En la clase anterior veiamos que: Para la mayor parte de las celulas y un gran

número de las bacterias que viven en condiciones aeróbicas, estas oxidan sus
combustibles orgánicos a dióxido de carbono y agua. El piruvato formado en la
glucolisis, en vez de ser reducido a lactato, etano o algún del anabolismo sufre
una oxidación mayor hasta formar H2O y CO2. Esta fase aeróbica del catabolismo
se denomina Respiración.
La respiración celular tiene lugar en tres fases principales:
En la primera, las moléculas de combustible orgánico, como (glucosa, ácidos
grasos y algunos aminoácidos) se oxidan para dar lugar a fragmentos de dos
átomos de carbono, en forma de grupos acetil-coenzima A (acetil-CoA)
En la segunda fase, los grupos acetilos se incorporan al ciclo del ácido cítrico,
donde son oxidados enzimáticamente hasta CO2 la energía liberada en esta
oxidación se conserva en los transportadores de electrones reducidos que son
las coenzimas, Nicotinamida Adenina Dinucleótido mejor conocida como NADH
(forma reducida) y Dinucleótido De Flavina Y Adenina conocido como FADH2
(forma reducida) Estas coenzimas que interviene como dador o aceptor de electrones y protones
(poder reductor) en reacciones metabólicas redox que se verán mas adelante; su estado oxidado (FAD) se
reduce a FADH2 o NADH al aceptar átomos de hidrógeno

En la tercera fase de la respiración estas coenzimas (FADH2 y NADH) reducidas

son a su vez oxidados liberando protones (H+) y electrones. Los electrones son
transferidos a lo largo de la cadena respiratoria, siendo O2 el aceptor final.
Durante el proceso de transferencia electrónica se libera una gran cantidad de
energía, que se conserva en forma de ATP gracias al proceso llamado
fosforilacion oxidativa.
Esto es a grandes rasgos el proceso de respiración celular en este momento nos
encontramos en la fase 2 en el ciclo del ácido cítrico. Por lo que la tercera fase y
la primera fase se explicaran más adelante, lo nombro en este momento para
recalcar que son procesos secuenciales que están relacionados

El ciclo de Krebs, ciclo del ácido cítrico, del ácido tricarboxílico tiene como
funciones principales el ser la ruta central final de las moléculas combustibles y
el de proporcionar moléculas precursoras para otras rutas biosintéticas. Es
parte de la vía catabólica que realiza la oxidación de las moléculas de acetil CoA
proveniente de los monosacáridos, ácidos grasos y aminoácidos para producir
CO2, liberando gran cantidad de energía química en forma de ATP. Como
anteriormente se mencionó en la clase pasada EL acetil CoA suele venir de la
β-oxidación de los ácidos grasos o del piruvato. El hecho de que varios
intermediarios del ciclo de Kebs sean la base para formar diversas biomoléculas
tiene un papel importantísimo a nivel celular, ya que permite interconectar las
principales rutas metabólicas. De tal forma que un tipo de biomolécula, puede
servir como precursor de otros tipos de biomoléculas lo cual supone optimizar
los recursos disponibles por la célula y depender en menor medida de los
aportes exógenos.

El ciclo del ácido citrico actúa en dos fases:

1) Introducción y Pérdida de dos átomos de carbono:
y una segunda fase que consiste en
2) La Regeneración del Oxalacetato

Fase 1: Introducción y Pérdida de dos átomos de carbono:

1. Paso 1: Introducción de dos átomos de Carbono en forma de acetil (CoA)

este paso es también conocida como Condensación: y esto se debe a que
ocurre de condensación entre una molécula de acetil CoA (de dos
carbonos) y una molécula de oxalacetato (de cuatro carbonos) Esta
reacción de condensación es de tipo aldolica y le sigue una hidrólisis que
libera la coenzima A libre. Dicha reacción esta catalizada por la enzima
citrato sintasa, dando como producto final el CITRATO (de seis carbonos)

