallado del balance energético de la combustión
total de la glucosa, indicando las reacciones implicadas.
 Molécula Enzima Tipo de reacción Productos Comentarios
I. Citrato 1. Aconitasa Deshidratación cis-Aconitato+ Reacción reversible
isomerización
H2O

II. cis-Aconitato Aconitasa Hidratación Isocitrato Reacción reversible

isomerización
III. Isocitrato Isocitrato Oxidación NADH + Oxalosuccinato Síntesis de NADH
deshidrogenasa + H+
IV. Oxalosuccinato Isocitrato Descarboxilación α-cetoglutarato + Reacción irreversible, es
deshidrogenasa dependiente de la
CO2
velocidad, sintetiza
moléculas de 5 carbonos
V. α-cetoglutarato α-cetoglutarato Descarboxilación NADH + H+ Reacción irreversible,
deshidrogenasa oxidativa + CO2 sintetiza NADH y moléculas
de 4 carbonos

VI. Succinil-CoA Succinil CoA Hidrólisis GTP + La reacción de

sintetasa CoA-SH condensación del GDP + Pi y
la hidrólisis de Succinyl-CoA
implican el H2O necesario
para equilibrar la ecuación.
VII. Succinato Succinato Oxidación FADH2 Utiliza FAD como un grupo
deshidrogenasa prostético en la enzima y
sintetiza ATP.
VIII. Fumarato Fumarato Adición (H2O) L-Malato
Hidratasa
IX. L-Malato Malato Oxidación NADH + H+ Reacción reversible
deshidrogenasa
X. Oxalacetato Citrato sintasa Condensación Citrato + Co-A Reacción irreversible
 CONCLUSIÓN

A través de este trabajo pudimos comprender o conocer más a fondo sobre el

proceso de respiración celular que para llevar a cabo esto es necesario que se

cumplan ciertas etapas que es imprescindible del ATP que se encarga de

proporcionar energía en las reacciones químicas, siendo la primera de ellas la

glucolisis y posterior a esta sería la Descarboxilacion Oxidativa del Piruvato, donde

su principal función es proporcionar la Acetil-Coenzima para dar lugar al ciclo de

Krebs que es de suma importancia para todas las células que utilizan oxígeno.
 Bibliografía

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McGraw-Hill. Interamericana Editores.
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 Bioquímica de Montgomery

 Escobar, M. T. (s.f.). CICLO de KREBS -Productos. Obtenido de LIC.

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