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TP 6 : Chromatographie sur couche mince

Compétence(s)
Réaliser et interpréter une chromatographie sur couche mince (mélanges colorés et incolores).
La chromatographie est une méthode physico-chimique de séparation
des espèces présentes dans un échantillon en phase homogène liquide ou II. CCM de l’huile essentielle d’orange
gazeuse.
Problématique
La chromatographie repose sur l'entraînement d'un échantillon par une
L’huile essentielle d’orange est-elle un corps pur ?
phase mobile (éluant) à travers une phase fixe. La phase stationnaire
retient plus ou moins fortement les substances contenues dans Contient-elle du limonène ?
l'échantillon.
Matériel disponible
Les différents composants de l'échantillon ont généralement une vitesse • Une cuve à chromatographie et son couvercle
caractéristique qui permet de les séparer, voire de les identifier. • Des cure-dents
Cette vitesse de séparation est fortement dépendante de la nature de • De l’huile essentielle d’orange
l'éluant et de la phase stationnaire. • Du limonène
Souvent, l'échantillon est analysé par comparaison avec des substances • De l’éluant (50 % cyclohexane, 50 % diéthyléther)
déjà connues. Ces substances servent de références et permettent • Une lampe UV
d'identifier chaque espèce par comparaison des vitesses de séparation.
Travail demandé
I. CCM de colorants alimentaires À l’aide d’une CCM, répondre à la problématique.
: Le dépôt d’huile essentielle doit être le plus petit possible car l’huile
Objectif essentielle est très concentrée.
Étudier la composition de quatre colorants
Question
alimentaires Représenter la plaque de CCM après élution
Document 1 : Préparer une CCM
Consulter cette animation. Front du solvant

Résumé des différentes étapes

• Mettre un demi centimètre d’éluant au fond de la cuve à éluer, couvrir
la cuve
• Sur un rectangle de papier filtre de 4 cm × 8 cm, tracer une ligne de
dépôt à environ 1 cm d’un petit bord.
• Déposer les différents colorants avec un demi cure-dent (pas trop près
des bords et pas trop près les uns des autres). Très peu de colorant Ligne de dépôt
suffit. HE Limonène
• Mettre le papier dans la cuve. Laisser éluer (l’éluant monte) sans faire
bouger la cuve. Conclusion
• Lorsque l’éluant est monté assez haut, retirer la plaque et tracer, au Répondre à la problématique de façon argumentée
crayon à papier, une ligne légère indiquant le niveau auquel est parvenu L’HE est constitué de plusieurs espèces chimiques (7 ou 8), car 7 ou
l’éluant (front de l’éluant). 8 taches sont présentes. L’une de ces espèces est du limonène car elle
a migré à la même hauteur que le dépôt de limonène de référence. __
Matériel disponible
• Une cuve à chromatographie et son couvercle
• Du papier filtre
• Des cure-dents
• Quatre colorants alimentaires concentrés
• De l’éluant (mélange d’eau salée et d’éthanol)
Travail demandé
Réaliser la CCM des quatre colorants alimentaires fournis
Questions
Conclure pour chaque colorant
Rouge, bleu et jaune : Corps pur car forme une seule tache _______
Vert : Corps composé de 2 espèces car il forme 2 taches. L’espèce
bleue qu’il contient est la même que l’espèce qui forme le colorant
bleu car elles ont migré à la même hauteur. Idem pour le jaune.____