2. Transformación del citrato en isocitrato: esta reacción que sucede en dos

pasos, una deshidratación seguida de una hidratación, se pasa de un
sustrato con un alcohol terciario a una molécula con un alcohol
secundario que resulta más fácilmente oxidable. Esta reacción se lleva a
cabo por la enzima Aconitasa formando un intermediario conocido como
cis-aconitato

3. Primera descarboxilación oxidativa: se produce la transformación del

isocitrato (de seis carbonos) a α-cetoglutarato (de 5 carbonos) reacción
que conlleva la reducción de una molécula de NAD+ a NADH + H+ y la
eliminación de un carbono en forma de CO2 .Esta reacción la cataliza la
isocitrato deshidrogenasa
 4. Segunda descarboxilación oxidativa: se produce la transformación del α-
cetoglutarato (de 5 carbonos) a succinil CoA (de 4 carbonos) reacción que
conlleva igualmente la generación de NADH + H+ y la eliminación de un
átomo de carbono en forma de CO2. La reacción la efectúa el complejo
multienzimatico α-cetoglutarato deshidrogenasa.

Fase 2: Regeneración del Oxalacetato: En este punto del ciclo se han

introducido dos átomos de carbono en forma de acetil-CoA y se han
perdido se han pedido otros dos carbonos en forma de CO2 . Dada la
estereoquímica de las reacciones, los dos átomos de carbono perdidos
no son los mismos que los dos átomos de carbono introducidos al
comienzo de ciclo. En las reacciones restantes el intermediario de 4
carbonos succinil-CoA se convierte en el producto de 4 carbonos llamado
Oxalacetato

Paso 5: Fosforilación a Nivel de Sustrato o La conversión de succinil-CoA en

succinato:
Antes de explicar que es lo que sucede en esta fase del ciclo les dire que es Fosforilación a
nivel de sustrato ¿Por qué? Bueno porque la mayoría de los textos te dicen en este paso sucede
una fosforilacion a nivel de sustrato pero no te dicen que es lo que significa esto:
LA FOSFORILACIÓN A NIVEL DE SUSTRATO ES UNA REACCIÓN QUÍMICA
QUE SE PUEDE DEFINIR COMO LA PRODUCCIÓN DE ATP (O GTP) A PARTIR
DE ADP (O GDP) COMBINADA A UNA TRANSFORMACIÓN ENZIMÁTICA DE
UN SUSTRATO, LO QUE GENERALMENTE OCURRE ES QUE UN SUSTRATO DE
ALTA ENERGÍA FOSFATADO, CEDE SU FOSFATO DE ALTA ENERGÍA AL ADP y
es una REACCIÓN EN LA QUE NO ESTÁ IMPLICADA LA FOSFORILACIÓN
OXIDATIVA NI UNA ATP SINTASA que es una reacion en la que se produce gran
cantidad de ATP y la enzima que participa en dicha reacción. Esto lo encuentran en el lozano

Ahora bien; En este paso la succinil-CoA se convierte en succinato, y se libera una

coenzima A libre y se produce ATP o GTP. ¿Qué es lo que sucede? el succinil-
CoA (sustrato) tiene un enlace tioéster con una energía libre estándar cuando
es hidrolizado que es altamente negativa. (∆G`º = -36kj/mol) La energía
liberado en la rotura de este enlace (tioéster) de la succinil-CoA, se utiliza para
promover la síntesis de un enlace fosfoanhídrido del (GUANOSÍN
TRIFOSFATO) GTP o del (Adenosin trifostato) ATP con una ∆G`º = -2,9 Kj/mol
Es importante saber que En química orgánica, la hidrólisis se presenta como la reacción opuesta
a la condensación. En este contexto una molécula orgánica y el agua reaccionan rompiendo
un enlace covalente y como ya sabemos los enlaces covalentes son enlaces muy estables y la
ruptura de uno de ellos libera una gran cantidad de energía.

