UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE

CÓDIGO: SGC.DI.505
VERSIÓN: 1.0
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA FECHA ULTIMA
REVISIÓN: 26/10/16

CARRERA: INGENIERÍA AGROPECUARIA

GUÍA PARA LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO, TALLER O CAMPO

PERIODO MARZO – JULIO
ASIGNATURA: QUÍMICA ORGÁNICA NIVEL: 2do
LECTIVO: 2019
DOCENTE: Dra. Nahir Dugarte NRC: 3077 PRÁCTICA N°: 3
LABORATORIO DONDE SE DESARROLLARÁ LA
EXTENCIÓN SANTO DOMINGO - LAB. MÚLTIPLE 2
PRÁCTICA:
TEMA DE LA
EXTRACCIÓN DE LA CAFEÍNA DEL TÉ.
PRÁCTICA:
INTRODUCCIÓN:
Los alcaloides constituyen un grupo numeroso de sustancias de origen natural cuyo análisis elemental revela la presencia de carbono,
hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. Son únicos en la variedad de sus estructuras, en la respuesta biológica sobre los organismos no
hospedadores y en las rutas biogenéticas para su formación.
La cafeína es un alcaloide que se aisló por primera vez en forma pura cristalina en el año 1882. Estructuralmente hablando, es una
1,3,7-trimetilxantina. Es también un derivado de purina y por lo tanto está relacionada con las bases tipo purinas de los ácidos
nucleicos y con el ácido úrico.
Se consigue en las plantas conocidas como café y té. También está presente en la nuez de cola, en las hojas de mate, en las
semillas de guaraná y en pequeñas cantidades en los granos de cacao. El contenido de cafeína en los granos de café es de
aproximadamente 1-2% en peso y en las hojas de té aproximadamente 2-4%. Muchos analgésicos comerciales también contienen
cafeína para contrarrestar el efecto adormecedor producido por los ingredientes activos de tales preparaciones.
La cafeína ha sido siempre una sustancia controversial, ya que es considerada por muchos una droga adictiva y debido a que
estructuralmente se asemeja a las bases tipo purina, adenina y guanina, que representan dos de las cinco bases principales que el
organismo usa para formar los ácidos nucleicos ADN y ARN, se teme que la sustitución de cafeína por adenina o guanina en
cualquiera de estas sustancias de importancia genética podría conducir a defectos cromosómicos.

PROCESO DE AISLAMIENTO DE LA CAFEINA:

En este experimento se aísla cafeína de las hojas del té. El principal problema con el aislamiento es que la cafeína no se encuentra
sola en las hojas de té, sino que se encuentra acompañada de otras sustancias naturales, de las cuales debe ser separada, el
principal componente de estas hojas de té es la celulosa, la cual constituye el principal material estructural de todas las plantas y es
un polímero de la glucosa. Por otra parte, la cafeína es soluble en agua y es uno de los componentes principales que se extraen en
la solución que denominamos té. Conjuntamente con la cafeína se extraen algunos otros compuestos, entre ellos los llamados
taninos. Cuando los taninos son extraídos en agua caliente, los de tipo hidrolizable son parcialmente hidrolizados, lo cual significa
que se puede encontrar ácido gálico libre en la solución acuosa del té. Los taninos, debido a sus grupos fenólicos y el ácido gálico
debido a sus grupos carboxilo, son ambos compuestos que presentan un grado de acidez apreciable.
Si a esta solución se le agrega una base tal como carbonato de sodio o hidróxido de sodio se forman sales iónicas de calcio o de
sodio de estos compuestos ácidos, fácilmente solubles en agua caliente. La cafeína puede extraerse entonces con un solvente
orgánico insoluble en agua tal como el diclorometano, ya que tanto las sales iónicas de calcio del ácido gálico como los taninos no
son solubles en este solvente y permanecen en la fase acuosa, liberando la cafeína. La extracción de las hojas del té directamente
con solventes no polares (diclorometano) para remover la cafeína produce pobres resultados puesto que esta se encuentra en la
planta como un complejo parcialmente iónico que no es muy soluble en solventes apolares.
El color marrón de la solución de té se debe a los pigmentos de flavonoides y de clorofilas y también a sus respectivos productos de
oxidación. Aun cuando las clorofilas son solubles en diclorometano, la gran parte de las otras sustancias componentes de las hojas
de té no lo son. De esta manera la extracción con diclorometano de la solución básica de té remueve la cafeína prácticamente pura.
El diclorometano es fácilmente removido por evaporación, calentando la solución que contiene el extracto en un baño de vapor dentro
de una campana extractora de gases o por destilación ya que su punto de ebullición es bajo, dejando a la cafeína cruda, que
posteriormente se purifica por recristalización o por sublimación.
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CÓDIGO: SGC.DI.505
VERSIÓN: 1.0
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA FECHA ULTIMA
REVISIÓN: 26/10/16

CARRERA: INGENIERÍA AGROPECUARIA

OBJETIVOS:
 Extraer cafeína a partir del te empleando solventes orgánicos
 Purificar la cafeína extraída por sublimación

MATERIALES:
REACTIVOS: 3 bolsas de té negro (2g aprox.)
Cloroformo, Hexano, Hidróxido de sodio, Tolueno,
Sulfato de sodio anhidro, Glicerina, Cloruro de sodio
INSUMOS: Matraz Erlenmeyer, Matraz kitasato
Embudo Büchner, Vasos de precipitación
Bomba de succión, Plancha de calentamiento
Mechero, Embudo de filtración por gravedad, Pipetas,
Tubo de ensayo, Termómetro, Espátula
Pinzas, Embudo de separación, Soportes, Aros para
embudos, Nueces

EQUIPOS: Plancha de calentamiento y agitación

MUESTRA: Té negro, guayusa.

