Informe de Laboratorio de Bioquímica Grupo 7

ACTIVIDAD DE LA AMILASA SALIVAL

Sebastián Guerrero, Andrés Osejo
sebastiangc@unicauca.edu.co
andresos@unicauca.edu.co

*Laboratorio Bioquimica General, Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación, Universidad del Cauca,
Popayán-Colombia.

termostato a 37 °c ,paso
1. RESULTADOS. siguiente se le agrego 2
Los resultados obtenidos en la práctica gotas de Lugol donde esta
de laboratorio se muestran en las solución presentó una
siguientes tablas: coloración azul- violeta.
LABILIDAD TÉRMICA DE ENZIMAS
 A partir de las 3 disoluciones
preparadas de amilasa salival INFLUENCIA DE pH SOBRE LA
más solución de almidón, cada ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS
una sometida a una temperatura  A partir de 3 disoluciones, de
diferente se pudo observar lo amilasa, solución amortiguadora y
siguiente: almidón, todas expuestas a una T°
Tabla 1. Observaciones de labilidad de 37°C se observó lo siguiente:
térmica de la amilasa. Tabla 2: observaciones pH
IMAGEN OBSERVACION IMAGEN OBSERVACION
TUBO 3. Al ser expuesto a TUBO 1. Al agregar
una temperatura de 0°C, solución amortiguadora a
durante 10 minutos y pH 4 y lugol se presenta
posteriormente al una coloración azul violeta.
adicionar Lugol este no
presentó coloración TUBO 2. Al agregar
(transparente). solución amortiguadora a
pH 6.8 y lugol no se
TUBO 2. Se sometió a una presenta coloración
temperatura de 37°C y al (transparente).
adicionar Lugol no se
presenta coloración TUBO 3. Al agregar
(transparente). solución amortiguadora a
pH 9 y lugol no se presenta
TUBO 1. Se sometió a coloración (transparente).
ebullición durante 2
minutos, luego se deja
enfriar y se le adicionó al ESPECIFIDAD DE LA ENZIMA
adicionar 2mL de Almidón  Para los 2 primeros tubos con
y se lo puso en baño a disolución de almidón más
amilasa y de almidón más
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Práctica 7 – Actividad de la amilasa salival
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sacarasa a una T° de 37°C más
lugol se pudo observar lo
siguiente:
Tabla 3: observaciones de especificidad.
IMAGEN OBSERVACION
TUBO 1.
 Para los tubos 3 y 4 con disolución
de sacarosa más amilasa y de
sacarosa más sacarasa, a una T°
de 37°C más reactivo de Fehling,
luego en ebullición se puede
observar lo siguiente:
Tabla 4: observaciones de especificidad.
IMAGEN OBSERVACION
TUBO 3. Al agregar el
reactivo de Fehling a 37°C
se presenta una coloración
azul. En ebullición se torna
un color rojo ladrillo.
TUBO 4. Al agregar el
reactivo de Fehling y al
calentar a ebullición se
presenta una coloración
naranja.
INFLUENCIA DE LOS ACTIVADORES
E INHIBIDORES
 Al preparar dos disoluciones de
NaCl y CuSO4, al adicionarles
almidón más amilasa a una T° de
37°C se observa lo siguiente:
Tabla 5. Observaciones de activadores
e inhibidores.
Práctica 7 – Actividad de la amilasa salival
Grupo 7
2. ANALISIS.
 LABILIDAD TERMICA DE
ENZIMAS
La temperatura del medio influye mucho
en la actividad de las enzimas, puesto
que un aumento de temperatura del
medio provoca una aceleración de la
reacción enzimática, activando las
moléculas de sustrato. Por lo general las
enzimas con temperaturas mayores a
40°C se desnaturalizan y se da una
pérdida de actividad. al bajar la
temperatura disminuye también su
actividad, pero el enfriamiento no causa
desnaturalización de la enzima. En l
practica se puede observar claramente lo
antes mencionado así:
Tubo 1: Fue calentado previamente a
hasta ebullición, luego se agregó el
almidón y se incubo a 37 grados, cuando
se agregó el Lugol, este reacciono y
genero el color azul o purpura,
confirmando que el incremento de la
temperatura desnaturalizo la enzima y
por lo tanto no puede actuar sobre el
sustrato.
Tubo 2: A este tubo se le agrego el
almidón y se puso a incubación. Luego
de 10 min y agregar el Lugol y como no
se sometió a ningún cambio extremo esta
debía permanecer incolora.
Tubo 3: A este tubo se le agrego la
enzima, y se llevó a una temperatura de
0 grados. Se agrego el almidón y se
incubo. A esta temperatura la velocidad
de reacción de la enzima y el almidón es
lenta por lo tanto no todo el almidón se
hidroliza. Pero al agregar el Lugol la
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solución permanece incolora, indicando