La enzima que cataliza la conversión de succinil-CoA en succinato se conoce

como Succinil-CoA sintetasa o succínico tioquinasa.
En los animales el nucleótido producto de energía elevada no siempre es el ATP,
sino que en algunos tejidos es GTP por ejemplo las células hepáticas contienen
principalmente la succinil-CoA sintetizada ligada al GTP mientras que las celuas
en el cerebro y el corazón predomina la enzima ligada al ATP, POR TANTO EL
PRODUCTO DEL PASO 5 PUEDE SER ATP O GTP EN FUNCION DE LA ISOENZIMA
DE LA SUCCINIL-CoA SINTETASA QUE ACTUE COMO CATALIZADOR.
¿Por qué sucede esto? Simple Las células animales tienen dos isoenzimas de la
succinil-CoA sintetasa, uno específico para el ADP y otro para el GDP, la enzima
tiene dos subunidades una α que contiene el residuo His y es el sitio de unión
para la CoA y una subunidad β que confiere la especificidad por ADP o GDP.
Además de esto es importante saber independientemente del producto que se
forme gran parte del GTP formado muchas veces, impulsa la síntesis final del
ATP mediante la acción de la enzima nucleósido difostato quinasa.
𝐺𝑇𝑃 + 𝐴𝐷𝑃 → 𝐺𝐷𝑃 + 𝐴𝑇𝑃
Y por tanto El resultado neto de la actividad de los dos isozimas de la succinil-
CoA sintetasa es la conservación de la energía en la forma de ATP. NO hay
ninguna variación de energía libre en la reacción de la nucleósido difosfato
quinasa; PORQUE el ATP y el GTP son enérgicamente equivalentes

Paso 6: Deshidrogenación dependiente de flavina u Oxidación del succinato a

fumarato: sucede por la acción de la flavoproteina succinato deshidrogenasa,
es una reacción de deshidrogenación, en la cual se produce la oxidación del
enlace sencillo situado en el centro de la molécula de succinato, dando lugar a
un doble enlace trans. Y el hidrogeno que es eliminado se acopla a la síntesis de
una molécula de FADH2 a partir de FAD
 La acción de la succinato deshidrogenasa, estereoselectiva, y solo se forma el
isómero trans, que es el fumarato. EL isómero Cis, el maleato no se forma

Paso 7: Hidratación de un doble enlace carbono - carbono: la hidratación trans

estereoespecifica del doble enlace carbono-carbono del fumarato la cataliza la
enzima fumarato hidratasa, denominada más comúnmente como fumarasa.
Formando una molecula de L-Malato.

EL isómero cis- del fumarato que recibe el nombre de maleato no es un sustrato

de la reacción porque la enzima fumarasa al igual que la anterior (succinato
deshidrogenasa) es altamente esteroespecifica catalizando solamente la
hidratación del doble enlace trans del fumarato pero no el doble enlace cis del
maleato.
Paso 8: Una deshidrogenación, que regenera el Oxalacetato: Finalmente el ciclo
se completa, con la deshidrogenación, dependiente del NAD+, del malato a
oxalacetato catalizada por la enzima malato deshidrogenasa.

Estequiometria del ciclo

Ahora vamos a analizar lo que se ha conseguido con una vuelta del ácido
cítrico,es posible escribir una ecuación química equilibrada que corresponde a
la suma de las ocho reacciones que intervienen en una vuelta del ciclo:

POR LO TANTO UNA VUELTA DEL CICLO GENERA UN FOSFATO DE ENERGIA

ELEVADA A TRAVES DE UNA FOSFORILACION A NIVEL DE SUSTRATO, MAS TRES
NADH Y UN FADH2 En estas condiciones, por cada vuelta se liberan 4 pares de
hidrógeno, los cuales pasarán al oxígeno molecular para obtener energía en
forma de ATP además de que se liberan dos carbonos en forma de CO2.
Y TIENE UNA VARIACION DE ENERGIA LIBRE PRIMA ESTANDAR DE -57,3

REACCIONES ANAPLERÓTICAS o SECUENCIAS ANAPLERÓTICAS: son reacciones o

secuencias de reacciones que nacen de la Necesidad de reponer los
intermediarios del ciclo. Aunque el ciclo de Krebs es la vía degradativa más
importante para generar ATP, el ciclo es esencial para la biosíntesis de otros
compuestos celulares. En los próximos temas vamos a ver que

