CROMATOGRAFÍA CAPA DELGADA

Iván Mancilla, Esther Ceballos.

Laboratorio de Química Orgánica IV, Facultad de Ciencias Básicas
Universidad del Atlántico
21/06/2019

Resumen
En esta práctica desarrollada se utiliza la técnica de cromatografía de capa fina con el
fin de determinar la polaridad de 5 compuestos de los cuales varios de ellos han sido
reactivos de partida en los anteriores laboratorios. Se ensayan varios eluyentes y al
encontrar el adecuado se realiza la cromatografía con los compuestos asignados
observando su trayectoria sobre la placa mediante un dispositivo que emite luz
ultravioleta, de esta manera se observa el paso o distancia recorrida por el compuesto y
se puede calcular el Rf lo cual nos dará un indicio de su polaridad.
Introducción
La cromatografía en capa fina (en inglés thin layer chromatography o TLC) es una
técnica analítica rápida y sencilla, muy utilizada en un laboratorio de Química Orgánica.
Entre otras cosas permite:
‐ Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así, por ejemplo,
la efectividad de una etapa de purificación.
‐ Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas. Si,
por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
‐ Realizar el seguimiento de una reacción. Es posible estudiar cómo desaparecen los
reactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cuándo la
reacción ha acabado.
La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lámina de plástico o
aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase
estacionaria). Entonces, la lámina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o
varios disolventes mezclados (eluyente o fase móvil). A medida que la mezcla de
disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se produce un reparto
diferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.
Adsobentes y eluyentes
Los dos adsorbentes (fase estacionaria) más ampliamente utilizados son la gel de sílice
(SiO2) y la alúmina (Al2O3), ambas de carácter polar. La alúmina anhidra es el más
activo de los dos, es decir, es el que retiene con más fuerza a los compuestos; por ello se
utiliza para separar compuestos relativamente apolares (hidrocarburos, haluros de
alquilo, éteres, aldehídos y cetonas). El gel de sílice, por el contrario, se utiliza para
separar sustancias más polares (alcoholes, aminas, ácidos carboxílicos). El proceso de

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adsorción se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolo‐dipolo o enlaces de
hidrógeno entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe ser inerte con las
sustancias a analizar y no actuar como catalizador en reacciones de descomposición. El
adsorbente interacciona con las sustancias mediante interacción dipolo‐dipolo o
mediante enlace de hidrógeno si lo presentan.

El orden de elución de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase

móvil o eluyente. Este puede ser un disolvente único o dos miscibles de distinta
polaridad. En el siguiente recuadro se recoge por orden creciente de fuerza eluyente los
disolventes más comúnmente empleados.
Hexano < tetraclorometano < cloroformo < diclorometano < acetato de etilo < acetona <
2‐propanol < metanol < agua

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Determinación del Rf
La retención se puede explicar en base a la competencia que se establece entre el soluto
a separar y la fase móvil por adsorberse a los centros activos polares de la fase
estacionaria. Así, las moléculas de soluto se encuentran adsorbidas en la fase
estacionaria y a medida que se produce la elución van siendo desplazadas por la fase
móvil. La retención y la selectividad en la separación dependen de los valores
respectivos de las constantes de los diferentes equilibrios químicos que tienen lugar, que
están en función de:
‐ la polaridad del compuesto, determinada por el número y naturaleza de los grupos
funcionales presentes. Los solutos más polares quedarán más retenidos puesto que se
adsorben más firmemente a los centros activos de la fase estacionaria, mientras que los
no polares se eluirán con mayor facilidad.
‐ naturaleza del disolvente. Así, para un mismo compuesto, un aumento en la polaridad
del disolvente facilita su desplazamiento en la placa. La relación entre las distancias
recorridas por el soluto y por el eluyente desde el origen de la placa se conoce como Rf,
y tiene un valor constante para cada compuesto en unas condiciones cromatográficas
determinadas (adsorbente, disolvente, tamaño de la cubeta, temperatura, etc.). Debido a
que es prácticamente imposible reproducir exactamente las condiciones experimentales,
la comparación de una muestra con otra debe realizarse eluyendo ambas en la misma
placa.
Para calcular el Rf se aplica la siguiente expresión:
Rf = distancia recorrida por el compuesto (X) / distancia recorrida por el eluyente (Y)

La distancia recorrida por el compuesto se mide desde el centro de la mancha. Si ésta es

excesivamente grande se obtendrá un valor erróneo del Rf.

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Revelado de las placas
La mayor parte de las placas de cromatografía llevan un indicador fluorescente que
permite la visualización de los compuestos activos a la luz ultravioleta (254 nm). El
indicador absorbe la luz UV y emite luz visible. La presencia de un compuesto activo en
el UV evita que el indicador absorba la luz en la zona en la que se encuentra el
producto, y el resultado es la visualización de una mancha en la placa que indica la
presencia de un compuesto.
Objetivo General
 Conocer y aplicar la técnica de cromatografía de capa delgada

Objetivos específicos
 Deducir, a través del Rf la relación que existe entre la polaridad de las sustancias
que se analizan y la de los eluyentes utilizados.