que todo el almidón se hidrolizo por
completo, esto se puede deber a que no
se manejó la temperatura de manera
correcta y que alcanzo a estar llegar a
una temperatura ambiente para
reaccionar de manera correcta.

pH 4
pH 8

 ESPECIFIDAD DE LA ENZIMA
Una de las características de las enzimas
es su alta especificidad sobre la reacción
que cataliza. Cada enzima cataliza un
solo tipo de reacción, y casi siempre
actúa sobre un único sustrato [2]. El
 INFLUENCIA DE pH SOBRE LA almidón es el sustrato que le
ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS corresponde a la amilasa y la sacarasa
Con respecto a la influencia del pH de la tiene especificidad con la sacarosa. El
actividad enzimática de la amilasa, se color rojo ladrillo del tubo 3 después de
dice que a pH extremos (es decir, muy ebullición posiblemente dio porque la
ácidos o muy básicos) la enzima no sacarosa se desplego en glucosa y
funciona, o al menos disminuye fructuosa.
notablemente su actividad, puesto que su
conformación se altera, produce un
cambio de estado de ionización de
grupos del sitio activo. Algunas enzimas
pueden tener una actividad del 100% en
un valor dado de pH y otras en un
intervalo de pH [1]. De lo anteriormente
mencionado se deduce que la actividad
de la amilasa actúa en un intervalo de pH
neutro y básico. En medio acido pierde
su actividad enzimática.

ANTES DE DESPUES DE
CALENTAR CALENTAR

3
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Del tubo 3 y 4 después de agregarle el 3. CONCLUSIONES.

reactivo de Fehling se esperaba que solo
un tubo se pusiera rojizo ya que eso
indicaba la presencia de azucares
reductores ejemplos la glucosa.
De los tubos 3 y 4 se puede decir que:
-Amilasa(azul) no rompe a la sacarosa
-Sacarasa si rompe a la sacarosa, lo que
significa que el reactivo interactuó con los
productos de la reacción de la enzima y
la sacarosa, confirmando que la enzima
es la indicada para degradar este
sustrato, pero la coloración rojiza que
presento el tubo debe ser por el exceso
de calor que se le suministro y por ende
esa coloración.
• Las temperaturas altas
desnaturalizan la amilasa salival,
mientras que las bajas temperaturas solo
reducen la velocidad de reacción.
• El NaCl es una sustancia que
aumenta la velocidad de reacción de a la
amilasa salival, mientras que el CuSO4
inactiva completamente la enzima.
• La amilasa es la principal enzima
para hidrolizar el almidón, pero no la
sacarosa, para este sustrato la enzima
indicada es la sacarasa.
4. BIBLIOGRAFIA

 INFLUENCIA DE LOS [1]. Benjamin, F. (1959). capitulo 1. Las

ACTIVADORES E INHIBIDORES Enzimas, 25. Retrieved from
La actividad de las enzimas está https://addi.ehu.es/bitstream/handle/108
regulada tanto por su medio interno como 10/14292/4- Capítulo I. Las
externo, por una serie de diferentes tipos enzimas.pdf?sequence=4
de sustancias de bajo peso molecular
que actúan sobre la molécula de enzima.
Los agentes positivos son los activadores [2]. TEMA 14: ENZIMAS. (n.d.).
y los negativos son los inhibidores [3]. En Retrieved from
el tubo 1 el cloruro sódico actúa como http://www.bionova.org.es/biocast/docu
activador y en el tubo 2 el sulfato de mentos/tema14.pdf
cobre actúa como inhibidor.
[3]. Rosero Brandon; Perefan Katerin.
(2013). Actividad de la amilasa salival. 20
Mayo, 9. Retrieved from
https://es.scribd.com/document/3155891
98/Informe-
amilasa?fbclid=IwAR2_4dsDsljtOiThodZ
zrSxX3bYo4QprDvCFi1cx9doGLCuW9z
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