Por ejemplo, La succinil-CoA se utiliza como precursor en la síntesis de los

grupos hemo y otras porfirinas como los citocromos. El oxalacetato y el α-
cetoglutarato son los análogos cetoacidos de los aminoácidos aspartato y
glutamato, respectivamente, y se utilizan en la síntesis de estos y otros
aminoácidos y dichos aminoácidos a su vez están relacionados con la síntesis
de las bases purinicas y pirimidinicas. En algunos tejidos el citrato se transporta
desde las mitocondrias al citosol, en donde se fragmenta para producir acetil-
CoA para la biosíntesis de los ácidos grasos.
Cuando esos metabolitos son extraídos del ciclo de Krebs, éste deja de
funcionar, puesto que se interrumpe la formación de oxalacetato. Para que el
ciclo siga actuando a un ritmo normal, las reacciones anapleróticas (“de
relleno”) reestablecen los niveles de los intermediarios del ciclo, entonces estas
(reacciones anapleroticas) reponen los intermediarios del ciclo A media que
estos (intermediarios) son retirados para servir como precursores biosinteticos.
En circunstancias normales las reacciones por las que intermediarios del ciclo
se dirigen hacia otras vías y aquellas que permiten reponerlos se encuentran en
equilibrio dinámico, permaneciendo prácticamente constantes.
La importancia de estas reacciones es que permiten reponer la fuga de los
intermediarios que otra forma afectarían el funcionamiento del ciclo y este se
iría deteriorando si no existieran estos procesos
Las reacciones anapleróticas más comunes, son todas ellas convierten piruvato
o fosfonolpiruvato en oxalacetato o malato.
Reacciones anapleroticas que reponen Oxalacetato
En los animales, la reacción anapleróticas más importantes, ocurren
especialmente en el hígado y el riñón, y es la carboxilación reversible del
piruvato dependiente del ATP, para dar oxalacetato. Esta reacción la cataliza la
enzima Piruvato carboxilasa, esta sucede cuando el ciclo del ácido cítrico carece
de oxalacetato o de algún otro intermediario, lo que sucede es que se carboxila
el piruvato, para producir más oxalacetato. La adición enzimática de un grupo
carboxilo al piruvato requiere energía, que es aportada por el ATP.
La piruvato carboxilasa es un enzima reguladora y se encuentra prácticamente
inactiva en usencia de acetil.CoA, el cual funciona como su modulador
alosterico. Por tanto Siempre que el acetil-CoA, el combustible del ciclo ácido
cítrico, esté presente en exceso, se estimula la reacción de la piruvato
carboxilasa para producir más oxalacetato, lo que permite que el ciclo utilice
más acetil.CoA.
La piruvato carboxilasa es una proteína tetramerica que lleva cuatro moléculas
de biotina (que es un cofactor de la mayor parte de las reacciones de
carboxilación en las que interviene el CO2). La piruvato carboxilasa actúa a
través de un mecanismo de dos pasos, 1. Empezando con una carboxilación,
dependiente de ATP, del cofactor, para dar N-carboxibiotina, 2. Este derivado
activado transfiere a continuación el grupo carboxilo directamente al piruvato.
En las plantas y las bacterias existe una ruta que convierte directamente el
Fosfoenolpiruvato a oxalacetato, es catalizada por la enzima fosfoenolpiruvato
carboxilasa.
Otra reaccion Anaplerotica es la llevada a cabo por la enzima malica. Este tercer
proceso anaplerótico es el que proporciona una enzima de malato
deshidrogenasa o malica (descarboxilante:NADP+) Esta enzima cataliza la
carboxilación reductora del piruvato para dar malato.

Reacciones en las que participan Aminoácidos: Aunque generalmente no se

clasifican como reacciones anapleróticas, las reacciones de transaminacion
pueden considerarse también reacciones de relleno, puesto que son reacciones
reversibles que pueden producir intermediarios del ciclo del ácido cítrico. En la
transaminacion, un aminoácido transfiere su grupo amino a un cetoácido y se
convierte a su vez en otro cetoacido.

Por ejemplo: El glutamato y el aspartato experimentan unas transaminacion

para generar los intermediarios del ciclo del ácido cítrico α-cetoglutarato y
oxalacetato, respectivamente.