Procedimiento experimental
Utilizando la placa de cromatografía dada por el docente, se crearon capilares con la
finalidad de llevar muestras de los compuestos asignados a la placa cromatográfica, una
vez se ensayan varias fases eluyentes se observó la trayectoria de los compuestos en la
placa y se utilizó la que se observaba mejor el movimiento de los compuestos puesto
que habían fases eluyentes que disparaban casi todos los compuestos.

Figura 1-Revelación UV de la placa A Figura 2-Revelación UV de la placa B

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Resultados.
Parte A
Para determinar el Rf de cada sustancia se utiliza la formula
𝑫𝒊𝒔𝒕𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂 𝑿
𝑹𝒇 =
𝑫𝒊𝒕𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂 𝒀
Donde X es el compuesto específico al que vamos a determinar el Rf y Y la distancia de
una de la línea de partida hasta (donde se adicionaron las porciones de los compuestos)
hasta la línea superior (hasta donde llegó la fase eluyente). A continuación se presenta
las distancias obtenidas de cada compuesto a partir de la línea de partida.
Distancia recorrida por el eluyente(hexano/Ac.etilo 1:1): 45 mm
Compuestos en A Recorrido Rf
(mm)
A (ácido falicítico) 12 0,266
B (P-nitroanilina) 42 0,933
C (P-nitrofenol) 22 0,488
D (nitrobenceno) 45 1
Figura 3- Placa A
E (2,4-dinitrofenilhidrazina) 35 0,77
Tabla #1. Valores de Rf en la placa A
Distancia recorrida por el eluyente (diclorometano): 44mm
Compuestos en B Recorrido Rf
(mm)
A (ácido falicítico) 29 0,66
B (P-nitroanilina) 32 0,727
C (P-nitrofenol) 38 0,86
D (nitrobenceno) 44 1
E (2,4-dinitrofenilhidrazina) 23 0,52
Figura 4- Placa B
Tabla #2. Valores de Rf en la placa B

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Análisis de resultados

En los resultados de la placa A observamos que el eluyente ideal para el compuesto C

(P-nitrofenol) es una solución de Hexano y acetato de etilo 1:1, que también serviría
para el ácido falicítico ya que en ambos el factor de retención es menor, mucho menor
para el ácido falicítico, y este resultado indica que son compuestos muy polares en este
medio. Caso contrario con el nitrobenceno que al no ser polar, esto debido a que se
encuentra desactivado con el grupo nitro, es totalmente transportado por el eluyente.

Para la placa B donde la fase eluyente fue el diclorometano, podemos observar que la
hidrazina fue el compuesto que más retención tuvo en este medio lo que indica que este
eluyente es el indicado para este compuesto y que es polar en este medio, y el
nitrobenceno nuevamente el compuesto “disparado” en la placa cromatográfica.

Para determinar si la fase eluyente es la indicada para disolver un compuesto, el factor

de retención debe ser aproximadamente 0,5. Es decir si se obtienen valores de 0,4-0,6 se
puede decir que se está utilizando la fase eluyende adecuada para disolver dicho
compuesto.

Se había planificado utilizar más fases eluyentes para obtener resultados en todos los
compuestos pero debido a que se presentaron inconvenientes en el espacio del
laboratorio se tuvo que concluir rápidamente la práctica, aun así se obtuvieron estos
resultados.

Conclusiones
Se logró conocer aplicar la cromatografía por capa fina, sus características y los factores que
influyen en la separación por cromatografía.
El tipo de cromatografía dependerá de la naturaleza de la fase móvil y estacionaria. La
polaridad de eluyente determinara la efectividad de éste como disolvente en la
cromatografía de capa fina. Para la cromatografía aplicada en pureza de sustancias, el
número de manchas notables en la cromatoplaca será el número de componentes
presentes en la sustancia, por lo tanto la sustancia pura presentara 1 sola mancha. De
igual manera, el no. de manchas apreciadas sobre la cromatoplaca deberá ser igual al no.
de componentes si el eluyente es el correcto. Si las manchas de la cromatoplaca
aparecen cerca del punto de aplicación será debido a que son más polares con respecto
al eluyente, y si aparecen más cercanas a la frontera del eluyente quiere decir que son
menos polares con respecto al eluyente.
Por su simplicidad y rapidez, la cromatografía de capa fina es una herramienta muy
valiosa en el análisis en el laboratorio de química orgánica.

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Bibliografía.

1. Allinger. N; Jhonson. C; Lebel. N. Química Orgánica. Editorial Reverté S.A. 2

Edición. España. P-1083
2. Anderson Guarnizon F, Pedro N. Martinez. Experimentos de química orgánica
(con enfoque en ciencias de la vida), Colombia - Adams R., et Al, Laboratorio
de Experimentos en Química Orgánica, 7a edition, Mc Millan, México.
3. Principios de Análisis Instrumental. 5™ ed. (2001). Douglas A. Skoog, F.J.
Holler, T.A. Nieman. Mc Graw-Hill Interamericana.