UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

Facultad De Ciencias
Departamento de Farmacia
FARMACOGNOSIA Y FITOQUÌMICA 2015659
PRÁCTICA No. 3
EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE GLICÓSIDOS ANTRACÉNICOS

INTRODUCCIÓN

Son un grupo de productos naturales poco distribuidos en la naturaleza. Son derivados

del antraceno y biosintéticamente se originan de la ruta del acetato. El mayor número de
las quinonas naturales están constituidas por las antraquinonas, las cuales tiene n
efecto de laxación y regulador del tono intestinal y se emplean como laxante o
catártico en el tratamiento del estreñimiento. La mayoría de ellos fueron hallados en
especies del reino vegetal pero también algunos derivados se encuentran en algunas
especies animales. Los compuestos antraquinónicos son frecuentes en especies de las
familias Rhamnaceae (cáscara sagrada, frángula), Polygonaceae (ruibarbo), Rubiaceae
(Rubia tinctoria), Leguminosae (hojas y frutos de sen), Liliaceae (aloe o sábila) y también
ha sido aislados de líquenes y hongos.

Las antraquinonas y otros compuestos derivados del antraceno como antrona, antranol,
antraquinona, oxantrona, diantrona, diantranol existen en las plantas en forma hidroxilada,
carboxilada o metilada, libres como agliconas o azucarados como glucósidos, lo cual
genera un enorme número de compuestos tales como el crisofanol, emodina, aloe
emodina, reina, senedina, senósido y otros.

La mayoría de los anteriores compuestos existen en la naturaleza como glicósidos o

heterósidos en los cuales los monosacáridos forman una unión etérea con uno o varios
grupos hidroxilos (O- glicósidos) o están ligados por enlaces carbono - carbono con la
aglicona (C-glicósidos).

PARTE EXPERIMENTAL

La detección de los glicósidos antracénicos en material vegetal se realiza por la reacción

de Bornträger modificada por Krauss (Reacción de Bornträger- Krauss). Para que los
resultados sean más confiables es aconsejable realizar, además de ésta prueba, un
análisis por cromatografía en capa delgada.

Se analiza en paralelo, un extracto de hojas de sen (Cassia angustifolia) y el extracto

problema.
  PROCEDIMIENTO

Dispersar un gramo de extracto seco en 15 mL de una mezcla de H2O: etanol (7:1).

Calentar a 60 °C por 10 minutos y filtrar. Reservar 1 mL del filtrado (SOLUCIÓN 1)

para la prueba de tubo de ensayo (muestra sin tratamiento) y recibir en un vaso de
precipitados el resto del filtrado (SOLUCIÓN 2). Al tubo con 1 mL de la SOLUCIÓN 1
adicionarle 1 mL de tolueno y agitar. Dejar separar las fases y transferir con ayuda de
una pipeta Pasteur la fase orgánica a dos tubos de ensayo (prueba y blanco). Al tubo
de prueba adicionar 1 mL de la solución de NaOH al 5% que contiene 2% de NH 4OH,
agitar y dejar que las dos capas se separen. Al tubo para el blanco adicionar 1 mL de
agua destilada, agitar y dejar que las dos capas se separen. Observar la aparición de
color inmediatamente y 15 min después.

Transferir la SOLUCIÓN 2 a un tubo de ensayo de 20 mL. Adicionar 1 mL de ácido

sulfúrico al 50% y 1 mL de peróxido de hidrógeno de 20 volúmenes. Calentar en un
baño de agua hirviendo durante 10 minutos. Dejar enfriar y filtrar si es necesario.
Transferir el contenido del tubo a un embudo de decantación y extraer con 2 porciones
de tolueno, de 5 mL cada una. Descartar la fase acuosa y conservar la fase orgánica.
Deshidratar las fases orgánicas ya reunidas, con sulfato de sodio anhidro. Concentrar
en rotaevaporador hasta 3 mL aproximadamente (SOLUCIÓN 3) y dividir la solución
en tres porciones iguales: dos tubos de ensayo y un vial.

A una de las soluciones en tubo de ensayo adicionar 1 mL de la SOLUCIÓN 3, agregar

1 mL de una solución de NaOH al 5% que contiene 2% de NH 4OH, agitar y dejar que
las dos capas se separen. Tomar la solución del otro tubo de ensayo como blanco;
adicionar 1 mL de agua destilada, agitar y dejar que las dos capas se separen.
Observar la aparición de color inmediatamente y 15 min después. La aparición de una
coloración roja rosada en la capa alcalina que se intensifica con el tiempo es positivo
para la presencia de compuestos antraquinónicos.

Utilizar la muestra del vial para la cromatografía en capa delgada (CCD). Aplicar en
una placa cubierta con sílice gel G y desarrollar el cromatograma en fase móvil
correspondiente a una mezcla de tolueno - acetato de etilo - ácido acético (75:24:1).
Dejar secar, observar en la luz ultravioleta y marcar las manchas fluorescentes.
Posteriormente revelar el cromatograma con una solución de KOH al 10% en etanol.
La aparición de manchas de color naranja, rojo, rosado, las cuales dan en la luz
ultravioleta una fluorescencia amarilla o parda que cambia a rojo, violeta o verde ,
indica la presencia de compuestos antraquinónicos.

BIBLIOGRAFÍA

1. E.J. Shellard, Practical Plant Chemistry for Pharmacy Students, Pitman

Medical Publishing Co. Ltd, London, 1957, p. 48.

2. N.R. Farnsworth, Biological and Phytochemical Screening of Plants, J. Pharm Sci.

55,225 (1966).

3. C.S. Shah, J.S. Qadry, J. Bhatt. Quantitative evaluation of antraquinone

derivatives in Indian rhubarb, Planta medica 22, 103-108 (1972).
 1 g de extracto seco.

Adicionar 15 mL de H2O:
etanol (7:1). Calentar a
~60°C por 10 min.

Filtrar por gravedad a través de algodón.

Tomar 1 mL de filtrado
Trasferir el filtrado (SOLUCIÓN 2) a
(SOLUCIÓN 1) en un
un tubo de ensayo de 20 mL.
tubo de ensayo.

Adicionar 1 mL de Adicionar 1 mL de H2SO4

tolueno . Agitar al 50% y 1 ml H2O2 de 20
ydejar en reposo. volumenes.

Calentar en un baño de agua hirviendo

Separar la fase orgánica y por 10 min. Enfriar y filtrar si es
dividirla en dos tubos de ensayo. necesario.

Transferir a un embudo de
Adicionar ~1mL de NaOH al decantación.
5% que contiene 2% de
NH4OH en uno de los
tubos. Al otro adicionar 1 Realizar extracción con 2
mL de H2O. Agitar. porciones de tolueno de 5mL c/u.
Observar inmediatamente
y 15 min después.
Fase Acuosa
Fase orgánica
(Descartar)

Deshidratar con sulfato

de sodio anhidro.

Filtrar y concentrar en
rotavapor hasta ~3 mL.

Trasferir ~1 mL a un Trasferir ~1 mL a un Trasferir ~1 mL a un

tubo de ensayo tubo de ensayo vial para CCD

Adicionar ~1mL de Adicionar 1 mL FM: tolueno: acetato

NaOH al 5% que de agua de etilo: ácido acético
contiene 2% de NH4OH destilada. (75:24:1).
Agitar. Observar Agitar. Revelador KOH 10% en
inmediatamente y 15 Observar. EtOH
min después. (Blanco)
UV: antes y después de
revelar