INSTRUCCIONES:
- Utilice ropa de protección: mandil, guantes, gafas, cabello recogido, zapato cerrado, etc.
- Verifique la disponibilidad de los equipos a usar en la práctica
- Todas las reacciones se deben efectuar en campana
- El diclorometano es un solvente que tiene una toxicidad significativa y se sospecha es un compuesto carcinogénico en
humanos. No intente respirar los vapores de este solvente.
- Previamente a la realización de la práctica debe leer sobre la técnica de extracción con solventes (uso de un embudo de
separación) uso de agentes desecantes y sublimación.
ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:
 Caliente a ebullición 100 ml de agua en un vaso de precipitados de 250 ml, coloque 3 bolsitas de té negro (llevadas
por el estudiante) de aproximadamente 2 gramos cada una, de tal manera que estas queden sumergidas en el
fondo del recipiente, pero al mismo tiempo colgadas hacia afuera. Permita que las bolsas permanezcan en contacto
con el agua caliente por 1 minuto. Retire las bolsas de té y colóquelas entre dos vidrios de reloj.
 Presione las bolsas de té hasta que el exceso de solución sea exprimido y devuelto al envase original. Descarte
las bolsas de té. Enfríe la solución de té hasta temperatura ambiente usando un baño de agua - hielo.
 Trasvase el líquido a un embudo de separación y extráigalo 3 veces con porciones sucesivas de 20 ml de
cloroformo. Agite la mezcla repetidamente en forma vigorosa por aproximadamente 1 minuto. Las capas se
separarán después de reposar por algunos minutos, aun cuando se podría formar alguna emulsión en la interfase
de las capas orgánica y acuosa (una emulsión es una suspensión coloidal de gotas de una fase suspendidas en la
otra fase).
 Si esto sucede, intente romper la emulsión haciendo girar el embudo suavemente, sujeto por el vástago, en la parte
inferior y en la parte superior por el cuello o quebrando la emulsión agitando la interfase con una varilla de vidrio.
Espere entre 2 y 4 minutos. Si estos procedimientos no funcionar agregue unos 10 ml de solución acuosa saturada
de cloruro de sodio, agite y separe las fases.
 Separe las capas orgánicas directamente desde el embudo de separación, recibiéndola en un matraz limpio.
Trasvase la capa de cloroformo a un embudo de separación y lávela dos veces con 20 ml de solución fría de NaOH
(6 M) y una vez con 20 ml de agua destilada. Separe la fase orgánica y séquela con una capa de sulfato de sodio
anhidro de aproximadamente, 1 cm de espesor.
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 Transfiera los extractos orgánicos secos a un vaso de precipitados de capacidad adecuada y evapore calentando
sobre una plancha de calentamiento o sobre un baño de María, el cloroformo en el interior de una campana
extractora de gases, hasta obtener aproximadamente 3 ml de solución.
 Use una cantidad mínima adicional de cloroformo y una pipeta Pasteur, transfiera la cafeína cruda a un matraz de
de 125 ml de capacidad. Evapore completamente el cloroformo hasta obtener los cristales casi blancos de cafeína
sólida. La cafeína cruda puede purificarse por recristalización usando el método de mezcla de solventes y por
sublimación.

PURIFICACIÓN POR RECRISTALIZACIÓN.

Figura 1. Proceso de recristalización de una muestra

 Disuelva el residuo de cafeína contenida en el matraz en 2 o 3 ml de tolueno. Es posible que sea necesario calentar la
solución en un baño de vapor para disolver totalmente el sólido. Transfiera la solución a otro matraz de 125 ml.
 Lave el matraz que contenía la cafeína con una porción adicional de 2 ml de tolueno y combine esta solución con la
contenida en el nuevo matraz. Añada una piedra de ebullición, caliente la solución y adicione gota a gota hexano, hasta
que la solución se torne ligeramente turbia.
 Permita que la solución repose hasta temperatura ambiente. Enfríe la solución en un baño de agua - hielo y colecte el
producto cristalino por filtración al vacío usando un embudo Büchner de pequeño tamaño. Una segunda porción de
cristales puede obtenerse concentrando las aguas madres (filtrado).
 Seque los cristales. Pese el producto y calcule el rendimiento porcentual basado en los gramos aproximados de té
originalmente usados. Determine el punto de fusión. Note el color del sólido en comparación con el material obtenido
después de la sublimación.

SUBLIMACIÓN DE LA CAFEÍNA.

 Colocar dentro de un vaso de precipitación la cafeína a ser purificada. Tapar el vaso con un vidrio de reloj, encima del vidrio
de reloj colocar un hielo con un poco de agua.
 Calentarlo el vaso con el vidrio reloj en la llama del mechero o en la plancha de calentamiento, como se indica en la figura
2.
 Observar la formación de cristales del compuesto. Dejar que se pierdan los vapores y retirar con cuidado el vidrio de reloj.
Colocar los cristales en una caja pettri.
 Tomar el peso final para calcular en rendimiento de los cristales obtenidos.
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Figura 2. Montaje del equipo para el proceso de sublimación

RESULTADOS OBTENIDOS:
Cafeína purificada
CONCLUSIONES:
La extracción con solventes permite obtener la cafeína cruda.
La sublimación arroja una cafeína más pura que la obtenida por recristalización.

RECOMENDACIONES:
Lea previamente la guía de la práctica y tenga cuidado en todas las actividades a realizar en el Laboratorio

FIRMAS

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Nombre: Dra. Nahir Dugarte Nombre: Ing. Fernando Vinueza Nombre: Dra. Sandra Naranjo
DOCENTE COORDINADOR DE ÁREA DE COORDINADOR DE LABORATORIOS
CONOCIMIENTO