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DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA E
IMUNOLOGIA
INSTITUTO DE BIOCIÊNCIAS – UNESP,
BOTUCATU
Microbiologia Humana
PROFESSORES
Eduardo Bagagli
Maria Fátima Sugizaki
Sandra de M. G. Bosco
TÉCNICO
Isaltino Onório de Oliveira
Botucatu - 2009
A Aspergillus sp rápido
B Saccharomyces sp rápido
1) A alça e agulha de platina devem ser flambadas, isto é, aquecidas na chama do bico
de Bunsen até se tornarem vermelhas, antes e depois de qualquer procedimento de
semeadura. A flambagem é mais facilmente e eficientemente conseguida mantendo-
se a agulha ou alça num ângulo de 45º em relação à mesa de trabalho. Antes da
coleta do material, deve-se resfriar o instrumento, na parede do tubo, no próprio meio
estéril, ou simplesmente aguardando o seu desaquecimento natural por alguns
segundos.
4) Todo recipiente (placas de Petri ou tubos de ensaio) com cultura ou meio estéril
deverá ser manuseado com cuidado de modo a não ficarem abertos e expostos ao
ambiente. Com esta medida e mais a exigência de abri-los somente próximo ao bico
de Bunsen em tempo suficiente para a semeadura, colheita do material ou simples
inspeção, será evitada a sua contaminação por microrganismos do ar. Uma vez
semeados, devem ser incubados em estufa. As placas de Petri devem ser envolvidas
por filme plástico (tipo Magipack) antes de ser colocadas na estufa e devem
permanecer com as tampas voltadas para baixo.
b) bordas: na periferia das colônias fúngicas podem ser observados muitos desenhos
que vão desde morfologias bem delimitadas até achados de projeções irregulares que
lembram franjas. Além disso, também pode ser observada, nas bordas das colônias uma
variação da coloração em relação ao centro. Esse achado é peça-chave para indicar o
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PRÁTICA 1
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
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PRÁTICA 2
COLORAÇÃO COM LACTOFENOL AZUL ALGODÃO
b) técnica:
c) interpretação
Na coloração com lactofenol azul algodão é possível observar que existem dois
tipos morfológicos de fungos: as leveduras e os filamentos (bolores ou micélios).
As leveduras são unicelulares e podem ter diferentes formatos (oval, circular,
naveta, etc) e se reproduzem por brotamento ou por fissão.
Os bolores são fungos filamentosos possuindo hifas septadas ou não septadas.
Na sua reprodução assexuada, é possível visualizar no micélio vegetativo os
clamidósporos e artrósporos, e no micélio reprodutor, os esporos endógenos
(esporangiósporos) em esporângios (estrutura fechada) e esporos exógenos
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PRÁTICA 3
3.1 - PESQUISA DE Malassezia furfur POR CULTURA EM MEIO SABOURAUD
ADICIONADO DE CLORANFENICOL, ACTIDIONE E 1% DE AZEITE DE OLIVA.
d) Interpretação
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
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PRÁTICA 4
CULTURA DE AMOSTRAS CLÍNICAS EM PLACAS COM MYCOSEL OU DTM
(Dermatophyte Test Medium) PARA PESQUISA DE DERMATÓFITOS.
d) Interpretação
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PRÁTICA 5
IDENTIFICAÇÃO DOS FUNGOS ISOLADOS PELA CULTURA DAS AMOSTRAS
CLÍNICAS (Continuação da Prática 4)
Colônia 1 Colônia 2
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c) material:
- Placas de Petri com lâminas dispostas sobre bastão de vidro em “U” ou “V”,
esterilizadas;
- Lamínulas;
- meio de cultura;
- Água destilada esterilizada;
- Algodão;
- Formol;
- Lactofenol azul algodão;
- Culturas: - suspeita de dermatófitos ou outro filamentoso
Cultura E
(fungo dermatófito – Microsporum canis)
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PRÁTICA 7
FUNGOS DE MICOSES SUBCUTÂNEAS
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
Forma L ou Y (levedura)
1. velocidade de crescimento: rápida
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
Forma M Forma L ou Y
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
Cultura G Cultura H
Cultura I Cultura J
PRÁTICA 8
FUNGOS DE MICOSES SISTÊMICAS – PATOGÊNICOS DIMÓRFICOS
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
Forma L ou Y
1. velocidade de crescimento: média
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
Forma M
1. velocidade de crescimento: lenta
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
Forma Y ou L
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
Forma M Forma L ou Y
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PRÁTICA 9
FUNGOS CAUSADORES DE MICOSES OPORTUNISTAS
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
d) técnica:
1. Fundir e colocar sobre a lâmina uma fina camada do meio corn-meal ágar
+ Tween 80;
2. Esperar solidificar;
3. Semear a lâmina contendo o meio de cultura em 3 estrias paralelas com a
Cultura de Candida;
4. Colocar uma lamínula limpa e previamente flambada sobre o referido
meio;
5. Adicionar à placa algodão embebido em água destilada, para manter a
umidade do meio;
6. vedar a placa com filme plástico;
7. Incubar à temperatura ambiente por mais ou menos 5 dias;
8. Observar ao microscópio e desenhar as estruturas visualizadas.
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação:
2. borda:
3. textura:
5. pigmentação: